Oligonucleótidos utilizados Oligo Gen Secuencia 5´-3´ ACE F- ACE TGGGACCACAGCGCCCGCCACTAC ACE R- CTGGAGACCACTCCCATCCTTTCT CKMM F- CKMM GGGATGCTCAGACTCACAGA CKMM R- AACTTGAATTTAGCCCAACG IL6 Interno (alelo G) IL6 GCACTTTTCCCCCTAGTTGTGTCTTCCG IL6 Interno (alelo C) ATTGTGCAATGTGACGTCCTTTAGCTTG IL6 externo 1 GACTTCAGCTTTACTCTTTGTCAAGACA IL6 externo 2 GAATGAGCCTCAGACATCTCCAGTCCTA ANÁLISIS DE POLIMORFISMOS GENÉTICOS ASOCIADOS A LESIONES MUSCULARES Y ALTO RENDIMIENTO EN TENISTAS Zyanya Karina Díaz Hirashi 1 , Fernando Ochoa Ahmed 2,4 , Juan M. Alcocer González 1 , Cris=na Rodríguez Padilla 1 , Abraham Rodríguez de la Fuente 1 , Oscar Salas Fraire 3 , Melody Falcó Díaz 4 , José A. Valadez Lira 1 1) Facultad de Ciencias BiológicasUANL, 2) Facultad de Organización Depor=vaUANL, 3) Facultad de MedicinaUANL , 4) Ins=tuto Estatal de Cultura Física y DeporteINDE. [email protected], [email protected] El desempeño físico en atletas es una característica heredada multifactorial que puede ser explicada en parte por polimorfismos genéticos y su interacción con el medio ambiente. La genética tiene una gran influencia en varias características del desempeño físico las cuales incluyen: capacidad de resistencia, composición de fibras musculares, soporte en tendones y ligamentos, perfiles nutricionales e inmunológicos; todas reflejadas en el alto rendimiento. El objetivo de esta investigación se basó en determinar la frecuencia de polimorfismos de los genes ACE, CKMM e IL6 en una población de tenistas consolidados; así como su asociación a factores físicos de rendimiento deportivo (velocidad, resistencia, fuerza y recuperación de lesiones). INTRODUCCIÓN ACE Intron 16 Alu 287pb I D Alu 287pb ACE : Resistencia CKMM A G CK : Niveles altos CK plasma CK : Tolerancia lesiones A/G 5´UTR 3´UTR IL6 G C IL-6 : Masa muscular, potencia, recuperación de lesiones IL-6 : Mayor inflamación, lesión muscular Promotor -174 G/C 5´ 3´ 5´ 3´ Alu 287pb .. Fig. 3. Gel muestra de los diferentes genotipos del polimorfismo ACE I/D. Fig. 1. Gel muestra de los diferentes genotipos del polimorfismo CKMM A/G después de RFLP con NcoI. Fig. 2. Gel muestra de los diferentes genotipos del polimorfismo IL6 -174 G/C con el uso de la técnica ARMS-PCR. Representación de Polimorfismos analizados A) CKMM A/G, B) IL6 -174 G/C y C) ACE I/D y gráficas de frecuencias genotípicas de polimorfismos; D) CKMM A/G, E) IL6 -174 G/C y F) ACE I/D. Los ( * ) representan las proporciones que difieren significativamente p < 0.05. 56.25 31.43 47.83 41.89 73.33 25.00 48.57 26.09 36.49 20 18.75 20.00 26.09 21.62 6.67 Juniors Intermedios Elite Global deportistas Controles Genotipo CKMM A/G %AA %AG %GG 6.25 25.71 7.14 15.19 33.33 75.00 54.29 67.86 63.29 50.00 18.75 20.00 25.00 21.52 16.67 Juniors Intermedios Elite Global deportistas Controles Genotipo ACE I/D %II %ID %DD 43.75 77.14 46.43 59.49 70.00 37.50 22.86 53.57 36.71 23.33 18.75 0.00 0.00 3.80 6.67 Juniors Intermedios Elite Global deportistas Controles Genotipo IL-6 G/C %GG %GC %CC * * En este estudio se encontró una diferencia significativa en la distribución de las frecuencias del polimorfismo IL6 -174 G/C dentro de las 3 categorías tenísticas marcadas, así como una asociación significativa de este polimorfismo con respecto al desempeño deportivo lo que lo convierte en un serio candidato para individualizar los planes de desarrollo y generación de estructura de entrenamientos. Por otra parte, no se encontraron resultados significativos que relacionen los polimorfismos de los genes CKMM y ACE con el desempeño o rendimiento físico. Cabe destacar que esta propuesta jamás fue encaminada como criterio de exclusión de los individuos, ya que la finalidad a largo plazo como estrategia integrativa busca conformar bases para individualizar programas de entrenamiento. D Q Zhou, Y Hu, G Liu, L Gong, Y Xi, and L Wen (2006). Muscle-specific creatine kinase gene polymorphism and running economy responses to an 18-week 5000-m training programme. Br J Sports Med 40:988-991. Nazarov IB, Woods DR, Montgomery HE, Shneider OV, Kazakov VI, Tomilin NV, Rogozkin VA (2001). The angiotensin converting enzyme I/D polymorphism in Russian athletes. Eur J Hum Genet. 10:797-801. Saul Myerson, Harry Hemingway, Richard Budget, John Martin, Steve Humphries, Hugh Montgomery and With the Technical Assistance of Maj Mutch and Helen McGloin (1999). Human angiotensin I-converting enzyme gene and endurance performance. ; J Appl Physiol 87:1313-1316. Sekerli Eleni, Katsanidis Dimitrios, Papadopoulou Vaya, Makedou Areti, Vavatsi Norma, Gatzola Magdalini. (2008). Angiotensin-I converting enzyme gene and I/D polymorphism distribution in the Greek population and a comparison with other European populations. J Genet. Apr; 87 (1):91-3. Yamin C, Duarte JA, Oliveira JM, Amir O, Sagiv M, Eynon N, Sagiv M & Amir RE (2008). IL6 (− 174) and TNFA (–308) promoter polymorphisms are associated with systemic creatine kinase response to eccentric exercise. Eur J Appl Physiol 104, 579586. Yuval Heled, Michael S. Bloom, T. John Wu, Quiona Stephens Patricia A. Deuster . 2007. CM-MM and ACE genotypes and physiological prediction of the creatine kinase response to exercise. J Appl Physiol 103:504-510. REFERENCIAS RESULTADOS PERSPECTIVAS Validaciones y Correlaciones; físico-genético-metabólicas y ambientales Análisis de niveles de expresión de Transcritos y Biomarcadores Generación de plataforma basada en Bioprospección con enfoque en optimización de programas de entrenamiento. Población 109 personas DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES ACE: Velocidad/potencia ESTRATEGIA EXPERIMENTAL • 16 : Juniors o en formación. • 35 : Intermedios, consolidados en competencias Nacionales. • 28 : Profesionales-élite Población control 4 2 3 1 5 1 Esquince de tobillo 2 Dolor hombro 3 Distensión en pantorrilla 4 Fractura por estrés en la espalda 5 Codo de tenista A B C F E D
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Oligonucleótidos utilizados
Oligo Gen Secuencia 5´-3´
ACE F- ACE
TGGGACCACAGCGCCCGCCACTAC
ACE R- CTGGAGACCACTCCCATCCTTTCT
CKMM F- CKMM
GGGATGCTCAGACTCACAGA CKMM R- AACTTGAATTTAGCCCAACG IL6 Interno (alelo G)
IL6
GCACTTTTCCCCCTAGTTGTGTCTTCCG
IL6 Interno (alelo C) ATTGTGCAATGTGACGTCCTTTAGCTTG
IL6 externo 1 GACTTCAGCTTTACTCTTTGTCAAGACA
IL6 externo 2 GAATGAGCCTCAGACATCTCCAGTCCTA
ANÁLISIS DE POLIMORFISMOS GENÉTICOS ASOCIADOS A LESIONES MUSCULARES Y ALTO RENDIMIENTO EN TENISTAS
Zyanya Karina Díaz Hirashi 1, Fernando Ochoa Ahmed 2,4, Juan M. Alcocer González 1, Cris=na Rodríguez Padilla 1, Abraham Rodríguez de la Fuente 1, Oscar Salas Fraire 3, Melody Falcó Díaz 4, José A. Valadez Lira 1
1) Facultad de Ciencias Biológicas-‐UANL, 2) Facultad de Organización Depor=va-‐UANL, 3) Facultad de Medicina-‐UANL , 4) Ins=tuto Estatal de Cultura Física y Deporte-‐INDE.
[email protected], [email protected]
El desempeño físico en atletas es una característica heredada multifactorial que puede ser explicada en parte por polimorfismos genéticos y su interacción con el medio ambiente. La genética tiene una gran influencia en varias características del desempeño físico las cuales incluyen: capacidad de resistencia, composición de fibras musculares, soporte en tendones y ligamentos, perfiles nutricionales e inmunológicos; todas reflejadas en el alto rendimiento. El objetivo de esta investigación se basó en determinar la frecuencia de polimorfismos de los genes ACE, CKMM e IL6 en una población de tenistas consolidados; así como su asociación a factores físicos de rendimiento deportivo (velocidad, resistencia, fuerza y recuperación de lesiones).
INTRODUCCIÓN
ACE Intron 16
Alu 287pb
Iü Dû
Alu 287pb ACE : Resistencia
CKMM A G
CK : Niveles altos CK plasma CK : Tolerancia lesiones
A/G 5´UTR 3´UTR
IL6 G C
IL-6 : Masa muscular, potencia, recuperación de lesiones
IL-6 : Mayor inflamación, lesión muscular
Promotor -174
G/C 5´ 3´
5´ 3´
Alu 287pb
..
Fig. 3. Gel muestra de los diferentes genotipos del polimorfismo ACE I/D.
Fig. 1. Gel muestra de los diferentes genotipos del polimorfismo CKMM A/G después de RFLP con NcoI.
Fig. 2. Gel muestra de los diferentes genotipos del polimorfismo IL6 -174 G/C con el uso de la técnica ARMS-PCR.
Representación de Polimorfismos analizados A) CKMM A/G, B) IL6 -174 G/C y C) ACE I/D y gráficas de frecuencias genotípicas de polimorfismos; D) CKMM A/G, E) IL6 -174 G/C y F) ACE I/D. Los ( * ) representan las proporciones que difieren significativamente p < 0.05.
56.25
31.43
47.83
41.89
73.33
25.00
48.57
26.09
36.49
20
18.75
20.00
26.09
21.62
6.67
Juniors
Intermedios
Elite
Global deportistas
Controles
Genotipo CKMM A/G %AA %AG %GG
6.25
25.71
7.14
15.19
33.33
75.00
54.29
67.86
63.29
50.00
18.75
20.00
25.00
21.52
16.67
Juniors
Intermedios
Elite
Global deportistas
Controles
Genotipo ACE I/D %II %ID %DD
43.75
77.14
46.43
59.49
70.00
37.50
22.86
53.57
36.71
23.33
18.75
0.00
0.00
3.80
6.67
Juniors
Intermedios
Elite
Global deportistas
Controles
Genotipo IL-6 G/C %GG %GC %CC
*
*
En este estudio se encontró una diferencia significativa en la distribución de las frecuencias del polimorfismo IL6 -174 G/C dentro de las 3 categorías tenísticas marcadas, así como una asociación significativa de este polimorfismo con respecto al desempeño deportivo lo que lo convierte en un serio candidato para individualizar los planes de desarrollo y generación de estructura de entrenamientos. Por otra parte, no se encontraron resultados significativos que relacionen los polimorfismos de los genes CKMM y ACE con el desempeño o rendimiento físico. Cabe destacar que esta propuesta jamás fue encaminada como criterio de exclusión de los individuos, ya que la finalidad a largo plazo como estrategia integrativa busca conformar bases para individualizar programas de entrenamiento.
D Q Zhou, Y Hu, G Liu, L Gong, Y Xi, and L Wen (2006). Muscle-specific creatine kinase gene polymorphism and running economy responses to an 18-week 5000-m training programme. Br J Sports Med 40:988-991. Nazarov IB, Woods DR, Montgomery HE, Shneider OV, Kazakov VI, Tomilin NV, Rogozkin VA (2001). The angiotensin converting enzyme I/D polymorphism in Russian
athletes. Eur J Hum Genet. 10:797-801. Saul Myerson, Harry Hemingway, Richard Budget, John Martin, Steve Humphries, Hugh Montgomery and With the Technical Assistance of Maj Mutch and Helen
McGloin (1999). Human angiotensin I-converting enzyme gene and endurance performance. ; J Appl Physiol 87:1313-1316. Sekerli Eleni, Katsanidis Dimitrios, Papadopoulou Vaya, Makedou Areti, Vavatsi Norma, Gatzola Magdalini. (2008). Angiotensin-I converting enzyme gene and I/D
polymorphism distribution in the Greek population and a comparison with other European populations. J Genet. Apr; 87 (1):91-3. Yamin C, Duarte JA, Oliveira JM, Amir O, Sagiv M, Eynon N, Sagiv M & Amir RE (2008). IL6 (− 174) and TNFA (–308) promoter polymorphisms are associated with
systemic creatine kinase response to eccentric exercise. Eur J Appl Physiol 104, 579586. Yuval Heled, Michael S. Bloom, T. John Wu, Quiona Stephens Patricia A. Deuster. 2007. CM-MM and ACE genotypes and physiological prediction of the creatine kinase
response to exercise. J Appl Physiol 103:504-510.
REFERENCIAS
RESULTADOS
PERSPECTIVAS
Validaciones y Correlaciones; físico-genético-metabólicas y ambientales
Análisis de niveles de expresión de Transcritos y Biomarcadores
Generación de plataforma basada en Bioprospección con enfoque en optimización de programas de entrenamiento.
Población 109 personas
DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES
ACE: Velocidad/potencia
ESTRATEGIA EXPERIMENTAL
• 16 : Juniors o en formación.
• 35 : Intermedios, consolidados en competencias Nacionales.
• 28 : Profesionales-élite
Población control
4
2
3
1
5
1 Esquince de tobillo 2 Dolor hombro 3 Distensión en pantorrilla 4 Fractura por estrés en la espalda 5 Codo de tenista
A
B
C F
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