Analisis Presisi dan Akurasi Pemeriksaan Imunoserologi ...€¦ · • Umumnya, tes HIV memiliki spesifisitas tinggi, yang berarti ada sedikit hasil positif palsu dan sebagian besar

Proprietary and confidential — do not distribute

Pemeriksaan ImunoserologiDengan Metode Rapid Test

PERTEMUAN ILMIAH DPW PATELKI JAWA TENGAH

• dr Laily Adninta.,Sp.PK

OUTLINE

Proprietary and confidential — do notdistribute

• POCT• RAPID TES• Interpretasi hasil – hasil pembacaan Rapid Test• Penerapan Rapid tes pada screening HIV

POCT

Definifinisi POCT(Point Of Care Testing)Pemeriksaan Lab dilakukan di dekat tempat perawatan pasien diluar Lab.

Karakter POCT

• Kemudahan oprasional alat• Kecepatan hasil• Konektivitas alat dengan IT• Ketahanan alat dalam penyimpanan maupun penggunaan• Penyimpanan data.• Kemampuan upgrade• Adanya pendeteksi system eror

RAPID TES


Definisi TesDiagnostikCepat


• Rapid Diagnostic Test (RDTs)adalah pemeriksaan diagnostikyang dirancang untukdigunakan pada point-of-care(POC), dan dapat diadaptasikanuntuk digunakan pada kondisidengan sumber daya rendah.

• Karakteristik RDTs:• Pasien berada di lokasi

fasilitas kesehatan• Tempat skrining• Penyedia kesehatan lain• Digunakan sebagai alat

epidemiological

ARDx Standard Template February 25, 2020 5

Sumber: http://www.globalhealthprimer.emory.edu/targets-technologies/rapid-diagnostic-test.html

Jenis-Jenis Uji Cepat/Rapid

Tes kehamilan,

Tes penanda virus Hepatitis (HBsAg,Anti HBs,Anti-HCV),

Tes Penanda virus Dengue ( anti-Dengue IgG & IgM,Dengue Ag NS1),

Tes Malaria,

Tes Syphilis dan

Tes Anti-HIV

Yang Harus Diperhatikan Dalam Memilih UjiCepat(Rapid tes)

Mempunyai surat Izin edar dan terdaftar resmi

Tes mempunyai kualitas tinggi (sensivitas & spesifitas yang tinggi

Mudah digunakan di lingkungan dengan peralatan kurang memadai

Hasil ujii dapat diperoleh dalam waktu singkat

Hasil uji mudah di baca

Hanya memerlukan sedikit peralatan dan Spesimen

Penyimpanan suhi di dalam kamar

Interpretasi hasil – hasilpembacaan Rapid Test


Source: https://www.who.int/diagnostics_laboratory/faq/simple_rapid_tests/en/Proprietary and confidential — do not distribute

Karakteristik Rapid Test


• Kualitas tinggi, mudah digunakan dan digunakan pada sumber daya terbatas• Tes berdasarkan aglutinasi, immuno-dot, immuno-chromatographic,

dan/atau immuno-filtration• Cepat dan mudah dilakukan – 10 menit sampai 20 menit – dan

membutuhkan sedikit atau tanpa peralatan• Digunakan untuk digunakan dengan sampel individu atau jumlah sedikit,

sehingga lebih murah dibandingkan dengan ELISA pada laboratoriumdengan jumlah throughput rendah

• Dapat disimpan pada suhu ruang dalam waktu lama• Hasil didapatkan pada hari yang sama sehingga dapat langsung diberikan

perawatan

Konsep RDT

Proprietary and confidential — do notdistribute ARDx Standard Template February 25, 2020 10

Source: https://www.creative-diagnostics.com/Immunochromatography-guide.htm

Hambatan dan Pengembangan RDTs


• Hambatan teknis

• Hambatan biologis

• Hambatan sosial

• Hambatan lainnya

Sumber: https://journals.sagepub.com/doi/pdf/10.5772/61114Proprietary and confidential — do not distribute

1. Hambatan Teknis


• Rentan panas dan kelembaban false positive/false negative

• Kurangnya karakterisasi agen afinitas dan antigen cross-reactivity false positive– Penggunaan Ag/Ab monoklonal/poliklonal

• Efek prozone false negative– Terlalu banyak antigen– Terlalu banyak antibody

– Cara menangani:» Selalu mengikuti petunjuk manufaktur (volume, etc)» Mendilusi sampel pasien» Gunakan teknologi dengan rancangan lebih baik


1. Hambatan Teknis


• Interpretasi hasil (false positive/false negative)


2. Hambatan Biologis


• Kurang biomarka/resistansi obat

• Reaktivitas silang pada cairan kompleks biologis sampel– Adanya zat pengotor/zat biologis yang memengaruhi hasil, misal RBC– Cara menanggulangi: menghilangan zat kontaminan pada sampel pasien



3. Hambatan Sosial


Pengaruh kebudayaan

Beberapa kebudayaan tidakmemperbolehkan pengambilan darah

4. Hambatan Lainnya

• Hambatan infrastruktur• Instruksi dan training yang tidak cukup

Bacalah Petunjuk Penggunaan sebelum memulai prosedur tes• Hambatan supply chain

• Hambatan Regulasi• Evaluasi produk

• Standar pengetesan• Quality Assurance

• Hambatan ekonomi• Cost-effectiveness dan harga

ARDx Standard Template February 25, 2020 16Sumber: https://journals.sagepub.com/doi/pdf/10.5772/61114Proprietary and confidential — do not distribute

Sumber: https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/180231/WHO_HIV_2015.33_eng.pdf?sequence=1

Penyebab Kesalahan – KesalahanLainnya


• Error Klerikal (30% error yang menyebabkan hasil tidak tepat)– Penyimpanan data salah, label– Pencampuran spesimen

• Error User / Human Error– Tidak tepat intrepretasi hasil, volume buffer, tidak mengikuti

waktu bacaan, waktu bacaan tidak akurat seperti instruksi, non-adherence pada SOP.

• Cross reactivity• Manajemen dan supervisi kurang

• Penerapan Rapid tes padascreening HIV


HIV (Human Immunodeficiency Virus) Merupakan Retrovirus yang menyerang sistem kekebalan tubuh (imunitas)

manusia sehingga tubuh menjadi lemah dalam melawan suatu infeksi. Penyebab penyakit AIDS ( Acquired Immunodeficiency Syndrome) HIV menyerang limfosit yang disebut ‘sel T-4’ atau ‘sel T-penolong’ (T-helper), atau

disebut juga ‘sel CD-4’ Rute transmisi HIV:

HIV tidak dapat disembuhkan, namun pengobatan antiretroviral (ARV) dapatmengendalikan virus, sehingga orang dengan HIV (ODHA) dapat hidup lama dansehat.

19

Penularan vertical dariibu ke janin

Transfusi darah, atau kontakdengan darah/cairan tubuh

individu yg terinfeksi HIV

Hubungan seksual

Bagaimana cara mendeteksi HIV?


1st generation

• Detects IgG Antibody for HIV1 only

2nd generation

• Detects IgG Antibody for HIV1, group O &HIV-2 only

3rd generation (20 days after infection)• Detects IgM as well as IgG Antibodies for HIV 1,

group O and HIV2

4th generation• Detects IgM and IgG Antibodies for HIV1, group

O and HIV2• Detects HIV-1 viral capsid antigen p24


Tes Algoritma HIV diIndonesia

Surat No. HK.02.02/I/1564/2018

Penatalaksanaan ODHA untuk Eliminasi HIV AIDS Tahun 2020

February 25, 2020 4

Tes A1

A1 (+), A2 (+) A1 (+), A2 (-)

Ulangi Tes A1 & A2

A1 (+), A2 (+)Tes A3

A1 (+), A2 (+), A3 (+) A1 (+), A2 (+), A3 (-)

Laporkan Positif Laporkan Inkonklusif

A1 (-)

Laporkan Negatif

A1 (+)

Tes A2

A1 (+), A2 (-) atau A1 (-), A2 (+)

Laporkan Inkonklusif, bila A1(+)tes rapid Generasi 4

A1 (-), A2 (-)

Laporkan Negatif

Follow up HIV Test Result


Positive Result

• Refer to HIV treatment

Negative Result

• Risk population: re-test 3, 6, and 12 months after• Non-risk population: healthy life-style

Inconclusive Result

• Re-test with new specimen 2 weeks after first test• Follow up with PCR test• If PCR is not possible, re-test 3, 6, and 12 months after first test

Source: PERMENKES 74/2014 Pedoman Pelaksanaan Konseling dan Tes HIV

22

Enter title via "insert>header and footer>footer" | February 25, 2020

Syarat Rapid Test HIV

• Sensitivitas Spesif

•R1 ≥ 99% -• (sensitivitas tertinggi)

• R2 - ≥ 9• (spesifisitas lebi

• R3 - ≥ 9• (spesifisitas lebi

• dan


Spesifisitas

>98%lebih tinggidari R1)

>99%lebih tinggidari R1R2)

Source: PERMENKES 15/2015 Pelayanan Laboratorium Pemeriksa HIV dan Infeksi Oportunistik

23

Enter title via "insert>header and footer>footer" | February 25, 2020

HIV Rapid Test 1/2 3.0


Evaluasi dan rekomendasi produk:1. PQ WHO2. Evaluasi RSCM

Partisipan tender WHO

Permasalahan dalam pembacaan hasil tesHIV 1/2 3.0

ARDx Standard Template February 25, 2020Proprietary and confidential — do notdistribute 26

• Positif SamarApabila garis C muncul, namungaris tes amat samar

• False ReaktifDilakukan pemeriksaan dengan R2– R3 non-reaktif

• False NegatifDilakukan pemeriksaan dengan R2– R3 reaktif

• InvalidGaris C dan tes tidak keluar,sampel tidak mengalir

Perhatikan hal – hal di bawah ini

Apakah tes langsung dikerjakansetelah kemasan dibuka?

Waktu pembacaan sudah tepat?

Volume sampel dan buffer sudahtepat?

Bagaimana kit disimpan sebelumdan setelah digunakan?

Bagaimana kondisi sampel?

Sumber: https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/180231/WHO_HIV_2015.33_eng.pdf?sequence=1

Laporan Kasus Kesalahan Diagnosa HIV di Dunia

• Kesalahan Diagnosa Positif Palsu

• Penyebab:– Tidak mengikuti prosedur standar

– Beban kerja tinggi sehingga tenagakerja stress

– Kerusakan kit

– Diagnosa salah menggunakan testunggal dibandingkan strategi yangdirekomendasikan

– Cross-reactivity

• Rate positif palsu berkisar: 2,6 – 10,3%

ARDx Standard Template February 25, 2020Proprietary and confidential — do notdistribute 27

Kesalahan Diagnosa Negatif Palsu

• ~2% pasien yang kemudian menjadiHIV positif (bukan baru terinfeksi)didiagnosa HIV negative atau inkonkusif

• Penyebab:– Strategi pengetesan: penggunaan

algoritma tertinggal

– Kesalahan pada pembacaan hasilreaktif lambat

– HIV yang sudah lama sehinggakadar antibody rendah

Rapid Test adalah pemeriksaan yang dapat diadaptasikanuntuk digunakan pada SDM rendah, Biasanyadigunakan untuk screening awal.

Mempunyai IjinEdar

Test, Mempunyai kualitas tinggi(Sensitivitas/Spesivitas)

Hasil UjiMudahdibaca

Penyimpanan

Hanyamemerlukansedikitperalatandan specimen

4

28Proprietary and confidential —do not distribute

3

1

2

5

Untuk Mendapatkan akurasi danpresisi yang baik, pengerjaanharus Berdasarkan SOP yg benar(KIT Insert, PMK, Evaluasi,Rekomendasi WHO)

RESUME


Hasil Test Positif Palsu menurutCDC (Center for Disease Controland Prevention, USA)

March 9, 2020ARDx Standard Template 32

Hasil Reaktif (Positif) Palsu dan Spesifisitas• Apa itu positif palsu?

• Ketika seseorang tidak terinfeksi HIV tetapimendapatkan hasil tes positif, hasil tersebutdianggap positif palsu.

• Umumnya, tes HIV memiliki spesifisitas tinggi,yang berarti ada sedikit hasil positif palsu dansebagian besar individu yang tidak terinfeksidiklasifikasikan sebagai tak terinfeksi melaluites.

• Bila ada 1.000 orang yang tidak terinfeksi yangdites menggunakan tes HIV dan 4 memilikihasil positif palsu, berarti spesifisitas tes HIVadalah 99,6% (996 hasil tes negatif pasti/1.000orang yang tidak terinfeksi HIV yang di tes)

March 9, 2020 ARDx Standard Template 33Sumber: https://www.cdc.gov/hiv/pdf/testing/cdc-hiv-factsheet-false-positive-test-results.pdf

Penyebab Hasil Reaktif Palsu pada Tes HIV• Isu teknis yang berkaitan dengan tes atau bahanbiologis.• Tercampurnya specimen• Kesalahan pelabelan• Penanganan yang tidak tepat• Salah tafsir dari RDT yang dibaca secara visual

• Penyebab biologis seperti partisipasi dalam studivaksin HIV, penyakit autoimun, dan kondisi medislain.1-5

March 9, 2020 ARDx Standard Template 34Sumber: https://www.cdc.gov/hiv/pdf/testing/cdc-hiv-factsheet-false-positive-test-results.pdf

Tambahan Pengetesan untuk MembedakanPositif Pasti dengan Positif Palsu

March 9, 2020 ARDx Standard Template 35

• Hasil uji saring/penapisan + diperlukanpenambahan tes• Tes laboratorium tambahan pengetesan menggunakan

spesimen asli.1,5

• Rapid test:• Pemeriksaan lebih tinggi• Algoritma pengetesan rapid test (misalkan, rapid test dari pabrikan

berbeda dengan urutan tertentu)• Merujuk individu ke layanan kesehatan yang dapat melakukan

pengetesan tambahan.7,8

Sumber: https://www.cdc.gov/hiv/pdf/testing/cdc-hiv-factsheet-false-positive-test-results.pdf

Dampak Prevalensi HIV• Prevalensi HIV merupakan proporsi populasi yang hidup dengan infeksi HIV.• Prevalensi HIV dalam suatu populasi yang dites memengaruhi seberapa banyak

hasil positif palsu yang ada, relatif pada hasil positif pasti.


Apa yang harus dilakukan bila tes uji saring HIVpada program memiliki banyak hasil positif palsu?

• Bila kita melakukan pengetesan pada populasi denganprevalensi rendah, kita dapat mengharapkan proporsiseluruh tes positif tersebut merupakan hasil positif palsu.

• Bila program tes kita menunjukkan sejumlah positif palsuyang lebih banyak dibandingkan ekspektasi untuk tes ujisaring dan tipe spesimen (misal, >2 positif palsu per 100negatif), segera hubungi pabrikan dan departemenkesehatan.


Analisis Presisi dan Akurasi Pemeriksaan Imunoserologi ...€¦ · • Umumnya, tes HIV memiliki spesifisitas tinggi, yang berarti ada sedikit hasil positif palsu dan sebagian besar

Documents