Bust of the Stars Efficacite

DOSSIER CLINIQUE

EVALUATION DE L'EFFICACITE D’UN COSMETIQUE STIMULANT LE RAFFERMISSEMENT

CORPOREL (BUSTE ET CORPS) :

TEST D’EFFICACITE

CONCLUSION ET INTERET COSMETIQUE

ATTESTATION FABRICANT

REFERENCE du PRODUIT :

BUST OF THE STARS (INSTITUT CLAUDE BELL)

REFERENCE DE L’ACTIF :

BIO-BUSTIL (SEDERMA)

Fabriquant

B2C

BP 617 - 59061 ROUBAIX Cedex 01

Actifs SEDERMA

29 rue du chemin vert

78610 LE PERRAY EN YVELINES

PLAN

1. DESCRIPTION DU BIO-BUSTYL

2. TESTS D’EFFICACITE

2.1. Tests in vitro

2.2. Tests in vivo

3. CONCLUSION ET INTERET COSMETIQUE

4. ATTESTATION FABRICANT

1

1. DESCRIPTION DE BIO-BUSTYL

Le buste est un des éléments les plus universels de la beauté corporelle de la

femme. Il exige donc une attention et un soin particulier.

Alors que les problèmes majeurs éventuels du sein (hypertrophie, sous-

développement, relâchement des muscles) ne peuvent être traités que par les

méthodes de la chirurgie esthétique, certains petits défauts peuvent être

corrigés par un traitement cosmétique adapté.

La stimulation du métabolisme tissulaire, l’augmentation de la respiration

cellulaire, du tonus, et du raffermissement du tissus cutané sont autant

d’éléments qui contribuent à une meilleure tenue du buste.

BIO-BUSTYL

Produit d’origine biotechnologique et de synthèse peptidique, est conçu pour

répondre à ce besoin de stimulation.

2

Le BIO-BUSTYL contient 3 composants :

- Un filtrat bactérien biotechnologique riche en facteurs de stimulation

et de croissance

- Le Biopeptide Amphiphile Palmitoyl-Glycyl-Histidyl-Lysine

(séquence fondamentale du collagène)

- et le Biopeptide Amphiphile Palmitoyl-Valyl-Glycyl-Valyl-Alanyl-

Prolyl-Glycine (séquence peptidique dite «ELASTIQUE» de

l’élastine).

Ces trois composants agissent en synergie pour stimuler le métabolisme

cellulaire et donc de raffermir le tissus :

Le biofiltrat bactérien est obtenu par culture de microorganismes aérobies

(gros demandeurs d’oxygènes) sur un milieu spécifique nutritif. Ce milieu

de culture permet une croissance rapide des germes.

A la fin de la fermentation, les germes sont éliminés par microfiltration

tangentielle, le filtrat est standardisé et conservé.

3

Le Biopeptide Amphiphile Palmitoyl-Glycol-Histdyl-Lysine est obtenu par

synthèse peptidique à partir des acides aminés libres. Cette molécule a été

choisie sur la base de nos connaissances du métabolisme du collagène ; en

fait, ce tripeptide, fragment naturel constitutif du collagène, est capable de

stimuler sa synthèse dans les fibroblastes, et ceci à très faible dose (10-8

M/l) [1]. Nous avons attaché l’acide palmitique sur le tripeptide pour rendre

la molécule plus substantive sur l’épiderme [2]. La présence de ce

Biopeptide dans BIO-BUSTYL assurera la stimulation du métabolisme

cellulaire collagénique du derme.

Le Biopeptide Amphiphile Palmitoyl-Valyl-Glycil-Valyl-Alanyl-Prolyl-

Glycine est également issu de la synthèse peptidique par voie chimique.

Cette séquence d’acides aminés a été choisie dans la structure de l’élastine,

autre macromolécule importante du tissus. Cet hexapeptide représente le

maillon « élastique » répétitif de l’élastine ; en outre, il a une activité

biologique qui lui est propre : la chimiotaxie, c’est à dire la capacité d’attirer

les cellules de restructuration (fibroblastes) vers le site d’action (cicatrisation,

régénération tissulaire) [3].

Le biopeptide participe ainsi à la remise en forme du tissus et à son

raffermissement.

4

2. TESTS D’EFFICACITE

2.1. Tests in vitro

2.1.1. Stimulation de la respiration cellulaire (OXIGRAPHIE)

Le principe et les détails de la méthode ont été très largement décrits

précédemment. A l’aide d’une électrode de type CLARK et d’un oxygraphe

GILSON, on mesure le taux de consommation d’oxygène de base d’une

suspension de cellules hépatiques. L’introduction du produit actif dans la

suspension stimule la respiration mitochondriale, ce qui se traduit par une

augmentation de la consommation d’oxygène. L’enregistrement des concentrations

d’oxygène dissout dans le milieu en fonction du temps conduit aux pentes

représentées dans la figure 1. L’augmentation de la pente s’exprime en

pourcentage d’après la formule :

nt : nombre de moles d’oxygène consommées par minutes et par mg de

cellules pour le lot témoin.

Ne : nombre de moles d’oxygène consommées par minute et par mg de

cellules fraîches pour le lot essai.

ne –nt x100

nt

5

Figure 1 : Courbe d’OXYGRAPHIE

La dose de 2 % de BIO-BUSTYL dans cette expérience conduit

à une augmentation de la respiration cellulaire de 103 ± 4%

23P1 = = 0.61

38

23

P2 = = 1.2418.5

P2 - P1

x 100 = 106%P1

6

2.1.2. Stimulation de la prolifération cellulaire

Nous avons choisi le protocole suivant pour mesurer l’activité stimulatrice de

BIO-BUSTYL in vitro.

Le test est effectué sur des fibroblastes de lignée 3T3. On utilise des plaques à

96 micropuits et la mesure de la viabilité cellulaire se fait par coloration MTT.

Protocole

5000 cellules sont ensemencées par puits et sont couvertes de milieu DMEM

avec 2% de Sérum de Veau Fœtal (SVF) contenant des concentrations

croissantes de BIO-BUSTYL (0.5, 2.0 et 5.0%). L’incubation dure 72 heures en

étuve. Le témoin est constitué par un milieu DMEM contenant 10% de SVF.

Après réaction avec le réactif MTT on détermine l’absorption de la lumière à

570 nm dans un lecteur à microplaque Dynatec.

7

Résultats

Le tableau suivant montre, que BIO-BUSTYL stimule la croissance cellulaire

de façon remarquable. Ceci peut s’expliquer par la richesse en substances

nutritives de base contenue dans le produit d’origine biotechnologique.

Ces deux expériences décrites montrent que BIO-BUSTYL possède

une très importante activité stimulante au niveau cellulaire

MILIEUXNombres de cellules

(5600 initialement)

Croissance par

rapport à 2% de SVF

DMEM 2 % SVF 20,000 -

DMEM 10 % SVF 29,000 45%

BIO-BUSTYL 0,5% 22,000 10%

BIO-BUSTYL 1% 28,500 42,50%

BIO-BUSTYL 5% 35,500 77,50%

8

2.2. Test in vivo

Tenant compte des activités biologiques des Biopeptides Amphiphiles contenus

dans le BIO-BUSTYL (stimulation de la synthèse de collagène pour le

Palmitoyl-Gly-His-Lys et restructuration pour le Palmitoyl-Val-Gly-Val-Ala-

Pro-Gly, nous avons entrepris une étude des paramètres d’Elasticité de la

peau à l’aide du Fermomètre.

Principe

La sonde du Fermomètre permet d’aspirer une petite zone de la peau par

l’application répétée d’une dépression d’environ 300 mbar. La déformation du

tégument est suivie par la déviation d’un rayon lumineux et enregistrée sous

forme d’une courbe. Plusieurs aspirations successives sont effectuées sur le

même site, ce qui permet d’exploiter différents paramètres (extensibilité,

plasticité, tonicité, élasticité, fermeté, fatigue cutanée).

9

Panel

Quatorze sujets de sexe féminin, âgés de 30 à 55 ans participent au test. Les

critères d’inclusion et d’exclusion habituels (capacité de suivre le protocole,

consentement libre ; maladie, grossesse, affection cutanées) sont appliqués.

BIO-BUSTYL est testé à 4% dans une émulsion légère, le test est réalisé

contre un placebo (émulsion sans BIO-BUSTYL) en double aveugle.

Les produits sont appliqués sur le buste, matin et soir, pendant 30 jours, à

raison d’environ 1 à 2mg/cm2.

Résultats

La figure 2 montre un enregistrement typique obtenu dans cette étude. On y

repère les points qui permettent d’étudier les paramètres qui décrivent le

comportement élastique de la peau.

Légende : E = Elasticité (extension élastique

T = Tonicité

FC = Fatigue cutanée

10

Habituellement, on utilise les termes Elasticité E (plus précisément Extensibilité

élastique = extension réversible immédiatement) et Tonicité T (relâchement)

pour calculer la Fermeté cutanée F en tant que rapport T/F (en général < 1).

L’évaluation de la Fatigue cutanée FC (variation de l’extensibilité totale entre

les aspirations successives) permet d’affiner l’étude.

Les valeurs mesurées sur chaque participante à jour J0 et jour J30 sont

analysées par un traitement statistique selon le test T de Student (valeurs

appariées).

11

Le tableau 1, résume les valeurs compilées et moyennées à partir des

enregistrements.

Tableau 1

On constate donc une forte augmentation (+18.5%) de la Fermeté F qui résulte

d’un effet cumulé de la diminution de l’extensibilité élastique E (-2.7%) et-

d’une augmentation (+13%) de la Tonicité T.

Paramètres J0 J30 Différence (%)

Elasticité (x100)

Placebo 48.99 49.48 1

Non significatif

BIO-BUSTYL 51.14 49.85 -2.6

Non significatif

Tonicité (x100)

Placebo 35.08 35.0 - 0,2

Non significatif

BIO-BUSTYL 36.06 40.9 + 13

Hautement

significatif

(p<0,01)

Fermeté (x10)

Placebo 7.08 7.03 - 0,7

Non significatif

BIO-BUSTYL 6.98 8.27 + 18,5

Hautement

significatif

(p<0,01)

12

La figure 3 montre l’effet du traitement par la crème contenant 4% de

BIO-BUSTYL sur la « Fatigue cutanée FC » (différence de l’extensibilité totale

entre la quatrième et la première aspiration).

La « Fatigue cutanée FC » régresse de 16.2%, alors qu’elle reste stable sur

les sites d’application du placebo.

Ses variations sont statistiquement significatives (p<0.01).

Unités (X100)

5

5.2

5.4

5.6

5.8

6

6.2

6.4

6.6

J=0 J=28PLACEBO

BIOBUSTYL 4%

FIG 3

13

3. CONCLUSION& INTERET COSMETIQUE

Les résultats des études décrites ci-dessus, montrent l’intérêt de

BIO-BUSTYL pour les soins cosmétiques.

. La stimulation du métabolisme fatigué,

- La synthèse du collagène dermique,

. L’action restructurante du fragment élastique,

. L’augmentation du tonus et de la fermeté

contribuent tous à l’amélioration de la beauté du buste.

14

BIBLIOGRAPHIE

1. MACQUART F.X., et al. 1988,

FEBS Letters 283, 343-346

2. BROCHURE SEDERMA : Les Biopeptides Amphiphiles

3. SENIOR R.M. et al. 1984,

J. Cell biol. 99, 870-874

15

B2C S.A.R.L

IMPORT-EXPORT - VENTE PAR CORRESPONDANCE INSTITUT CLAUDE BELL

Fax : 03 20 26 27 28 Tél : 03 20 26 27 48

Roubaix le 12 novembre 2002

Monsieur,

Je soussigné Stéphane CATRYSSE, gérant de la SARL B2C, propriétaire et fabriquant le

BAUME BUST OF THE STARS atteste que

- Les formules sont conformes à la législation Européenne,

- BUST OF THE STARS ne comprend pas de substances ou composants d’origine

bovine,

- Les formules ont été déposées aux centres anti-poisons de Paris, Lyon et Marseille,

- Les allégations avancées sur l'efficacité des produits ont été testées par le

laboratoire SEDERMA

- Sur chaque flacon est indiqué, la composition des produits, le numéro de lot et le

code emballeur.

Je reste à votre disposition pour toute information complémentaire.

Veuillez recevoir Monsieur mes respectueux salutations.

.

Le GERANT

___________________________________________________________________________ B2C

IMPORT - EXPORT - VENTE PAR CORRESPONDANCE

BP 617 59061 ROUBAIX CEDEX O1

S.A.R.L. au capital de 22 867€ - RCS B 412 480 956 Roubaix Tourcoing - APE 514 S