Biologia dos Vírus - UNESP: Câmpus de Jaboticabal · Vírus Envelopados •Presença de Membrana circundando o nucleocapsídeo •Maioria afeta animais - influenza •Minoria infecta

Biologia dos Vírus

Prof. Everlon Cid Rigobelo

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Vírus Envelopados

• Presença de Membrana circundando o

nucleocapsídeo

• Maioria afeta animais - influenza

• Minoria infecta bactérias e plantas

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Vírus Envelopados

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Constituição do Envelope

Bicamada Lipídica

Proteínas

Glicoproteínas

Lipídeos

– Provenientes de Células Hospedeiras (HO)

• Proteínas

– Responsáveis pela Adesão HO

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Adesão Viral

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Qual é a função do envelope?

• Componente responsável pelo contato

– Relacionados

• Especificidade da infecção

• Aspectos da penetração viral no HO

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Envelope regula a penetração

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Vírus Complexos

• Constituídos por várias partes

• Geralmente são bacteriófagos

– T4 de E. coli

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Vírus Complexos

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Vírus Complexos - Herpes

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Vírus Complexo – Febre Amarela

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Estrutura dos Vírus Complexos

• Cauda – estrutura complexa

– Contem 20 proteínas diferentes

• Cabeça

– Contem outras 20 proteínas diferentes

• Formação

– Cauda e cabeça separadamente

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Enzimas Virais

• Partículas virais não realizam metabolismo

– Parasitas obrigatórios

– Metabolicamente inertes

• Penetração viral no HO

– Exige a presença de enzimas

– Realizam orifício na parede celular bacteriana

– Entrada do ácido nucléico viral

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Enzimas virais

• Estágios Tardios da Infecção

– Síntese de grande quantidade de lisozima

– Lise celular

– Liberação de virions

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Enzimas virais

Entricitabine

Inibe a síntese da enzima viral

Vírus de RNA

• Enzimas

– Transcriptase reversa

– DNA polimerase dependente de RNA

• RNA polimerase viral

– Célula HO possuem RNA polimerase

– RNA incompetente para sintetizar DNA ou RNA

– Quando o MOLDE RNA viral

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Promovem a

liberação do vírus

Enzimas

• Auxiliam a liberação do vírus no HO

– Neuraminidases

– Vírus de animais

• Agem em células animais

– Clivando ligações glicosídicas

– Glicoproteínas e glicosídeos

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TECIDO CONECTIVO

Enzimas Virais

• Substituem ausência ou enzimas não funcionais

HOSPEDEIRO

Ausência de Enzimas

Ausência de Replicação Viral

Brotamento Saída do Vírus

Hospedeiro Viral

• Vírus são parasitas obrigatórios

– Replicação exige HO apropriados

• Enzimaticamente falando

– O vírus precisa carregar toda enzima

– Que seu HO não tem

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Três Tipos de Hospedeiros Virais

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Hospedeiros Virais

• Podem estar em culturas puras

– Meios liquídos ou semi-sólidos (ágar)

• Culturas de tecidos

– Facilitou os estudos de vírus

– Animais e plantas

– Plantas exigem a planta inteira

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Planta inteira

• Células possuem metabólitos diferenciados

• Estágio independentes

– Cada estágio de desenvolvimento

– Ocorre a síntese de metabolitos diferentes

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Estágios Metabolismos

Cultura de Células Animais

• Células retiradas de animais experimentais

– Órgãos dos animais

– Remoção asséptica de partes do tecido

– Dissociação das células

– Remoção do cimento intracelular

– Semeadura da suspensão sob superfície de garrafa

– Placa de Petri

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Culturas de Células Animais

• Formação de monocamada

– Meio de cultura adequado

– Meios complexos

– Amino ácidos

– Vitaminas

– Sais

– Glicose

– Sistema de tambonamento CaHCO3

– Soros sanguíneo

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Cultura de células

Cultura de Célula Animal

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Cultura de células eucarióticas

Tecido da Pele Animal

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Diversidade de células

Cultura de Célula Vegetal

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Piadas

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Cultura de Células

• Uso de antibióticos

– Evitar contaminação bacteriana

• Algumas culturas podem crescer subcultivadas

– Crescem indefinidademente

– Células Hela

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Em alguns casos

• Cultura não cresce indefinidamente

• Exige o cultivo de novas culturas

• Preparadas frescas

• Processo de altos custos

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Uso de órgãos

• Inteiros ou partes

• Permitem a inserção da cultura viral

• Condições laboratoriais controladas

– Sintomatologia da infecção na célula HO

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Quantificação dos Vírus

• Necessário quantificar o n. de partículas virais

• Pode-se usar microscópio eletrônico

• Medir seus efeitos sobre a célula hospedeira

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Unidade Infecciosa Viral (UIV)

• Menor unidade capaz de promover efeito

– Detectável

• Quando inoculada em um hospedeiro

– Susceptível

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Unidade Infecciosa Viral

• Pode corresponder somente a um vírion

• Geralmente exige um inoculo maior

• Determinar o número de UI por volume

• Medida da quantidade de vírus

• Uma medida é denominada TÍTULOProf. Rigobelo

UIV

• UIV por volume

• Capaz de causar um infecção

• Determinada por placa de lise

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Placas de Lise

• Infecção viral em uma camada celular

• Células hospedeiras crescendo em uma

superfície plana

• Formação da zona de lise

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Zona de lise

• Área clara

• Convenção – surge pela infecção de um único

virion

• São janelas cortando o crescimento confluente

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Bacteriófago

• Fina camada de bactérias hospedeiras

• Espalhadas na forma de sobrecamada

• Agar – meio sólido

• Presença de vírus

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Bacteriófagos

• Com o crescimento bacteriano

• Surge uma camada turva

• Regiões onde há infecção

• Ocorrerá lise celular

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Contar Lise

• Unidade Formadoras de Placas de Lise

• Contar UFPL – determinar

• Número de Unidades Virais da Amostra

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Ensaio de formação de placas de lise

Replicação

Curva de crescimento de Bacteriófagos:

Período de eclipse: partículas virais em replicação dentro das

células

Ensaios de Formação de Placas de Lise

• Permite isolar culturas puras

• Identificar vírus geneticamente puros

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Vírus Animais

• Usar células animais como hospedeiras

• Placas de lise – zonas de destruição

• Pelo número de placas formadas

• Estima-se o título viral

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Sazonalidade de mortalidade

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Ciclo celular

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Apoptose

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Apoptose

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Necrose – morte por trauma

Apoptose morte programada

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Autólise

• A autólise ou citólise -- A ruptura dos

lisossomos no interior da célula pode digerir

as organelas celulares.

• É a autodissolução celular (autólise)

• A Autólise é a autodestruição celular por

ativação das lisosimas em decorrência da

falta de nutrientes e O2. É a desorganização

progressiva até a desintegração completa.

Gripe Espanhola

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Gripe Espanhola

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AIDS

Gripe aviária

Gripe aviária

Gripe aviária

Cultura de células

Papilomatose

Papilomatose

Prevenção/vacinação

Vírus Intestinais de Maior Ocorrência

• Rotavírus

– Vírus entéricos

– Dores abdominais

– Contaminação por alimentos

– Pessoa pessoa

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Mecanismo de Ação Viral

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CANSEI

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