• durch Polarimetrie • durch NMR-Spektroskopie - NMR-Spektroskopie mit chiralen shift-Reagenzien - NMR-Spektroskopie diastereomerer Derivate • durch Gaschromatographie (GC) - GC an chiralen Phasen - GC diastereomerer Derivate • durch Hochdruckflüssigchromatographie - HPLC an chiralen Phasen - HPLC diastereomerer Derivate • durch Kapillarelektrophorese (CE) Analytische Methoden zum Nachweis der Reinheit von Enantiomeren und Diastereomeren :
21
Embed
Analytische Methoden zum Nachweis der Reinheit von ......g) Die optische Reinheit des Reagenzes ist limitierend für die Bestimmung geringer Antipodenkonzentrationen h) 13C-NMR-Signale
This document is posted to help you gain knowledge. Please leave a comment to let me know what you think about it! Share it to your friends and learn new things together.
Transcript
• durch Polarimetrie
• durch NMR-Spektroskopie- NMR-Spektroskopie mit chiralen shift-Reagenzien
- NMR-Spektroskopie diastereomerer Derivate
• durch Gaschromatographie (GC)- GC an chiralen Phasen
- GC diastereomerer Derivate
• durch Hochdruckflüssigchromatographie- HPLC an chiralen Phasen- HPLC diastereomerer Derivate
• durch Kapillarelektrophorese (CE)
Analytische Methoden zum Nachweis der Reinheitvon Enantiomeren und Diastereomeren :
Nachweis der Enantiomerenreinheit durch NMR
Enantiomere unterscheiden sich prinzipiell NMR-spektroskopisch nicht !Lediglich Diastereomere können unterscheidbare NMR-Signale liefern !Daher ist der Zusatz von enantiomerenreine Hilfsstoffen erforderlich.
Methoden:- Lösungsmittel oder Lösungsmitteladditiv ist chiral und enantiomerenrein; es bilden sich diastereomere Komplexe
- vor der Messung erfolgt die Synthese von diastereomeren Derivaten mit einem enatiomerenreinen Hilfsstoff
Voraussetzungen für die Anwendbarkeit der Methode:- das NMR-Spektrum des Analyten sollte möglichst viele differenzierte
NMR-Signale liefern- die getrennt detektierten Signale sollten keine Kopplungen aufweisen- das signal/noise-Verhältnis erlaubt eine quantitative Auswertung
Als Lösungsmitteladditive werden Komplexe von Lanthaniden (Eu, Pr, Yb,) mit chiralen Komplexbildnern (meist Campher-Derivate) verwendet
- Europium(II), MG = 152, Z = 63- Praseodym(III), MG = 141, Z = 59- Ytterbium(III), MG = 173, Z = 70
Diese Schwermetalle liefern große shift-Effekte ohne große LinienverbreiterungDer Effekt der kommt über die Bindungen und durch Dipolwirkung zustande und ist abhängig vom Abstand zum Schwermetall- Eu, Yb: liefert Tieffeldverschiebung- Pr: ergibt HochfeldverschiebungAls chirale Komplexbildner werden fluorierte Diketone verwendet, die auschiral-pool-Bausteinen (z.B.Campher) hergestellt werden können
Anwendungsbereich:Diese Methode ist für Arzneistoffe geeignet, die einen Komplex mit dem chiralen shift-Reagens bilden könnenAmine, Aminosäureester, Alkohole, Hydroxysäureester,Thiole, Oxirane,Aziridine, Aldehyde, Ketone, Ester, Sulfoxide, ...
Präzission der Methode:stark abhängig von Signalform, Signaltrennung und somit der Feldstärke
für das Beispiel (S)-Methyl-2-Chlor-propanoat / Eu(hfc)3
gilt laut Literaturangaben: 99.8 ± 1% ee bei 400 MHz
ee-Bestimmung nach Derivatisierung zu Diastereomeren
Die Derivatisierung von Enantiomerenmischungen mit chiralen Reagentien führt zu diastereomeren Produkten; diese haben unterschiedliche NMR-Spektren Detektierbare Kerne: 1H, 13C, 19F, 31P,..
Kern natürlicheHäufigkeit
in %
Spin Larmor-Frequenz
(MHz)
Verschiebungsbereichδ(ppm)
1H 99,989 1/2 500,0000 12 bis -1
13C 1,070 1/2 125,7520 240 bis -10
15N 0,358 1/2 50,6990 1200 bis -500
19F 100 1/2 470,2850 100 bis -300
31P 100 1/2 202,5890 230 bis -200
Voraussetzungen für die Anwendbarkeit der Methode:a) chirales Reagens muß verfügbar sein (möglichst beide Antipoden)b) chirales Reagens muß klar getrennte, scharfe Signale liefert
Anwendung: geeignet für Alkohole und AmineDerivate: MTPA-Ester, MTPA-AmideVorteile: - MTPA liefert nur wenige, klar unterscheidbare Signale- keine Racemisierungsgefahr- Zuordnungsregeln für die Absolutkonfigurationszuordnung bekannt
Mosher-Reagens (= MTPA)
O
ClPh
CF3MeO
(S)O
ClPh
CF3MeO
(R)
HCN Me2SO4 H2SO4
Racematspaltung als
1-Phenylethylammonium-Salz
SOCl2
O
OHPh+
CF3MeO
O
ClPh
CF3MeO
(S)
SOCl2
O
OHPh
CF3MeO
O
ClPh
CF3MeO
(R)
O
OHPh
CF3MeO
CPh
CF3MeO
NCPh
CF3HO
NOPh
CF3
Darstellung:
Derivatisierungs-Reaktion:
Die Reinigung erfolgt nur durch Extraktion und Trocknung
O
O
OMe
+ R*OHPyridin / CCl4
CF3
R*Ph
O
Cl
OMe
CF3
Ph
O
NH
OMe
+ R*NH2
Pyridin / CCl4
CF3
R*Ph
O
Cl
OMe
CF3
Ph
Reinheitsbestimmung von MTBA:mit 1-Phenylethylamin nach Amidbildung via NMR