Tipos de luz ptimas para el crecimiento de las plantas.
[Tipos de luz ptimas para el crecimiento de las
plantas.]Practica N2
Tipos de luz ptimas para el crecimiento de las plantas.
Introduccin
La mayora de los grmenes de la leche elaboran reductasas que
modifican el potencial de xido-reduccin de la misma. Para demostrar
ese fenmeno basta aadir a la leche una sustancia que se decolore al
pasar de la forma oxidada a la forma reducida. La rapidez con que
cambia de color est en funcin de la poblacin bacteriana y, por
ello, puede ser un ndice del grado de contaminacin de la leche. El
colorante ms empleado es el azul de metileno, pero tambin se pueden
utilizar la resazurina y el cloruro de 2, 3, 5,
trifenil-tetrazolium, ya que son colorantes fcilmente absorbibles
por las clulas vivas.En general se admite que la decoloracin es ms
rpida cuanto mayor es el nmero de microorganismos en la leche. Sin
embargo, las bacterias presentan distinta habilidad para reducir el
azul de metileno, as el Streptococcus liquefaciens, los grmenes del
grupo coliaergenos y los de la putrefaccin (Bacillus subtilis) se
muestran muy activos. Las clulas somticas presentes en la leche
tambin influye mucho en la velocidad de decoloracin, sobre todo los
leucocitos.
Desarrollo ExperimentalA.-Determinacin del grado de contaminacin
de la lecheLas enzimas reductasas presentes en las bacterias actan
sobre los sustratos reducindolos. Una de estas enzimas, la
deshidrogenasa lctica acta sobre la leche liberando iones de
hidrogeno los cuales son captados por el azul de metileno. El
tiempo que tarda una muestra de leche en decolorarse es un
indicador de la presencia de bateras y del grado de
contaminacin.Procedimiento1) Obtener 4 o ms muestra de leche de
diferencia procedencia:-Leche de materna de canino refrigerada
(tubo 3)-Leche materna de canino sin refrigerar (tubo 4)-Leche
evaporada del es leche del estado (tubo 6)-Leche mater de ser
humano (tubo 2)
2) Vierta 5cc de las muestras en 4 tubos diferentes3) Etiquetar
cada tuvo con un nmero4) Adicione cuatro gotas de azul de metileno
a cada tubo5) Ten cada tubo con el tapn estril preparado y
colquelos en la estufa a 37C.-10:12 se coloco el azul de
metileno
-10:15 Se coloco a la estufa a 37C2 pequeas grnulos3 Forma
burbujas4 Cambio de color celeste6 no se observa ningn cambio
-10:302 hay tonalidades3 hay precipitaciones4 se condensa el
azul de metileno6 sigue igual
-10:552 diferencia y tonalidades de colores3 espuma blanca
celeste claro4 blanco con una franjita azul6 verdoso una espuma
blanca
-11:304 Muy contaminado3 contaminado6 Poco contaminado2 no
contaminado
Observaciones:En este experimento nos hemos podido que hay
factores que hay factores que pueden afectar al tiempo de reduccin,
entre ellos en tipo de microorganismos, el numero de leucocitos, el
periodo ala exposicin a la luz, la cantidad de oxigeno disuelto y
la tendencia del a leche a elevar los microorganismos hacia la
superficie a medida que este se va separando la crema en el tubo de
prueba.
B.-Identificacin de BacteriasUn mtodo de identificacin directa
de las bacterias es la tincin Diferencial de Gram que permite
identificar la morfologa de la clula bacteriana en coco y bacilos
Gram positivos y Gram negativos segn la estructura des u pared
celularLas gran positivas se tien de color violeta y las Gram
negativas se tien de color rosado debido a las diferencias den la
composicin de su pared celular.La pared celular est formada por
peptidoglucano; la diferencia consiste en que la pared de las
bacterias Gram positivas es gruesa y est formada por varias capas
de peptidoglucano (aproximadamente 80%-90%) y algo de acido
teicoico, mientras que la pared de la bacterias Gram negativas est
formada por una sola capa delgada de peptidoglucano (hasta un 20%)
y est rodeada por una membrana exterior compuesta de fosfolipido
lipopolisacarid, y lipoprotenas.Hay otro grupo de bacterias
denominados bacilos acido alcohol resistentes que son diferenciados
utilizando la coloracin de Ziehl Nielsen, estas bacterias son
resistentes a la decoloracin acida permaneciendo teidos de
fucsia.
Procedimiento:1) Usamos el palito mondadientes obtenga nuestra
muestra de sarro dental.2) Sobre una laminita porta-objetos
extienda la muestra en movimiento circular.3) Fije la muestra al
medio ambiente durante 54) Agregue unas gotas de violeta de
genciana y djelo 1
5) Lave con agua corriente
6) Agregue unas gotas de Fucsina, djelo 1 .Luego lavar con agua
corriente.
9) Secar al medio ambiente.10) Ponga una gota de aceite de
inmersin
11) Identificar la muestra al microscopio
Observaciones:Presencia de bacilos Gram positivos largos y Gran
negativos en la muestra de sarro dental.
Cuestionario1.- De acuerdo a su coloracin como se clasifican las
bacterias?-Gram Positivo.-Gram Negativo.2.- Por qu se decoloran
algunas muestras de leche?El potencial de oxido-reduccin (Eh) de la
leche fresca aireada, el cual se debe principalmente al contenido
de oxigeno disuelto en el producto, si por cualquier causa el
oxigeno es separado el Eh disminuye .Esto ocurre cuando los
microorganismos crecen en la leche y consumen el oxigeno. Si el
numero de oxigeno es elevado en consumo de oxigeno ser mayor y por
consiguiente el Eh caer rpidamente; si por el contrario, el numero
de microorganismos es pequeo, el Eh disminuir lentamente.3.- Haga
esquemas de todas sus observaciones.Esta tcnica nos permite
diferenciar a dos grupos de bacterias que son las gram positivas y
las gram negativas .Mediante la coloracin , en el caso de las gram
poritivas las colonias se observaran color violeta, debido a su
pared de peptidoglucano gruesa el colorante nose pierde al
agregarle el alcohol acetona , en cambio en las gram negativas ,
debido a su pared delgada , este pierde con facilidad el colorante
, por lo que al agregarle la fucsina esta ingresa y las colonias se
observan de color rosada.Generalmente esta es una tcnica muy
utilizada en el rea de salud ya que de acuerdo al coloracin gram
podremos determinar que medio utilizar para aislar el
microorganismo.En caso de los gran positivos mayormente son cocos,
pero algunos bacilos tambin se encuentran en este grupo, como
Bacillus.En el caso de los gram negativos tenemos a los que
presentan forma bacilar conocidos como los BGN.
Ilustracin de la apariencia de cocos gram positivos y de bacilos
gram negativos en diferentes estadiosdel procedimiento de tincin de
Gram.
INGENIERIA AGROINDUSTRIALPgina 2