ผลของปริมาณไธโอไซยาเนทในน้ํานมดิบ ตอจํานวนจุลินทรีย และการตรวจสอบสารปฏิชีวนะตกคางในน้ํานมดิบ โดยชุดทดสอบ สุรียวรรณ พันธนรา พรศรี ชัยรัตนายุทธ ประวีร วิชชุลตา สมจิต สุรพัฒน อุทัย คันโธ และวงศอนันต ณรงควาณิชการ
ผลของปริมาณไธโอไซยาเนทในน้ํานมดิบ
ตอจาํนวนจุลนิทรีย
และการตรวจสอบสารปฏิชีวนะตกคางในน้ํานมดิบ
โดยชุดทดสอบ
สุรียวรรณ พันธนรา พรศรี ชัยรัตนายุทธ ประวีร วิชชุลตา สมจิต สุรพัฒน อทุัย คนัโธ และวงศอนันต ณรงควาณิชการ
ระบบแลคโตเพอรออกซิเดส (LPS)
- Natural antimicrobial factor
- ประกอบดวย
- เอนไซมแลคโตเพอรออกซิเดส (LP)
- ไฮโดรเจนเพอรออกไซด (H2O2 )
- ไธโอไซยาเนท (SCN)
ไธโอไซยาเนท (SCN)
- แหลง - เนื้อเยื่อสัตว และ ซีรัม
- สารคัดหลั่ง เชน น้ํานม น้ําลาย และน้ําตา
- ปสสาวะ
- ปกติในน้ํานมโคมี 1-10 ppm
- ปริมาณ SCN ในรางกายขึน้อยูกับอาหารที่โคกนิ
สารตั้งตนของ SCN
cyanogenic glycosidesพบในมันสําปะหลัง มันฝรั่ง ขาวโพด ถัว่ ออย และเปลือกของผลไมหลายชนิด cyanogenic glycosides HCN
glucosinolates
การกาํจัดพิษ HCN ในรางกายโคการกาํจัดพิษ HCN ในรางกายโค
S2O32- + CN- SCN- + SO3
2-Rhodanese
Thiocysteine + CN- Rhodanese + CysteineSCN-
lactoperoxidase system
โดยโดย
2SCN- + H2O2 + 2H+ (SCN)2 + 2H2O PeroxidasePeroxidase
(SCN)2 + H2O HOSCN + SCN + H+
HOSCN
หรือหรือ
SCN- + H2O2 OSCN- + H2O PeroxidasePeroxidase
Milk SCN
H+ + OSCN-
-- ??????????
ใบมันสําปะหลังใบมันสําปะหลังมันเสนมันเสน
การกระตุนระบบการกระตุนระบบ LP LP ในน้ํานมดิบในน้ํานมดิบ ดวยดวย SCNSCN
-- ใหโคกนิอาหารที่มีสารตั้งตนของใหโคกนิอาหารที่มีสารตั้งตนของ SCNSCN
วิธีการวิธีการ
1. แผนการทดลอง
- RCBD
- น้ํานมดิบ 3 บล็อก
- ปจจัยศึกษา SCN 4 ระดับ คือ 0, 5, 10 และ15 ppm
- คาสังเกตคือ SPC และ coliform count ในน้ํานม
2. วิธีการ
- วิเคราะห SPC , coliform, LP และ SCN กอนการทดลอง
- แบงน้ํานมดิบ จํานวน 4 ขวด
- ขวดที่ 1ไมเติม SCN (control, 0 ppm)
- ขวดที่ 2, 3 และ 4 เติม SCN 5, 10 และ 15 ppm ตามลําดับ
- วิเคราะห SCN
- แบงน้ํานมทุกตัวอยางเปน 2 สวน เก็บที่ 25 และ 4 OC
- ตรวจนับ SPC และ coliform ที่เวลา 2, 4, 6, 8 และ 10 ชั่วโมง
วิธีการวิธีการ
วิธีการวิธีการ
3. การวิเคราะหขอมลูทางสถติิ
- วิเคราะหความแปรปรวน และเปรียบเทียบความแตกตาง
คาเฉลี่ยระหวางกลุม โดยวิธี Tukey
ผลการทดลอง ผลการทดลอง
- ปริมาณ LP ในน้ํานมดบิ
- LP เฉลี่ย 7.55 unit/ml (1.2 – 19.4 unit/ml)
SCN ที่เติม (ppm) SCN ที่วัดได (ppm)
00 5.165.16
+ 5+ 5 11.1111.11
+10+10 15.4815.48
+15+15 19.8919.89
- ปริมาณ SCN ในน้ํานมดิบ
ผลการทดลอง ผลการทดลอง
จํานวนจลุินทรียเริ่มตนในน้าํนมดิบ
- TPC 3.31x105 CFU/ml (400,000 CFU/ml)
- Coliform count 1.34x103 CFU/ml
(10,000 CFU/ml)
ผลการทดลอง ผลการทดลอง
TPC ในน้ํานมดิบ ที่ 25 oC
0
0 2 4 6 8 10
Time (hr.)
TPC ( х 10 8 CFU/ml)50
45
40
35
30
25
20
15
10
5
control
SCN 5 ppm
SCN 10 ppm
SCN 15 ppm
ผลการทดลอง ผลการทดลอง
TPC ในน้ํานมดิบ ที่ 4 oC
20
30
40
50
60
70
0 2 4 6 8 10
control
SCN 5 ppm
SCN 10 ppm
SCN 15 ppm
Time (hr.)
Total plate count ( х 10 4 CFU/ml )
ผลการทดลอง ผลการทดลอง
จํานวนโคลิฟอรมในน้ํานมดิบ ที่ 25 oC
0
5
10
15
25
30
0 2 4 6 8 10 Time (hr.)
Colif
orm
coun
t(х
10
7CF
U/m
l.)
20
control
SCN 5 ppm
SCN 10 ppm
SCN 15 ppm
ผลการทดลอง ผลการทดลอง
จํานวนโคลิฟอรมในน้ํานมดิบ ที่ 4 oC
0
5
10
15
20
25
30
0 2 4 6 8 10 Time (hr.)
Col
ifor
mco
un
t(C
FU/m
l.)
control
SCN 5 ppm
SCN 10 ppm
SCN 15 ppm
การตรวจสอบสารปฏิชีวนะตกคางในน้าํนมดิบการตรวจสอบสารปฏิชีวนะตกคางในน้าํนมดิบ
โดยชุดทดสอบโดยชุดทดสอบ
DelvotestDelvotest AMAM--TestTest DMS Test kitsDMS Test kits
วิธีการทดลองวิธีการทดลอง
แผนการทดลอง
- 2x3 Factorial Experiments in RCBD
- ปจจัยศึกษา 2 ปจจัย
- ปริมาณไธโอไซยาเนท 2 ระดับ (0 และ 15 ppm)
- ชุดทดสอบ 3 ชนิด (Delvotest,AM-Test และ DMS)
- ตัวอยางนมดิบ จํานวน 10 บล็อก
การวิเคราะหขอมูลทางสถิติ การวิเคราะหขอมูลทางสถิติ
- วิเคราะหความแปรปรวน และเปรียบเทียบความ
แตกตางโดยวธิี Duncan
ปริมาณไธโอไซยาเนทในน้ํานมดิบ ปริมาณไธโอไซยาเนทในน้ํานมดิบ
- ปริมาณ Milk SCN เฉลี่ย 4.76 ppm
- เติม conc. SCN 15 ppm
- Milk SCN เฉลี่ยเปน 18.98 ppm
ผลการทดลอง ผลการทดลอง
Table 2 Results of antibiotic residues test in non-heat
treated raw milk by antibiotic residues test kits
Table 2 Results of antibiotic residues test in non-heat
treated raw milk by antibiotic residues test kits
0 ppma 15 ppmb
Milksample Delvotestx AM-Testy DMSx Delvotestp AM-Testq DMSp
- 8(80%) 3(30%) 7(70%) 3(30%) 1(10%) 2(20%)
+ 0(0%) 1(10%) 0 (0%) 1(10%) 5(50%) 1(10%)
+/- 2(20%) 6(60%) 3(30%) 6(60%) 4(40%) 7(70%)
Table 3 Results of antibiotic residues test in heat treated
raw milk by antibiotic residues test kits
Table 3 Results of antibiotic residues test in heat treated
raw milk by antibiotic residues test kits
0 ppm 15 ppmMilk
samples Delvotesta AM-Testb DMSa Delvotestx AM-Testy DMSx
- 10(100%) 8(80%) 10(100%) 10(100%) 8(80%) 10(100%)
+ 0 0 0 0 0 0
+/- 0 2(20%) 0 0 2(20%) 0
- ในน้าํนมดิบที่ไมผานความรอน SCN ทําใหเกิดผลบวกเท็จ และสงสยับวกเท็จ ตอการตรวจสอบสารปฏิชีวนะตกคาง ในน้ํานมดิบ ดวยชุดทดสอบ
- ความรอนทําลายสารตอตานจุลินทรียตามธรรมชาติในน้ํานม ทําใหลดการเกิดผลบวกเท็จ และสงสัยบวกเท็จได
- ในน้าํนมดิบที่ไมผานความรอน SCN ทําใหเกิดผลบวกเท็จ และสงสยับวกเท็จ ตอการตรวจสอบสารปฏิชีวนะตกคาง ในน้ํานมดิบ ดวยชุดทดสอบ
- ความรอนทําลายสารตอตานจุลินทรียตามธรรมชาติในน้ํานม ทําใหลดการเกิดผลบวกเท็จ และสงสัยบวกเท็จได
- ปริมาณ SCN เพิ่มขึ้น ประสิทธิภาพ LPS เพิ่มขึ้น สามารถลดจํานวนจุลินทรียทั้งหมด และโคไลฟอรม ในน้ํานมดิบได
สรุปผลการทดลอง สรุปผลการทดลอง