Contaminantes biológicos em produtos de origem animal, em ...ftp.inmetro.gov.br/credenciamento/eventos-cgcre/...Alimentarius –Comitê de Contaminantes em Alimentos (CCFC) Legislação

Laboratório Nacional Agropecuário LANAGRO - MGLaboratório de Controle de Qualidade e Segurança Alimentar LACQSA

Contaminantes biológicos em produtos de origem animal, em produtos de origem vegetal, e bebidas e em alimentos para animais

Palestrante: Eugênia Azevedo VargasAuditora Fiscal Federal Agropecuária

Workshop para Avaliadores de Laboratórios e Especialistas voltados à Agricultura e PecuáriaPrograma MAPA

I - MICOTOXINAS

MICOTOXINAS

Metabolitos tóxicos produzidos por fungos

toxigênicos

Podem ser produzidos:

• pré e pós colheita de produtos vegetais

• armazenamento e distribuição de alimentos de

origem vegetal e animal

Contaminação de produtos de origem animal por

ingestão de ração contaminada

Aproximadamente 500 micotoxinas identificadas

Micotoxinas mais regulamentadas

• Aflatoxinas BG e M1

• Ocratoxina A

• Desoxinivalenol

• Fumonisinas B1+B2+B3

• Zearalenona

• Patulina

• T-2

• HT-2

• Alcalóides de Ergot.

REGULAMENTAÇÃOD

ife

ren

ças

en

tre

lim

ite

s e

ab

ran

gên

cia

de

ap

licaç

ão

II - REGULAMENTAÇÃO

REGULAMENTAÇÃO

ANVISA. RDC N° 7, de 18 de fevereiro de 2011. Dispõe sobre limitesmáximos tolerados (LMT) para as micotoxinas, Aflatoxinas BG e M1,ocratoxina A, desoxinivalenol, fumonisinas B1+B2, zearalenona e patulinaem alimentos para consumo humano.

Mercosul (25/02): Resolução RDC nº 274, de 15 de outubro de 2002 queaprova o Regulamento Técnico Sobre “Limites Máximos de AflatoxinasAdmissíveis no Leite, no Amendoim, no Milho“ D.O.U. - Diário Oficial daUnião.

Limites máximos de Micotoxinas recomendados pelo CodexAlimentarius – Comitê de Contaminantes em Alimentos (CCFC)

Legislação Européia

ANVISA. RDC Nº 138, de 8 de fevereiro de 2017. Altera a Resolução daDiretoria Colegiada - RDC nº 7, de 18 de fevereiro de 2011, em relação a LMTde deoxinivalenol (DON) em trigo e produtos de trigo prontos para oferta aoconsumidor e os prazos para sua aplicação.

BR

ASI

L

REGULAMENTAÇÃO

Resolução da ANVISA: RDC Nº 7 - 9 de março de 2011Limites máximos tolerados em alimentos - consumo direto e posterior processamento

(µg/kg)

• Aflatoxinas BG 1 a 20

• Ocratoxina A 2 a 20

• Desoxinivalenol 200 a 3000

• Fumonisinas B1+B2 200 a 5000

• Zearalenona 20 a 1000

• Patulina 50

• Aflatoxina M1 0,5 a 5

1 em1 000 000 0001s em 32 anos

Principais produtos susceptíveis à contaminação por micotoxinas

PLANOS DE AMOSTRAGEM

10

Distribuição de aflatoxinas totais em castanha-do-brasil

10

Lote 23: 4.000 kg

Contaminações determinadas (µg/kg)

0,11

0,52

0,55

0,76

1,06

1,23

1,251,74

2,06 4,33 5,9617,17

39,26

38,11

21,55

19,33

40,38

30,93

35,21

100,93

Amostra: 200kg

Média (µg/kg) =18,12

Mediana (µg/kg) = 5,15

CV (%) = 124,4

Valor mínimo (µg/kg) = 0,11

Valor máximo (µg/kg) = 100,93

Variância observada = 612,59

Variabilidade dos resultados

Instrução Normativa SDA no. 03 de 28 de janeiro de 2009, que estabelece critérios e procedimentos para o controle higiênico sanitário do amendoim

e seus subprodutos na cadeia produtiva

REGULAMENTAÇÃO

Instrução Normativa SDA no. 11 de 22 de Março de 2010, que estabelece critérios e procedimentos para o controle higiênico sanitário da castanha-do-brasil e seus subprodutos

REGULAMENTAÇÃO

REGULAMENTAÇÃO

Procedimentos de amostragem diferenciados de acordo comcombinações de matriz e micotoxinas.

Traz o conjunto de procedimentos que permite fazer atomada de amostras REPRESENTATIVAS de um determinadolote ou sublote.

Indica o número, a massa e a frequência dos incrementos aserem retirados em cada amostragem.

IN SDA No. 42 de 31 de dezembro de 2008 institui o Plano Nacional de Controle de Residuos e Contaminantes em Produtos de Origem Vegetal – PNCRC Vegetal

REGULAMENTAÇÃO

REGULAMENTAÇÃO

http://www.agricultura.gov.br/assuntos/inspecao/produtos-vegetal/pncrc-vegetal/arquivos/manual-coleta.pdf

Defini os procedimentos de coleta, acondicionamento e envio de amostras

IN SDA No. 42 de 20 de dezembro de 1999, institui o Plano Nacional de Controle de Resíduos e Contaminantes em Produtos de Origem Animal– PNCRC Animal

REGULAMENTAÇÃO

REGULAMENTAÇÃO

Visa harmonizar e orientar os procedimentos para a coleta de amostras do Plano Nacional de Controle de Resíduos e Contaminantes –PNCRC/SDA/MAPA,

http://www.agricultura.gov.br/assuntos/laboratorios/arquivos-publicacoes-laboratorio/manual-de-coleta-de-amostras-2010.pdf/view

Defini os procedimentos de recebimento, emissão de certificados e custodia de amostra

http://www.agricultura.gov.br/assuntos/inspecao/produtos-vegetal/pncrc-vegetal/arquivos/manual-de-procedimentos-do-plano-nacional-de-controle-de-residuos-

REGULAMENTAÇÃO

LANAGRO PA

REDE MAPA MICOTOXINAS

OFICIAL

o CREDENCIADOoCERELABoSFDKoEUROFINSoSGS do Brasil SantosoJLA Brasil

oLAMIC

LACQSALANAGRO-MG

CGAL

http://www.agricultura.gov.br/assuntos/laboratorios

III - ESCOPO

DOC CGAL 009 – ESCOPO DE REFERÊNCIA PARA ANÁLISE DE PRODUTOS DE ORIGEM VEGETAL E ANIMAL

http://www.agricultura.gov.br/assuntos/laboratorios

ESCOPO – LACQSA

Determinação Técnica Matrizes

AFB1, AFB2, AFG1, AFG2 CLAE-FL

Amêndoas: amendoim; pasta de amendoim; farelo de amendoim; avelã; castanha-do-Brasil; amêndoa de cacau; pistache; nozes; amêndoas em geral e suas respectivas pastas e coco.Cereais: arroz; milho; cevada; trigo e suas frações e farinhas.Ração: farelo de soja; farelo de milho; ração para frango, para suíno, equino e bovino.Frutas secas: uva passas; ameixa; damasco; tâmara; figo; banana; dentre outras.Leguminosas e oleaginosas: feijão; lentilhas e leguminosas em geral.Algodão: caroço e farelo de algodão.Especiarias: páprica; pimenta; pimenta do reino; noz-moscada e canela.

ESCOPO – LACQSA


AFB1 e OTAAFB1, AFB2, AFG1, AFG2,

OTA

CLAE-FL Tecido animal: fígado suíno e de ave.

Amêndoa de cacau

AFM1 CLAE-FL Leite em pó e leite fluido.

ZON CLAE-FL

Cereais: arroz; milho; cevada; trigo e suas frações e farinhas.Ração: farelo de soja; farelo de milho; ração para frango, para suíno, equino e bovino.Leguminosas e oleaginosas: feijão; lentilhas e leguminosas em geral.

FB1 e FB2 CLAE-FL Cereais: milho e derivados.

ESCOPO – LACQSA


DON CLAE-UV/VIS

Cereais: arroz; milho; cevada; trigo e suas frações e farinhas.Ração: farelo de soja; farelo de milho; ração para frango, para suíno, equino e bovino.Leguminosas e oleaginosas: feijão; lentilhas e leguminosas em geral.Algodão: caroço e farelo de algodão.

OTA CLAE-FL Vinhos e Suco de uva

Em implantação, rotina: métodomultimicotoxinas por LC-MS/MS em arroz,milho, trigo (validado, porém não acreditado).

Em validação:

método multimicotoxinas por LC-MS/MSem amêndoa de cacau

método multimicotoxinas por LC-MS/MSem café torrado e moído.

ESCOPO – LACQSA

ESCOPO – LANAGRO-PA


AFBG CLAE-FLCastanha do Brasil, Amendoim, Milho,

Arroz, Feijão, Soja, Amêndoa, Castanha de Caju, Pistachio, Avelã e Nozes

ESCOPO – REDE CREDENCIADA

- Rede credenciada: participação com envio de amostraspara controle de qualidade interlaboratorial (CI).

Laboratório Analitos Matrizes

SGS do Brasil

AFB1, AFB2, AFG1, AFG2

Amendoim; Cereais (Soja, milho, farelo de soja, trigo); Produtos oleaginosos (Óleos vegetais); Cascas de frutas, frutas secas e

derivadas (uva seca, noz, amêndoa, castanha do Pará, castanha de caju,

macadâmia, damasco seco, coco ralado, pistache); Condimentos; Pimentão seco.

OTA Café verde e processado; Cereais (Soja, milho, farelo de soja, trigo).

Laboratório de Análise

Micotoxicológicas - LAMIC


Cereais, derivados; Subprodutos de cereais; Sementes oleaginosas e derivados;

Frutas Secas.Milho e derivados; Amendoim.



CERELAB –Laboratórios

Químicos

AFB1, AFB2AFG1, AFG2

Classe I/ Amêndoas e amendoim –amendoim, pasta de amendoim, farelo de

amendoim, avelãs, castanha-do-brasil, pistache, coco, nozes e amêndoas e derivados em geral bem como suas

respectivas pastas ou manteigas Classe II/ Cereais – Arroz, Milho, Cevada, Centeio,

Trigo, Farinha de milho e Farinha de trigo Classe IV/ Frutas secas – Uva-passa,

ameixa, damasco, tâmara, figo, banana, dentre outras.




TÜV SÜD SFDK LABORATÓRIO DE

ANÁLISE DE PRODUTOS LTDA


Amêndoas e amendoim.Cereais: Arroz, milho, cevada, centeio, trigo, farinha de trigo farinha de milho, farinha de

trigo farinha de trigo.Frutas Secas: Uva passa, ameixa, damasco,

tâmara, figo, banana dentre outras.

AFM1 Leite em pó, leite fluido.

OTA Frutas Secas: Uva passa, ameixa, damasco, tâmara, figo, banana dentre outras.

JLA BRASIL LABORATÓRIO DE

ANÁLISES DE ALIMENTOS S.A


Amendoim.




EUROFINS DO BRASILANÁLISES DE ALIMENTOS


Milho e derivados.Amendoim e derivados.

Soja e derivados.Trigo e derivados.

Patulina Suco de maçã.

OTA Milho.

EVIDENCIA DA CONFORMIDADE DOS PRODUTOS AGROPECUÁRIOS

RASTREABILIDADE DO PRODUTO LABORATORIORASTREABILIDADE METROLOGICA

CERTIFICADO DE ANALISE

REDE MAPA DE LABORATÓRIOS MICOTOXINAS

IV - REQUISITOS TECNICOS

PROCESSO ANALÍTICO

Documentação apropriada

Embalagem da amostra

Integridade da amostra

Conservação da amostra (conforme matriz e analito)

Quantidade estipulada em procedimentos de amostragem

Amostra

Critériorecebimento

Registro

Analise

Certificado Analise

Código único

Requisitos:

Critério – Preparo de amostra

Equipamentos Calibrados/Verificados

Métodos validados

Incerteza de medição

Pessoal treinado

Pontos de Controle:

Uso de MR, MRC

Curva de Calibração Diária

Recuperação (fortificado)

Branco de amostra e Branco de solvente

extração

purificação

detecção

quantificação

VIM

20

12

: 2.4

1 (6

.10

) rastreabilid

ade

metro

lógica

IV.1 - AMOSTRAS

Preparo de Amostras

1 a 30 kg

Tipo Turrax

Preparo de Amostras

Tipo Faca

Preparo da Amostra

Moagem

Pastaamostra: água (1:1,5 p/p)

Padrão Aceitável

85% da amostra com tamanho de partícula < 1mm ou 18 mesh

Moagem a seco

TAMANHO DA PARTICULA

PREPARO DE AMOSTRA

PREPARO DE AMOSTRA

NÃO ACEITÁVEL

85% > 1 mm ou 18 mesh

Moagem a seco

TAMANHO DA PARTICULA

CUSTÓDIA DA AMOSTRA

> 200g ConbtroleIntralaboratorial,,,,,,,,> 200g Laboratorio,,,,,,,,,,,,,,,, > 200g Cliente,,,,,,> 200g Disputa,,,,,

Armazenamento < - 15 °C 3 meses

IV.2 – VALIDADE DOS RESULTADOS

•VIM 2008

•Eurachem (1998, 2000, 2007)

•GUM 2003

•ISO 5725-1 to 6

•Documentos IUPAC

•Documentos CODEX

• Directive 657/2002/EC and

related ISOs

•Directive 401/2006/EC

•Outras

Referencias importantes

http://www.agricultura.gov.br/assuntos/laboratorios/arquivos-publicacoes-laboratorio/manual-de-garantia-qualidade-analitica.pdf/view

Manual da Garantia da Qualidade Analitica

REQUISTOS GERAIS

Materiais de Referencia

Certificados (MRC)

Materiais de Referencia (RM)

Padrão de medição de trabalho (PMT)

Padrão de trabalho (PA)

Valor designado, incerteza, rastreabilidade metrologica,

homogeneidade e estabilidade, certificado

Valor designado, incerteza, homogeneidade

e estabilidade

Valor designado e incerteza

Reagentes de Alta

Qualidade

Sistema de verificação com

padrões de segunda fonte

POP 009 v.2

Hierarquia de padrões no Lacqsa

USO DO PADRÃO DE SEGUNDA FONTE

REQUISITOS DE VALIDAÇÃO

CEE

657/2002

REQUISITOS DE VALIDAÇÃO

Traz requerimentos específicos para validação de métodos

analíticos!

DESEMPENHO DE MÉTODOS

DESEMPENHO DE MÉTODOS

SANTE/12089/2016 - Guidance document on identification of mycotoxins in food and feed

Características do detector de masas

Sistema Aquisição

Requisitos de identificação

Número mínimo de íons

Outros

Single Mass ResolutionTQUAD,

ion trap and TOFFull scan, limited range of

m / z, SIM3 íons

Analyte peaks in the extracted ion

chromatograms should completely overlap, Ions

Ratio with ± 30% (relative) of the average

of the calibration standards of the same

analytical sequence

MS/MS TQUAD, ion trap,

Q-trap, Q-TOF, Q-Orbitrap

Monitoring of Multiple or Selected Reactions (MRM,

SRM), with mass resolution for precursor

ion insulation equal to or better than one unit of

mass resolution

2 íons products

Exact Mass

High resolution:(Q-)TOF

(Q-) Orbitrap

FT-ICR-MS

Magnetic sector

Full scan, limited range of m / z ratio, YES,

fragmentation with or without selection of

precursor ion, or combinations thereof

2 íons, with mass accuracy≤ 5 ppm to m/z ≥200

≤ 1 mDa to m/z ≤ 200

Simultaneous full scan MS / MS experiment with

mass resolution for precursor ion insulation equal to or better than a

mass resolution unit

2 íons: 1 molecular ion, (de)

protonated or adduct ion with mass accuracy of≤ 5

ppm (or ≤ 1mDa para razão m/z ≤200)

and1 íon product MS/MS

ISHIKAWA DIAGRAM FOR THE MULTIMYCOTOXIN LC/MS/MS

Me

asu

rem

en

tu

nce

rtai

nty

Gráficos de Controle Estratégias de validade dos resultados na rotina

Carta controle de recuperação e amostra controle intralaboratorial(OTA)

Estratégias de validade dos resultados na rotina

Estabilidade da solução P1 (MRC - AFM1)

Gráficos de Controle

0

10000

20000

30000

40000

50000

60000

70000

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25

Áre

as m

édia

s

Série de injeções

Carta Controle para P1 para Áreas corrigidas pela recuperação

Média

Média + u1

Média -u1

Média -u2

Média + u2

Média - 2*u2

Média + 2*u2

Áreas

Gráficos de ControleEstratégias de validade dos resultados na rotina

Estabilidade da solução P1 (MRC - AFM1)

Participação em EP - Estratégias de validade dos resultados na rotina

Carta controle de z-score em EP

Gráficos de Controle

CARTA CONTROLEESTABILIDADE 2002-2014

OTA – AMOSTRA CAFÉ BENEFICIADO

Mean

T0 5.48 T1 5.15

T2 5.57 T3 5.13 T4 5.44ISO 13528

• V – COMPARABILIDADE DOS RESULTADOS

REDE MAPA DE MICOTOXINASPROGRAMAS INTERLABORATORIAIS

LACQSA

Amostra de verificação

Certificados de Analises

Analise das amostras e

relatórios

Relatório mensal de

amostras analisadas

Laboratório Credenciado

LACQSA

Relatório com analise

estatistica (Z-Score)

Analise e Envio de

resultados

Laboratório Credenciado

Amostras de PT

Instrução Normativa DAS nº 10, de 24 de março de 2000 (BRASIL, 2000).

Amostras recebidas e já analisadas por laboratórios credenciados e Lacqsa

(certificado de análise) é reanalisado pelo Lacqsa dentro de 3 meses a partir da

data de recebimento da amostra

REDE MAPA DE MICOTOXINASPROGRAMAS INTERLABORATORIAIS

Escolhidas de relatórios de amostras

mensais enviados para o Lacqsa com base

no perfil de contaminação e no tipo de

preparação de amostra

As amostras são enviadas sob condições de

refrigeração acompanhadas de um

certificado de análise da amostra

As amostras são: visualmente

inspecionadas para tamanho de partícula

segregação de partículas

homogeneização visual

qualidade e integridade dos frascos

Horwitz predictive model (1998) modificado por Thompson (2000) para reproducitibilidade: desvio padrão relativo (RSDR) de 22%

2 x (RSDR) - 44%

Modified Horwitz equation

CONTROLE INTERLABORATORIAL

Resultados de amostras X ±U (µg/kg) determinadas pelo laboratório credenciado e o Lacqsa são comparados

Controle Interlaboratorial Cego - Programa de Verificação de amostrasLACQSA x LACQSA

Horwitz approach (Thompson)


Laboratório 2: TLCLacqsa: HPLC/UHPLC

Controle Interlaboratorial Cego - Programa de Verificação de amostrasLaboratório 2 x Lacqsa - 2013 to 2018

Horwitz approach (Thompson)


Total de amostras de amendoim= 80 HPLC

Controle Interlaboratorial Cego - Programa de Verificação de amostrasLaboratório 3 x Lacqsa - 2013 to 2018


ENSAIO DE PROFICIENCIA REDE CREDENCIADA

VI – REFERENCIAS

REFERENCIASMAPA. Instrução Normativa SDA no. 03 de 28 de janeiro de 2009, que estabelece critérios eprocedimentos para o controle higiênico sanitário do amendoim e seus subprodutos na cadeiaprodutiva.ANVISA. RDC N° 7, de 18 de fevereiro de 2011. Dispõe sobre limites máximos tolerados (LMT) paraas micotoxinas, Aflatoxinas BG e M1, ocratoxina A, desoxinivalenol, fumonisinas B1+B2,zearalenona e patulina em alimentos para consumo humano.

Mercosul (25/02): Resolução RDC nº 274, de 15 de outubro de 2002 que aprova o RegulamentoTécnico Sobre “Limites Máximos de Aflatoxinas Admissíveis no Leite, no Amendoim, no Milho“D.O.U. - Diário Oficial da União.

ANVISA. RDC Nº 138, de 8 de fevereiro de 2017. Altera a Resolução da Diretoria Colegiada - RDC nº7, de 18 de fevereiro de 2011, em relação a LMT de deoxinivalenol (DON) em trigo e produtos detrigo prontos para oferta ao consumidor e os prazos para sua aplicação.

MAPA. Instrução Normativa SDA no. 11 de 22 de Março de 2010 que estabelece critérios eprocedimentos para o controle higiênico sanitário Da castanha-do-brasile seus subprodutos

MAPA. DE COLETA DE AMOSTRAS DO PLANO NACIONAL DE CONTROLE DE RESÍDUOS ECONTAMINANTES EM PRODUTOS DE ORIGEM VEGETAL, Brasília, 2013

COMMISSION REGULATION (EC) No 401/2006 of 23 February 2006 laying down the methods ofsampling and analysis for the official control of the levels of mycotoxins in foodstuffs

MAPA. MANUAL DE COLETA DE AMOSTRAS DO PNCRC/MAPA, Brasilia, 2011

Vocabulário Internacional de Metrologia Conceitos fundamentais e gerais e termos associados (VIM2012), Inmetro Rio de Janeiro Edição Luso-Brasileira 2012

MAPA. Manual de Procedimentos do Plano Nacional de Controle de Resíduos e Contaminantes –PNCRC - Para Laboratórios - Área Vegetal Brasilia 2010

MAPA. Manual da Garantia da Qualidade Analítica, Brasilia, 2011

MAPA. N SDA No. 42 de 31 de dezembro de 2008 institui o Plano Nacional de Controle deResíduos e Contaminantes em Produtos de Origem Vegetal – PNCRC Vegetal

MAPA. IN SDA No. 42 de 20 de dezembro de 1999 institui o Plano Nacional de Controle deResíduos e Contaminantes em Produtos de Origem Animal– PNCRC V Animal

MAPA. Instrução Normativa SDA nº 10, de 24 de março de 2000 (BRASIL, 2000).

OBRIGADA!

E-mail para [email protected]

Contaminantes biológicos em produtos de origem animal, em ...ftp.inmetro.gov.br/credenciamento/eventos-cgcre/...Alimentarius –Comitê de Contaminantes em Alimentos (CCFC) Legislação

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