Jul 15, 2015
Bolile monogenicecontinuare
MUCOVISCIDOZA ( din engl.FIBROZA CHISTICA)
Mucoviscidoza Una din cele mai frecvente boli
genetice Afectate sunt cu precadere: Plamanii Pancreasul exocrin
Gena ABCC7 determina sinteza unei forme anormale de proteina CFTR ( = cystic
fibrosis transmembrane conductance regulator), care actioneaza ca un canal de clor la nivelul polului apical al celulelor epitelialeProteina CFTR a fost identificata in celulele din : - plamani, - ficat, -pancreas. - glandele sudoripare , - si tractul genitourinar
Proteina CFTR (wikipedia)
Mucoviscidoza
Cand proteina CFTR este anormal sintetizata datorita unei mutatii, celulele epiteliale nu mai pot regla modul in care clorul strabate membranele celulare
Heterogenitate alelica: exista peste 800 de mutatii ale genei Gena ABCC7 este mare (250 000 pb) avand 27 exoni ce sunt supusi
unei matisari alternative (3 izoforme); ARNm = 6129 pb, din care 4443 pb codifica 1480 aa ai proteinei transmembranare ce regleaza activitatea canalelor de clor Izoforma 2 se asociaza mai frecvent cu absenta congenitala a
vaselor deferente. (http://www.uniprot.org/uniprot/P13569)
Peste 66% dintre bolnavi au mutatia
F508, adica o
deletie de 3pb, ce are drept urmare disparitia a.a. fenilalanina din pozitia 508 a CFTR
MUCOVISCIDOZA Cauzele sunt: mutatii nonsens si mutatii cu sens gresit (engl. missense), deletii si mutatii ce modifica matisarea (splicingul) ARN-ului
Gena este numita tot CFTR
vs
http://nature.ca/genome/03/d/10/03d_11_e.cfm
Manifestarile clinice sunt rezultatul obstructiei canalelor glandelor exocrine cu secretii vascoase, respectiv -infectii pulmonare, -malnutritie, - dureri abdominale, - sinuzite, - constipatie, -infertilitate Speranta medie de viata este de aprox. 30 de ani
HETEROGENITATE ALELICA (POLIALELISM)
Mucoviscidoza Exista o serie de teorii (wiki) care explica mecanismele
moleculare presupuse a fi implicate in aparitia bolii Toate acestea vin in sprijinul observatiei ca majoritatea
modificarilor ce apar in cadrul bolii sunt datorate ingrosarii / cresterii vascozitatii secretiilor. Obstructiile conduc la remodelari si infectii pulmonare
recurente, Tulburarile digestive apar datorita: acumularii enzimelor digestive in pancreas,
malabsorbtiei, obstructiei tranzitului intestinal ( fecale cu consistenta crescuta), etc
DIAGNOSTICUL TABLOUL CLINIC SUGESTIV copilul
nu creste! TESTUL SUDORII confirma dg.(concentratia de sare este mult peste valorile normale)
Conc. Cl < 40 mmol/L
Rezultat e Normal
40-60 mmol/L > 60 mmol/L
La limita Anormal
Pilocarpina stimuleaza secretia sudorala
ANALIZE MOLECULAREA. Relatia dintre gena si un RFLP-lincat , KM.19, de pe cz. 7. + alela KM.19 prezenta , iar alela absencta la nivelul situsului de restrictie B. B. Diagnosticul bolii utilizand RFLP-ul KM.19 in ADN amplificat prin PCR . Dupa PCR, ADN a fost supus digestiei enzimatice cu Pst I si s-a efectuat electroforeza.http://www.glowm.com/?p=glowm.cml/section_view&articleid=344
Analiza ADN cu sonde oligonucleotidice specifice unei alele (ASO)Sonde monocatenare specifice: -ADN normal , fara Mutatia F508 - ADN cu mutatia F508 9 pacienti cu mucoviscidoza; ADN-ul genomic nefractionat imobilizat pe o membrana de nitroceluloza va hibrida cu sonda; heteroduplexul tinta sonda este evidentiat in cele 9 cazuri prin autoradiografie
-htz: 1,7,9 -hz: 2,3,4,5,8
Ce se intampla? Nu uitati: b. autoz.rec