UNIVERSIDAD EARTH ESTABLECIMIENTO DEL MICELIO DEL HONGO SHII TAK E ( Lentinus edodes ) EN TRONCOS DE MADERA Y ASERRÍN ENRIQUECIDO CON NUTRIENTES Por ANA SAL OMÉ LÓPEZ ARGOTTI DIANA MARITZA SEGURA DÍAZTrabajo de graduación presentad o como requisito parcial para optar al título de INGENIERO AGRÓNOMO Con el grado de LICENCIATURA Guácimo, Costa Rica Diciembre, 2005
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Hace cuatro años empezamos un nuevo ciclo en nuestras vidas, y parece que fue
en un abrir y cerrar de ojos que transcurrió todo este tiempo de grandes esfuerzos,
constancia y perseverancia reflejados en nuestro crecimiento personal y profesional.
Ahora, está por cerrarse esta etapa y es este proyecto el resultado de ello; razón por la
cual agradecemos a Dios y a todas aquellas personas que han hecho posible que este
sueño se haga realidad.
En especial, queremos agradecer a nuestros donantes por confiar en nuestra
capacidad y ser parte de nuestra formación profesional para ser líderes de cambio.
También a nuestros profesores asesores Richard Taylor y Takatsuru Nishikawapor su apoyo, sus conocimientos y el tiempo dedicado a la realización de este proyecto.
Al personal del Taller Didáctico y el Laboratorio de Ciencias Naturales por su
colaboración en el desarrollo de nuestro estudio.
Al profesor Víctor Quiroga quien nos brindó su ayuda, el tiempo, la motivación y la
comprensión para que este trabajo, hoy, sea una realidad.
Finalmente, a ustedes queridas amigas quienes más que amigas han sido
nuestras hermanas y lo más valioso que hemos podido encontrar en este lugar, que nos
han enseñado a vivir, disfrutar, aprovechar y creer en la verdadera amistad. A cada una
de ustedes que con sus personalidades únicas y hasta cierto punto incomprensibles
nos dieron la oportunidad de conocerlas y de brindarles lo mejor de nosotras. Tanto es
así que, ahora las palabras sobran mientras podamos hablar con la mirada y en el
futuro, sean los recuerdos vividos los que permanezcan y fortalezcan este sentimiento
de cariño y amor que tenemos por cada una de ustedes.
El Shiitake (Lentinus edodes ) es un hongo exótico de origen asiático, que se
cultiva en troncos de árboles de maderas duras y también en sustratos artificiales
enriquecidos con nutrientes. El consumo de este hongo se ha incrementado durante
los últimos años debido a sus características organolépticas y medicinales.
El objetivo de este proyecto fue el de evaluar el desarrollo del micelio del
Lentinus en tres tipos de madera: Melina (Gmelina arborea ), Eucalipto (Eucaliptus
camaldulensis ), Sotacaballo. (Zygia latifolia), y en dos sustratos artificiales
enriquecidos con nutrientes uno inoculado con EM al 2% y el otro sin EM.
De las tres maderas evaluadas durante seis meses el eucalipto fue la únicamadera que respondió bien al desarrollo del micelio, por otro lado en los sustratos
enriquecidos con nutrientes la diferencia no fue estadísticamente significativa (p<0.05)
entre los dos tratamientos. Sin embargo, durante las ocho semanas de evaluación el
tratamiento con EM al 2% presento un desarrollo más lento del micelio.
latifolia); and in two artificial substrates. The substrate was divided into two portions.
One was inoculated with 2% activated EM and the other was treated with equal amounts
of tap water.
Of the three woods evaluated during six months, eucalyptus was the only woodthat responded well as shown by spawning. In the case of the nutrient enriched
substrates, the difference between both treatments was not statistically significant
(p<0.05). During the eight weeks of evaluation, however, the treatment with EM at 2%
2.1 OBJETIVO GENERAL .............................................................................. 3 2.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS..................................................................... 3
3 REVISIÓN DE LITERATURA ........................................................................... 4
3.1 MERCADO MUNDIAL............................................................................... 4 3.2 PROPIEDADES MEDICINALES DEL SHIITAKE...................................... 5 3.3 PRODUCCIÓN ......................................................................................... 6
3.3.1 Producción en troncos de madera............................................... 6 3.4 CULTIVO EN BOLSAS DE POLIPROPILENO ....................................... 11
4 MATERIALES Y MÉTODOS .......................................................................... 14
4.1 PREPARACIÓN DEL AGAR – PAPA – DEXTROSA (APD): .................. 14
4.1.1 Aislamiento de la cepa .............................................................. 14 4.1.2 Preparación del sorgo para propagación del micelio................. 14 4.1.3 Inoculación del sorgo. ............................................................... 15
4.2 PREPARACIÓN E INOCULACIÓN DE TRONCOS................................ 16 4.2.1 Ubicación de los troncos ........................................................... 18
4.3 PREPARACIÓN DEL SUSTRATO DE ASERRÍN Y NUTRIENTESCON Y SIN EM. ...................................................................................... 19 4.3.1 Selección del sitio para la fructificación..................................... 19
5 RESULTADOS Y DISCUSIÓN ....................................................................... 20
5.1 PRODUCCIÓN EN TRONCOS............................................................... 20 5.2 ESTABLECIMIENTO DEL HONGO SHIITAKE EN BOLSAS
DE ASERRÍN INOCULADAS CON NUTRIENTES ................................. 22
Figura 1, 2 y 3. Sorgo escurriéndose luego de ser cocinado durante 30 minutos y lapreparación de las botellas a inocular con el micelio del hongo Shiitake. ......................15
Figura 4. Micelio del hongo Shiitake inoculado en el sorgo............................................15
Figura 5. Troncos seleccionados para la inoculación del micelio...................................16
Figura 6. Perforación del tronco de Sotacaballo para la inoculación..............................17
Figuras 7, 8 y 9. Proceso de inoculación con el micelio del hongo Shiitake del tronco deSotacaballo.....................................................................................................................17
Figuras 10 y 11. Sellado de hoyos con cera de abeja y tronco de eucalipto después deinoculado y sellado.........................................................................................................18
Figura 12. Estructura metálica donde se colocaron los troncos una vez inoculados......18
Figuras 13 y 14. Corte y vista transversal de tronco de Eucalipto mostrando el desarrollo
del micelio del hongo Shiitake a las 5 semanas de inoculado........................................20
Figuras 15 y 16. Ataque de insectos en troncos de Melina y Sotacaballo......................21
Figura 17. Número de bolsas de sustrato enriquecido con nutrientes con más del 50%del desarrollo del micelio del hongo Shiitake en un tratamiento con EM al 2% y uno sinEM, evaluado durante 8 semanas..................................................................................22
Figura 18. Número de bolsas que se contaminaron durante el proceso de desarrollo delmicelio del hongo Shiitake en tratamiento con EM al 2% y tratamiento sin EM durante 8semanas.........................................................................................................................24
La industria de hongos exóticos ha tenido un gran desarrollo durante los últimos
años a nivel mundial. En la actualidad, la producción mundial es de 6.158.000 toneladas
al año. Es importante mencionar que en 1986, el hongo más consumido fue elChampiñón común (Agaricus bisporus), con un 56.2 % del mercado mundial. Sin
embargo, para el año de 1997 este hongo había disminuido a un 31.8%, debido al
consumo de nuevas especies exóticas tales como el Shiitake (25.4%) y el ostra
(14.2%) (Medina, 2004).
Entre los principales productores a nivel mundial se encuentra China con un 50
% de la producción de hongos exóticos lo que representa 3 millones de toneladas al
año. Actualmente, la producción en América es muy baja, sin embargo; países comoMéxico, Chile y Argentina se han convertido en los principales productores
latinoamericanos (Lora 2000).
El Shiitake (Lentinus edodes ) o también conocido como el hongo Japonés Negro
o el hongo Chino Negro es una seta de origen asiático, que se ha cultivado desde
hace siglos en grandes cantidades sobre troncos de árboles de maderas duras y
semiduras como por ejemplo el eucalipto y el roble entre otros. Su raíz etimológica
proviene del griego y del latín Lentinus que viene de Lentis o Lenshape por su formade sombrero y edodes que significa que esta es una especie comestible. Por otro lado,
la palabra Shiitake proviene del japonés Shii que es árbol proveniente de la familia del
roble (Fabaceae) y take que es hongo (Staments 1983).
El Shiitake no sólo se destaca por ocupar el segundo lugar a nivel mundial de
consumo, si no también por sus propiedades medicinales, entre estas se destacan las
anticancerígenas. Además, este hongo, por sus características organolépticas, es de
fácil colocación en el mercado y por su utilización como materia prima para laelaboración de diversos subproductos como por ejemplo: harinas, suplementos
alimenticios (cápsulas), cerveza, vino, té, galletas entre otros (Medina 2004).
Según Medina (2003) los hongos se encuentran distribuidos ampliamente en
todo el planeta y se adaptan a casi todos los climas, sin embargo se requieren ciertos
elementos indispensables para su crecimiento tales como materia orgánica y agua.
Desde hace cientos de años, los hongos se han venido utilizando como alimento
humano y, en muchos casos, en la medicina también. En la actualidad, han venido
cobrando gran importancia debido a las amplias alternativas de sabores, texturas y
formas de preparación (Medina, 2003).
Los hongos son una fuente alternativa de alimentación, debido a su alto
contenido de proteínas, que en algunos casos llega al 40% de su peso seco. Algo que
vale la pena resaltar es su utilización en terapias contra enfermedades como el cáncer y
el sida, debido al efecto activador del sistema inmunológico que presentan algunos de
ellos (Medina, 2003).
3.1 MERCADO MUNDIAL
De acuerdo con Lora, (2000) en los últimos 32 años la industria de los hongos
exóticos ha tenido un gran desarrollo a nivel internacional. Su producción mundial
representa, en la actualidad, cerca de 6.160.800 toneladas métricas por año con un
crecimiento sostenido cercano al 5% por año (Chang, 2004). El hongo más consumido
sigue siendo el champiñón común (Agaricus bisporus ), seguido de cerca por el
Shiitake (Lentinula edodes ) y por último el hongo Ostra (Pleurotus spp ).
El principal productor es China con un 50% de la producción mundial de hongosexóticos, casi 3.000.000 toneladas anualmente. Sin embargo, la calidad no ha sido tan
buena, lo que ha ocasionado una reducción en el mercado Europeo, en países como
El hongo Shiitake es uno de los que tiene mayor interés económico ya que ofrece
atractivas oportunidades de mercado, por lo que en la actualidad muchas empresas se
dedican a producirlo. Cabe destacar que al ser un hongo gourmet se caracteriza por
estar destinado a nichos selectivos y de alto poder adquisitivo (Cisterna 2004).
Según Carlos Cisterna (2004), el Shiitake es altamente apreciado en países
asiáticos tales como Japón, Tailandia, Corea y China, especialmente por su sabor y por
sus beneficios en la salud humana. Tradicionalmente, el Shiitake ha sido cultivado en
las regiones montañosas de Asia utilizando técnicas milenarias, no obstante, en los
últimos treinta años se han realizado estudios para desarrollar sistemas de cultivos
mejorados, con el propósito de incrementar su rendimiento y su comercialización en
países occidentales.
3.2 PROPIEDADES MEDICINALES DEL SHIITAKE
Los hongos, en general, presentan un alto valor nutritivo (Anexo 1); muestra de
ello es que varios análisis realizados, confirman que las setas son muy ricas en
oligoelementos, hierro, silicio, magnesio o azufre, además; en vitaminas, especialmente
la vitamina C, D, riboflavina y el ácido fólico entre otros (Albertó, 2003).
De acuerdo con Vicobos (2005) el Shiitake es el más popular y el más estudiado
entre los hongos medicinales desde finales de los años sesenta, en el anexo 2 se
pueden observar los constituyentes activos de este hongo. El cual posee los nueve
aminoácidos esenciales en la dieta del ser humano y un bajo contenido calórico (390
calorías por Kg.).
Este hongo posee un agente anti- cáncer (Lentinan), sustancias anti-oxidantes,vitaminas y elementos inorgánicos como el selenio, además; estimula en el organismo
la producción de interferón que es un agente antiviral. El consumo de este hongo
reduce el colesterol, previene la trombosis y la formación de altos niveles de azúcar en
La producción del Shiitake se divide en dos categorías: cultivo en troncos y
cultivo en sustratos sintéticos. La innovación en el uso de sustratos sintéticos (aserrín)
fue adoptada en 1983 por K. Mori. Esta nueva tecnología promovió el desarrollo de la
industria de producción de hongos comestibles en China, con esto este país toma el
liderazgo en producción y mercado a nivel mundial, dejando atrás a Japón su mayor
competidor.
3.3.1 Producción en troncos de madera
El Shiitake crece de forma natural en la madera muerta (descomposición) de
diferentes especies de maderas duras y en diferentes condiciones climáticas. Elmaterial usado se puede dividir en tres categorías: los que fructifican a los 20°C, los que
crecen entre los 10 y 15°C y los que fructifican a los 10°C. No hay inóculo que pueda
producirse durante todo el año. Si se desea tener una producción constante se debe
usar una combinación de diferentes materiales (Chang; et al ., 2004).
Según (Chang; et al ., 2004) el Lentinus es un hongo saprofito, que crece en el
cambium de los troncos secos, mediante la absorción de los nutrientes que se
encuentran en la madera. La corteza de los troncos protege el crecimiento del micelio y juega un rol importante en el desarrollo del cuerpo fructífero. Los troncos utilizados para
la producción del Shiitake deben contener suficiente cantidad de nutrientes para el
desarrollo de los hongos. El Lentinus crece en troncos de hoja ancha que provienen
principalmente de las familias de las Fagaceae que incluye especies como el roble.
Bratkovich (2004) menciona en su investigación sobre la Producción del Hongo
Shiitake, que el crecimiento del hongo va a depender de la edad y/o el grosor del
tronco, además es mejor utilizar troncos de un tamaño uniforme para facilitar el manejoy los costos de producción. Por lo general, se sabe que los troncos viejos y gruesos son
de difícil manipulación, además que el crecimiento del micelio es mucho más lento por
lo que retrasa el desarrollo del hongo. Sin embargo, cuando el desarrollo ha iniciado y si
los hongos son de buena calidad estos tendrán un alto rendimiento y la duración en
del Lentinus . El primero es hecho por la inoculación del micelio del hongo dentro de un
medio de aserrín y el segundo es con trozos de madera (Chang; et al ., 2004).
Según Chang; et al . (2004) el aserrín se debe tamizar para remover todas las
impurezas y luego se mezcla con ingredientes suplementarios. Se disuelve agua conazúcar y se rocía sobre el sustrato extendido. La humedad de la mezcla es la adecuada
cuando esta es apretada con la mano y el agua gotea levemente. Luego, la mezcla se
deposita en botellas de cultivo o en bolsas de polipropileno. Se presiona hasta aplanar
la superficie del medio y con una varilla en el centro del mismo se hace un hoyo de 1.5-
2 cm. de diámetro para la inoculación. Los contenedores son tapados con algodón y
cubiertos con papel aluminio después de ser inoculados. Luego de esto se debe
inocular entre 24 a 25 ºC durante 30-40 días.
El segundo tipo de sustrato para el Lentinus es hecho por la inoculación del
hongo dentro de cuñas o piezas cilíndricas de madera. Cuando el micelio ha crecido
totalmente en las piezas de madera, estos pueden ser usados como el sustrato para el
hongo (Chang; et al ., 2004).
Seguidamente se da la inoculación de los troncos, los hoyos se realizan
directamente en la madera y estos son preparados con la utilización de una herramienta
adecuada para esta labor (taladro). El tamaño adecuado del hoyo es entre 1-1.5 cm. de
diámetro y 1.5 –2 cm. de profundidad. Debe tenerse en cuenta que el hoyo debe estar 1
cm. por debajo de la corteza. La separación entre hoyos hacia lo largo debe ser de 20 –
30 cm., además debe existir una separación a lo ancho de 5 –6 cm. entre cada hoyo.
Los hoyos son ordenados en patrones alternos creando espacios entre cada fila de 12
cm. de separación (Bratkovich, 2004).
De acuerdo a Bratkovich (2004), las esporas son tomadas de las botellas de
cultivo o de las bolsas plásticas de polipropileno y se dividen en pequeñas partes
aproximadamente del tamaño del dedo pulgar y con un peso aproximado de 1g, luego
cada parte de las esporas son colocadas en cada hoyo. Se debe evitar que las esporas
el 50-60% del sombrero esta abierto, para hongos deshidratados se cosecha con un 70-
80% del sombrero abierto.
3.4 CULTIVO EN BOLSAS DE POLIPROPILENO
Como se ha mencionado, el Lentinus ha sido tradicionalmente cultivado en troncos
de madera dura en un ambiente natural, pero una alternativa ha sido el desarrollo de
técnicas de cultivo que permiten una producción más intensa. Muestra de ello es la
utilización del sustrato obtenido de la mezcla de aserrín con otros ingredientes, y con un
crecimiento controlado o semi controlado de las condiciones del ambiente (Chang; et
al., 2004). Se pueden mencionar dos características especiales del método de cultivo
de hongos en bolsas plásticas, estas pueden ser generalizadas en:1. Los materiales usados para hacer los troncos sintéticos son principalmente
aserrín y otros productos o remanentes agrícolas, como por ejemplo desechos
de café, cáscaras de semillas de girasol y cáscaras de semillas de algodón, las
cuales son abundantes y se encuentran disponibles en la mayor parte del
mundo.
2. Este método acorta el tiempo de producción y da un alto rendimiento. En troncos
sintéticos, los hongos pueden ser cosechados alrededor de los 60-80 díasdespués de la inoculación. Esto es 5 meses más temprano que los hongos
cultivados en troncos naturales. El proceso completo de cosecha toma menos de
8 meses el cual se acorta en 1 1/2 a 2 años comparado con el método natural.
Bajo condiciones semicontroladas y controladas, la eficiencia biológica puede
alcanzar un promedio del 80%. Esto significa que de 100 Kg. de aserrín con
suplementos, se puede producir 80 Kg. de hongos frescos.
Los materiales usados para el cultivo del Lentinus son bolsas de polipropilenoademás de varias elementos usados como sustratos para el crecimiento del Shiitake.
La bolsa debe ser de polipropileno porque este polímero soporta las temperaturas
requeridas en el autoclavado (121ºC). El tamaño de la bolsa que comúnmente se utiliza
es de 15 x 30 cm. Las botellas de vidrio pueden también usarse para el cultivo del
hongo en un sustrato sintético debido a que estos sirven como contenedores
Las actividades que se llevaron a cabo para la realización del proyecto se describirán
en los siguientes pasos:
4.1 PREPARACIÓN DEL AGAR – PAPA – DEXTROSA (APD):
Para la preparación del Agar- Papa – Dextrosa, se usó una marca comercial
(DIFCO) que viene lista para ser preparada en Laboratorio.
4.1.1 Aislamiento de la cepa
A partir de una cepa madre, se obtiene el material de reproducción del hongo
esto se realiza a través del micelio. El cultivo madre puede replicarse una vez por
semana, mientras este se encuentre a una temperatura entre los 20 y 25ºC puede
permanecer por un período de dos meses.
4.1.2 Preparación del sorgo para propagación del micelio.
Se dejó remojando aproximadamente 4 Kg. de sorgo en agua destilada durante24 horas. Este mismo día se lavaron las botellas con jabón neutro y agua destilada,
posteriormente se dejaron secando en el horno durante un día. Al día siguiente, se
cocinó el sorgo durante 30 minutos, se escurrió y se dejó enfriar (Figura 1). Luego se
llenaron ¾ partes de cada botella con sorgo, se taparon con algodón (Figuras 2 y 3), se
recubrieron con papel celofán transparente, se sujetaron con una liga y se cubrieron
con papel aluminio. Finalmente, se colocaron las botellas en el autoclave por una hora.
Se evaluaron 3 tipos de madera: Melina (Gmelina arborea ), Eucalipto (Eucaliptus
camaldulensis ) y Sotacaballo. (Zygia latifolia).
Los troncos deben presentar condiciones óptimas para el desarrollo del hongo,
por ejemplo debe estar libre de pudriciones, agujeros o plagas ya que en este estado el
tronco es más susceptible al ataque de otras plagas como hormigas y comején (Figura
5). Se deben escoger troncos recién cortados por el alto porcentaje de humedad que
poseen; estos deben limpiarse con un cepillo y agua para eliminar el musgo y ramas
pequeñas. Si los troncos presentaran alguna herida esta debe ser sellada con la cera
de abeja para que no se de ningún problema de contaminación durante el proceso de
crecimiento.
Figura 5. Troncos seleccionados para la inoculación del micelio.
El lugar en el que se debe realizar la inoculación debe ser amplio, limpio y bajo
techo. Como se muestra en la figura 6, para hacer los agujeros se va a usar un taladro
con una broca de 11/2 pulgada de largo por 1/2 pulgada de grosor, los agujeros nodeben ser de más de 3 cm de profundidad. La broca debe ser esterilizada cada vez que
se realice una perforación en el tronco, sumergiéndola en alcohol etílico al 70% y
Figuras 10 y 11. Sellado de hoyos con cera de abeja y tronco de eucalipto
después de inoculado y sellado.
La cantidad de agujeros por tronco va a depender del diámetro del mismo, sin
embargo el promedio para un tronco de 1m de largo es de 7 agujeros por fila y de 5 a 6
filas por tronco (generalmente siembra 5cm entre surco o fila y 14cm entre agujero).
4.2.1 Ubicación de los troncos
Luego de inoculados los troncos estos deben colocarse en un lugar con buena
ventilación, alta humedad y baja luminosidad. Es importante mencionar que los troncosno pueden estar en contacto directo con el suelo esto para reducir el riesgo de
contaminación, lo ideal es colocarlos en una estructura de metal (Figura 12) que
permita que el tronco se encuentre durante los primeros meses de crecimiento en
posición horizontal y antes de la fructificación en posición vertical.
Figura 12. Estructura metálica donde se colocaron los troncos una vez
4.3 PREPARACIÓN DEL SUSTRATO DE ASERRÍN Y NUTRIENTES CON Y SINEM.
La elaboración del sustrato se realizó con 100 Kg. de aserrín, 5 Kg. de salvado
de arroz, 2 Kg. de azúcar granulada, 5 Kg. de carbonato de calcio, 200 gramos de
sulfato de magnesio con 7 aguas y 1 Kg. de sulfato de calcio (Ver Anexo 4, figura 3, 4 y5). . Como se observa en el anexo 4 en las figuras 6,7 y 8, con todos estos materiales
se elaboró una mezcla homogénea con una humedad del 50- 60 %. Se separó el
aserrín en dos lotes de 50 Kg. y se agregó agua con EM activado al 2% a uno de ellos y
al otro solo agua. En ambos casos, la humedad se ajustó entre 50 y 60%.
Seguidamente, se llenaron las bolsas de polipropileno con un 1 Kg., del sustrato de
aserrín con EM al 2% y sin él, asegurándose que quedaran bien compactadas.
Posteriormente, se esterilizaron las bolsas en un autoclave para proceder a inocularlas
una vez que estuvieran frías (Ver Anexo 4, Figura 9).
Para la inoculación se abrieron las botellas que contenían el micelio (Anexo 4,
Figura 10). Se prepararon las bolsas con el sustrato para que estas no permanecieran
por mucho tiempo expuestas a la contaminación. Con un asa, previamente esterilizada
y flameada con alcohol etílico al 70%, se depositaron aproximadamente 10 gr. del
micelio en cada bolsa con sustrato. Luego se taparon las bolsas inoculadas con papel
periódico previamente autoclavado y secado, asegurándose el cierre con una liga en la
parte superior de cada bolsa.
4.3.1 Selección del sitio para la fructificación
La selección del lugar se hizo tomando en cuenta las mejores condiciones para
el desarrollo del micelio. Las bolsas con el micelio se colocaron en un vivero ubicado en
las instalaciones de las residencias estudiantiles. La infraestructura usada fue muy
sencilla .Entre los materiales empleados están: madera, zarán y un techo de plástico.Las bolsas se colocaron sobre unas mesas hechas de hierro.
5.2 ESTABLECIMIENTO DEL HONGO SHIITAKE EN BOLSAS DE ASERRÍNINOCULADAS CON NUTRIENTES
En la figura 17, se puede observar el aumento de las bolsas de aserrín con un
desarrollo del más del 50% del micelio del hongo Shiitake durante las 8 semanas de
evaluación. Cabe destacar que el tratamiento sin EM al 2% tuvo al final de laevaluación 6 bolsas más que el tratamiento con EM al 2%(Ver Anexo 4, Figura 1 y 2).
Suponemos que esto se dio porque el EM retardó el desarrollo del micelio. Esto pudo
suceder porque cuando se aplicó al sustrato de aserrín el EM, éste originó una mayor
cantidad de microorganismos, los cuales no se eliminaron definitivamente en el proceso
de esterilización quizás por no haber dejado el sustrato el tiempo necesario en el
autoclave, por lo que a la hora de la inoculación, el micelio tuvo que competir con otros
microorganismos para poder establecerse.
0
2
4
6
8
10
12
14
16
1 2 3 4 5 6 7 8
Semanas evaluadas
B o l s a s c o n
m á s d e l 5 0 %
d e
m i c e l i o d e s a r r o l l a d o
Con EM al 2% Sin EM
Figura 17. Número de bolsas de sustrato enriquecido con nutrientes con más del50% del desarrollo del micelio del hongo Shiitake en un tratamiento con
EM al 2% y uno sin EM, evaluado durante 8 semanas.
Linear (Tratamiento con EM) Linear (Tratamiento sin EM)
Figura 18. Número de bolsas que se contaminaron durante el proceso de
desarrollo del micelio del hongo Shiitake en tratamiento con EM al 2% y
tratamiento sin EM durante 8 semanas.
Como se mencionó anteriormente, en ambos tratamientos hubo una altaincidencia en la contaminación de las bolsas inoculadas. El primer factor que pudo ser
el causante de esta contaminación es el insuficiente tiempo (60 minutos) de
esterilización del sustrato en la autoclave, ya que según la investigación realizada por
Cisterna (2004) donde compara las ventajas y desventajas de la esterilización y
pasteurización para sustratos en el cultivo de hongos, menciona que para el Shiitake se
debe realizar una esterilización en autoclave a una temperatura de 121°C durante 90-
150 minutos. También durante el proceso de esterilización por la alta temperatura y la
presión a las que se sometieron las bolsas, se pudieron crear micro perforaciones que
permitieron la entrada de agentes contaminantes. Además, algunas bolsas se pegaron
entre sí, por lo que a la hora de separarlas existió la posibilidad de que se formaran
pequeñas fisuras. Otro factor que pudo aumentar la posibilidad de contaminación es la
falta de práctica para la inoculación, que se vio reflejada en un lento procedimiento, que
aumentó el tiempo de exposición del inóculo y del sustrato con los microorganismos del
medio, al mismo tiempo, se pudo dar una mala esterilización de los instrumentos
contaminando el sustrato entre cada inoculación realizada.
Por último, en el campo se dio la contaminación de tres bolsas debido a que la ligase reventó esto pudo obedecer a las altas temperaturas a que fueron expuestas en el
autoclave por lo que el papel periódico se cayó, permitiendo la entrada de otro tipo de
Albertó, E. 2003. Hongos medicinales (en línea). s.l., INTECH. Consultado 22 oct. 2005.Disponible en http://www.iib.unsam.edu.ar/IIB-INTECH/html/laboratorios/micologia/micologia.htm
Bratkovich, S. 2004?. Shiitake mushroom production: obtaining spawn, obtaining andpreparing logs, and inoculation (en línea). Ohio State University. Consultado 24oct. 2005. Disponible en http://ohioline.osu.edu/for-fact/0040.html
Cisterna, C. 2004. Esterilización vs pasteurización en sustratos de cultivo (en línea).Micotec Talca, CL. Consultado 10 oct. 2005. Disponible enhttp://www.micotec.cl/Pasteurizacion_vs_Esterilizacion.pdf
Chang, S; Miles, P. 2004. Mushrooms: cultivation, nutritional value, medicinal effect, andenvironmental impact. 2 ed. Boca Ratón, US. 464 p.
Davis, J. 1995. Producing shiitake mushrooms: a guide for small – scale outdoorcultivation on logs (en línea). North Carolina Cooperative Extension Service.Consultado 24 oct. 2005. Disponible enhttp://www.ces.ncsu.edu/nreos/forest/woodland/won-20.html
Espinosa, F. 1996. Revisión sobre la alelopatía de Eucalyptus L´Herit (en línea).
México, MX; Universidad Nacional Autónoma. Consultado 10 oct. 2005.Disponible en http://www.socbot.org.mx/publicaciones/boletin/bolres58e.html
García, M. 1987. Cultivo de setas y trufas. Madrid, ES. Mundi- Prensa. 130 p.
Lora, M. 2000.. Mercado internacional del hongo shiitake (en línea). s.l., INDAPConsultado 20 mar. 2005. Disponible enhttp://serinfo.indap.cl/doc/mercado%20%internacional%20del%20hongo%20shiitake.doc
Medina, R. 2004. Producción de hongos comestibles (en línea). Consultado 3 mar.
2005. Disponible en http://www.micotec.cl/prodcuccion%20mundial.pdf
Medina, R. 2003. Cultivo de hongos exóticos: los hongos medicinales (en línea). s.l.,MICOTEC. Consultado 3 mar. 2005. Disponible enhttp://www.micotec.cl/medicinales.html