Bacillus thuringiensis Bacillus thuringiensis Bacillus Bacillus thuringiensis thuringiensis
Nov 12, 2014
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
Bacillus Bacillus thuringiensisthuringiensisBacillus Bacillus thuringiensisthuringiensis
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
Familia BacillaceaeFamilia Bacillaceae Género Género BacillusBacillusBacteria esporuladaBacteria esporuladaGramGram positivapositivaAerobiaAerobia facultativa y móvilfacultativa y móvil
Familia BacillaceaeFamilia Bacillaceae Género Género BacillusBacillusBacteria esporuladaBacteria esporuladaGramGram positivapositivaAerobiaAerobia facultativa y móvilfacultativa y móvil
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
ES COSMOPOLITA, SIN ES COSMOPOLITA, SIN EMBARGO LA RAZÓN EMBARGO LA RAZÓN DE ESTA DIVERSIDAD DE ESTA DIVERSIDAD NO ES CONOCIDA NO ES CONOCIDA
ES COSMOPOLITA, SIN ES COSMOPOLITA, SIN EMBARGO LA RAZÓN EMBARGO LA RAZÓN DE ESTA DIVERSIDAD DE ESTA DIVERSIDAD NO ES CONOCIDA NO ES CONOCIDA
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
•FORMA INCLUSIONES FORMA INCLUSIONES CRISTALINAS VISIBLES AL CRISTALINAS VISIBLES AL MICROSCOPIO ÓPTICO MICROSCOPIO ÓPTICO DURANTE LA ESPORULACIÓNDURANTE LA ESPORULACIÓN
•ESTAS INCLUSIONES ESTAS INCLUSIONES CRISTALINAS ESTÁN CRISTALINAS ESTÁN COMPUESTAS POR COMPUESTAS POR PROTOXINAS, QUE PROTOXINAS, QUE CONTIENE DELTA CONTIENE DELTA ENDOTOXINAS, TÓXICAS ENDOTOXINAS, TÓXICAS PARA LOS INSECTOSPARA LOS INSECTOS
•FORMA INCLUSIONES FORMA INCLUSIONES CRISTALINAS VISIBLES AL CRISTALINAS VISIBLES AL MICROSCOPIO ÓPTICO MICROSCOPIO ÓPTICO DURANTE LA ESPORULACIÓNDURANTE LA ESPORULACIÓN
•ESTAS INCLUSIONES ESTAS INCLUSIONES CRISTALINAS ESTÁN CRISTALINAS ESTÁN COMPUESTAS POR COMPUESTAS POR PROTOXINAS, QUE PROTOXINAS, QUE CONTIENE DELTA CONTIENE DELTA ENDOTOXINAS, TÓXICAS ENDOTOXINAS, TÓXICAS PARA LOS INSECTOSPARA LOS INSECTOS
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
LA LA ENDOTOXINA PUEDE VARIAR EN ENDOTOXINA PUEDE VARIAR EN TAMAÑO Y EN FORMA, PRESENTANDO TAMAÑO Y EN FORMA, PRESENTANDO DIFERENTES FORMAS EN SUS CRISTALESDIFERENTES FORMAS EN SUS CRISTALES
•ROMBOIDAL (65 KDA), ROMBOIDAL (65 KDA), •AMORFO ENTRE (130 Y 140 KDA)AMORFO ENTRE (130 Y 140 KDA)•HETEROGÉNEO (63 KDA) HETEROGÉNEO (63 KDA) •BIPIRAMIDAL (130 Y 65 KDA ) BIPIRAMIDAL (130 Y 65 KDA )
LA LA ENDOTOXINA PUEDE VARIAR EN ENDOTOXINA PUEDE VARIAR EN TAMAÑO Y EN FORMA, PRESENTANDO TAMAÑO Y EN FORMA, PRESENTANDO DIFERENTES FORMAS EN SUS CRISTALESDIFERENTES FORMAS EN SUS CRISTALES
•ROMBOIDAL (65 KDA), ROMBOIDAL (65 KDA), •AMORFO ENTRE (130 Y 140 KDA)AMORFO ENTRE (130 Y 140 KDA)•HETEROGÉNEO (63 KDA) HETEROGÉNEO (63 KDA) •BIPIRAMIDAL (130 Y 65 KDA ) BIPIRAMIDAL (130 Y 65 KDA )
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
CLASIFICACIÓN DE LOS CRISTALES CLASIFICACIÓN DE LOS CRISTALES SEGUN SU ESPECTRO DE ACTIVIDAD SEGUN SU ESPECTRO DE ACTIVIDAD INSECTICIDAINSECTICIDA
•Cry I tóxicos para lepidópterosCry I tóxicos para lepidópteros•Cry II para lepidópteros y dípterosCry II para lepidópteros y dípteros•Cry III para coleópteros Cry III para coleópteros •Cry IV para dípterosCry IV para dípteros
CLASIFICACIÓN DE LOS CRISTALES CLASIFICACIÓN DE LOS CRISTALES SEGUN SU ESPECTRO DE ACTIVIDAD SEGUN SU ESPECTRO DE ACTIVIDAD INSECTICIDAINSECTICIDA
•Cry I tóxicos para lepidópterosCry I tóxicos para lepidópteros•Cry II para lepidópteros y dípterosCry II para lepidópteros y dípteros•Cry III para coleópteros Cry III para coleópteros •Cry IV para dípterosCry IV para dípteros
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
ECOLOGÍA DE BtECOLOGÍA DE Bt
HAY VARIAS HIPÓTESIS PARA EXPLICAR SU HAY VARIAS HIPÓTESIS PARA EXPLICAR SU ROL EN EL AMBIENTE, LAS CUALES ESTÁN ROL EN EL AMBIENTE, LAS CUALES ESTÁN BASADAS PRINCIPALMENTE EN:BASADAS PRINCIPALMENTE EN:
1. SE HA PROPUESTO QUE Bt CRECE EN 1. SE HA PROPUESTO QUE Bt CRECE EN SUELOS SOLO BAJO CONDICIONES SUELOS SOLO BAJO CONDICIONES ESPECIALES, Y EL ORIGEN DE LAS ESPORAS ESPECIALES, Y EL ORIGEN DE LAS ESPORAS PODRÍA VENIR DE LA ACTIVIDAD DE INSECTOS PODRÍA VENIR DE LA ACTIVIDAD DE INSECTOS Y/O CAÍDA DE HOJAS DE PLANTAS, ACTUANDO Y/O CAÍDA DE HOJAS DE PLANTAS, ACTUANDO COMO UN SUMIDERO PARA LA ESPORA DE BtCOMO UN SUMIDERO PARA LA ESPORA DE Bt
ECOLOGÍA DE BtECOLOGÍA DE Bt
HAY VARIAS HIPÓTESIS PARA EXPLICAR SU HAY VARIAS HIPÓTESIS PARA EXPLICAR SU ROL EN EL AMBIENTE, LAS CUALES ESTÁN ROL EN EL AMBIENTE, LAS CUALES ESTÁN BASADAS PRINCIPALMENTE EN:BASADAS PRINCIPALMENTE EN:
1. SE HA PROPUESTO QUE Bt CRECE EN 1. SE HA PROPUESTO QUE Bt CRECE EN SUELOS SOLO BAJO CONDICIONES SUELOS SOLO BAJO CONDICIONES ESPECIALES, Y EL ORIGEN DE LAS ESPORAS ESPECIALES, Y EL ORIGEN DE LAS ESPORAS PODRÍA VENIR DE LA ACTIVIDAD DE INSECTOS PODRÍA VENIR DE LA ACTIVIDAD DE INSECTOS Y/O CAÍDA DE HOJAS DE PLANTAS, ACTUANDO Y/O CAÍDA DE HOJAS DE PLANTAS, ACTUANDO COMO UN SUMIDERO PARA LA ESPORA DE BtCOMO UN SUMIDERO PARA LA ESPORA DE Bt
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
ECOLOGÍA DE Bt
2. ASOCIACIÓN A ESTRUCTURAS DE LAS PLANTAS, YA QUE HA SIDO AISLADO DE HOJAS DE RESIDUOS Y CONÍFERAS EN NORTE AMÉRICA (SMITH & COUCHE, 1991 CITADO POR VALLEJO ET AL., 1995) Y DE RAÍCES DE HIDRÓFITOS. SEGÚN SMITH & COUCHE (1991)
ECOLOGÍA DE Bt
2. ASOCIACIÓN A ESTRUCTURAS DE LAS PLANTAS, YA QUE HA SIDO AISLADO DE HOJAS DE RESIDUOS Y CONÍFERAS EN NORTE AMÉRICA (SMITH & COUCHE, 1991 CITADO POR VALLEJO ET AL., 1995) Y DE RAÍCES DE HIDRÓFITOS. SEGÚN SMITH & COUCHE (1991)
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
3. LA ALTITUD Y LA TEMPERATURA JUEGUAN UN PAPEL IMPORTANTE EN LA DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA DE Bt, YA QUE EN EL ANÁLISIS DE LOS AISLAMIENTOS REALIZADOS EN DIFERENTES REGIONES DE COLOMBIA, SE REPORTÓ QUE UN 74% DE ESTOS AISLADOS, FUERON OBTENIDOS EN ZONAS CON ALTITUDES SUPERIORES A 1450 m.s.n.m Y TEMPERATURAS INFERIORES A 20ºC, NO ENCONTRÁNDOSE EN LAS ZONAS DESÉRTICAS MUESTREADAS
•B. cereus SE HA AISLADO COMÚNMENTE DEL SUELO JUNTO CON Bt. ENCONTRÁNDOSE EN UN NÚMERO MÁS ALTO, LO QUE PODRÍA INDICAR QUE ESTÁ MÁS ADAPTADO A LAS CONDICIONES DEL SUELO.
3. LA ALTITUD Y LA TEMPERATURA JUEGUAN UN PAPEL IMPORTANTE EN LA DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA DE Bt, YA QUE EN EL ANÁLISIS DE LOS AISLAMIENTOS REALIZADOS EN DIFERENTES REGIONES DE COLOMBIA, SE REPORTÓ QUE UN 74% DE ESTOS AISLADOS, FUERON OBTENIDOS EN ZONAS CON ALTITUDES SUPERIORES A 1450 m.s.n.m Y TEMPERATURAS INFERIORES A 20ºC, NO ENCONTRÁNDOSE EN LAS ZONAS DESÉRTICAS MUESTREADAS
•B. cereus SE HA AISLADO COMÚNMENTE DEL SUELO JUNTO CON Bt. ENCONTRÁNDOSE EN UN NÚMERO MÁS ALTO, LO QUE PODRÍA INDICAR QUE ESTÁ MÁS ADAPTADO A LAS CONDICIONES DEL SUELO.
ECOLOGÍA DE BtECOLOGÍA DE BtECOLOGÍA DE BtECOLOGÍA DE Bt
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
ECOLOGÍA DE BtECOLOGÍA DE Bt
4. LA MAYOR DIFERENCIA ENTRE Bt Y BC, ES LA 4. LA MAYOR DIFERENCIA ENTRE Bt Y BC, ES LA PRODUCCIÓN DE CRISTALES δ- ENDOTOXINAS PRODUCCIÓN DE CRISTALES δ- ENDOTOXINAS POR Bt.POR Bt.
•LAS INCLUSIONES PARAESPORALES CONTIENE LAS INCLUSIONES PARAESPORALES CONTIENE VARIAS δ- ENDOTOXINAS, Y ES ESTA VARIAS δ- ENDOTOXINAS, Y ES ESTA DIVERSIDAD LO QUE DETERMINA LA DIVERSIDAD LO QUE DETERMINA LA SELECTIVIDAD DE LA ACTIVIDAD INSECTICIDA DE SELECTIVIDAD DE LA ACTIVIDAD INSECTICIDA DE CADA CEPA CADA CEPA
•ESTAS TOXINAS SON SELECTIVAS, PERO NO ESTAS TOXINAS SON SELECTIVAS, PERO NO ESPECÍFICAS, YA QUE PUEDEN ACTUAR SOBRE ESPECÍFICAS, YA QUE PUEDEN ACTUAR SOBRE DIFERENTES GRUPOS DE INSECTOS EN MENOR DIFERENTES GRUPOS DE INSECTOS EN MENOR PROPORCIÓNPROPORCIÓN
ECOLOGÍA DE BtECOLOGÍA DE Bt
4. LA MAYOR DIFERENCIA ENTRE Bt Y BC, ES LA 4. LA MAYOR DIFERENCIA ENTRE Bt Y BC, ES LA PRODUCCIÓN DE CRISTALES δ- ENDOTOXINAS PRODUCCIÓN DE CRISTALES δ- ENDOTOXINAS POR Bt.POR Bt.
•LAS INCLUSIONES PARAESPORALES CONTIENE LAS INCLUSIONES PARAESPORALES CONTIENE VARIAS δ- ENDOTOXINAS, Y ES ESTA VARIAS δ- ENDOTOXINAS, Y ES ESTA DIVERSIDAD LO QUE DETERMINA LA DIVERSIDAD LO QUE DETERMINA LA SELECTIVIDAD DE LA ACTIVIDAD INSECTICIDA DE SELECTIVIDAD DE LA ACTIVIDAD INSECTICIDA DE CADA CEPA CADA CEPA
•ESTAS TOXINAS SON SELECTIVAS, PERO NO ESTAS TOXINAS SON SELECTIVAS, PERO NO ESPECÍFICAS, YA QUE PUEDEN ACTUAR SOBRE ESPECÍFICAS, YA QUE PUEDEN ACTUAR SOBRE DIFERENTES GRUPOS DE INSECTOS EN MENOR DIFERENTES GRUPOS DE INSECTOS EN MENOR PROPORCIÓNPROPORCIÓN
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
MECANISMO DE ACCION DE LA MECANISMO DE ACCION DE LA -ENDOTOXINA-ENDOTOXINAMECANISMO DE ACCION DE LA MECANISMO DE ACCION DE LA -ENDOTOXINA-ENDOTOXINA
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
•LA INGESTION DEL CRISTAL POR UN INSECTO SE DA LA INGESTION DEL CRISTAL POR UN INSECTO SE DA EN FASE LARVARIA EN FASE LARVARIA •ESTE LLEGA A SU INTESTINO MEDIO, SE DISUELVE ESTE LLEGA A SU INTESTINO MEDIO, SE DISUELVE POR LA ACCIÓN DE LOS JUGOS INTESTINALES A pH POR LA ACCIÓN DE LOS JUGOS INTESTINALES A pH ALCALINOALCALINO•LA LA -ENDOTOXINA SUFRE UNA PROTEOLISIS -ENDOTOXINA SUFRE UNA PROTEOLISIS ENZIMÁTICA Y DA ORIGEN A LA TOXINA ACTIVAENZIMÁTICA Y DA ORIGEN A LA TOXINA ACTIVA
•LA INGESTION DEL CRISTAL POR UN INSECTO SE DA LA INGESTION DEL CRISTAL POR UN INSECTO SE DA EN FASE LARVARIA EN FASE LARVARIA •ESTE LLEGA A SU INTESTINO MEDIO, SE DISUELVE ESTE LLEGA A SU INTESTINO MEDIO, SE DISUELVE POR LA ACCIÓN DE LOS JUGOS INTESTINALES A pH POR LA ACCIÓN DE LOS JUGOS INTESTINALES A pH ALCALINOALCALINO•LA LA -ENDOTOXINA SUFRE UNA PROTEOLISIS -ENDOTOXINA SUFRE UNA PROTEOLISIS ENZIMÁTICA Y DA ORIGEN A LA TOXINA ACTIVAENZIMÁTICA Y DA ORIGEN A LA TOXINA ACTIVA
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
•ESTA SE UNE A UN RECEPTOR ESPECÍFICO DE LAS ESTA SE UNE A UN RECEPTOR ESPECÍFICO DE LAS MEMBRANAS EPITELIALES DE LAS CÉLULAS DEL INTESTINOMEMBRANAS EPITELIALES DE LAS CÉLULAS DEL INTESTINO•GENERA POROS QUE DESEQUILIBRAN SU BALANCE GENERA POROS QUE DESEQUILIBRAN SU BALANCE OSMÓTICO Y PROVOCAN LA LISIS CELULAR DE ESTA PARTE OSMÓTICO Y PROVOCAN LA LISIS CELULAR DE ESTA PARTE DEL APARATO DIGESTIVODEL APARATO DIGESTIVO
•ESTA SE UNE A UN RECEPTOR ESPECÍFICO DE LAS ESTA SE UNE A UN RECEPTOR ESPECÍFICO DE LAS MEMBRANAS EPITELIALES DE LAS CÉLULAS DEL INTESTINOMEMBRANAS EPITELIALES DE LAS CÉLULAS DEL INTESTINO•GENERA POROS QUE DESEQUILIBRAN SU BALANCE GENERA POROS QUE DESEQUILIBRAN SU BALANCE OSMÓTICO Y PROVOCAN LA LISIS CELULAR DE ESTA PARTE OSMÓTICO Y PROVOCAN LA LISIS CELULAR DE ESTA PARTE DEL APARATO DIGESTIVODEL APARATO DIGESTIVO
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
•POSTERIORMENTE CAUSA DIARREA Y POSTERIORMENTE CAUSA DIARREA Y VÓMITOS EN EL INSECTO, LO QUE PUEDE VÓMITOS EN EL INSECTO, LO QUE PUEDE PROVOCAR EVENTUALMENTE SU MUERTE PROVOCAR EVENTUALMENTE SU MUERTE POR UNA DESHIDRATACIÓN SEVERAPOR UNA DESHIDRATACIÓN SEVERA
•POSTERIORMENTE CAUSA DIARREA Y POSTERIORMENTE CAUSA DIARREA Y VÓMITOS EN EL INSECTO, LO QUE PUEDE VÓMITOS EN EL INSECTO, LO QUE PUEDE PROVOCAR EVENTUALMENTE SU MUERTE PROVOCAR EVENTUALMENTE SU MUERTE POR UNA DESHIDRATACIÓN SEVERAPOR UNA DESHIDRATACIÓN SEVERA
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
FACTORES DE VIRULENCIAFACTORES DE VIRULENCIA
•ES UN PATÓGENO OPORTUNISTA DE INSECTOSES UN PATÓGENO OPORTUNISTA DE INSECTOS•SUS CRISTALES Y ESPORAS SON SUS CRISTALES Y ESPORAS SON
EXTREMAMENTE SUSCEPTIBLES A INACTIVACIÓN EXTREMAMENTE SUSCEPTIBLES A INACTIVACIÓN
POR RADIACIÓN ULTRAVIOLETAPOR RADIACIÓN ULTRAVIOLETA•LOS CRISTALES SE LIBERAN CONJUNTAMENTE LOS CRISTALES SE LIBERAN CONJUNTAMENTE
CON LA ESPORA CON LA ESPORA •SUS ESPORAS, QUE REQUIEREN CONDICIONES SUS ESPORAS, QUE REQUIEREN CONDICIONES
MUY ESPECIFICAS PARA GERMINAR EN SUELOS O MUY ESPECIFICAS PARA GERMINAR EN SUELOS O
AGUAS, SON PARTE DE LA DIETA DE NEMATODOS AGUAS, SON PARTE DE LA DIETA DE NEMATODOS
Y OTROS ORGANISMOSY OTROS ORGANISMOS
FACTORES DE VIRULENCIAFACTORES DE VIRULENCIA
•ES UN PATÓGENO OPORTUNISTA DE INSECTOSES UN PATÓGENO OPORTUNISTA DE INSECTOS•SUS CRISTALES Y ESPORAS SON SUS CRISTALES Y ESPORAS SON
EXTREMAMENTE SUSCEPTIBLES A INACTIVACIÓN EXTREMAMENTE SUSCEPTIBLES A INACTIVACIÓN
POR RADIACIÓN ULTRAVIOLETAPOR RADIACIÓN ULTRAVIOLETA•LOS CRISTALES SE LIBERAN CONJUNTAMENTE LOS CRISTALES SE LIBERAN CONJUNTAMENTE
CON LA ESPORA CON LA ESPORA •SUS ESPORAS, QUE REQUIEREN CONDICIONES SUS ESPORAS, QUE REQUIEREN CONDICIONES
MUY ESPECIFICAS PARA GERMINAR EN SUELOS O MUY ESPECIFICAS PARA GERMINAR EN SUELOS O
AGUAS, SON PARTE DE LA DIETA DE NEMATODOS AGUAS, SON PARTE DE LA DIETA DE NEMATODOS
Y OTROS ORGANISMOSY OTROS ORGANISMOS
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
FACTORES DE VIRULENCIAFACTORES DE VIRULENCIA EL CICLO DE VIDA DE Bt PUEDE SER DIVIDIDO EN EL CICLO DE VIDA DE Bt PUEDE SER DIVIDIDO EN CUATRO FASES: CUATRO FASES:
1.1. FASE PREVIA LOG FASE PREVIA LOG 2.2. ETAPA DE CRECIMIENTO ETAPA DE CRECIMIENTO EXPONENCIALEXPONENCIAL1.1. ESTADO DE TRANSICIÓN ESTADO DE TRANSICIÓN 2.2. ETAPA DE EXPRESIÓN ETAPA DE EXPRESIÓN DE GENES QUE DE GENES QUE CODIFICAN LAS CODIFICAN LAS δ- ENDOTOXINASδ- ENDOTOXINAS
FACTORES DE VIRULENCIAFACTORES DE VIRULENCIA EL CICLO DE VIDA DE Bt PUEDE SER DIVIDIDO EN EL CICLO DE VIDA DE Bt PUEDE SER DIVIDIDO EN CUATRO FASES: CUATRO FASES:
1.1. FASE PREVIA LOG FASE PREVIA LOG 2.2. ETAPA DE CRECIMIENTO ETAPA DE CRECIMIENTO EXPONENCIALEXPONENCIAL1.1. ESTADO DE TRANSICIÓN ESTADO DE TRANSICIÓN 2.2. ETAPA DE EXPRESIÓN ETAPA DE EXPRESIÓN DE GENES QUE DE GENES QUE CODIFICAN LAS CODIFICAN LAS δ- ENDOTOXINASδ- ENDOTOXINAS
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
DURANTE EL CRECIMIENTO EXPONENCIAL, Bt DURANTE EL CRECIMIENTO EXPONENCIAL, Bt PRODUCE EXOTOXINAS SOLUBLES DE VARIOS PRODUCE EXOTOXINAS SOLUBLES DE VARIOS TIPOS, ENTRE ELLAS:TIPOS, ENTRE ELLAS:
- EXOTOXINAS- EXOTOXINAS (HEMOLISINA I Y II, THURINGIOLISINA), (HEMOLISINA I Y II, THURINGIOLISINA), PROTEÍNAS CITOLÍTICAS DE 29-47 KDA.PROTEÍNAS CITOLÍTICAS DE 29-47 KDA.
- EXOTOXINA- EXOTOXINA ( THURINGIENSINA), ANÁLOGO ( THURINGIENSINA), ANÁLOGO NUCLEOTÍDICO DEL ATP SINTETIZADA POR PROTEÍNAS NUCLEOTÍDICO DEL ATP SINTETIZADA POR PROTEÍNAS CODIFICADAS EN PLÁSMIDOS CONJUGATIVOS CODIFICADAS EN PLÁSMIDOS CONJUGATIVOS
COMPITE POR LAS RNA- POLIMERASAS Y ASÍ BLOQUEA LA COMPITE POR LAS RNA- POLIMERASAS Y ASÍ BLOQUEA LA
SÍNTESIS DE rRNA EN MAMÍFEROS AL INHIBIR LA SÍNTESIS DE rRNA EN MAMÍFEROS AL INHIBIR LA
TRANSCRIPCIÓN Y EJERCER ACTIVIDAD MUTAGÉNICA TRANSCRIPCIÓN Y EJERCER ACTIVIDAD MUTAGÉNICA
( CARBERG ( CARBERG ET ALET AL., 1995) ., 1995)
DURANTE EL CRECIMIENTO EXPONENCIAL, Bt DURANTE EL CRECIMIENTO EXPONENCIAL, Bt PRODUCE EXOTOXINAS SOLUBLES DE VARIOS PRODUCE EXOTOXINAS SOLUBLES DE VARIOS TIPOS, ENTRE ELLAS:TIPOS, ENTRE ELLAS:
- EXOTOXINAS- EXOTOXINAS (HEMOLISINA I Y II, THURINGIOLISINA), (HEMOLISINA I Y II, THURINGIOLISINA), PROTEÍNAS CITOLÍTICAS DE 29-47 KDA.PROTEÍNAS CITOLÍTICAS DE 29-47 KDA.
- EXOTOXINA- EXOTOXINA ( THURINGIENSINA), ANÁLOGO ( THURINGIENSINA), ANÁLOGO NUCLEOTÍDICO DEL ATP SINTETIZADA POR PROTEÍNAS NUCLEOTÍDICO DEL ATP SINTETIZADA POR PROTEÍNAS CODIFICADAS EN PLÁSMIDOS CONJUGATIVOS CODIFICADAS EN PLÁSMIDOS CONJUGATIVOS
COMPITE POR LAS RNA- POLIMERASAS Y ASÍ BLOQUEA LA COMPITE POR LAS RNA- POLIMERASAS Y ASÍ BLOQUEA LA
SÍNTESIS DE rRNA EN MAMÍFEROS AL INHIBIR LA SÍNTESIS DE rRNA EN MAMÍFEROS AL INHIBIR LA
TRANSCRIPCIÓN Y EJERCER ACTIVIDAD MUTAGÉNICA TRANSCRIPCIÓN Y EJERCER ACTIVIDAD MUTAGÉNICA
( CARBERG ( CARBERG ET ALET AL., 1995) ., 1995)
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
FOSFOLIPASAS CFOSFOLIPASAS C, PROTEÍNA CITOTÓXICA DE DOS , PROTEÍNA CITOTÓXICA DE DOS TIPOS, UNA ESPECÍFICA PARA HIDROLIZAR TIPOS, UNA ESPECÍFICA PARA HIDROLIZAR FOSFATIDIL-COLINA Y OTRA PARA FOSFATIDIL-FOSFATIDIL-COLINA Y OTRA PARA FOSFATIDIL-INOSITOLINOSITOL
ENTEROTOXINAENTEROTOXINA, PROTEÍNA CITOTÓXICA SEMEJANTE A , PROTEÍNA CITOTÓXICA SEMEJANTE A LA ENCONTRADA EN LA ENCONTRADA EN B. cereusB. cereus (40 KDA). (40 KDA).
THURICINATHURICINA (PÉPTIDO ANTIBACTERIANO), (PÉPTIDO ANTIBACTERIANO), BACTERIOCINA SEMEJANTE A LA CEREINA (BACTERIOCINA SEMEJANTE A LA CEREINA (B. cereusB. cereus) Y ) Y A LA MEGACINA (A LA MEGACINA (B. megateriumB. megaterium), ESTA CODIFICADA ), ESTA CODIFICADA EN UN PLÁSMIDO DE 150 MDA ( DAMGAARD, 1996).EN UN PLÁSMIDO DE 150 MDA ( DAMGAARD, 1996).
FOSFOLIPASAS CFOSFOLIPASAS C, PROTEÍNA CITOTÓXICA DE DOS , PROTEÍNA CITOTÓXICA DE DOS TIPOS, UNA ESPECÍFICA PARA HIDROLIZAR TIPOS, UNA ESPECÍFICA PARA HIDROLIZAR FOSFATIDIL-COLINA Y OTRA PARA FOSFATIDIL-FOSFATIDIL-COLINA Y OTRA PARA FOSFATIDIL-INOSITOLINOSITOL
ENTEROTOXINAENTEROTOXINA, PROTEÍNA CITOTÓXICA SEMEJANTE A , PROTEÍNA CITOTÓXICA SEMEJANTE A LA ENCONTRADA EN LA ENCONTRADA EN B. cereusB. cereus (40 KDA). (40 KDA).
THURICINATHURICINA (PÉPTIDO ANTIBACTERIANO), (PÉPTIDO ANTIBACTERIANO), BACTERIOCINA SEMEJANTE A LA CEREINA (BACTERIOCINA SEMEJANTE A LA CEREINA (B. cereusB. cereus) Y ) Y A LA MEGACINA (A LA MEGACINA (B. megateriumB. megaterium), ESTA CODIFICADA ), ESTA CODIFICADA EN UN PLÁSMIDO DE 150 MDA ( DAMGAARD, 1996).EN UN PLÁSMIDO DE 150 MDA ( DAMGAARD, 1996).
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
FACTORES DE VIRULENCIAFACTORES DE VIRULENCIA
•LAS δ-ENDOTOXINAS SE SINTETIZAN COMO LAS δ-ENDOTOXINAS SE SINTETIZAN COMO PROTOXINAS Y AL SER ACTIVADAS SE LIBERAN LOS PROTOXINAS Y AL SER ACTIVADAS SE LIBERAN LOS FRAGMENTOS TÓXICOS CARACTERIZADOS POR UN FRAGMENTOS TÓXICOS CARACTERIZADOS POR UN PATRÓN FUNCIONAL DE TRES DOMINIOSPATRÓN FUNCIONAL DE TRES DOMINIOS
•ESTRUCTURALMENTE MUESTRA UN PATRÓN ESTRUCTURALMENTE MUESTRA UN PATRÓN FAVORECIDO POR LA ADICIÓN DE RESIDUOS FAVORECIDO POR LA ADICIÓN DE RESIDUOS GLÚCIDOS E INTERACCIONES ENTRE LOS GRUPOS GLÚCIDOS E INTERACCIONES ENTRE LOS GRUPOS DISULFURODISULFURO
•QUE EN LUGAR DE ESTRUCTURAS CUATERNARIA QUE EN LUGAR DE ESTRUCTURAS CUATERNARIA ALGUNA, LAS PROTEÍNAS SE AGREGAN EN UN ALGUNA, LAS PROTEÍNAS SE AGREGAN EN UN PATRÓN REGULAR ( CELDA CRISTALINA)PATRÓN REGULAR ( CELDA CRISTALINA)
FACTORES DE VIRULENCIAFACTORES DE VIRULENCIA
•LAS δ-ENDOTOXINAS SE SINTETIZAN COMO LAS δ-ENDOTOXINAS SE SINTETIZAN COMO PROTOXINAS Y AL SER ACTIVADAS SE LIBERAN LOS PROTOXINAS Y AL SER ACTIVADAS SE LIBERAN LOS FRAGMENTOS TÓXICOS CARACTERIZADOS POR UN FRAGMENTOS TÓXICOS CARACTERIZADOS POR UN PATRÓN FUNCIONAL DE TRES DOMINIOSPATRÓN FUNCIONAL DE TRES DOMINIOS
•ESTRUCTURALMENTE MUESTRA UN PATRÓN ESTRUCTURALMENTE MUESTRA UN PATRÓN FAVORECIDO POR LA ADICIÓN DE RESIDUOS FAVORECIDO POR LA ADICIÓN DE RESIDUOS GLÚCIDOS E INTERACCIONES ENTRE LOS GRUPOS GLÚCIDOS E INTERACCIONES ENTRE LOS GRUPOS DISULFURODISULFURO
•QUE EN LUGAR DE ESTRUCTURAS CUATERNARIA QUE EN LUGAR DE ESTRUCTURAS CUATERNARIA ALGUNA, LAS PROTEÍNAS SE AGREGAN EN UN ALGUNA, LAS PROTEÍNAS SE AGREGAN EN UN PATRÓN REGULAR ( CELDA CRISTALINA)PATRÓN REGULAR ( CELDA CRISTALINA)
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
REPRESENTACIÓN DE LOS TRES DOMINIOS DE LA PROTEÍNA TOXICA REPRESENTACIÓN DE LOS TRES DOMINIOS DE LA PROTEÍNA TOXICA Cry Cry 33A A A. A. PRODUCIDA POR Bt PRODUCIDA POR Bt Subsp. Subsp. Kurstaki Kurstaki B. PRODUCIDA POR BtB. PRODUCIDA POR Bt Subsp.Subsp. Morrisoni Morrisoni
REPRESENTACIÓN DE LOS TRES DOMINIOS DE LA PROTEÍNA TOXICA REPRESENTACIÓN DE LOS TRES DOMINIOS DE LA PROTEÍNA TOXICA Cry Cry 33A A A. A. PRODUCIDA POR Bt PRODUCIDA POR Bt Subsp. Subsp. Kurstaki Kurstaki B. PRODUCIDA POR BtB. PRODUCIDA POR Bt Subsp.Subsp. Morrisoni Morrisoni
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
TIPO DE TIPO DE GENESGENES
ACTIVIDAACTIVIDADD
OCURRENCIAOCURRENCIA PESO MOLECULAR PESO MOLECULAR kDa kDa
Cry 1Cry 1Cry 2Cry 2Cry 3Cry 3Cry 4Cry 4Cry 5 Cry 5 Cry 6Cry 6Cry 7Cry 7Cry 8 Cry 8 Cry 9Cry 9
Cry 10 Cry 10 Cry 11Cry 11Cry 12Cry 12Cry 13Cry 13Cry 14Cry 14Cry 15Cry 15Cry 16 Cry 16 Cry 17Cry 17Cry 18Cry 18Cry 19Cry 19
Cyt Cyt
LLL/DL/DCCDDNNNNCC
C/LC/LLLDDDDNNNNNN
NDNDDDDD
NDNDDD
D/CytolD/Cytol
kur, sot, aiz, ent, thu, ale, dar. kur, sot, aiz, ent, thu, ale, dar. tol, gal, kentol, gal, ken
kurkurmor (ten, san), tol mor (ten, san), tol
aiz, mor, isr, med, tou, daraiz, mor, isr, med, tou, dar5 cepas patentadas por 5 cepas patentadas por
MicogenMicogen5 cepas patentadas por 5 cepas patentadas por
MicogenMicogenmormorNDND
kur, aiz, morkur, aiz, mormor, isr, med, toumor, isr, med, toumor, isr, med, toumor, isr, med, tou
NDNDNDNDNDNDNDND
isr, morisr, morisr, morisr, mor
ND ND isr, morisr, morisr, morisr, mor
130-140130-14070707373
70-13470-1348080
128128NDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDND
88.588.5
CLASIFICACIÓN DE LOS GENES Cry DE ACUERDO A SU SECUENCIA CLASIFICACIÓN DE LOS GENES Cry DE ACUERDO A SU SECUENCIA NUCLEOTÍDICA NUCLEOTÍDICA
CLASIFICACIÓN DE LOS GENES Cry DE ACUERDO A SU SECUENCIA CLASIFICACIÓN DE LOS GENES Cry DE ACUERDO A SU SECUENCIA NUCLEOTÍDICA NUCLEOTÍDICA
Especificidad del rango de huésped: L,Lepidoptera; C, Coleoptera; D,Diptera; N, Nematoda; Cytol, citolítico. Especificidad del rango de huésped: L,Lepidoptera; C, Coleoptera; D,Diptera; N, Nematoda; Cytol, citolítico. kur, kur, kurstakikurstaki; thu, thuringiensis; sot,; thu, thuringiensis; sot,sotto;sotto; aiz, aiz, aizawai;aizawai; ent, entomocidus; ent, entomocidus; ale, alest; ale, alest; dar, dar, darmstadiensisdarmstadiensis; ;
tol,tol,tolwarthitolwarthi; ken, ; ken, kenya, kenya, gal, gal, galieriaegalieriae; mor, ; mor, morrisonimorrisoni; ten, ; ten, tenebrionistenebrionis; san, ; san, sandiegosandiego;isr, ;isr, israelensisisraelensis; med, ; med, MedellínMedellín; ND, no disponible. Tomada de Galán et al (1995a) y Bravo et al (1998).; ND, no disponible. Tomada de Galán et al (1995a) y Bravo et al (1998).
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
GeneGene Crystal Crystal shapeshape
Protein Protein size(kDa)size(kDa) Insect activityInsect activity
cry I [several subgroups:cry I [several subgroups:A(a), A(b), A(c), B, C, D, A(a), A(b), A(c), B, C, D, E, F, G]E, F, G]
bipyramidalbipyramidal 130-138130-138 lepidoptera lepidoptera larvaelarvae
cry II [subgroups A, B, C]cry II [subgroups A, B, C] cuboidalcuboidal 69-7169-71 lepidoptera and lepidoptera and dipteradiptera
cry III [subgroups A, B, C]cry III [subgroups A, B, C] flat/irregularflat/irregular 73-7473-74 coleopteracoleoptera
cry IV [subgroups A, B, C, cry IV [subgroups A, B, C, D]D] bipyramidalbipyramidal 73-13473-134 dipteradiptera
cry V-IXcry V-IX variousvarious 35-12935-129 variousvarious
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
ESPECIFIDADESPECIFIDAD
LA ACTIVIDAD TÓXICA SOLO ES POSIBLE SI LOS LA ACTIVIDAD TÓXICA SOLO ES POSIBLE SI LOS CRISTALES INGERIDOS SON SOLUBILIZADOS Y SUS CRISTALES INGERIDOS SON SOLUBILIZADOS Y SUS PROTEÍNAS DIGERIDAS SON RECONOCIDAS POR EL PROTEÍNAS DIGERIDAS SON RECONOCIDAS POR EL INSECTO-BLANCO (ELLAR, 1996)INSECTO-BLANCO (ELLAR, 1996)
INICIALMENTE LOS CRISTALES SE DISUELVEN BAJO INICIALMENTE LOS CRISTALES SE DISUELVEN BAJO CONDICIONES FISICOQUÍMICAS ESPECÍFICAS DEL CONDICIONES FISICOQUÍMICAS ESPECÍFICAS DEL INSECTO DE LAS LARVASINSECTO DE LAS LARVAS
LUEGO SUCEDE LA ACTIVACIÓN PROTELÍTICA DE LAS LUEGO SUCEDE LA ACTIVACIÓN PROTELÍTICA DE LAS PROTOXINAS LIBERANDO EL FRAGMENTO ACTIVO PROTOXINAS LIBERANDO EL FRAGMENTO ACTIVO
ESPECIFIDADESPECIFIDAD
LA ACTIVIDAD TÓXICA SOLO ES POSIBLE SI LOS LA ACTIVIDAD TÓXICA SOLO ES POSIBLE SI LOS CRISTALES INGERIDOS SON SOLUBILIZADOS Y SUS CRISTALES INGERIDOS SON SOLUBILIZADOS Y SUS PROTEÍNAS DIGERIDAS SON RECONOCIDAS POR EL PROTEÍNAS DIGERIDAS SON RECONOCIDAS POR EL INSECTO-BLANCO (ELLAR, 1996)INSECTO-BLANCO (ELLAR, 1996)
INICIALMENTE LOS CRISTALES SE DISUELVEN BAJO INICIALMENTE LOS CRISTALES SE DISUELVEN BAJO CONDICIONES FISICOQUÍMICAS ESPECÍFICAS DEL CONDICIONES FISICOQUÍMICAS ESPECÍFICAS DEL INSECTO DE LAS LARVASINSECTO DE LAS LARVAS
LUEGO SUCEDE LA ACTIVACIÓN PROTELÍTICA DE LAS LUEGO SUCEDE LA ACTIVACIÓN PROTELÍTICA DE LAS PROTOXINAS LIBERANDO EL FRAGMENTO ACTIVO PROTOXINAS LIBERANDO EL FRAGMENTO ACTIVO
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
ESPECIFIDADESPECIFIDAD
POSTERIORMENTE ESTE INTERACTÚA CON POSTERIORMENTE ESTE INTERACTÚA CON RECEPTORES A NIVEL DE LAS MEMBRANAS RECEPTORES A NIVEL DE LAS MEMBRANAS VELLOSAS DEL INTESTINO MEDIOVELLOSAS DEL INTESTINO MEDIO
DESPUÉS OCURREN CAMBIOS QUE DAN DESPUÉS OCURREN CAMBIOS QUE DAN LUGAR A LA FORMACIÓN DE CANALES IÓNICOS LUGAR A LA FORMACIÓN DE CANALES IÓNICOS POR MODIFICACIÓN DE LA ESTRUCTURA DE POR MODIFICACIÓN DE LA ESTRUCTURA DE LAS MEMBRANAS CELULARLAS MEMBRANAS CELULAR
ESPECIFIDADESPECIFIDAD
POSTERIORMENTE ESTE INTERACTÚA CON POSTERIORMENTE ESTE INTERACTÚA CON RECEPTORES A NIVEL DE LAS MEMBRANAS RECEPTORES A NIVEL DE LAS MEMBRANAS VELLOSAS DEL INTESTINO MEDIOVELLOSAS DEL INTESTINO MEDIO
DESPUÉS OCURREN CAMBIOS QUE DAN DESPUÉS OCURREN CAMBIOS QUE DAN LUGAR A LA FORMACIÓN DE CANALES IÓNICOS LUGAR A LA FORMACIÓN DE CANALES IÓNICOS POR MODIFICACIÓN DE LA ESTRUCTURA DE POR MODIFICACIÓN DE LA ESTRUCTURA DE LAS MEMBRANAS CELULARLAS MEMBRANAS CELULAR
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
EL MECANISMO DE ACCIÓN DE LAS EL MECANISMO DE ACCIÓN DE LAS PROTEÍNAS CRISTALINAS EXPLICA SU PROTEÍNAS CRISTALINAS EXPLICA SU SELECTIVIDAD DADA QUE INVOLUCRA A LA SELECTIVIDAD DADA QUE INVOLUCRA A LA VEZ LA ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL DEL VEZ LA ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL DEL FRAGMENTO TÓXICO Y FACTORES FRAGMENTO TÓXICO Y FACTORES INHERENTES AL INSECTO ( CONDICIONES INHERENTES AL INSECTO ( CONDICIONES QUÍMICAS ESPECIALES Y UN RECEPTOR QUÍMICAS ESPECIALES Y UN RECEPTOR ESPECÍFICO) ESPECÍFICO)
ADEMÁS SE HAN ENCONTRADO CASOS ADEMÁS SE HAN ENCONTRADO CASOS SINGULARES DE SINERGISMO ENTRE SINGULARES DE SINERGISMO ENTRE TOXINAS COMO EL QUE SE PRESENTA EN BtTOXINAS COMO EL QUE SE PRESENTA EN Bt subspsubsp. israeliensis. israeliensis
EL MECANISMO DE ACCIÓN DE LAS EL MECANISMO DE ACCIÓN DE LAS PROTEÍNAS CRISTALINAS EXPLICA SU PROTEÍNAS CRISTALINAS EXPLICA SU SELECTIVIDAD DADA QUE INVOLUCRA A LA SELECTIVIDAD DADA QUE INVOLUCRA A LA VEZ LA ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL DEL VEZ LA ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL DEL FRAGMENTO TÓXICO Y FACTORES FRAGMENTO TÓXICO Y FACTORES INHERENTES AL INSECTO ( CONDICIONES INHERENTES AL INSECTO ( CONDICIONES QUÍMICAS ESPECIALES Y UN RECEPTOR QUÍMICAS ESPECIALES Y UN RECEPTOR ESPECÍFICO) ESPECÍFICO)
ADEMÁS SE HAN ENCONTRADO CASOS ADEMÁS SE HAN ENCONTRADO CASOS SINGULARES DE SINERGISMO ENTRE SINGULARES DE SINERGISMO ENTRE TOXINAS COMO EL QUE SE PRESENTA EN BtTOXINAS COMO EL QUE SE PRESENTA EN Bt subspsubsp. israeliensis. israeliensis
ESPECIFIDADESPECIFIDADESPECIFIDADESPECIFIDAD
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
USO COMERCIAL DE LAS δ- ENDOTOXINA USO COMERCIAL DE LAS δ- ENDOTOXINA COMO INSECTICIDACOMO INSECTICIDADDUSO COMERCIAL DE LAS δ- ENDOTOXINA USO COMERCIAL DE LAS δ- ENDOTOXINA COMO INSECTICIDACOMO INSECTICIDADD
LAS VENTAJAS DE SU USO LAS VENTAJAS DE SU USO
A)A)AALTA ESPECIFICIDADLTA ESPECIFICIDADB)B) AASPECTO INOFENSIVO PARA EL MEDIO AMBIENTE, LA SPECTO INOFENSIVO PARA EL MEDIO AMBIENTE, LA
FAUNA BENÉFICA Y DEMÁS ORGANISMOS FAUNA BENÉFICA Y DEMÁS ORGANISMOS VIVOS, INCLUYENDO AL HOMBRE VIVOS, INCLUYENDO AL HOMBRE C)ADAPTABLE A MÚLTIPLE TIPOS DE C)ADAPTABLE A MÚLTIPLE TIPOS DE FORMULACIONES.FORMULACIONES.
LAS VENTAJAS DE SU USO LAS VENTAJAS DE SU USO
A)A)AALTA ESPECIFICIDADLTA ESPECIFICIDADB)B) AASPECTO INOFENSIVO PARA EL MEDIO AMBIENTE, LA SPECTO INOFENSIVO PARA EL MEDIO AMBIENTE, LA
FAUNA BENÉFICA Y DEMÁS ORGANISMOS FAUNA BENÉFICA Y DEMÁS ORGANISMOS VIVOS, INCLUYENDO AL HOMBRE VIVOS, INCLUYENDO AL HOMBRE C)ADAPTABLE A MÚLTIPLE TIPOS DE C)ADAPTABLE A MÚLTIPLE TIPOS DE FORMULACIONES.FORMULACIONES.
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
D) D) LLA ALTA PROBABILIDAD DE A ALTA PROBABILIDAD DE DISMINUCIÓN DE LOS COSTOS DE DISMINUCIÓN DE LOS COSTOS DE PRODUCCIÓN DEBIDO A LOS AVANCES PRODUCCIÓN DEBIDO A LOS AVANCES TECNOLÓGICOS, TECNOLÓGICOS, MICROBIOLÓGICOS MICROBIOLÓGICOS Y GENÉTICOS, LO QUE LO HACE Y GENÉTICOS, LO QUE LO HACE COMERCIALMENTE COMPETITIVO COMERCIALMENTE COMPETITIVO FRENTE A LOS INSECTICIDAS FRENTE A LOS INSECTICIDAS QUIMICOSQUIMICOS
D) D) LLA ALTA PROBABILIDAD DE A ALTA PROBABILIDAD DE DISMINUCIÓN DE LOS COSTOS DE DISMINUCIÓN DE LOS COSTOS DE PRODUCCIÓN DEBIDO A LOS AVANCES PRODUCCIÓN DEBIDO A LOS AVANCES TECNOLÓGICOS, TECNOLÓGICOS, MICROBIOLÓGICOS MICROBIOLÓGICOS Y GENÉTICOS, LO QUE LO HACE Y GENÉTICOS, LO QUE LO HACE COMERCIALMENTE COMPETITIVO COMERCIALMENTE COMPETITIVO FRENTE A LOS INSECTICIDAS FRENTE A LOS INSECTICIDAS QUIMICOSQUIMICOS
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
CEPA DE CEPA DE Bt.Bt. HUÉSPEDHUÉSPED PRODUCTOPRODUCTO COMPAÑIAS COMPAÑIAS
PRODUCTORASPRODUCTORAS
kurstakikurstaki LepidopteraLepidoptera
BactospeineBactospeineBactusideBactusideBernan Bt.Bernan Bt.BioBiobitbitForayForayDipelDipelDelfinDelfinJavelinJavelinThuricideThuricide
Duphar Duphar Compagina di Ricerca Compagina di Ricerca ChimChimBactecBactecNovoNovoNovoNovoAbbottAbbottSandozSandozSandozSandoz
aizawaiaizawai LepidopteraLepidoptera CertanCertan Sandoz Sandoz
israelensisisraelensis DipteraDiptera
BactimosBactimosSkeetaiSkeetaiTeknarTeknarVecobacVecobac
DoparDoparNovoNovoSandozSandozAbbottAbbott
sandiegosandiego ColeopteraColeoptera M-OneM-OneM-One-PlusM-One-Plus
MycogenMycogenMycogenMycogen
tenebriositenebriosiss
ColeopteraColeoptera Trident Trident Novodor Novodor
SandozSandozNovoNovo
conjugadoconjugadoLepidopteraLepidopteralColeopteralColeopteraLepidoptera Lepidoptera
FoieFoieAgrreeAgrree
EcogenEcogenCiga-Giegy Ciga-Giegy
PRODUCTOS BASADOS EN Bt DISPONIBLE COMERCIALMENTE A NIVEL MUNDIALPRODUCTOS BASADOS EN Bt DISPONIBLE COMERCIALMENTE A NIVEL MUNDIALPRODUCTOS BASADOS EN Bt DISPONIBLE COMERCIALMENTE A NIVEL MUNDIALPRODUCTOS BASADOS EN Bt DISPONIBLE COMERCIALMENTE A NIVEL MUNDIAL
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisAGENTE DE CONTROL AGENTE DE CONTROL BIOLÓGICO BIOLÓGICO
Tipo de Tipo de ACBACB PATOGENO PATOGENO PRODUCTOS COMERCIALES PRODUCTOS COMERCIALES
Bacillus popillae Bacillus popillae Bacteria Bacteria Popilla japonica Popilla japonica Doom, Japidemic (Fairfax Biological Doom, Japidemic (Fairfax Biological Labs) Labs)
Bacillus thuringiensis Bacillus thuringiensis var. var. aizawai aizawai Bacteria Bacteria Galleria melonella Galleria melonella B 401(Sandoz), Agree (Certis), B 401(Sandoz), Agree (Certis),
Design (Abbott), Mattch (Mycogen) Design (Abbott), Mattch (Mycogen)
var. var. israelensis israelensis Bacteria Bacteria Larvas de dípteros (mosquitos, Larvas de dípteros (mosquitos, mosca negra) mosca negra)
Vectobac, Gnatrol (Abbott), Vectobac, Gnatrol (Abbott), Skeetal (Novo Nordisk), Teknar Skeetal (Novo Nordisk), Teknar (Certis)* (Certis)*
EG 2424 EG 2424 Bacteria Bacteria Larvas de lepidópteros y Larvas de lepidópteros y coleópteros coleópteros Foil (Ecogen) Foil (Ecogen)
Pseud. fluorescens+B.t. Pseud. fluorescens+B.t. kurstaki kurstaki toxin toxin Bacteria Bacteria Lepidópteros (orugas) Lepidópteros (orugas) MVP (Mycogen) MVP (Mycogen)
Pseud. fluorescens+B.t. San Pseud. fluorescens+B.t. San Diego Diego toxin toxin Bacteria Bacteria Escarabajo de la patata Escarabajo de la patata
((Leptinotarsa decemliniataLeptinotarsa decemliniata) ) M-Trak (Mycogen)M-Trak (Mycogen)
Pseud. fluorescens+B.t. Pseud. fluorescens+B.t. toxin toxin Bacteria Bacteria Piral del maíz (Piral del maíz (Ostrinia nubilarisOstrinia nubilaris) ) M-Peril (Mycogen)M-Peril (Mycogen)
Nosema locustae Nosema locustae Protozoo Protozoo Saltamontes, langostasSaltamontes, langostas Nolo Bait (Evans BioControl) Nolo Bait (Evans BioControl)
Beauveria bassiana Beauveria bassiana Hongo Hongo Mosca blancaMosca blanca Naturalis (Agrichem), Botanigard y Naturalis (Agrichem), Botanigard y Mycotrol (Mycotech) Mycotrol (Mycotech)
Verticillium lecanii Verticillium lecanii Hongo Hongo Mosca blanca (Mosca blanca (Bemisia tabaciBemisia tabaci) ) Mycotal(Koppert)Mycotal(Koppert)
Paecilomyces fumosoreus Paecilomyces fumosoreus Hongo Hongo Mosca blanca (Mosca blanca (Trialeurodes Trialeurodes vaporariorumvaporariorum) )
PreFeRal (Biobest)PreFeRal (Biobest)
Pine sawfly nuclear Pine sawfly nuclear polyhedrosis virus polyhedrosis virus Virus Virus Diprion similis Diprion similis Virox (Novo Nordisk), Noecheck Virox (Novo Nordisk), Noecheck
(USDA Forest Service) (USDA Forest Service)
Heliothis nuclear Heliothis nuclear polyhedrosis virus polyhedrosis virus Virus Virus Helioicoverpa zea Helioicoverpa zea Elcar (Sandoz), Condor (Ecogen) Elcar (Sandoz), Condor (Ecogen)
Gypsi moth nuclear Gypsi moth nuclear polyhedrosis virus polyhedrosis virus Virus Virus Lymantria dispar Lymantria dispar Gypcheck (USDA Forest Service) Gypcheck (USDA Forest Service)
Spodeptera exiqua virus Spodeptera exiqua virus Virus Virus Spodoptera exigua Spodoptera exigua Spod-X (Crop Genetics Spod-X (Crop Genetics International) International)
BIOINSECTICIDAS QUE CONTIENEN COMO INGREDIENTE ACTIVO BACTERIAS, BIOINSECTICIDAS QUE CONTIENEN COMO INGREDIENTE ACTIVO BACTERIAS, PROTOZOOS, HONGOS O VIRUS, COMERCIALIZADOS EN DIFERENTES PAÍSES. PROTOZOOS, HONGOS O VIRUS, COMERCIALIZADOS EN DIFERENTES PAÍSES. BIOINSECTICIDAS QUE CONTIENEN COMO INGREDIENTE ACTIVO BACTERIAS, BIOINSECTICIDAS QUE CONTIENEN COMO INGREDIENTE ACTIVO BACTERIAS, PROTOZOOS, HONGOS O VIRUS, COMERCIALIZADOS EN DIFERENTES PAÍSES. PROTOZOOS, HONGOS O VIRUS, COMERCIALIZADOS EN DIFERENTES PAÍSES.
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
PARA REALIZAR UNA IDENTIFICACIÓN GENERAL DE CÉLULAS BACTERIANAS, SE PUEDEN SEGUIR PROCEDIMIENTOS SIMPLES COMO:
•DESCRIPCIÓN DE SU MORFOLOGÍA CELULAR•COLORACIÓN GRAM•ANÁLISIS DE SU CAPACIDAD PARA CRECER EN CONDICIONES AEROBIAS O ANAEROBIAS•REQUERIMIENTOS DE SUSTRATOS ESPECIALES PARA SU CULTIVO UTILIZANDO TÉCNICAS CONVENCIONALES•IDENTIFICARSE CON BASES EN LAS PROPIEDADES BIOQUÍMICAS•ANÁLISIS SEROLÓGICOS DE ANTÍGENOS FLAGELARES (ANTÍGENO H) DE CÉLULAS VEGETATIVAS
PARA REALIZAR UNA IDENTIFICACIÓN GENERAL DE CÉLULAS BACTERIANAS, SE PUEDEN SEGUIR PROCEDIMIENTOS SIMPLES COMO:
•DESCRIPCIÓN DE SU MORFOLOGÍA CELULAR•COLORACIÓN GRAM•ANÁLISIS DE SU CAPACIDAD PARA CRECER EN CONDICIONES AEROBIAS O ANAEROBIAS•REQUERIMIENTOS DE SUSTRATOS ESPECIALES PARA SU CULTIVO UTILIZANDO TÉCNICAS CONVENCIONALES•IDENTIFICARSE CON BASES EN LAS PROPIEDADES BIOQUÍMICAS•ANÁLISIS SEROLÓGICOS DE ANTÍGENOS FLAGELARES (ANTÍGENO H) DE CÉLULAS VEGETATIVAS
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
•DENTRO DEL GÉNERO DENTRO DEL GÉNERO Bacillus, Bacillus, ESPECIES COMO ESPECIES COMO B.B. sphaericussphaericus (Bsph) Y (Bsph) Y B. popilliaeB. popilliae (Bp) (Bp) PRODUCEN, AL IGUAL QUE Bt, TOXINAS PRODUCEN, AL IGUAL QUE Bt, TOXINAS INSECTICIDAS DE TIPO PROTEICO QUE SON INSECTICIDAS DE TIPO PROTEICO QUE SON SINTETIZADAS DURANTE LA ESPORULACIÓN Y SE SINTETIZADAS DURANTE LA ESPORULACIÓN Y SE DEPOSITAN COMO INCLUSIONES CRISTALINAS DEPOSITAN COMO INCLUSIONES CRISTALINAS PARAESPORALES PARAESPORALES
•COMO LO REPORTA ARONSON Bsph ES UN COMO LO REPORTA ARONSON Bsph ES UN BACILO GRAM POSITIVO; POSEE ESPORAS BACILO GRAM POSITIVO; POSEE ESPORAS ESFÉRICAS QUE DEFORMA NOTABLEMENTE EL ESFÉRICAS QUE DEFORMA NOTABLEMENTE EL CUERPO DEL BACILO Y CUYA UBICACIÓN PUEDE CUERPO DEL BACILO Y CUYA UBICACIÓN PUEDE SER TERMINAL O SUBTERMINAL. SER TERMINAL O SUBTERMINAL.
•PERTENECE A LAS CLASIFICACIONES GRUPALES PERTENECE A LAS CLASIFICACIONES GRUPALES PARA PARA BACILLUS BACILLUS II Y IVII Y IV..
•DENTRO DEL GÉNERO DENTRO DEL GÉNERO Bacillus, Bacillus, ESPECIES COMO ESPECIES COMO B.B. sphaericussphaericus (Bsph) Y (Bsph) Y B. popilliaeB. popilliae (Bp) (Bp) PRODUCEN, AL IGUAL QUE Bt, TOXINAS PRODUCEN, AL IGUAL QUE Bt, TOXINAS INSECTICIDAS DE TIPO PROTEICO QUE SON INSECTICIDAS DE TIPO PROTEICO QUE SON SINTETIZADAS DURANTE LA ESPORULACIÓN Y SE SINTETIZADAS DURANTE LA ESPORULACIÓN Y SE DEPOSITAN COMO INCLUSIONES CRISTALINAS DEPOSITAN COMO INCLUSIONES CRISTALINAS PARAESPORALES PARAESPORALES
•COMO LO REPORTA ARONSON Bsph ES UN COMO LO REPORTA ARONSON Bsph ES UN BACILO GRAM POSITIVO; POSEE ESPORAS BACILO GRAM POSITIVO; POSEE ESPORAS ESFÉRICAS QUE DEFORMA NOTABLEMENTE EL ESFÉRICAS QUE DEFORMA NOTABLEMENTE EL CUERPO DEL BACILO Y CUYA UBICACIÓN PUEDE CUERPO DEL BACILO Y CUYA UBICACIÓN PUEDE SER TERMINAL O SUBTERMINAL. SER TERMINAL O SUBTERMINAL.
•PERTENECE A LAS CLASIFICACIONES GRUPALES PERTENECE A LAS CLASIFICACIONES GRUPALES PARA PARA BACILLUS BACILLUS II Y IVII Y IV..
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
FASE 1:FASE 1: •SELECCIÓN CON ACETATO DE SODIO – CHOQUE TÉRMICOSELECCIÓN CON ACETATO DE SODIO – CHOQUE TÉRMICO•CADA MUESTRA FUE PESADA Y MACERADA CADA MUESTRA FUE PESADA Y MACERADA •COLOCÁNDOSE 500 MG EN 10 ML DE CALDO L. BROTH COLOCÁNDOSE 500 MG EN 10 ML DE CALDO L. BROTH ACETATO 0.25 M ACETATO 0.25 M
FASE 2:FASE 2: ESPORULACIÓN Y DETERMINACIÓN MORFOLÓGICAESPORULACIÓN Y DETERMINACIÓN MORFOLÓGICA
TODAS LAS COLONIAS PREDOMINANTES Y CON TODAS LAS COLONIAS PREDOMINANTES Y CON MORFOLOGÍA MACROSCÓPICA DE MORFOLOGÍA MACROSCÓPICA DE Bacillus spp Bacillus spp FUERON FUERON ANALIZADAS SEGÚN:ANALIZADAS SEGÚN:•LA FORMA DE CRECIMIENTOLA FORMA DE CRECIMIENTO•ELEVACIÓNELEVACIÓN•CONSISTENCIA DE LA COLONIACONSISTENCIA DE LA COLONIA•CARACTERÍSTICAS DE LOS BORDES Y PIGMENTACIÓNCARACTERÍSTICAS DE LOS BORDES Y PIGMENTACIÓN
FASE 1:FASE 1: •SELECCIÓN CON ACETATO DE SODIO – CHOQUE TÉRMICOSELECCIÓN CON ACETATO DE SODIO – CHOQUE TÉRMICO•CADA MUESTRA FUE PESADA Y MACERADA CADA MUESTRA FUE PESADA Y MACERADA •COLOCÁNDOSE 500 MG EN 10 ML DE CALDO L. BROTH COLOCÁNDOSE 500 MG EN 10 ML DE CALDO L. BROTH ACETATO 0.25 M ACETATO 0.25 M
FASE 2:FASE 2: ESPORULACIÓN Y DETERMINACIÓN MORFOLÓGICAESPORULACIÓN Y DETERMINACIÓN MORFOLÓGICA
TODAS LAS COLONIAS PREDOMINANTES Y CON TODAS LAS COLONIAS PREDOMINANTES Y CON MORFOLOGÍA MACROSCÓPICA DE MORFOLOGÍA MACROSCÓPICA DE Bacillus spp Bacillus spp FUERON FUERON ANALIZADAS SEGÚN:ANALIZADAS SEGÚN:•LA FORMA DE CRECIMIENTOLA FORMA DE CRECIMIENTO•ELEVACIÓNELEVACIÓN•CONSISTENCIA DE LA COLONIACONSISTENCIA DE LA COLONIA•CARACTERÍSTICAS DE LOS BORDES Y PIGMENTACIÓNCARACTERÍSTICAS DE LOS BORDES Y PIGMENTACIÓN
AISLAMIENTO DE COLONIAS ENDÉMICASAISLAMIENTO DE COLONIAS ENDÉMICASAISLAMIENTO DE COLONIAS ENDÉMICASAISLAMIENTO DE COLONIAS ENDÉMICAS
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS DE LOS AISLADOS CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS DE LOS AISLADOS ENDÉMICOS DEENDÉMICOS DE BtBtCARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS DE LOS AISLADOS CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS DE LOS AISLADOS ENDÉMICOS DEENDÉMICOS DE BtBt
CARACTERÍSTICASCARACTERÍSTICAS DESCRIPCIÓNDESCRIPCIÓN
TamañoTamaño GrandeGrande
Forma de crecimientoForma de crecimiento IrregularIrregular
Elevación de la coloniaElevación de la colonia PlanaPlana
Forma de los bordesForma de los bordes LobuladoLobulado
Consistencia de la coloniaConsistencia de la colonia CremosaCremosa
AspectoAspecto Opaco- mateOpaco- mate
PigmentaciónPigmentación Blanco cremosoBlanco cremoso
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
CARACTERÍSTICAS CARACTERÍSTICAS MICROSCÓPICAS DE MICROSCÓPICAS DE
BtBt
CARACTERÍSTICAS CARACTERÍSTICAS MICROSCÓPICAS DE MICROSCÓPICAS DE
BtBt
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
•SE REALIZO COLORACIÓN DE GRAM POSITIVOS PARA SE REALIZO COLORACIÓN DE GRAM POSITIVOS PARA
BACILOS, BACILOS, •POSTERIORMENTE FUERON REPICADAS LAS COLONIAS POSTERIORMENTE FUERON REPICADAS LAS COLONIAS
AISLADAS CON UN PALILLO DE MADERA ESTÉRILES A AISLADAS CON UN PALILLO DE MADERA ESTÉRILES A
CAJAS DE PETRI CON MEDIO DE ESPORULACIÓN T3 CAJAS DE PETRI CON MEDIO DE ESPORULACIÓN T3
UTILIZANDO EL MÉTODO DE LA CUADRÍCULA (MILLER, UTILIZANDO EL MÉTODO DE LA CUADRÍCULA (MILLER,
1992)1992)•POSTERIORMENTE SE INCUBARON A 30 ºC POR 5 DÍAS POSTERIORMENTE SE INCUBARON A 30 ºC POR 5 DÍAS
PARA ESPORULACIÓN PARA ESPORULACIÓN •PARA DETERMINAR LA PRESENCIA O AUSENCIA DE PARA DETERMINAR LA PRESENCIA O AUSENCIA DE
CRISTALES PARAESPORALES SE UTILIZARON LA TINCIÓN CRISTALES PARAESPORALES SE UTILIZARON LA TINCIÓN
DIFERENCIAL DE WIRTZ Y LA TINCIÓN VIOLETA –DIFERENCIAL DE WIRTZ Y LA TINCIÓN VIOLETA –
SAFRANINA /OHSAFRANINA /OH
•SE REALIZO COLORACIÓN DE GRAM POSITIVOS PARA SE REALIZO COLORACIÓN DE GRAM POSITIVOS PARA
BACILOS, BACILOS, •POSTERIORMENTE FUERON REPICADAS LAS COLONIAS POSTERIORMENTE FUERON REPICADAS LAS COLONIAS
AISLADAS CON UN PALILLO DE MADERA ESTÉRILES A AISLADAS CON UN PALILLO DE MADERA ESTÉRILES A
CAJAS DE PETRI CON MEDIO DE ESPORULACIÓN T3 CAJAS DE PETRI CON MEDIO DE ESPORULACIÓN T3
UTILIZANDO EL MÉTODO DE LA CUADRÍCULA (MILLER, UTILIZANDO EL MÉTODO DE LA CUADRÍCULA (MILLER,
1992)1992)•POSTERIORMENTE SE INCUBARON A 30 ºC POR 5 DÍAS POSTERIORMENTE SE INCUBARON A 30 ºC POR 5 DÍAS
PARA ESPORULACIÓN PARA ESPORULACIÓN •PARA DETERMINAR LA PRESENCIA O AUSENCIA DE PARA DETERMINAR LA PRESENCIA O AUSENCIA DE
CRISTALES PARAESPORALES SE UTILIZARON LA TINCIÓN CRISTALES PARAESPORALES SE UTILIZARON LA TINCIÓN
DIFERENCIAL DE WIRTZ Y LA TINCIÓN VIOLETA –DIFERENCIAL DE WIRTZ Y LA TINCIÓN VIOLETA –
SAFRANINA /OHSAFRANINA /OH
AISLAMIENTO DE COLONIAS ENDÉMICASAISLAMIENTO DE COLONIAS ENDÉMICASAISLAMIENTO DE COLONIAS ENDÉMICASAISLAMIENTO DE COLONIAS ENDÉMICAS
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
•LA VISUALIZACIÓN DE LAS BACTERIAS SE REALIZO POR LA VISUALIZACIÓN DE LAS BACTERIAS SE REALIZO POR MEDIO DE UN MICROSCOPIO DE LUZ CON OBJETIVO DE MEDIO DE UN MICROSCOPIO DE LUZ CON OBJETIVO DE INMERSIÓN 100XINMERSIÓN 100X•SE TOMO REGISTRO DE LA FORMA, POSICIÓN SE TOMO REGISTRO DE LA FORMA, POSICIÓN PREDOMINANTE DE LA ESPORA Y DEFORMACIÓN DEL PREDOMINANTE DE LA ESPORA Y DEFORMACIÓN DEL ESPORANGIO Y FORMACIÓN DE CRISTALES ESPORANGIO Y FORMACIÓN DE CRISTALES PARAESPORALES.PARAESPORALES.
FASE 3: FASE 3: REVISIÓN FINAL DEL COMPLEJO CRISTAL – ESPORAREVISIÓN FINAL DEL COMPLEJO CRISTAL – ESPORA
•TODAS LAS COLONIAS FORMADORAS DE ESPORA TODAS LAS COLONIAS FORMADORAS DE ESPORA FUERON REPICADAS PARA UNA ÚLTIMA REVISIÓN FUERON REPICADAS PARA UNA ÚLTIMA REVISIÓN SELECTIVA DEL CRISTAL, AL MEDIO AGAR TRÍPTICO DE SELECTIVA DEL CRISTAL, AL MEDIO AGAR TRÍPTICO DE SOYA, SEGÚN LO PROPUESTO POR KABLIN ET AL., 1994SOYA, SEGÚN LO PROPUESTO POR KABLIN ET AL., 1994
•LA VISUALIZACIÓN DE LAS BACTERIAS SE REALIZO POR LA VISUALIZACIÓN DE LAS BACTERIAS SE REALIZO POR MEDIO DE UN MICROSCOPIO DE LUZ CON OBJETIVO DE MEDIO DE UN MICROSCOPIO DE LUZ CON OBJETIVO DE INMERSIÓN 100XINMERSIÓN 100X•SE TOMO REGISTRO DE LA FORMA, POSICIÓN SE TOMO REGISTRO DE LA FORMA, POSICIÓN PREDOMINANTE DE LA ESPORA Y DEFORMACIÓN DEL PREDOMINANTE DE LA ESPORA Y DEFORMACIÓN DEL ESPORANGIO Y FORMACIÓN DE CRISTALES ESPORANGIO Y FORMACIÓN DE CRISTALES PARAESPORALES.PARAESPORALES.
FASE 3: FASE 3: REVISIÓN FINAL DEL COMPLEJO CRISTAL – ESPORAREVISIÓN FINAL DEL COMPLEJO CRISTAL – ESPORA
•TODAS LAS COLONIAS FORMADORAS DE ESPORA TODAS LAS COLONIAS FORMADORAS DE ESPORA FUERON REPICADAS PARA UNA ÚLTIMA REVISIÓN FUERON REPICADAS PARA UNA ÚLTIMA REVISIÓN SELECTIVA DEL CRISTAL, AL MEDIO AGAR TRÍPTICO DE SELECTIVA DEL CRISTAL, AL MEDIO AGAR TRÍPTICO DE SOYA, SEGÚN LO PROPUESTO POR KABLIN ET AL., 1994SOYA, SEGÚN LO PROPUESTO POR KABLIN ET AL., 1994
AISLAMIENTO DE COLONIAS ENDÉMICASAISLAMIENTO DE COLONIAS ENDÉMICASAISLAMIENTO DE COLONIAS ENDÉMICASAISLAMIENTO DE COLONIAS ENDÉMICAS
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
INGREDIENTESINGREDIENTES CANTIDAD/LITROCANTIDAD/LITRO CONCENTRACIÓNCONCENTRACIÓN
L. broth Acetato(CLA)L. broth Acetato(CLA)NaClNaClExtracto de LevaduraExtracto de LevaduraTriptonaTriptonaAcetato de SodioAcetato de Sodio
20 g20 g10 g10 g10 g10 g
20.6 g20.6 g
1X1X
Agar Luria Bertani ( LB)Agar Luria Bertani ( LB)NaClNaClExtracto de LevaduraExtracto de LevaduraTriptonaTriptonaAgar-agarAgar-agar
10 g10 g5 g5 g10 g10 g15 g15 g
1X1X
Medio T3Medio T3NaClNaClExtracto de LevaduraExtracto de LevaduraTriptonaTriptonaMnClMnClFosfato de Sodio pH 6.8Fosfato de Sodio pH 6.8Agar-agarAgar-agar
3 g3 g2 g2 g
1.5 g1.5 g5 mg5 mg6.9 g6.9 g15 g15 g
1X1X
Agar Tríptico de Soya Agar Tríptico de Soya ( TSE)( TSE)Peptona de SoyaPeptona de SoyaNaClNaClExtracto de LevaduraExtracto de LevaduraAgar-agarAgar-agar
5 g5 g5g5g
1.5 g1.5 g15 g15 g
1X1X
MEDIOS PARA CULTIVO DE Bt MEDIOS PARA CULTIVO DE Bt MEDIOS PARA CULTIVO DE Bt MEDIOS PARA CULTIVO DE Bt
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
Muestra de suelo
500mg
Colocar en 10ml de caldo LB con acetato
de sodio
Incubar 30ºC a 200 rpm por 4
horas
Pasar a tubo de
polipropiler estériles
Centrifugar 1’ 2000
rpm
Lavar 2 veces
Resuspender en 10ml de
agua destilada
estéril
Tomar 1.5ml
Pasar a tubos de
microcentrífuga
Calentar a 80ºC por 10
min
Sembrar por Extensión en 1 Agar
Incubar 30ºC por 24 horas
Resultado de colonias
en la superficie
Aislamiento por
agotamiento por estrías
Observar a 100X Tinción de GRAM(+)
Picar a media T3
Método de la cuadrícula
Incubar a 30ºC por 5
días
Observación a 100X Forma y
Posición de la espora
Agar TSEIncubar
30ºC por 2 días
Revisar a 100X
Determinación del
complejo Espora - Cristal
FASE 1
FASE 3
FASE 2
METODOLOGÍA PARA AISLAR E IDENTIFICAR Bt ENDÉMICO METODOLOGÍA PARA AISLAR E IDENTIFICAR Bt ENDÉMICO METODOLOGÍA PARA AISLAR E IDENTIFICAR Bt ENDÉMICO METODOLOGÍA PARA AISLAR E IDENTIFICAR Bt ENDÉMICO
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
CCARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS DE LOS ARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS DE LOS AISLADOS DE Bt, COMO SON:AISLADOS DE Bt, COMO SON:
•PRODUCCIÓN DE CATALASAPRODUCCIÓN DE CATALASA•HIDRÓLISIS DE ALMIDÓN Y CASEINAHIDRÓLISIS DE ALMIDÓN Y CASEINA•CRECIMIENTO EN NaCl AL 7% CRECIMIENTO EN NaCl AL 7% •FORMACIÓN DE CRISTALES PARAESPORALFORMACIÓN DE CRISTALES PARAESPORAL
CCARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS DE LOS ARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS DE LOS AISLADOS DE Bt, COMO SON:AISLADOS DE Bt, COMO SON:
•PRODUCCIÓN DE CATALASAPRODUCCIÓN DE CATALASA•HIDRÓLISIS DE ALMIDÓN Y CASEINAHIDRÓLISIS DE ALMIDÓN Y CASEINA•CRECIMIENTO EN NaCl AL 7% CRECIMIENTO EN NaCl AL 7% •FORMACIÓN DE CRISTALES PARAESPORALFORMACIÓN DE CRISTALES PARAESPORAL
BIOQUÍMICAMENTE SE CARACTERIZA POR TENER BIOQUÍMICAMENTE SE CARACTERIZA POR TENER UN METABOLISMO ESTRICTAMENTE OXIDATIVOUN METABOLISMO ESTRICTAMENTE OXIDATIVONO UTILIZA AZÚCARES COMO FUENTE DE NO UTILIZA AZÚCARES COMO FUENTE DE CARBONO Y DE ENERGÍA, SINO QUE UTILIZA CARBONO Y DE ENERGÍA, SINO QUE UTILIZA ACETATO O AMINOÁCIDOS COMO GLUTAMATOACETATO O AMINOÁCIDOS COMO GLUTAMATO
BIOQUÍMICAMENTE SE CARACTERIZA POR TENER BIOQUÍMICAMENTE SE CARACTERIZA POR TENER UN METABOLISMO ESTRICTAMENTE OXIDATIVOUN METABOLISMO ESTRICTAMENTE OXIDATIVONO UTILIZA AZÚCARES COMO FUENTE DE NO UTILIZA AZÚCARES COMO FUENTE DE CARBONO Y DE ENERGÍA, SINO QUE UTILIZA CARBONO Y DE ENERGÍA, SINO QUE UTILIZA ACETATO O AMINOÁCIDOS COMO GLUTAMATOACETATO O AMINOÁCIDOS COMO GLUTAMATO
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
•Bp Bp ES TAMBIÉN UN BACILO POSITIVO QUE POSEE ES TAMBIÉN UN BACILO POSITIVO QUE POSEE ESPORA ELIPSOIDAL EN POSICIÓN TERMINAL Y ESPORA ELIPSOIDAL EN POSICIÓN TERMINAL Y PERTENECE EN AMBOS CASO AL GRUPO I. PERTENECE EN AMBOS CASO AL GRUPO I.
•SE DESTACA BIOQUÍMICAMENTE POR PRESENTAR SE DESTACA BIOQUÍMICAMENTE POR PRESENTAR REACCIÓN NEGATIVA PARA CATALASA, VOGES REACCIÓN NEGATIVA PARA CATALASA, VOGES PROSKAUER E HIDRÓLISIS DE CASEÍNAPROSKAUER E HIDRÓLISIS DE CASEÍNA
•HASTA AHORA HA SIDO AISLADO ÚNICAMENTE DE HASTA AHORA HA SIDO AISLADO ÚNICAMENTE DE ESCARABAJOS DISECADOSESCARABAJOS DISECADOS..
•Bp Bp ES TAMBIÉN UN BACILO POSITIVO QUE POSEE ES TAMBIÉN UN BACILO POSITIVO QUE POSEE ESPORA ELIPSOIDAL EN POSICIÓN TERMINAL Y ESPORA ELIPSOIDAL EN POSICIÓN TERMINAL Y PERTENECE EN AMBOS CASO AL GRUPO I. PERTENECE EN AMBOS CASO AL GRUPO I.
•SE DESTACA BIOQUÍMICAMENTE POR PRESENTAR SE DESTACA BIOQUÍMICAMENTE POR PRESENTAR REACCIÓN NEGATIVA PARA CATALASA, VOGES REACCIÓN NEGATIVA PARA CATALASA, VOGES PROSKAUER E HIDRÓLISIS DE CASEÍNAPROSKAUER E HIDRÓLISIS DE CASEÍNA
•HASTA AHORA HA SIDO AISLADO ÚNICAMENTE DE HASTA AHORA HA SIDO AISLADO ÚNICAMENTE DE ESCARABAJOS DISECADOSESCARABAJOS DISECADOS..
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
CARACTERÍSTICACARACTERÍSTICA
ESPECIES DE BacillusESPECIES DE Bacillus
Bt. Bt. B. B.
subtilisubtiliss
B. B. cereuscereus
B. B. licheniformelicheniforme
ss
B. B. pumilispumilis
B. B. megateriummegaterium
B. B. coagulancoagulan
ss
CATALASACATALASA ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++
VOGES PROSKAUER (VP)VOGES PROSKAUER (VP) ++ ++ ++ ++ ++ -- ++
CRECIMIENTO CRECIMIENTO ANAERÓBICOANAERÓBICO ++ ++ ++ ++ -- -- ++
CRECIMIENTO CRECIMIENTO ANAERÓBICO A 50 CANAERÓBICO A 50 C -- ++ -- ++ ++ -- ++
CRECIMIENTO EN NaCl 7%CRECIMIENTO EN NaCl 7% ++ ++ ++ ++ ++ ++ --
FORMACIÓN DE ÁCIDO Y FORMACIÓN DE ÁCIDO Y GAS A PARTIR DE GAS A PARTIR DE GLUCOSAGLUCOSA
-- -- -- -- -- -- --
REDUCCIÓN DE NOREDUCCIÓN DE NO3 3 A NOA NO22 ++ -- ++ ++ -- VV VV
HIDRÓLISIS DE ALMIDÓNHIDRÓLISIS DE ALMIDÓN ++ ++ ++ ++ -- ++ ++
CRECIMIENTO A 65 CCRECIMIENTO A 65 C -- -- -- -- -- -- --
pH EN VP MEDIO 6.0pH EN VP MEDIO 6.0 -- VV -- VV -- VV --
FORMACIÓN DE ÁCIDO DE FORMACIÓN DE ÁCIDO DE GLUCOSAGLUCOSA ++ ++ ++ ++ ++ ++ --
HIDRÓLISIS DE CASEINAHIDRÓLISIS DE CASEINA ++ ++ ++ ++ ++ ++ VV
FORMACIÓN DE CRISTAL FORMACIÓN DE CRISTAL PARAESPORALPARAESPORAL ++ -- VV -- -- -- --
CARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS PARA BACILLUS CARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS PARA BACILLUS PERTENECIENTES AL GRUPO 1A PERTENECIENTES AL GRUPO 1A
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
CARACTERÍSTICACARACTERÍSTICA
ESPECIE DE BacillusESPECIE DE Bacillus
Bt.Bt. B. B. sphaericussphaericus B. popilliaeB. popilliae
GRUPO GRUPO IIII IVIV II
POSICIÓN Y FORMA DE LA POSICIÓN Y FORMA DE LA ESPORAESPORA C, PC y O, NC, PC y O, N ST, T y R, SST, T y R, S T y OT y O
CATALASACATALASA ++ ++ --
VOGES PROSKAUER (VP)VOGES PROSKAUER (VP) ++ -- --
CRECIMIENTO ANAERÓBICO EN CRECIMIENTO ANAERÓBICO EN AGARAGAR ++ -- ++
CRECIMIENTO EN NaCl 7%CRECIMIENTO EN NaCl 7% ++ VV --
FORMACIÓN DE ÁCIDO Y GAS A FORMACIÓN DE ÁCIDO Y GAS A PARTIR DE GLUCOSAPARTIR DE GLUCOSA ++ -- ++
REDUCCIÓN DE NOREDUCCIÓN DE NO3 3 A NOA NO22 ++ -- --
HIDRÓLISIS DE ALMIDÓNHIDRÓLISIS DE ALMIDÓN ++ -- --
FORMACIÓN DE ÁCIDO DE FORMACIÓN DE ÁCIDO DE GLUCOSAGLUCOSA ++ -- ++
HIDRÓLISIS DE CASEINAHIDRÓLISIS DE CASEINA ++ VV --
Resumen comparativo de los caracteres usados para identificar Resumen comparativo de los caracteres usados para identificar especies de especies de BacillusBacillus formadores de inclusiones cristalinas formadores de inclusiones cristalinas
C: central, PC: paracentral; ST: subterminal; T: terminal; O: ovalada, R: redonda; N: no deforma el cuerpo C: central, PC: paracentral; ST: subterminal; T: terminal; O: ovalada, R: redonda; N: no deforma el cuerpo del bacilo; S: si deforma el cuerpo del bacilo; V: carácter variable.del bacilo; S: si deforma el cuerpo del bacilo; V: carácter variable.
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
CARACTERÍSTICASCARACTERÍSTICAS
SUBESPECIES DE BtSUBESPECIES DE Bt
darmstadiensisdarmstadiensis
Israeliensis Israeliensis 18891889
MorrisoniMorrisoniserotipo 8a: 8bserotipo 8a: 8b
ARGININAARGININA ++ -- --
ESCULINAESCULINA ++ -- ++
UREAUREA -- -- --
CATALASACATALASA ++ -- --
SACAROSASACAROSA -- -- ++
CASEINACASEINA ++ ++ NDND
HEMOLISIS EN AGAR HEMOLISIS EN AGAR SANGRESANGRE ΒΒ ββ ββ
PRUEBAS BIOQUÍMICAS PARA ALGUNAS PRUEBAS BIOQUÍMICAS PARA ALGUNAS SUBESPECIES DE SUBESPECIES DE Bt Bt
PRUEBAS BIOQUÍMICAS PARA ALGUNAS PRUEBAS BIOQUÍMICAS PARA ALGUNAS SUBESPECIES DE SUBESPECIES DE Bt Bt
(+) = reacciones positivas; (-) = reacción negativa; (ND)= dato no obtenido; (+) = reacciones positivas; (-) = reacción negativa; (ND)= dato no obtenido; ( β)= hemólisis beta en agar sangre. ( β)= hemólisis beta en agar sangre. Fuente Slepcky & Hemphill, 1992. Fuente Slepcky & Hemphill, 1992.
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
•LAS CÉLULAS DE LAS PLANTAS Bt LAS CÉLULAS DE LAS PLANTAS Bt TRANSFORMADAS PRESENTAN LOS GENES Y TRANSFORMADAS PRESENTAN LOS GENES Y LOS REGULADORES (PROMOTORES, LOS REGULADORES (PROMOTORES, PROCESAMIENTO DEL ARN MENSAJERO, PROCESAMIENTO DEL ARN MENSAJERO, TRADUCCIÓN, LOCALIZACIÓN SUBCELULAR) TRADUCCIÓN, LOCALIZACIÓN SUBCELULAR) INVOLUCRADOS EN LA EXPRESIÓN DEL INVOLUCRADOS EN LA EXPRESIÓN DEL MISMOMISMO
•LAS PLANTAS SE TRANSFORMAN ASÍ EN LAS PLANTAS SE TRANSFORMAN ASÍ EN “PRODUCTORAS DE INSECTICIDA”, LO QUE “PRODUCTORAS DE INSECTICIDA”, LO QUE LAS HACE ALTAMENTE RESISTENTES A UN LAS HACE ALTAMENTE RESISTENTES A UN AMPLIO RANGO DE LEPIDÓPTEROS Y AMPLIO RANGO DE LEPIDÓPTEROS Y COLEÓPTEROSCOLEÓPTEROS
•LAS CÉLULAS DE LAS PLANTAS Bt LAS CÉLULAS DE LAS PLANTAS Bt TRANSFORMADAS PRESENTAN LOS GENES Y TRANSFORMADAS PRESENTAN LOS GENES Y LOS REGULADORES (PROMOTORES, LOS REGULADORES (PROMOTORES, PROCESAMIENTO DEL ARN MENSAJERO, PROCESAMIENTO DEL ARN MENSAJERO, TRADUCCIÓN, LOCALIZACIÓN SUBCELULAR) TRADUCCIÓN, LOCALIZACIÓN SUBCELULAR) INVOLUCRADOS EN LA EXPRESIÓN DEL INVOLUCRADOS EN LA EXPRESIÓN DEL MISMOMISMO
•LAS PLANTAS SE TRANSFORMAN ASÍ EN LAS PLANTAS SE TRANSFORMAN ASÍ EN “PRODUCTORAS DE INSECTICIDA”, LO QUE “PRODUCTORAS DE INSECTICIDA”, LO QUE LAS HACE ALTAMENTE RESISTENTES A UN LAS HACE ALTAMENTE RESISTENTES A UN AMPLIO RANGO DE LEPIDÓPTEROS Y AMPLIO RANGO DE LEPIDÓPTEROS Y COLEÓPTEROSCOLEÓPTEROS
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
•LAS PLANTAS TRANSGÉNICAS BT FUERON LAS PLANTAS TRANSGÉNICAS BT FUERON CREADAS PARA REDUCIR LA DEPENDENCIA CREADAS PARA REDUCIR LA DEPENDENCIA DE LOS INSECTICIDAS CONVENCIONALES DE DE LOS INSECTICIDAS CONVENCIONALES DE AMPLIO ESPECTRO Y REDUCIR DE ESTA AMPLIO ESPECTRO Y REDUCIR DE ESTA FORMA EL IMPACTO QUE ÉSTOS TIENEN EN FORMA EL IMPACTO QUE ÉSTOS TIENEN EN EL AMBIENTE POR SER NO ESPECÍFICOS Y EL AMBIENTE POR SER NO ESPECÍFICOS Y EN ALGUNOS CASOS DE GRAN TOXICIDADEN ALGUNOS CASOS DE GRAN TOXICIDAD
•OTRA VENTAJA QUE PRESENTARÍAN ES OTRA VENTAJA QUE PRESENTARÍAN ES QUE SE REDUCIRÍAN LOS COSTOS DE QUE SE REDUCIRÍAN LOS COSTOS DE APLICACIÓN DE AGROQUÍMICOS, LO QUE APLICACIÓN DE AGROQUÍMICOS, LO QUE IRÍA LIGADO A UN AUMENTO EN LA IRÍA LIGADO A UN AUMENTO EN LA PRODUCCIÓNPRODUCCIÓN
•LAS PLANTAS TRANSGÉNICAS BT FUERON LAS PLANTAS TRANSGÉNICAS BT FUERON CREADAS PARA REDUCIR LA DEPENDENCIA CREADAS PARA REDUCIR LA DEPENDENCIA DE LOS INSECTICIDAS CONVENCIONALES DE DE LOS INSECTICIDAS CONVENCIONALES DE AMPLIO ESPECTRO Y REDUCIR DE ESTA AMPLIO ESPECTRO Y REDUCIR DE ESTA FORMA EL IMPACTO QUE ÉSTOS TIENEN EN FORMA EL IMPACTO QUE ÉSTOS TIENEN EN EL AMBIENTE POR SER NO ESPECÍFICOS Y EL AMBIENTE POR SER NO ESPECÍFICOS Y EN ALGUNOS CASOS DE GRAN TOXICIDADEN ALGUNOS CASOS DE GRAN TOXICIDAD
•OTRA VENTAJA QUE PRESENTARÍAN ES OTRA VENTAJA QUE PRESENTARÍAN ES QUE SE REDUCIRÍAN LOS COSTOS DE QUE SE REDUCIRÍAN LOS COSTOS DE APLICACIÓN DE AGROQUÍMICOS, LO QUE APLICACIÓN DE AGROQUÍMICOS, LO QUE IRÍA LIGADO A UN AUMENTO EN LA IRÍA LIGADO A UN AUMENTO EN LA PRODUCCIÓNPRODUCCIÓN
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
•““Bt" Bt" Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensis, una bacteria del suelo , una bacteria del suelo cuyas esporas contienen una proteína cristalina cuyas esporas contienen una proteína cristalina (Cry).(Cry).
•En el intestino del insecto, la proteína se En el intestino del insecto, la proteína se descompone y libera una toxina llamada endotoxina descompone y libera una toxina llamada endotoxina delta. delta.
•Se han identificado distintas versiones de los Se han identificado distintas versiones de los genes Cry, también llamados "genes Bt". genes Cry, también llamados "genes Bt".
•Insecticidas que contienen Bt y sus toxinas (Dipel, Insecticidas que contienen Bt y sus toxinas (Dipel, Thuricide, Ventobac). Thuricide, Ventobac).
•En las plantas “Bt” se ha incorporado una versión En las plantas “Bt” se ha incorporado una versión modificada del gen Cry bacteriano en el ADN de la modificada del gen Cry bacteriano en el ADN de la propia planta, de tal modo que la maquinaria celular propia planta, de tal modo que la maquinaria celular de la planta produce la toxina. de la planta produce la toxina.
•““Bt" Bt" Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensis, una bacteria del suelo , una bacteria del suelo cuyas esporas contienen una proteína cristalina cuyas esporas contienen una proteína cristalina (Cry).(Cry).
•En el intestino del insecto, la proteína se En el intestino del insecto, la proteína se descompone y libera una toxina llamada endotoxina descompone y libera una toxina llamada endotoxina delta. delta.
•Se han identificado distintas versiones de los Se han identificado distintas versiones de los genes Cry, también llamados "genes Bt". genes Cry, también llamados "genes Bt".
•Insecticidas que contienen Bt y sus toxinas (Dipel, Insecticidas que contienen Bt y sus toxinas (Dipel, Thuricide, Ventobac). Thuricide, Ventobac).
•En las plantas “Bt” se ha incorporado una versión En las plantas “Bt” se ha incorporado una versión modificada del gen Cry bacteriano en el ADN de la modificada del gen Cry bacteriano en el ADN de la propia planta, de tal modo que la maquinaria celular propia planta, de tal modo que la maquinaria celular de la planta produce la toxina. de la planta produce la toxina.
Barrenador del maíz
Gusano del copo del algodón
PLANTAS “Bt”PLANTAS “Bt”PLANTAS “Bt”PLANTAS “Bt”
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
Maíz:Maíz: básicamente para el básicamente para el control del barrenador control del barrenador europeo del maíz y el europeo del maíz y el barrenador grande del maíz. barrenador grande del maíz.
Algodón:Algodón: para el control del para el control del gusano de las yemas del gusano de las yemas del tabaco y el gusano del copo tabaco y el gusano del copo de algodón.de algodón.
Papa:Papa: para el control del para el control del escarabajo de la papa de escarabajo de la papa de Colorado. Colorado.
Maíz:Maíz: básicamente para el básicamente para el control del barrenador control del barrenador europeo del maíz y el europeo del maíz y el barrenador grande del maíz. barrenador grande del maíz.
Algodón:Algodón: para el control del para el control del gusano de las yemas del gusano de las yemas del tabaco y el gusano del copo tabaco y el gusano del copo de algodón.de algodón.
Papa:Papa: para el control del para el control del escarabajo de la papa de escarabajo de la papa de Colorado. Colorado.
LOS CULTIVOS BT RESISTENTES A LOS INSECTOS LOS CULTIVOS BT RESISTENTES A LOS INSECTOS ACTUALMENTE EN EL MERCADO INCLUYEN: ACTUALMENTE EN EL MERCADO INCLUYEN: LOS CULTIVOS BT RESISTENTES A LOS INSECTOS LOS CULTIVOS BT RESISTENTES A LOS INSECTOS ACTUALMENTE EN EL MERCADO INCLUYEN: ACTUALMENTE EN EL MERCADO INCLUYEN:
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
0
20
40
60
80
100
1985 1990 1995 2000 2003
resistencia aherbicidas
resistencia ainsectos
resistencia avirus
calidad delproducto0
20
40
60
80
100
1985 1990 1995 2000 2003
resistencia aherbicidas
resistencia ainsectos
resistencia avirus
calidad delproducto
A partir de: http/highwire.stanfordA partir de: http/highwire.stanfordA partir de: http/highwire.stanfordA partir de: http/highwire.stanford
CARACTERISTICAS INCORPORADASCARACTERISTICAS INCORPORADASCARACTERISTICAS INCORPORADASCARACTERISTICAS INCORPORADAS
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
Bol. Entomol. Venez. 4(8): 61-70. 30 octubre 1985 Bol. Entomol. Venez. 4(8): 61-70. 30 octubre 1985
Evaluación de dos insecticidas, uno Evaluación de dos insecticidas, uno químico (Diazinón y otro biológico químico (Diazinón y otro biológico
(Bacillus thuringiensis (Bacillus thuringiensis var. var. kurstaki), kurstaki), en en base a sus efectos sobre las poblaciones base a sus efectos sobre las poblaciones de larvas de de larvas de Spodoptera frugiperda (S.)Spodoptera frugiperda (S.)
ROSA I. FERNANDEZ B. y SANTIAGO CLAVIJO A.ROSA I. FERNANDEZ B. y SANTIAGO CLAVIJO A.
APLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONES
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
•CON EL FIN DE DETERMINAR EL EFECTO DE CON EL FIN DE DETERMINAR EL EFECTO DE DOS INSECTICIDAS (DIAZINÓN Y DOS INSECTICIDAS (DIAZINÓN Y Bacillus Bacillus thuringiensis thuringiensis ber), SOBRE LAS POBLACIONES DE ber), SOBRE LAS POBLACIONES DE LARVAS DE LARVAS DE SS. . frugiperda frugiperda SE SEMBRÓ UN SE SEMBRÓ UN ENSAYO CON EL HÍBRIDO "ARICHUNA BLANCO" ENSAYO CON EL HÍBRIDO "ARICHUNA BLANCO" DE MAÍZ, EN LA ESTACIÓN EXPERIMENTAL DE MAÍZ, EN LA ESTACIÓN EXPERIMENTAL "SAMÁN MOCHO" DE LA FACULTAD DE "SAMÁN MOCHO" DE LA FACULTAD DE AGRONOMIA (U.C.V.), EN UN DISEÑO DE AGRONOMIA (U.C.V.), EN UN DISEÑO DE BLOQUES AL AZAR. BLOQUES AL AZAR.
•CON EL FIN DE DETERMINAR EL EFECTO DE CON EL FIN DE DETERMINAR EL EFECTO DE DOS INSECTICIDAS (DIAZINÓN Y DOS INSECTICIDAS (DIAZINÓN Y Bacillus Bacillus thuringiensis thuringiensis ber), SOBRE LAS POBLACIONES DE ber), SOBRE LAS POBLACIONES DE LARVAS DE LARVAS DE SS. . frugiperda frugiperda SE SEMBRÓ UN SE SEMBRÓ UN ENSAYO CON EL HÍBRIDO "ARICHUNA BLANCO" ENSAYO CON EL HÍBRIDO "ARICHUNA BLANCO" DE MAÍZ, EN LA ESTACIÓN EXPERIMENTAL DE MAÍZ, EN LA ESTACIÓN EXPERIMENTAL "SAMÁN MOCHO" DE LA FACULTAD DE "SAMÁN MOCHO" DE LA FACULTAD DE AGRONOMIA (U.C.V.), EN UN DISEÑO DE AGRONOMIA (U.C.V.), EN UN DISEÑO DE BLOQUES AL AZAR. BLOQUES AL AZAR.
APLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONES
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
Spodoptera frugiperdaSpodoptera frugiperdaSpodoptera frugiperdaSpodoptera frugiperda
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
•LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN EL MISMO, LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN EL MISMO, PARECEN REFLEJAR, EN EL CASO DE LAS PARECEN REFLEJAR, EN EL CASO DE LAS PARCELAS TESTIGOS Y LOS TRATADOS CON PARCELAS TESTIGOS Y LOS TRATADOS CON B. B. thuringiensis, thuringiensis, EL DESARROLLO EN EDAD DE EL DESARROLLO EN EDAD DE UNA POBLACIÓN LIBRE DE INSECTICIDAUNA POBLACIÓN LIBRE DE INSECTICIDA
•ADEMÁS, EN EL TRATAMIENTO CONADEMÁS, EN EL TRATAMIENTO CON B. B. thuringiensis thuringiensis LA MEDIA PARA EL PORCENTAJE LA MEDIA PARA EL PORCENTAJE DE LARVAS PEQUEÑAS ES MENOR QUE EN EL DE LARVAS PEQUEÑAS ES MENOR QUE EN EL TESTIGO Y TRATAMIENTO CON DIAZINÓN, LO TESTIGO Y TRATAMIENTO CON DIAZINÓN, LO CUAL PUEDE DEBERSE A QUE EL CUAL PUEDE DEBERSE A QUE EL BACILUS BACILUS HAYA HAYA EJERCIDO CIERTO CONTROL SOBRE LARVAS EJERCIDO CIERTO CONTROL SOBRE LARVAS PEQUEÑAS DE PEQUEÑAS DE SS. . frugiperdafrugiperda
•LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN EL MISMO, LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN EL MISMO, PARECEN REFLEJAR, EN EL CASO DE LAS PARECEN REFLEJAR, EN EL CASO DE LAS PARCELAS TESTIGOS Y LOS TRATADOS CON PARCELAS TESTIGOS Y LOS TRATADOS CON B. B. thuringiensis, thuringiensis, EL DESARROLLO EN EDAD DE EL DESARROLLO EN EDAD DE UNA POBLACIÓN LIBRE DE INSECTICIDAUNA POBLACIÓN LIBRE DE INSECTICIDA
•ADEMÁS, EN EL TRATAMIENTO CONADEMÁS, EN EL TRATAMIENTO CON B. B. thuringiensis thuringiensis LA MEDIA PARA EL PORCENTAJE LA MEDIA PARA EL PORCENTAJE DE LARVAS PEQUEÑAS ES MENOR QUE EN EL DE LARVAS PEQUEÑAS ES MENOR QUE EN EL TESTIGO Y TRATAMIENTO CON DIAZINÓN, LO TESTIGO Y TRATAMIENTO CON DIAZINÓN, LO CUAL PUEDE DEBERSE A QUE EL CUAL PUEDE DEBERSE A QUE EL BACILUS BACILUS HAYA HAYA EJERCIDO CIERTO CONTROL SOBRE LARVAS EJERCIDO CIERTO CONTROL SOBRE LARVAS PEQUEÑAS DE PEQUEÑAS DE SS. . frugiperdafrugiperda
APLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONES
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
APLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONES
•B. thuringiensisB. thuringiensis SUPRIME LA VIRULENCIA POR SUPRIME LA VIRULENCIA POR PARTE DE PARTE DE Erwinia carotovoraErwinia carotovora A TRAVÉS DE UNA A TRAVÉS DE UNA NUEVA FORMA DE ANTAGONISMO BACTERIANO, NUEVA FORMA DE ANTAGONISMO BACTERIANO, COMO LAS SEÑALES DE INTERFERENCIACOMO LAS SEÑALES DE INTERFERENCIA
•E. carotovoraE. carotovora PRODUCE Y RESPONDE A LA PRODUCE Y RESPONDE A LA LACTONA ACIL-HOMOSERINA (AHL) QUE LACTONA ACIL-HOMOSERINA (AHL) QUE REGULAN LA PRODUCCIÓN DE ANTIBIOTICOS Y REGULAN LA PRODUCCIÓN DE ANTIBIOTICOS Y LA EXPRESIÓN DE LOS GENES DE VIRULENCIALA EXPRESIÓN DE LOS GENES DE VIRULENCIA
•B. thuringiensisB. thuringiensis SUPRIME LA VIRULENCIA POR SUPRIME LA VIRULENCIA POR PARTE DE PARTE DE Erwinia carotovoraErwinia carotovora A TRAVÉS DE UNA A TRAVÉS DE UNA NUEVA FORMA DE ANTAGONISMO BACTERIANO, NUEVA FORMA DE ANTAGONISMO BACTERIANO, COMO LAS SEÑALES DE INTERFERENCIACOMO LAS SEÑALES DE INTERFERENCIA
•E. carotovoraE. carotovora PRODUCE Y RESPONDE A LA PRODUCE Y RESPONDE A LA LACTONA ACIL-HOMOSERINA (AHL) QUE LACTONA ACIL-HOMOSERINA (AHL) QUE REGULAN LA PRODUCCIÓN DE ANTIBIOTICOS Y REGULAN LA PRODUCCIÓN DE ANTIBIOTICOS Y LA EXPRESIÓN DE LOS GENES DE VIRULENCIALA EXPRESIÓN DE LOS GENES DE VIRULENCIA
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
Erwinia Erwinia carotovoracarotovoraErwinia Erwinia carotovoracarotovora
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
APLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONES
•MIENTRAS QUE MIENTRAS QUE B. thuringiensis B. thuringiensis POSEE LA POSEE LA ENZIMA AHL-LACTONASA, QUE DEGRADA LA ACIL-ENZIMA AHL-LACTONASA, QUE DEGRADA LA ACIL-HOMOSERINA LACTONAHOMOSERINA LACTONA
•B. thuringiensis B. thuringiensis PARECE QUE NO INTERFIERE PARECE QUE NO INTERFIERE CON EL NORMAL CRECIMIENTO DE CON EL NORMAL CRECIMIENTO DE E. caratovoraE. caratovora, , SI NO QUE INTERVIENE ELIMINANDO LA SI NO QUE INTERVIENE ELIMINANDO LA ACUMULACIÓN DE AHL, QUE ACTUA COMO SEÑAL.ACUMULACIÓN DE AHL, QUE ACTUA COMO SEÑAL.
•EN PLANTAS DE PAPA, EN PLANTAS DE PAPA, B. thuringiensisB. thuringiensis DISMINUYE LA INCIDENCIA DE LA INFECCIÓN Y DISMINUYE LA INCIDENCIA DE LA INFECCIÓN Y LOS SÍNTOMAS POR PARTE DE LOS SÍNTOMAS POR PARTE DE E. caratovoraE. caratovora
•MIENTRAS QUE MIENTRAS QUE B. thuringiensis B. thuringiensis POSEE LA POSEE LA ENZIMA AHL-LACTONASA, QUE DEGRADA LA ACIL-ENZIMA AHL-LACTONASA, QUE DEGRADA LA ACIL-HOMOSERINA LACTONAHOMOSERINA LACTONA
•B. thuringiensis B. thuringiensis PARECE QUE NO INTERFIERE PARECE QUE NO INTERFIERE CON EL NORMAL CRECIMIENTO DE CON EL NORMAL CRECIMIENTO DE E. caratovoraE. caratovora, , SI NO QUE INTERVIENE ELIMINANDO LA SI NO QUE INTERVIENE ELIMINANDO LA ACUMULACIÓN DE AHL, QUE ACTUA COMO SEÑAL.ACUMULACIÓN DE AHL, QUE ACTUA COMO SEÑAL.
•EN PLANTAS DE PAPA, EN PLANTAS DE PAPA, B. thuringiensisB. thuringiensis DISMINUYE LA INCIDENCIA DE LA INFECCIÓN Y DISMINUYE LA INCIDENCIA DE LA INFECCIÓN Y LOS SÍNTOMAS POR PARTE DE LOS SÍNTOMAS POR PARTE DE E. caratovoraE. caratovora
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
•EL GEN EL GEN cryIAc7 cryIAc7 DE DE B. thuringiensis B. thuringiensis CEPA 234, QUE CEPA 234, QUE MUESTRA ACTIVIDAD CONTRA EL GUSANO MUESTRA ACTIVIDAD CONTRA EL GUSANO BARRENADOR DE LA CAÑA DE AZUCAR BARRENADOR DE LA CAÑA DE AZUCAR Eldana Eldana saccharina saccharina , FUE CLONADO BAJO EL CONTROL DEL , FUE CLONADO BAJO EL CONTROL DEL PROMOTOR PROMOTOR tactac
•LA FUSION FUE INTRODUCIDA DENTRO DE UN LA FUSION FUE INTRODUCIDA DENTRO DE UN PLASMIDO pKT240 Y EN EL VECTOR DE INTEGRACION PLASMIDO pKT240 Y EN EL VECTOR DE INTEGRACION pJFF350, TAMBIÉN SE UTILIZARON PLASMIDOS PERO pJFF350, TAMBIÉN SE UTILIZARON PLASMIDOS PERO SIN LA PRESENCIA DEL PROMOTOR SIN LA PRESENCIA DEL PROMOTOR tactac, Pml122 y , Pml122 y pKmM0pKmM0
•EL GEN EL GEN cryIAc7 cryIAc7 DE DE B. thuringiensis B. thuringiensis CEPA 234, QUE CEPA 234, QUE MUESTRA ACTIVIDAD CONTRA EL GUSANO MUESTRA ACTIVIDAD CONTRA EL GUSANO BARRENADOR DE LA CAÑA DE AZUCAR BARRENADOR DE LA CAÑA DE AZUCAR Eldana Eldana saccharina saccharina , FUE CLONADO BAJO EL CONTROL DEL , FUE CLONADO BAJO EL CONTROL DEL PROMOTOR PROMOTOR tactac
•LA FUSION FUE INTRODUCIDA DENTRO DE UN LA FUSION FUE INTRODUCIDA DENTRO DE UN PLASMIDO pKT240 Y EN EL VECTOR DE INTEGRACION PLASMIDO pKT240 Y EN EL VECTOR DE INTEGRACION pJFF350, TAMBIÉN SE UTILIZARON PLASMIDOS PERO pJFF350, TAMBIÉN SE UTILIZARON PLASMIDOS PERO SIN LA PRESENCIA DEL PROMOTOR SIN LA PRESENCIA DEL PROMOTOR tactac, Pml122 y , Pml122 y pKmM0pKmM0
APLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONES
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
Eldana saccharinaEldana saccharinaEldana saccharinaEldana saccharina
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
•ESOS PLASMIDOS FUERON INTRODUCIDOS EN ESOS PLASMIDOS FUERON INTRODUCIDOS EN Pseudomonas fluoresecensPseudomonas fluoresecens Y LA BACTERIA Y LA BACTERIA ENDOFITICA ENDOFITICA Herbaspirillum seropediacaeHerbaspirillum seropediacae. .
•EN EL RESULTADO DE LOS BIOENSAYOS SE EN EL RESULTADO DE LOS BIOENSAYOS SE OBSERVO UNA ALTA MORTALIDAD DE LARVAS OBSERVO UNA ALTA MORTALIDAD DE LARVAS E. saccharinaE. saccharina AL INOCULAR CON AL INOCULAR CON H. H. seropediacaeseropediacae TRANSFORMADA, MIENTRAS QUE TRANSFORMADA, MIENTRAS QUE LA MORTALIDA POR PARTE LA LA MORTALIDA POR PARTE LA P. fluorescensP. fluorescens NO NO FUE IGUAL DE ALTAFUE IGUAL DE ALTA
•ESOS PLASMIDOS FUERON INTRODUCIDOS EN ESOS PLASMIDOS FUERON INTRODUCIDOS EN Pseudomonas fluoresecensPseudomonas fluoresecens Y LA BACTERIA Y LA BACTERIA ENDOFITICA ENDOFITICA Herbaspirillum seropediacaeHerbaspirillum seropediacae. .
•EN EL RESULTADO DE LOS BIOENSAYOS SE EN EL RESULTADO DE LOS BIOENSAYOS SE OBSERVO UNA ALTA MORTALIDAD DE LARVAS OBSERVO UNA ALTA MORTALIDAD DE LARVAS E. saccharinaE. saccharina AL INOCULAR CON AL INOCULAR CON H. H. seropediacaeseropediacae TRANSFORMADA, MIENTRAS QUE TRANSFORMADA, MIENTRAS QUE LA MORTALIDA POR PARTE LA LA MORTALIDA POR PARTE LA P. fluorescensP. fluorescens NO NO FUE IGUAL DE ALTAFUE IGUAL DE ALTA
APLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONES
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
APLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONES
RESIDUALIDAD DE UN FORMULADO SÓLIDO DEL RESIDUALIDAD DE UN FORMULADO SÓLIDO DEL INSECTICIDA INSECTICIDA
MICROBIANO BTI (H-14) EN EL CONTROL DE LARVAS DE MICROBIANO BTI (H-14) EN EL CONTROL DE LARVAS DE Aedes aegyptiAedes aegypti (DIPTERA CULICIDAE) (DIPTERA CULICIDAE)
Masuh H1, Seccacini E1, de Licastro S1, Zerba E2.Masuh H1, Seccacini E1, de Licastro S1, Zerba E2.
Revista Peruana de Epidemiología. Vol. 10 • Nº 7 • 2002 Revista Peruana de Epidemiología. Vol. 10 • Nº 7 • 2002 Revista Peruana de Epidemiología. Vol. 10 • Nº 7 • 2002 Revista Peruana de Epidemiología. Vol. 10 • Nº 7 • 2002
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
Aedes Aedes aegyptiaegyptiAedes Aedes
aegyptiaegypti
APLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONES
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
APLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONES
OBJETIVO:OBJETIVO: EVALUAR LA RESIDUALIDAD DE UN EVALUAR LA RESIDUALIDAD DE UN FORMULADO SÓLIDO DE LIBERACIÓN LENTA FORMULADO SÓLIDO DE LIBERACIÓN LENTA DEL BIOINSECTICIDA BTI (H-14) PARA EL DEL BIOINSECTICIDA BTI (H-14) PARA EL CONTROL DE LARVAS DE CONTROL DE LARVAS DE Aedes aegyptiAedes aegypti
MATERIAL Y MÉTODOS:MATERIAL Y MÉTODOS: ESTUDIO DESCRIPTIVO ESTUDIO DESCRIPTIVO TRANSVERSAL. SE UTILIZARON LARVAS DE TRANSVERSAL. SE UTILIZARON LARVAS DE Aedes aegyptiAedes aegypti DEL III ESTADIO TARDÍO Ó IV DEL III ESTADIO TARDÍO Ó IV TEMPRANO (CEPA SUSCEPTIBLE CIPEIN) QUE TEMPRANO (CEPA SUSCEPTIBLE CIPEIN) QUE EN ENSAYOS DE LABORATORIO EN ENSAYOS DE LABORATORIO DEMOSTRARON UNA ACTIVIDAD RESIDUAL A DEMOSTRARON UNA ACTIVIDAD RESIDUAL A DOSIS DE USO RECOMENDADAS POR EL DOSIS DE USO RECOMENDADAS POR EL FABRICANTE (14,4 MG/CM2)FABRICANTE (14,4 MG/CM2)
OBJETIVO:OBJETIVO: EVALUAR LA RESIDUALIDAD DE UN EVALUAR LA RESIDUALIDAD DE UN FORMULADO SÓLIDO DE LIBERACIÓN LENTA FORMULADO SÓLIDO DE LIBERACIÓN LENTA DEL BIOINSECTICIDA BTI (H-14) PARA EL DEL BIOINSECTICIDA BTI (H-14) PARA EL CONTROL DE LARVAS DE CONTROL DE LARVAS DE Aedes aegyptiAedes aegypti
MATERIAL Y MÉTODOS:MATERIAL Y MÉTODOS: ESTUDIO DESCRIPTIVO ESTUDIO DESCRIPTIVO TRANSVERSAL. SE UTILIZARON LARVAS DE TRANSVERSAL. SE UTILIZARON LARVAS DE Aedes aegyptiAedes aegypti DEL III ESTADIO TARDÍO Ó IV DEL III ESTADIO TARDÍO Ó IV TEMPRANO (CEPA SUSCEPTIBLE CIPEIN) QUE TEMPRANO (CEPA SUSCEPTIBLE CIPEIN) QUE EN ENSAYOS DE LABORATORIO EN ENSAYOS DE LABORATORIO DEMOSTRARON UNA ACTIVIDAD RESIDUAL A DEMOSTRARON UNA ACTIVIDAD RESIDUAL A DOSIS DE USO RECOMENDADAS POR EL DOSIS DE USO RECOMENDADAS POR EL FABRICANTE (14,4 MG/CM2)FABRICANTE (14,4 MG/CM2)
Bacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensisBacillus thuringiensis
APLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONESAPLICACIONES
RESULTADOS:RESULTADOS: EN TODOS LOS CASOS PARA ESTA EN TODOS LOS CASOS PARA ESTA CONCENTRACIÓN RECOMENDADA DE USO (14,4 CONCENTRACIÓN RECOMENDADA DE USO (14,4 MG/CM2) SE OBSERVÓ EL 100% DE MORTALIDAD MG/CM2) SE OBSERVÓ EL 100% DE MORTALIDAD INMEDIATAMENTE LUEGO DE LA APLICACIÓN INMEDIATAMENTE LUEGO DE LA APLICACIÓN DEL FORMULADO Y PARA 24 HORAS DE DEL FORMULADO Y PARA 24 HORAS DE EXPOSICIÓN DE LARVASEXPOSICIÓN DE LARVAS
CONCLUSIONES:CONCLUSIONES: LA NUEVA FORMULACIÓN LA NUEVA FORMULACIÓN SÓLIDA DE LIBERACIÓN LENTA DE BTI, DEBIDO A SÓLIDA DE LIBERACIÓN LENTA DE BTI, DEBIDO A SU RESIDUALIDAD REPRESENTA UNA BUENA SU RESIDUALIDAD REPRESENTA UNA BUENA ALTERNATIVA PARA EL REEMPLAZO DEL ALTERNATIVA PARA EL REEMPLAZO DEL TEMEFOS EN EL CONTROL DE LARVAS DE TEMEFOS EN EL CONTROL DE LARVAS DE Aedes Aedes aegyptiaegypti
RESULTADOS:RESULTADOS: EN TODOS LOS CASOS PARA ESTA EN TODOS LOS CASOS PARA ESTA CONCENTRACIÓN RECOMENDADA DE USO (14,4 CONCENTRACIÓN RECOMENDADA DE USO (14,4 MG/CM2) SE OBSERVÓ EL 100% DE MORTALIDAD MG/CM2) SE OBSERVÓ EL 100% DE MORTALIDAD INMEDIATAMENTE LUEGO DE LA APLICACIÓN INMEDIATAMENTE LUEGO DE LA APLICACIÓN DEL FORMULADO Y PARA 24 HORAS DE DEL FORMULADO Y PARA 24 HORAS DE EXPOSICIÓN DE LARVASEXPOSICIÓN DE LARVAS
CONCLUSIONES:CONCLUSIONES: LA NUEVA FORMULACIÓN LA NUEVA FORMULACIÓN SÓLIDA DE LIBERACIÓN LENTA DE BTI, DEBIDO A SÓLIDA DE LIBERACIÓN LENTA DE BTI, DEBIDO A SU RESIDUALIDAD REPRESENTA UNA BUENA SU RESIDUALIDAD REPRESENTA UNA BUENA ALTERNATIVA PARA EL REEMPLAZO DEL ALTERNATIVA PARA EL REEMPLAZO DEL TEMEFOS EN EL CONTROL DE LARVAS DE TEMEFOS EN EL CONTROL DE LARVAS DE Aedes Aedes aegyptiaegypti