AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAN FRAKSI …eprints.ums.ac.id/60597/11/HALAMAN DEPAN.pdfdari segi materi yang disajikan maupun dalam susunan penulisannya. Oleh karena itu, segala

i

AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL

DAN FRAKSI-FRAKSI DAUN Selaginella willdenowii

TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D

SKRIPSI

Oleh:

RIKA AMBARSARI

K 100 140 006

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

2018

ii




SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai

derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

di Surakarta

Oleh:

RIKA AMBARSARI

K 100 140 006

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

SURAKARTA

2018

iii

PENGESAHAN SKRIPSI

Berjudul:




Oleh:

RIKA AMBARSARI

K 100 140 006

Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi

Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta

Pada tanggal : 10 Februari 2018

Mengetahui,

Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

Dekan,

Azis Saifudin, Ph.D., Apt.

Pembimbing

( Ratna Yuliani, M.Biotech.St. )

Penguji:

1. Azis Saifudin, Ph.D., Apt.

2. Agus Purnomohadi, M.Biotech.

3. Ratna Yuliani, M.Biotech.St.

iv

DEKLARASI

Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya

yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan

Tinggi dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat

yang pernah ditulis atau diterbitkan orang lain, kecuali secara tertulis diacu dalam

naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Saya bersedia dan sanggup menerima sanksi sesuai peraturan yang berlaku

apabila terbukti melakukan tindakan pemaluan data dan plagiasi.

.

Surakarta, 13 Januari 2018

Peneliti

(Rika Ambarsari)

v

KATA PENGANTAR Assalamu’alaikum Wr. Wb.

Alhamdulillahirabbil’alamin. Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT

yang telah melimpahkan rahmat, hidayah dan inayah-Nya sehingga penulis dapat

menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi yang berjudul “AKTIVITAS

SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAN FRAKSI-FRAKSI DAUN Selaginella

willdenowii TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D”. Tujuan dari penulisan

naskah skripsi ini adalah untuk memenuhi tugas dan kewajiban penulis dalam melengkapi

persyaratan kelulusan Program Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas

Muhammadiyah Surakarta.

Selama proses penulisan naskah skripsi ini tentunya penulis mendapat

banyak bantuan dari berbagai pihak yang telah mendukung dan membimbing

penulis. Oleh karenanya dengan ini penulis mengucapkan terima kasih secara

tulus kepada:

1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas

Muhammadiyah Surakarta.

2. Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech.St. selaku dosen pembimbing,

3. Bapak Andi Suhendi, Apt., M.Sc. selaku pembimbing akademik.

4. Kedua orang tua dan adik-adik penulis yang telah memberi semangat,

dukungan dan doa selama ini.

5. Rekan-rekan tim penelitian (Sita Mulyawati, Aninda Faizatul Hasanah, Nur

Ervia Rahmawati, Diah Rachmawati, Prastiwi Wulaning Tyas, Diah Palupi

Probo Siwi).

Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari kata sempurna, baik

dari segi materi yang disajikan maupun dalam susunan penulisannya. Oleh karena

itu, segala kritik dan saran yang membangun penulis akan diterima dengan senang

hati. Penulis juga berharap semoga karya ini dapat bermanfaat untuk kemajuan

ilmu pengetahuan khususnya dalam bidang farmasi.

Wassalamu’alaikum Wr. Wb.

Surakarta, 13 Januari 2018

Penulis

vi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN SAMPUL DEPAN ............................................................................ i

HALAMAN SAMPUL DALAM ......................................................................... ii

HALAMAN PENGESAHAN SKRIPSI .............................................................. iii

HALAMAN DEKLARASI .................................................................................. iv

KATA PENGANTAR .......................................................................................... v

DAFTAR ISI ........................................................................................................ vi

DAFTAR GAMBAR ......................................................................................... viii

DAFTAR TABEL ................................................................................................ ix

DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... x

ABSTRAK ........................................................................................................... xi

ABSTRACT .......................................................................................................... xii

BAB I PENDAHULUAN ..................................................................................... 1

A. Latar Belakang Masalah ............................................................................ 1

B. Rumusan Masalah ..................................................................................... 2

C. Tujuan Penelitian ....................................................................................... 2

D. Tinjauan Pustaka ....................................................................................... 2

1. Kanker Payudara................................................................................... 2

2. Doksorubisin ......................................................................................... 5

3. Metode MTT assay ............................................................................... 5

4. Tanaman Selaginella willdenowii ......................................................... 6

E. Landasan Teori .......................................................................................... 7

F. Hipotesis .................................................................................................... 8

BAB II METODE PENELITIAN ......................................................................... 9

A. Kategori dan Rancangan Penelitian .......................................................... 9

B. Variabel Penelitian .................................................................................... 9

C. Alat dan Bahan .......................................................................................... 9

D. Tempat Penelitian .................................................................................... 10

E. Jalannya Penelitian .................................................................................. 10

vii

1. Determinasi Tanaman ......................................................................... 10

2. Preparasi Bahan .................................................................................. 10

3. Ekstraksi ............................................................................................. 11

4. Fraksinasi ............................................................................................ 11

5. Pembuatan Larutan Uji ....................................................................... 12

6. Pemanenan dan Perhitungan Sel T47D .............................................. 12

7. Uji MTT .............................................................................................. 12

8. Identifikasi Kandungan Senyawa ....................................................... 13

F. Analisis Data ......................................................................................... ..13

1. Analisis Data Uji Sitotoksik ............................................................... 13

2. Analisis Kromatografi Lapis Tipis ..................................................... 14

BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN............................................................ 16

A. Determinasi Tanaman.............................................................................. 16

B. Ekstraksi Daun Selaginella willdenowii .................................................. 16

C. Fraksinasi Ekstrak Etanol Selaginella willdenowii ................................. 16

D. Uji Sitotoksik dengan MTT Assay .......................................................... 17

E. Uji Kandungan Senyawa ......................................................................... 21

BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................... 23

A. Kesimpulan .............................................................................................. 23

B. Saran ........................................................................................................ 23

DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 24

LAMPIRAN ........................................................................................................ 27

viii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Skema jalannya penelitian ................................................................. 15

Gambar 2. Reaksi pembentukan kristal formazan (ungu) dari reagen MTT ...... 18

Gambar 3. Kristal formazan ................................................................................ 18

Gambar 4. Perbedaan morfologi sel kanker payudara T47D .............................. 19

Gambar 5. Hasil uji KLT pada fraksi etil asetat daun Selaginella willdenowii .. 21

ix

DAFTAR TABEL

Tabel 1. Rendemen fraksi etanol-air, fraksi etil asetat, fraksi n-heksan daun S.

willdenowii ............................................................................................ 17

Tabel 2. Nilai IC50 ekstrak etanol, fraksi n-heksan, fraksi etil asetat, fraksi etanol-

air daun Selaginella willdenowii, dan doksorubisin ............................. 19

Tabel 3. Deteksi senyawa pada fraksi etil asetat daun Selaginella willdenowii . 22

x

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Hasil determinasi tumbuhan Selaginella willdenowii. ................... 27

Lampiran 2. Perhitungan rendemen ekstrak etanol dan fraksi-fraksi daun

Selaginella willdenowii. ................................................................... 28

Lampiran 3. Perhitungan sel T47D pada saat pemanenan .................................. 29

Lampiran 4. Pembuatan seri konsentrasi ektrak dan fraksi-fraksi daun Selaginella

willdenowii ....................................................................................... 30

Lampiran 5. Tabel perhitungan absorbansi kontrol sel dan kontrol media ......... 32

Lampiran 6. Perhitungan persentase (%) sel hidup ............................................. 33

Lampiran 7. Grafik hubungan konsentrasi ekstrak etanol, fraksi n-heksan, fraksi

etil asetat, dan fraksi etanol-air daun Selaginella willdenowii dengan

% sel hidup dengan metode MTT. ................................................... 35

Lampiran 8. Mapping plate uji sitotoksik ........................................................... 36

Lampiran 9. Absorbansi hasil uji sitotoksik ........................................................ 37

xi

ABSTRAK

Kanker payudara merupakan jenis kanker dengan persentase kasus baru dan

penyebab kematian tertinggi di Indonesia. Pengobatan kanker selama ini

menimbulkan efek yang merugikan, sehingga memicu berkembangnya alternatif

pengobatan yang berasal dari alam atau tumbuhan sebagai terapi antikanker.

Selaginella willdenowii merupakan salah satu tanaman yang memiliki aktivitas

sebagai antikanker. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui aktivitas

sitotoksik ekstrak etanol dan fraksi-fraksi daun S. willdenowii terhadap sel kanker

payudara T47D serta untuk mengetahui golongan senyawa yang terkandung di

dalamnya.

Ekstrak daun S. willdenowii diperoleh dengan metode maserasi dengan

pelarut etanol 96%. Uji sitotoksik dilakukan berdasarkan metode MTT assay.

Golongan senyawa yang terkandung di dalam fraksi etil asetat diidentifikasi

menggunakan metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT).

Hasil uji sitotoksik menunjukkan bahwa fraksi etil asetat daun S.

willdenowii memiliki aktivitas sitotoksik dengan kategori lemah pada sel kanker

T47D dengan nilai IC50 259,380 µg/mL sedangkan ekstrak etanol, fraksi n-

heksan, dan fraksi etanol-air tidak memiliki aktivitas sitotoksik terhadap sel

kanker payudara T47D. Kontrol positif yang digunakan yaitu doksorubisin

mempunyai nilai IC50 39,770 µg/mL. Hasil analisis fitokimia menunjukkan

golongan senyawa yang terdapat dalam fraksi etil asetat daun S. willdenowii

antara lain alkaloid, flavonoid, dan terpenoid.

Kata Kunci : Selaginella willdenowii, uji sitotoksik, MTT assay, T47D

xii

ABSTRACT

Breast cancer is a type of cancer with the highest percentage of new cases

and death in Indonesia. Cancer treatment has been causing adverse effects, thus

triggering the development of alternative medicines derived from nature or plants

as anticancer therapy. Selaginella willdenowii is one of plants that has anticancer

activity. The purposes of this research were to investigate cytotoxic activity of

ethanol extract and fraction of S. willdenowii leaves against T47D breast cancer

cell and to determine the class of compound in the active fraction.

The leaf extract of S. willdenowii was obtained by maceration method

using 96% ethanol. The cytotoxic assay was performed based on MTT assay

method. The group of compounds contained in ethyl acetate fraction were

identified using Thin Layer Chromatography (TLC) method.

The result of cytotoxic test showed that the ethyl acetate fraction of S.

willdenowii leaf have weak cytotoxic activity on T47D cancer cell with IC50 value

of 259,380 μg/mL meanwhile ethanol extract, n-hexane fraction, and ethanol-

water fraction did not have cytotoxic activity against breast cancer cells T47D.

Doxorubicin as positive control has IC50 value of 39,770 μg/mL. The results of

phytochemical analysis showed that ethyl acetate fraction of S. willdenowii leaves

contains alkaloids, flavonoids, and terpenoids.

Keywords : Selaginella willdenowii, cytotoxic activity, MTT assay, T47D

AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAN FRAKSI …eprints.ums.ac.id/60597/11/HALAMAN DEPAN.pdfdari segi materi yang disajikan maupun dalam susunan penulisannya. Oleh karena itu, segala

Documents