Diagnóstico Microbiológico
Toma de muestras clínicas representativas
Esputo
Orina(micción espontánea o
al acecho)
Material fecal
Sangre/LCR
Biopsia de tejidos
Sitios no contaminados con Flora Normal
Sitios contaminados con Flora Normal
Orina(punción suprapúbica)
Diagnóstico microbiológicoMuestra clínica
TRANSPORTE
Material necesario
Medio semisólido: Medio StuartMedio AmiesMedio Cary & Blair
Medio líquido: Agua peptonada (Vibrio cholerae)PRAS/TAB (anaerobios)
Medio
Frasco estéril: orina, materia fecal.
Hisopo en medio semisólido: fauces, recto, endocervix, uretra.
Frasco con medio para anaerobios: anaerobios
Frasco de hemocultivo: sangre
Conservación de las muestrasTIPO DE MUESTRA TEMPERATURA AMBIENTE HELADERA (4ºc)
SANGRE X
ORINA X
EXUDADOS FARINGEOS X
ESPUTO Y MUESTRAS RESPIRATORIAS X
EXUDADOS GENITALES X ( hisopo en medio Amies o Stuart
para Neisseria gonorrhoeae)
LCR X
Punciones o biopsias de PIEL Y TEJ. BLANDOS
X
EXUDADOS OCULARES X
MUESTRAS PARA ANAEROBIOS X
MATERIA FECAL X
Diagnóstico microbiológico
Observación microscópica
CultivoDetección de antígenos bacterianos
Métodos moleculares
Pruebas Bioquímicas
Identificación
Sensibilidad antibiótica
Medios Selectivos
Medios diferenciales
Medios de enriquecimiento
Diagnóstico Microbiológico
Microscopia
Cultivo
TinciónFresco
Aislar
Identificar
Conocer el patrón de susceptibilidad antibiótica
Presencia o no de bacterias
Morfología
Movilidad
Células epiteliales
Leucocitos
Hematíes
Candidas (hongo)
GRAM
ZIEHL NIELSEN
GIEMSA
OTROS
Procesamiento de la muestraDiagnóstico microbiológico
Exámen en fresco
Candida spp. (hongo)
Células epitelialesHematíes
Leucocitos
Diagnóstico microbiológico
Cocos Gram positivos
Tinción de Gram
En cadena Ej: Streptococcus spp
Microscopio óptico
En racimo Ej: Staphylococcus aureus
Diagnóstico microbiológico
Bacilos gram-positivos
Bastones o cilindros
Microscopio óptico
Diagnóstico microbiológico
Corynebacterium diphteriae(agrupamiento como letras chinas)
Tinción de Ziehl-Neelsen
Microscopio óptico
Diagnóstico microbiológico
CultivoMedio sólido
(aislar)
Medio líquido
(enriquecer)
Diagnóstico microbiológico
Medios Selectivos y Diferenciales
Chapman
Levine
o EMB
CultivoDiagnóstico microbiológico
Identificación bacteriana
Pruebas bioquímicas Identificación de antígenos bacterianos
API E
Serotipificación
Diagnóstico microbiológico
Serotipificación
Se utilizan anticuerpos
específicos para detectar antígenos
en la superficie de la envoltura bacteriana
1 gota de
Ac
1
colonia
aislada
Aglutinación = positivo
Diagnóstico microbiológico
Cultivo
Microorganismo patógeno
Diagnóstico microbiológico
Repaso
Pruebas de susceptibilidad antibiótica
Aislamiento- identificación-
OBJETIVOS
Determinar la sensibilidad de una cepa
bacteriana a un determinado antibiótico
Determinar la eficacia de un antibiótico
Pruebas de susceptibilidad antibiótica
Antibiograma de difusión o método de
Kirby & Bauer
Significado clínico de la prueba de Kirby & Bauer
•Bacterias sensibles•Bacterias de susceptibilidad intermedia•Bacterias resistentes
E-Test
Gradientede concentracionesen la tira (µg/ml)
La diferencia con el disco, es que el disco contiene una únicaconcentración del antibiótico
Esta es la CIM
Agente etiológico Método diagnóstico serológico
Treponema pallidum IF (FTA-abs)/ HA (MHA-Tp)VDRL
Brucella spp. Aglutinación/ ELISA
Chlamydia trachomatis IFD/ELISA
Leptospira interrogans Aglutinación
Coxiella burnetti IFIFC: Fijación de complemento IF: inmunofluorescencia HA: hemoaglutinación
FTA-abs: Fluorescent Treponemal Antibody with absorption.
MHA-Tp: Microhemaglutinación del Treponema pallidum
Diagnóstico Microbiológico Indirecto:
detección de anticuerpos séricos
EJEMPLO
NIÑO DE 3 AÑOS LLEGA A LA GUARDIA CON LOS SIGUIENTES SINTOMAS:
FIEBRE ALTA (38 a400C)
VOMITOS FUERTE DOLOR DE CABEZA
…Y FOTOFOBIA
RIGIDEZ DE NUCA
AL DIA CON EL CALENDARIO DE VACUNACION
Diagnóstico microbiológico de meningitis
Líquido cefalorraquídeo (2 tubos de ensayo)
Fisicoquímico
Cultivo
PROCESAMIENTO INMEDIATO
TRANSPORTE SIN REFRIGERAR (N.meningitidis)
X 3HEMOCULTIVO
Resiembra a ciegas
menos de 24 h de incubación
y a intervalos hasta 7 días de incubación, sin
esperar la observación del desarrollo en el
frasco
S
Detección Visual: Turbidez ,
Formación de gas, de películas,
coágulos o pequeñas colonias en
los frasco
SUBCULTIVOS
SUBCULTIVO sólo
de hemocultvos positivos
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
LCR
Sin centrifugar Centrifugado
Observación en fresco
(móvil)-Giemsa-Tricrómico
sobrenadante
sedimentoDiagnostico
directoVirus
Aislamiento
Búsqueda ácidos nucleicos
LATEX
CIEF
ELISA
PCR
ZN
Gram
Tinta china
Cultivo
Identificación por pruebas bioquímicas
Antibiograma