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Focused Support for Scientists
Working for a Cancer-Free World
発光ルシフェラーゼ検出テクノロジー
がん免疫研究に最適 !…細胞毒性・傷害性試験への新しいアプローチ… ………(2)
細胞死からの回避 vs制御…細胞死メカニズムの解析…………………………………(4)
がん細胞・免疫細胞の代謝変化を追え !…
細胞内代謝変化をプレートリーダーで測定………………(6)
タンパク質安定化および転写活性を定量化…
がんと低酸素応答…………………………………………(8)
タンパク質ケミカルノックダウン…
標的タンパク質を分解… ………………………………(10)
シグナルの変調①…GPCRによるシグナルの異常…………………………(12)
シグナルの変調②…キナーゼの無秩序なシグナル…………………………(14)
エピジェネティック制御の変調…
最新エピジェネティクス研究ツール……………………(16)
核酸精製&増幅テクノロジーバイオマーカー探索…分子マーカー探索………………………………………(20)
遺伝子検査・コンパニオン診断…
ゲノム不安定性と核酸精製… …………………………(22)
その細胞株、大丈夫ですか?…
細胞認証試験……………………………………………(24)
プロメガ テクノロジー による 最新 がん研究実験法
2019 ノーベル賞 関連
ノーベル賞 関連分野
2019年 ノーベル生理学・医学賞
細胞の低酸素応答 !8ページ 低酸素応答研究ツールもご覧ください。
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世界一簡単なアポトーシスアッセイ!
従来法の問題点
通常の細胞増殖試験: 中心部への試薬到達が困難 (MTT、レサズリン、 ルシフェラーゼ[ATP 測定]など)
3 次元培養細胞の内部状態
増殖
増殖休止
ネクローシス顕微鏡観察: 生細胞数の測定不能 (中心部の死細胞)
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スフェロイドを用いた 各細胞生存試験の 感度の違い
約 1 hr静置
試薬添加 発光測定
1219
3MA
1
10
100
1,000
10,000
CellTiter-Glo® 3D alamarBlue® MTT
Sign
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o-Ba
ckgr
ound
Rat
io
細胞生存性試験
製品名 カタログ 番号 サイズ 通常価格
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(¥)
CellTiter-Glo® 2.0 AssayG9242 100 mL 60,000 48,000G9243 500 mL 230,000 184,000
CellTiter-Glo® 3D Cell Viability Assay (3D培養用)
G9682 10 x 10 mL 75,000 60,000G9683 100 mL 63,000 50,400
アポトーシスアッセイ
製品名 カタログ 番号 サイズ 通常価格
(円)特別価格 (円)
Caspase-Glo® 3/7 Assay
G8091 10 mL 77,000 61,600G8092 100 mL 376,000 300,800G8093 10 x 10 mL 490,000 392,000
1,000
1,000 10,000
100
100
10
101
Number of Cells
Caspase-Glo® 3/7Fluorescent Substrate
Sign
al-t
o-No
ise
Ratio
7299
MA
蛍光法と Caspase-Glo®の感度とダイナミックレンジの比較蛍光法とCaspase-Glo®の感度とダイナミックレンジの比較
“ 最新がん研究実験法ガイド ”
発刊記念!!
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2. Culture 2–3 days 3. Treat 4. Dual-Luciferase ® Assay
レポーターベクター
トランスフェクション試薬
アッセイ試薬レポーターアッセイの定番 Dual-Luciferase® Assay。長時間発光(グロータイプ)の Dual-Glo® は多検体アッセイに最適です。
pGL4 ベクターに応答配列が導入されたホタルルシフェラーゼ レポーターベクターで安定発現株作成のためのハイグロマイシン耐性遺伝子を含みます。
非リポソームタイプのトランスフェクション試薬で、細胞毒性は低く抑えられています。血清や培地を除く必要はなく、試薬 /DNA複合体を添加した後に洗浄や培地交換は不要です。
デュアルレポーターアッセイ(ホタル & ウミシイタケ)
製品名 カタログ 番号 サイズ 通常価格
(¥)特別価格 (¥)
Dual-Luciferase® Reporter Assay System
E1980 1,000 回分 236,000 188,800E1960 10 X 100 回分 255,000 204,000
Dual-Glo® Luciferase Assay System E2940 100 mL 300,000 240,000
応答配列導入 レポーターべクター(ホタル)シグナル経路 / 活性化因子 転写因子 製品名 カタログ
番号
cAMP/PKA CREBpGL4.29 [luc2P/CRE/Hygro] Vector
E8471
カルシウム / カルシニューリン NFAT
pGL4.30 [luc2P/NFAT-RE/Hygro] Vector
E8481
NF- κB NF- κBpGL4.32 [luc2P/NF-κB-RE/Hygro] Vector
E8491
MAP/ERK Elk-1/SRF pGL4.33 [luc2P/SRE/Hygro] Vector E1340
RhoA SRFpGL4.34 [luc2P/SRF-RE/Hygro] Vector
E1350
多様( GAL4-DNA 結合ドメインによる結合と活性化を要する )
ーpGL4.35 [luc2P/9XGal4 UAS/Hygro] Vector
E1370
アンドロゲン受容体、 グルココルチコイド 受容体を含む いくつかの核内受容体
ーpGL4.36 [luc2P/MMTV/Hygro] Vector
E1360
酸化ストレス Nrf2pGL4.37 [luc2P/ARE/Hygro] Vector
E3641
DNA 損傷 p53pGL4.38 [luc2P/p53 RE/Hygro] Vector
E3651
小胞体ストレス ATF6pGL4.39 [luc2P/ATF6 RE/Hygro] Vector
E3661
シグナル経路 / 活性化因子 転写因子 製品名 カタログ
番号
重金属ストレス MTF1 pGL4.40 [luc2P/MRE/Hygro] Vector E4131
熱ショック HSF1 pGL4.41 [luc2P/HSE/Hygro] Vector E3751
低酸素 Hif1 α pGL4.42 [luc2P/HRE/Hygro] Vector E4001
生体異物ストレス AhR pGL4.43 [luc2P/XRE/Hygro] Vector E4121
MAPK/JNK AP1pGL4.44 [luc2P/AP1 RE/Hygro] Vector
E4111
INF- α STAT1:STAT2 pGL4.45 [luc2P/ISRE/Hygro] Vector E4141
IL-6 STAT3:STAT3 pGL4.47 [luc2P/SIE/Hygro] Vector E4041
TGF- β SMAD3:SMAD4 pGL4.48 [luc2P/SBE/Hygro] Vector E3671
Wnt LEF-TCFpGL4.49 [luc2P/TCF-LEF RE/Hygro] Vector
E4611
IL-3 STAT5:STAT5pGL4.52 [luc2P/STAT5 RE/Hygro] Vector
E4651
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FuGENE® HD Transfection Reagent
E2311 1 mL 65,000 52,000E2312 5 X 1 mL 255,000 204,000
FuGENE® 6 Transfection Reagent
E2691 1 mL 65,000 52,000E2692 5 X 1 mL 255,000 204,000
ViaFect™ Transfection Reagent E4982 2 x 0.75 mL 98,000
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ホタルルシフェラーゼレポーター: 細胞内シグナル解析やバイオセンサー開発などにも!レポー
ター
アッセイ
(細胞ベース
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キナーゼ
キナーゼアッセイ試薬セット
(納期 約 1か月)
(納期 約 1か月)
Kinase Enzyme System & ADP-Glo™ Kinase Assay
簡便、高感度な発光 in Vitro アッセイと高品質なキナーゼ酵素 なのでご自身の研究室でちょいスクリーニング & プロファイリングも可能です!
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キナーゼ
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Kinase Enzyme System 各種 10 µg 86,000 51,600内容:キナーゼ 10 µg、基質、反応バッファー※ ヘテロ三量体の AMPKのみ通常価格は¥159,000(特別価格 ¥95,400)
キナーゼ + アッセイ試薬
製品名 サイズ 通常価格 (¥)
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ADP-Glo™ + Kinase Enzyme System各種 1セット 176,000 88,000
内容:ADP-Glo™ Kinase Assay 1,000ウェル分(384プレート)、 キナーゼ 10 µg、基質、反応バッファー※ ヘテロ三量体の AMPKのみ通常価格は¥250,000(特別価格 ¥125,000)
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9000
18000
27000
36000
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Lipid KinasePhosphatidylinositol (lipid)
Log10[PI3K p120γ], ng
RLU
EC50=2.8ng
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A
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7000
14000
21000
28000
35000
Tyrosine KinasePoly Glu4-Tyr1(peptide)
Log10[EGFR], ng
RLU
EC50=7.7ng
9171M
A
ADP-Glo™ System の測定原理
ADP-Glo™ Kinase Assay はキナーゼ反応より産生される ADP を ATP に変換し、これをルシフェラーゼ反応で生じる発光として定量します。発光法を採用しているので、ADPへの変換効率が低い酵素や少量サンプルでも高感度に測定することができます。
様々なキナーゼ活性を検出できるユニバーサルな ADP-Glo™
各キナーゼ酵素ごとに ADP-Glo™ アッセイ用プロトコール & データシートを用意
*同じキナーゼまたはキナーゼアッセイ試薬セットのご注文は 1個限りとさせていただきます。
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島6-8-8 花原第8ビル704号室
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CDK5/p35
EGFR (d746-750 T790M) GOPC-ROS1
MET (K1244R)PKC ζ
TEC
ABL1 (E255K)CDK6/CyclinD3
EGFR (d746-750 T790
M C797S)
GRK5
MET (M1250T) PKC η (eta)
TGF βR1
ABL1 (F317I)CDK7/CyclinH1/MNAT1
EGFR (d746-750 T790M
C797S L858R) GSK3 α
MET (P991S)PKC θ
TGF βR2
ABL1 (F317L)CDK9/CyclinK
EGFR (d746-750 T790M) GSK3 β
MET (Y1230C)PKC ι
TIE2
ABL1 (H396P)CHK1
EGFR (d746-750)Haspin
MET (Y1230H)PKC μ (mu)
TIE2 (R849W)
ABL1 (Q252H)CHK2
EGFR (D770-N771
insNPG)
HCK
MINK1
PKC ν (nu)
TIE2 (R915C)
ABL1 (T315I)CK1α1
EGFR (G719C)HER2
MLCK
PKD2
TIE2 (Y897H R915C)
ABL1 (V299L)CK1α1L
EGFR (L858R)
HER2 (A775_
G776insYVMA)MLK1
PLK1
TIE2 (Y897S)
ABL1 (Y253F)CK1 γ 1
EGFR (L861Q)HER2 (G776VC)
MLK2
PLK2
TMP3-ROS1
ABL2
CK1 δ
EGFR (T790M)
HER2 (P780
Y781insGSP)
MLK4
PLK3
TNIK
ACK
CK1 ε
EGFR (T790M C797S) HER2 (V777L)
MRCK α
PLK4
TNK1
AKT1
CK1 ε (R178C)
EGFR (T790M C797S
L858R)
HER4
MRCK β
PRKG1
TOPK
AKT2
CK2α1
EGFR (T790M D770
_N771insNPG )
HGK
MSK1
PRKX
TPR-TRKA (TRK-T1)
AKT3
CK2α2
EGFR (T790M L858R)HIPK1
MSK2 ※mousePTC1 (CCDC6-RET)
TRKA
ALK (L1196M)c-KIT
EIF2AK1 (HRI)HIPK3
MSSK1
PTC3 (NCOA4-RET)TRKA (A608D)
ALK2
c-KIT (d557-558)EIF2AK2
HPK1
MST1
PYK2
TRKA (F589L)
ALK4
c-KIT (D816E)EIF2AK4
IGF1R
MYLK2
QIK
TRKA (G595R A608D)
ALK6
c-KIT (D820E)EML4-ALK
IKK α
MYO3 β
RET
TRKA (G595R)
AMPK (A1/B1/G1) c-KIT (N822K)
EPHA1
IKK β
NEK1
RET (A883F)TRKA (G667C)
AMPK (A1/B1/G2)c-KIT (T670E)
EPHA2
IKK ε
NEK2
RET (M918T)TRKA (L657M)
AMPK (A1/B1/G3)c-KIT (V559D)
EPHA3
InsR
NEK3
RET (R749T)TRKB
AMPK (A1/B2/G1)c-KIT (V559D V654A)
EPHA4
InsR (R1201Q)NEK5
RET (R813Q)TRKC
AMPK (A1/B2/G2)c-KIT (V560G)
EPHA6
IRAK1
NEK7
RET (R912P)TRKC (G623R)
AMPK (A2/B1/G1)c-KIT (V560G D816V)
EPHA7
IRAK4
NEK9
RET (S904A)TSSK1B
AMPK (A2/B1/G2)c-KIT (Y823D)
EPHB1
ITK
NIK
RET (S904F)TSSK2
AMPK (A2/B2/G1)CLK1
EPHB4
JAK1
NIM1
RET (V778I)TXK
AMPK (A2/B2/G2)CLK2
ERK1
JAK1 (R724H)NUAK1
RET (V804L)TYRO3
ASK1
CLK3
ERK2
JAK3
NUAK2
RET (Y791F)ULK1
Aurora ACLK4
ERN1 (IRE1)JNK1 ※mouse
p38 α
RIPK1 (1-327)ULK2
Aurora Bc-MER
ERN2 (IRE2)JNK2
p38 β
RIPK2
ULK3
Aurora CCSK
FAK
JNK3
p38 γ
ROCK1
VRK2
AXL1
DAPK1
FER
KDR
p38 δ
ROCK2
WNK1
BCR-RETDAPK2
FES
KHS1
p70S6K
RON
YES1
BLK
DAPK3
FGFR1
KSR1 (L639F)p70S6Kb
ROS1
YES1 (T348I)
BMPR2
DCAMKL1
FGFR1 (V561M)LCK
PAK1
ROS1 (G2032R)YSK4
BMX
DDR2
FGFR1OP-FGFR1LIMK1
PAK1/CDC42RSK1
ZAK
BRK
DGKA
FGFR2
LRRK2
PAK3
RSK2
ZAP70
BRSK1
DGKB
FGFR2 (N549H)LTK
PAK4
RSK2 (L608F)
BRSK2
DGKE
FGFR2 (R612T)LYN A
PAK6
RSK3
BTK
DGKQ
FGFR2 (V564F)LYN B
PAK7
RSK4
BTK (C481S)DGKZ
FGFR3
MAPKAPK2PASK
SBK1
CAMK1 γDNA-PK
FGFR3 (G697C)MAPKAPK3
PDGFR αSGK1
CAMK2 αDRAK1 (STK17A)
FGFR3 (K650E)MAPKAPK5
PDGFR α (D842V)SGK2
CAMK2 βDRAK2
FGFR3 (K650Q)MARK1
PDGFR α (T674 I)SIK
CAMK2 γDYRK1A
FGFR4
MARK2
PDGFR βSIK3
CAMK2 δDYRK1B
FGR
MARK3
PDK1
SLK
CAMK4
DYRK2
FIP1L1-PDGFR αMARK4
PHKG1
SPHK2
CAMKK1DYRK3
FLT1
MASTL
PIM1
SRC
CDC7/DBF4EGFR
FLT3
MEK1
PIM2
SRPK1
CDK1/Cyclin A1EGFR (A763_
Y764insFHEA)
FLT3 (D835Y)MEK4
PKA
SRPK2
CDK1/Cyclin A2EGFR (C775S T790M
L858R)
FLT3 (ITD-NPOS)MEK5
PKAC β
STK3
CDK2/Cyclin A1EGFR (C797S)
FLT3 (N676K)MEKK3
PKC α
STK33
CDK2/Cyclin A2EGFR (C797S L858R)
FMS
MELK
PKC β I
SYK
CDK2/Cyclin E1EGFR (d746)
FRK
MET
PKC β IITAK1-TAB1
CDK2/Cyclin E2EGFR (d746-750)
FYN A
MET (D1228H)PKC γ
TAOK1
CDK3/Cyclin E1EGFR (d746-750 C797S) GCK
MET (D1228N)PKC δ
TAOK2
CDK5/p25
EGFR (d746-750 T790M
C797S L858R) GLK
MET (F1200I)PKC ε
TBK1
クリアファイル
を進呈!
キナーゼアラカルト 250種セットで
驚愕の999万円● 内容:キナーゼ 10 µg、基質、反応バッファー● 納期:お問い合わせください● その他のまとめ買いについてもお尋ねください。
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Target
Nluc
TargetTargTar et
Nluc
TTTTargrgT et
NlucNlucNluc
NanoBRET™ tracer CompoundBRET
TargetTargTar et
Nluc
TargetTargTar et
Nluc
Equilibrium Binding Non-Equilibrium Competition
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テクニカルサービス ● Tel. 03-3669-7980 / Fax. 03-3669-7982 ● E-Mail : [email protected]
PK1911-04B
販売店
NanoBRET™ Target Engagement Intracellular Kinase Assay
プロメガ株式会社本 社 〒103-0011東京都中央区日本橋大伝馬町14-15 マツモトビルTel. 03-3669-7981/Fax. 03-3669-7982
大阪事務所 〒532-0011大阪市淀川区西中島6-8-8 花原第8ビル704号室Tel. 06-6390-7051/Fax. 06-6390-7052※製品の仕様、価格については2019年11月現在のものであり予告なしに変更することがあります。
細胞内で発現させた高輝度発光酵素 NanoLuc®と融合した標的キナーゼと蛍光標識されたNanoBRET ™ トレーサーにより生じる BRETへのテスト化合物の影響を調べることにより、セルフリー系に比べ真のキナーゼ:化合物結合性を調べることができます。
ベクター
製品名 サイズ 通常価格(¥)
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NanoLuc®融合キナーゼ発現べクター 各種 20 µg 75,000 45,000※その他のキナーゼ発現ベクターについては別途お問い合わせください。
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検出試薬製品名 カタログ番号 サイズ 通常価格(¥) 特別価格(¥)NanoBRET™ Target Engagement Intracellular Kinase Assay, K-4 N2520 100回分 100,000 60,000NanoBRET™ Target Engagement Intracellular Kinase Assay, K-5 N2500 100回分 100,000 60,000※ご注文は研究室で 1個限りとさせていただきます。また、お見積り内容は 2019年 12月 25日まで有効
ベクターについては、以下のフォームより納期 および特価についての見積りをご請求ください。
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検出試薬上記キナーゼ発現ベクターに適した検出試薬(K-4または K-5)については上記のエクセルファイルでご確認ください。
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★ 細胞内(生理学的環境内)での細胞透過性と結合性に関するデータを取得★ 滞留時間(化合物がキナーゼに結合している時間)も測定可能★ NanoLuc® 融合 標的キナーゼ発現ベクター 126種類(詳細については以下 URL参照)
(納期 約 1か月)
キナーゼ創薬:細胞ベース NanoBRET™ だから実現した 真の化合物 タンパク質結合性試験化合物
:酵素
結合性測定
(細胞ベース
)
キナーゼへの真の化合物結合性を明らかにする生細胞内での親和性および滞留時間の決定
NanoBRET™ TE ABL1 キナーゼアッセイと慢性骨髄性白血病(CML)を標的とした薬剤を使用した。第一世代 CML 薬イマチニブは ABL1に対して第二世代薬(ダサチニブ)や第三世代薬(ポナチニブ)よりも弱い結合性と短い滞留時間を示した。ポナチニブはダサチニブと比べて同程度の親和性を有していたが、非常に長い滞留時間を示した。