1 AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK TANAMAN SARANG SEMUT (Myrmecodia pendans) YANG DIEKSTRAK DENGAN METODE MICROWAVE ASSISTED EXTRACTION (MAE) DAN APLIKASINYA SEBAGAI ANTIBAKTERI PADA IKAN KAKAP MERAH (Lutjanus sanguineus) TESIS Oleh: RAHMAT YULIANDRI NIM. 156100100111021 PROGRAM STUDI TEKNOLOGI HASIL PERTANIAN PROGRAM PASCASARJANA UNIVERSITAS BRAWIJAYA M A L A N G 2 0 1 7
78
Embed
AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK TANAMAN SARANG SEMUT ...repository.ub.ac.id/1873/1/RAHMAT YULIANDRI.pdf · 1 aktivitas antibakteri ekstrak tanaman sarang semut (myrmecodia pendans)
This document is posted to help you gain knowledge. Please leave a comment to let me know what you think about it! Share it to your friends and learn new things together.
Transcript
1
AKTIVITAS ANTIBAKTERI
EKSTRAK TANAMAN SARANG SEMUT (Myrmecodia pendans) YANG DIEKSTRAK
DENGAN METODE MICROWAVE ASSISTED EXTRACTION (MAE)
DAN APLIKASINYA SEBAGAI ANTIBAKTERI PADA IKAN KAKAP MERAH
(Lutjanus sanguineus)
TESIS
Oleh:
RAHMAT YULIANDRI
NIM. 156100100111021
PROGRAM STUDI TEKNOLOGI HASIL PERTANIAN
PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS BRAWIJAYA
M A L A N G
2 0 1 7
2
LEMBAR PENGESAHAN
AKTIVITAS ANTIBAKTERI
EKSTRAK TANAMAN SARANG SEMUT (Myrmecodia pendans) YANG DIEKSTRAK
DENGAN METODE MICROWAVE ASSISTED EXTRACTION (MAE)
DAN APLIKASINYA SEBAGAI ANTIBAKTERI PADA IKAN KAKAP MERAH
(Lutjanus sanguineus)
TESIS
Oleh:
Nama Mahasiswa : Rahmat Yuliandri NIM : 156100100111021 Program Studi : Teknologi Hasil Pertanian
This study aims to determine the effect of temperature and time of
extraction of “sarang semut” using Microwave Assisted Extraction (MAE) to the
yield, total phenol, total flavonoids and total tannins. Extract of “sarang semut” for
Minimum Inhibitory Concentration (MIC) against Escherichia coli, Listeria
monocytogenes and Vibrio parahaemolyticus was also observed. The design
experiment used was completely randomized design, with two factors of
temperature MAE (50, 60 and 70 °C) and time of extraction (10, 20 and 30
minutes).
The best result obtained from the extraction at temperature of 70 °C for 20
minutes, resulting a yield, total phenol, total flavonoids, total tannins are
7.83%,150.33 ± 8. 06 mg GAE / g, 56.12 ± 3. 47 mg QE / g and 20. 42 TAE ±
2.77 mg / g, respectively. The values of MIC (Minimum Inhibitory Concentration)
against Escherichia coli, Listeria monocytogenes and Vibrio parahaemolyticus
are 0.5 mg / ml, 0.1 mg / ml and 0.5 mg / ml, respectively.
Soaking of Snapper fish that has been contaminated with Listeria
monocytogenes in 0.1% extract and stored at -8 and 4 °C. During 45 days on
storage at 4 °C, population of Listeria monocytogenes fish with soaking extract is
5.70 Log10/g, and fish without soaking extract is 6.07 Log10/g. During 45 days
on storage at -8 °C, population of Listeria monocytogenes fish with soaking
extract is 4.41 Log10/g, and fish without soaking extract is 4.95 Log10/g.
Keywords: MIC, Total Phenol, Total Flavonoid, Total Tannin
9
DAFTAR ISI
Halaman HALAMAN JUDUL.............................................................................. i IDENTITAS TIM PENGUJI.................................................................. ii KATA PENGANTAR........................................................................... iii DAFTAR ISI......................................................................................... iv DAFTAR LAMPIRAN.......................................................................... v I. PENDAHULUAN..................................................................... 1 1.1. Latar Belakang............................................................. 1 1.2. Rumusan Masalah....................................................... 3 1.3. Tujuan Penelitian.......................................................... 3 1.4. Manfaat Penelitian........................................................ 4 II. KAJIAN PUSTAKA................................................................... 5 2.1. Tanaman Sarang Semut............................................. 5 2.1.1. Taksonomi Tanaman Sarang Semut................ 5 2.1.2. Senyawa Fenolik dalam Sarang Semut............. 6
2.2. Ikan Kakap Merah......................................................... 13 2.3. Bakteri Patogen Pada Ikan........................................... 13 2.3.2. Escherichia coli.................................................... 14 2.3.3. Listeria monocytogenes...................................... 14 2.3.4.Vibrio parahaemolitycus ...................................... 16 2.4. Ekstraksi Metode MAE.................................................. 17 2.4.1. Kelebihan Metode MAE...................................... 17 2.4.2. Faktor Penentu Efektifitas MAE.......................... 19 III. KERANGKA KONSEPTUAL DAN HIPOTESIS....................... 21 3.1. Kerangka Pikir Penelitian.............................................. 21 3.2. Hipotesis........................................................................ 21 IV. METODE PENELITIAN............................................................ 23 4.1. Bahan-bahan................................................................. 23 4.2. Alat................................................................................. 23 4.3. Metode........................................................................... 23 4.3.1. Ekstraksi Senyawa Antibakteri dengan MAE...... 25 4.3.1. Preparasi Sampel................................... 25 4.3.2. Ekstraksi Sarang Semut (MAE).............. 25 4.3.3. Analisis Rendemen................................. 26 4.3.4. Analisis Total Fenol................................ 26 4.3.5. Analisis Total Flavonoid.......................... 26 4.3.6. Penentuan Total Tanin........................... 27 4.3.7. Penentuan Nilai KHM .............................. 27 4.3.8. Analisis LC-MS........................................ 28 4.3.2. Aplikasi Ekstrak pada Ikan.................................. 28
10
4. HASIL DAN PEMBAHASAN....................................................... 30
5.1. Karakteristik Bahan Baku................................................ 30 5.2. Ekstraksi Senyawa Antibakteri dengan MAE................. 31 5.2.1. Rendemen............................................................. 31 5.2.2. Total Fenol............................................................ 33 5.2.3. Total Flavonod...................................................... 36 5.2.4. Total Tanin............................................................ 39 5.2.5. Konsentrasi Hambat Minimum.............................. 41 5.2.6. Korelasi Senyawa Bioaktif denga KHM................ 46 5.2.7. Penentuan Perlakuan Terbaik.............................. 52 5.2.8. Analisa LC-MS ...................................................... 53 5.3. Aplikasi Ekstrak pada Ikan............................................... 55
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................. 60 LAMPIRAN............................................................................................... 66
11
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
1. Prosedur Analisis Total Fenol.......................................................... 66 2. Prosedur Analisis Total Flavonoid................................................... 69 3. Prosedur Analisis Total Tanin.......................................................... 70 4. Prosedur Penentuan Konsentrasi Hambat Minimum (KHM)........... 71 5. Pengujian Listeria monocytogenes.................................................. 72 6. Analisa Rendemen........................................................................... 73 7. Anova Rendemen Ekstrak etanol.................................................... 74 8. Kurva Standar Asam Galat.............................................................. 75 9. Kurva Standar Kuersetin.................................................................. 76 10. Kurva Standar Asam Tanat............................................................. 77 11. Hasil Analisa Total Fenol................................................................. 78 12. Anova Analisa Total Fenol............................................................... 79 13. Hasil Analisa Total Flavonoid.......................................................... 80 14. Anova Analisa Total Flavonoid........................................................ 81 15. Hasil Analisa Total Tanin................................................................. 82 16. Anova Analisa Total Tanin............................................................... 83 17. Hasil Karakter Rata-rata Ekstrak Sarang Semut............................. 84 18. Hasil Pengamatan Pertumbuhan Listeria monocytogenes............. 85 19. Kurva Pertumbuhan Listeria monocytogenes.................................. 86 20. Hasil Pengamatan Pertumbuhan Escherichia coli........................... 87 21. Kurva Pertumbuhan Escherichia coli............................................... 88 22. Hasil Pengamatan Pertumbuhan Vibrio parahaemolyticus............. 89 23. Kurva Pertumbuhan Vibrio parahaemolyticus.................................. 90 24. KHM Ekstrak Sarang Semut............................................................ 91 25. Analisa Korelasi Senyawa Bioaktif terhadap KHM......................... 92 26. Penentuan Hasil Terbaik Metode TOPSIS...................................... 96 27. Penentuan Hasil Terbaik Metode Zeleny......................................... 98 28. Anova Jumlah Log Bakteri pada Ikan.............................................. 101 29. Penyetaraan Hasil Ekstrak Perlakuan Terbaik................................ 103 30. Spesifikasi dan Hasil Kromatogram LC-MS..................................... 104 31. Dokumentasi.................................................................................... 107
12
DAFTAR TABEL
Halaman
1. Hasil analisa serbuk sarang semut...................................................... 30 2. Rerata rendemen akibat perlakuan suhu............................................ 33 3. Rerata total fenol akibat perlakuan waktu........................................... 36 4. Rerata total flavonoid akibat perlakuan suhu...................................... 38 5. Rerata total tanin akibat perlakuan suhu............................................. 40 6. Rerata total tanin akibat perlakuan waktu........................................... 40 7. Rerata KHM bakteri setiap perlakuan ekstraksi.................................. 43 8. Regresi berganda senyawa bioaktif terhadap E. Coli.......................... 46 9. Regresi berganda senyawa bioaktif terhadap V. Parahaemolyticus... 47 10. Regresi berganda senyawa bioaktif terhadap L. Monocytogenes...... 49 11. Korelasi senyawa bioaktif terhadap ketiga jenis bakteri..................... 50 12. Penentuan perlakuan terbaik............................................................... 53
13
DAFTAR GAMBAR
Halaman
1. Tumbuhan sarang semut............................................................. 5 2. Klasfikasi fenol............................................................................. 7 3. Struktur cincin flavonoid.............................................................. 10 4. Struktur dasar tanin..................................................................... 11 5. Fosforilasi oksidatif...................................................................... 12 6. Bagian-bagian MAE..................................................................... 18 7. Kerangka pikir penelitian................................................ ............. 22 8. Kerangka operasional................................................................. 24 9. Pengaruh suhu dan waktu MAE terhadap rendemen................ 31 10. Pengaruh suhu dan waktu MAE terhadap total fenol................. 34 11. Pengaruh suhu dan waktu MAE terhadap total flavonoid.......... 37 12. Pengaruh suhu dan waktu MAE terhadap total tanin................. 39 13. Kromatogram LC-MS................................................................... 54 14. Pengaruh perlakuan perendaman daging ikan terhadap jumlah
301), dimana senyawa p-coumaric acid, gallic acid, caffeic acid dan ferulic acid
tergolong dalam asam fenol, sedangkan kaempferol, rutin dan kuersetin
tergolong dalam senyawa flavonoid. Senyawa kuersetin yang menunjukkan hasil
positif, sedangkan 6 senyawa yang lain menunjukkan hasil negatif.
54
Gambar 13. Kromatogram LC-MS
Pada kromatogram dapat diketahui adanya kandungan kuersetin pada
ekstrak etanol MAE sarang semut dengan waktu retensi 0,91 menit, dengan
berat molekul 301, mendekati berat molekul kuersetin yaitu sebesar 302
g/molekul (Lu et al., 2000).
Keberadaan kuersetin dalam tanaman sarang semut sesuai dengan hasil
penelitian Engida (2013) yang melakukan ekstraksi pada tanaman sarang semut
dengan metode maserasi menggunakan pelarut air dan didapatkan senyawa
kuersetin sejumlah 0,03 mg/g.
Peranan kuersetin sebagai antibakteri telah dikemukakan oleh Xu and
Lee (2001) yang mendapatkan bahwa senyawa kuersetin mempunyai diameter
hambat 9 mm terhadap beberapa bakteri. Kuersetin tergolong dalam senyawa
flavonoid, yang mempunyai sifat antioksidan dan antibakteri. Flavonoid
mempunyai peranan antibakteri dengan cara merusak membran sitoplasma,
menurunkan kestabilan membran, menghambat sintesis asam nukleat dan
menghambat metabolisme energi (Chusnie, 2011).
Sampel
Asam galat
Asam kafeid
Asam ferulik
Kaempferol
Rutin
Kuersetin
Asam kumarid
55
5.3 Aplikasi Ekstrak pada Ikan
Berdasarkan analisa statistik menggunakan Anova (Lampiran 29),
diketahui bahwa keempat jenis perlakuan mempunyai pengaruh yang signifikan
terhadap laju pertumbuhan bakteri Listeria monocytogenes, dari hari ke 1, 15, 30
sampai hari ke 45.
Gambar 14. Pengaruh Perlakuan Perendaman Daging Ikan dengan Ekstrak Terhadap Pertumbuhan Listeria monocytogenes (♦Suhu 4 oC, ■Suhu 4 °C dengan ekstrak, ▲Suhu -8 °C, ●Suhu -8 °C dengan
ekstrak.)
Berdasarkan Gambar 14, jumlah peningkatan jumlah bakteri yang
tertinggi dialami oleh sampel dengan perlakuan penyimpanan dingin tanpa
perendaman ekstrak, kemudian diikuti secara berurutan oleh sampel perlakuan
penyimpanan dingin dengan perendaman ekstrak, sampel perlakuan
penyimpanan dingin tanpa perendaman ekstrak, dan sampel perlakuan
penyimpanan beku dengan perendaman ekstrak.
Pada hari pertama, jumlah sel semua perlakuan mengalami peningkatan
dibandingkan dengan hari ke 0, dimana kenaikan kedua perlakuan sampel
dengan perendaman ekstrak mengalami kenaikan yang lebih sedikit dari pada
3,00
3,50
4,00
4,50
5,00
5,50
6,00
6,50
0 1 15 30 45
L. M
on
ocy
tog
enes
(Lo
g cf
u/g
)
Waktu penyimpanan (hari)
56
kenaikan kedua sampel yang tidak diberikan perlakuan perendaman ekstrak.
Berdasarkan penelitian tahap I, ekstrak sarang semut yang digunakan untuk
perendaman ini mempunyai kandungan fenol 150,33 mgGAE/g. Menurit Lin
(2004), bagian fenolik yang bersifat hidrofobik memungkinkan penempelan pada
membran sitoplasma bakteri yang pada akhirnya akan mengakibatkan kematian
sel. Menurut Lin (2004), bagian hidrofobik alami yang dimiliki oleh senyawa
fenolik mampu bekerja secara lebih efektif dalam menghadapi bagian lipid dan
air dalam daging, sehingga cocok diaplikasikan dalam makanan.
Pada kedua sampel penyimpanan dingin, sampel yang tidak mengalami
perlakuan perendaman ekstrak memiliki kenaikan jumlah sel yang jauh lebih
tinggi dari pada sampel yang direndam pada ekstrak, baik pada hari ke 15, 30
dan 45. Sampel tanpa perendaman memiliki jumlah sel 28x104 cfu/g pada hari ke
0, berjumlah 3,3x104 cfu/g pada hari ke 1, berjumlah 3,1x105 cfu/g pada hari ke
15, berjumlah 6,7x105 cfu/g pada hari ke 30, dan diatas 107 cfu/g pada hari ke
45. Hasil ini sebanding dengan penelitian Lin (2004) yang meneliti bahwa
pertumbuhan Listeria monocytogenes tanpa penembahan ekstrak pada ikan
yang disimpan pada suhu 4 oC, jumlah sel bakteri tersebut mengalami
peningkatan sebesar 1 log10 cfu/g dari hari ke 0 hingga hari ke-8. Dalam
penelitian tersebut, dinyatakan bahwa kandungan fenol yang terdapat dalam
ekstrak Oregano berperan dalam menurunkan jumlah sel sejumlah 3 log10 cfu/g
pada hari kedelapan. Begitu pula penelitian yang dilakukan oleh Miladi et al.
(2008), menyatakan bahwa Listeria monocytogenes masih mempunyai
kemampuan tumbuh pada suhu 2-5 oC. Ikan yang di inokulasi Listeria
monocytogenes kemudian disimpan pada suhu 4 °C, setelah 15 hari mengalami
kenaikan jumlah sel sejumlah 1,46 log10 cfu/g. kenaikan ini lebih kecil dari pada
ikan yang disimpan pada suhu 25 oC (Miladi et al., 2008). Pada hari ke 45,
sampel perlakuan dingin tanpa perendaman tersebut sudah akan mengalami
57
fase stationer, dimana grafik akan mengalami arah yang horizontal, dan pada
sampel penyimpanan dingin dengan perendaman ekstrak masih dalam fase log.
Sampel yang lain pada suhu penyimpanan yang sama dengan perlakuan
perendaman ekstrak terlebih dahulu sebelum penyimpanan dingin, memiliki
jumlah sel yang lebih sedikit di setiap waktu pengamatan, mulai dari hari ke 1,
15, 30 sampai 45 hari.
Begitu pula dengan kedua sampel yang disimpan pada suhu -8 °C,
sampel yang tidak mengalami perlakuan perendaman ekstrak memiliki kenaikan
jumlah sel yang jauh lebih tinggi dari pada sampel yang direndam pada ekstrak,
baik pada hari ke 15, 30 dan 45. Menurut Chung et al. (1993), Tanin mempunyai
daya hambat pada uji cakram terhadap 15 jenis bakteri diantaranya Listeria
monocytogenes dan Escherichia coli, sedangkan asam galat yang merupakan
produk hidrolisis dari asam tanat, tidak dapat menghambat pertumbuhan bakteri-
bakteri tersebut, dikarenakan rantai ester pembentuk asam tanat pada asam
galat adalah berperan penting sebagai antibakteri pada komponen tersebut.
Kedua sampel dengan perlakuan penyimpanan beku mempunyai
pertumbuhan sel lebih rendah dari pada penyimpanan beku, baik dengan
perlakuan perendaman ekstrak atau tanpa perendaman sebelum penyimpanan
beku. Hal ini sesuai dengan penelitian yang dilakukan oleh Miladi et al. (2008),
bahwa penyimpanan beku ikan salmon yang telah diinokulasi Listeria
monocytogenes dapat menurunkan jumlah sel 1 sampai 2 log10 cfu/g pada hari
ke 30 penyimpanan beku. Dari hari ke 30 sampai hari ke 200 penurunan jumlah
sel tidak banyak, yaitu kurang dari 1 log cfu/g. Pada suhu dibawah 0 °C, bakteri
Listeria monocytogenes mengalami penyusutan ukuran sel dan mengalami
evolusi karakter biokimia, dimana beberapa enzim (D-arabitol, D-xylose, L-
rhamnose, α-methyl-D-glucoside, D-ribose, glucose-1-phosphate, dan D-
tagatose) memproduksi asam.
58
VI. KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan dan saran yang didapatkan dari penelitian ini yaitu sebagai
berikut.
6.1. Kesimpulan
Ekstraksi etanol sarang semut dengan metode Microwave Assisted
Extraction (MAE) dengan 9 kombinasi perlakuan suhu dan waktu dan didapatkan
perlakuan optimum pada suhu 70 oC dengan waktu 20 menit dengan rendemen
sebesar 7,83 %, total fenol 150,33 mg GAE/g, total flavonoid 56,12 mg QE/g,
total tanin 20,42 mg TAE/g, Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) pada
Escherichia coli, Vibrio parahaemolyticus dan Listeria monocytogenes sebesar
0,5 mg/g.
Pada penyimpanan suhu 4 oC maupun -8 oC, daging ikan yang
sebelumnya mengalami perlakuan perendaman dengan ekstrak perlakuan
terbaik dengan konsentrasi 0,1 % mengalami peningkatan pertumbuhan Listeria
monocytogenes lebih lambat dari pada daging ikan yang tidak mengalami
perlakuan perendaman ekstrak.
Pada pengamatan akhir hari ke 45, jumlah log Listeria monocytogenes
dari perlakuan penyimpanan dingin tanpa perendaman ekstrak 6,07 log10/g,
penyimpanan dingin dengan perendaman ekstrak 5,7 log10/g, penyimpanan
beku tanpa perendaman ekstrak 4,95 log10/g dan penyimpanan beku dengan
perendaman ekstrak sebelum penyimpanan 4,41 log10/g.
59
6.2. Saran
Perlu dilakukan penelitian selanjutnya mengenai ekstraksi sarang semut
dengan menggunakan faktor perlakuan waktu MAE yang lebih pendek pada
suhu antara 60 sampai 70 oC dengan waktu 20 menit.
Perlu adanya penelitian lebih lanjut mengenai ekstraksi tumbuhan sarang
semut menggunakan pelarut non-polar untuk mengetahui dan mengekstrak
senyawa-senyawa non-polar yang terdapat pada tumbuhan tersebut.
Perlu penelitian lebih lanjut mengenai identifikasi senyawa-senyawa tanin
yang terdapat pada tumbuhan sarang semut.
60
DAFTAR PUSTAKA
Adesiyun, A. A. (1993). Prevalence of Listeria spp., Campylobacter spp. Salmonella spp. Yersinia spp. and toxigenic Escherichia coli meat and seafoods in Trinidad. Food microbiology, 10(5), 395-403.
Allison, D., & Gilbert, P., 2004, Bacteria, in Denyer, S.P., Hodges, N.A., & Gorman, S.P. (Eds.), Hugo and Russell’s Pharmaceutical Microbiology, 7th Ed., Blackwell Science, Masssachusetts, USA
Ambarwati, R. 2014. Membangun Kelautan untuk Mengembalikan Kejayaan Sebagai Negara Maritim, http://www.ppk-pp3k.kkp.go.id/ver2/news/read/ 115/
Apriyanti, E., Kurnia, D.S.D., Dharsono, H.D.A., Satari, M.H. 2015. Flavonoid dari Myrmecodia pendans dan aktifitas antibakteri terhadap Enterococcus faecalis, Pustaka Unpad. Bandung
Atanassova, M., Georgieva S., and Ivancheva K. 2011. Total Phenolic And Total Flavonoid Contents, Antioxidant Capacity And Biological Contaminants In Medicinal Herbs. Journal of the University of Chemical Technology and Metallurgy. 46 (1): 81-88.
Baghdikian, B., Filly, A., Fabiano-Tixier, A. S., Petitcolas, E., Mabrouki, F., hemat,
F., & Ollivier, É. (2016). Extraction by Solvent Using Microwave and Ultrasound-Assisted Techniques Followed by HPLC Analysis of Harpagoside from Harpagophytum Procumbens and Comparison with Conventional Solvent Extraction Methods. Comptes Rendus Chimie. 19 (6): 692-698.
Bayoub, K., Baibai, T., Mountassif, D., Retmane, A., & Soukri, A. (2010).
Antibacterial activities of the crude ethanol extracts of medicinal plants against Listeria monocytogenes and some other pathogenic strains. African Journal of Biotechnology, 9(27), 4251-4258.
Bobbarala, V. (2012). Antimicrobial Agent. InTech. Janeza Trdine 9, 51000.
Rijeka, Croatia. Chung, K. T., SE Jr, S., Lin, W. F., & Wei, C. I. (1993). Growth inhibition of
selected food‐borne bacteria by tannic acid, propyl gallate and related compounds. Letters in Applied Microbiology, 17(1), 29-32.
Chung, K. T., Zhao, G., Stevens Jr, E., Simco, B. A., & Wei, C. I. (1995). Growth
inhibition of selected aquatic bacteria by tannic acid and related compounds. Journal of Aquatic Animal Health, 7(1), 46-49.
Cushnie, T. T., & Lamb, A. J. (2011). Recent advances in understanding the
antibacterial properties of flavonoids. International journal of antimicrobial agents, 38(2), 99-107.
61
Cowan, M.M. 1999. Plant Products as Antimicrobial Agents. Clinical
Microbiology Reviews. 12 : 564 – 582. Cui, X. B., Qian, X. C., Huang, P., Zhang, Y. X., Li, J. S., Yang, G. M., & Cai, B.
C. (2015). Simultaneous determination of ten flavonoids of crude and
wine‐processed Radix Scutellariae aqueous extracts in rat plasma by UPLC‐ESI‐MS/MS and its application to a comparative pharmacokinetic study. Biomedical Chromatography, 29(7), 1112-1123.
Doughari, J. H. (2006). Antimicrobial activity of Tamarindus indica Linn. Tropical
Journal of Pharmaceutical Research. 5(2): 597-603. Duncan, C. J., Bowler, K., & Davison, T. F. (1970). The effect of tannic acid on
the phosphorylation and ATPase activity of mitochondria from blowfly flight muscle. Biochemical pharmacology, 19(8), 2453-2460.
Efendi, Y. N., & Hertiani, T. (2013). Antimicrobial potency of ant-plant extract
(Myrmecodia tuberosa Jack) against Candida albicans, Escherichia coli, and Staphylococcus aureus. Trad Med J. 18 (1): 53-58.
Engida, A. M., Kasim, N. S., Tsigie, Y. A., Ismadji, S., Huynh, L. H., & Ju, Y. H.
(2013). Extraction, identification and quantitative HPLC analysis of flavonoids from sarang semut (Myrmecodia pendan). Industrial Crops and Products. 41 (1): 392-396.
Genisa, A.S. (1999). Pengenalan jenis-jenis ikan laut ekonomis penting di
Indonesia, Oseana. 24 (1) : 17 – 38. Gharekhani, M., Ghorbani, M., & Rasoulnejad, N. (2012). Microwave-assisted
extraction of phenolic and flavonoid compounds from Eucalyptus camaldulensis Dehn leaves as compared with ultrasound-assisted extraction. Latin American applied research. 42 (3): 305-310.
Gonçalves, A. C., Almeida, R. C. C., Alves, M. A. O., & Almeida, P. F. (2005).
Quantitative Investigation on the Effects of Chemical Treatments in Reducing Listeria monocytogenes Populations on Chicken Breast Meat. Food control. 16(7): 617-622.
Grotewold, E. (2006). The Science of Flavonoids, Springer Science Business
Media, Inc. New York. Handayani, D., Mun’im, A., & Ranti, A. S. (2015). Optimation of Green Tea Waste
Axtraction Using Microwave Assisted Extraction to Yield Green Tea Extract. Traditional Medicine Journal, 19(1), 29-35.
Herrmann, K., & Nagel, C. W. (1989). Occurrence and content of
hydroxycinnamic and hydroxybenzoic acid compounds in foods. Critical Reviews in Food Science & Nutrition, 28(4), 315-347.
Jay, J.M., Loessner, M.J., Golden, D.A. (2005). Modern Food Microbiology 7th Ed. Springer Science Business Media, Inc. New York.
62
Jing, P., & Giusti, M. M. (2007). Effects of Extraction Conditions on Improving the Yield and Quality of an Anthocyanin‐Rich Purple Corn (Zea mays L.) Color Extract. Journal of food science, 72(7), C363-C368.
Junior, M. R. M., Leite, A. V., & Dragano, N. R. V. (2010). Supercritical fluid extraction and stabilization of phenolic compounds from natural sources–review (supercritical extraction and stabilization of phenolic compounds). Open Chem Eng J, 4, 51-60.
Khumaidi, A., Hertiani, T., & Sasmito, E. (2015). Analisis Korelasi antara Efek
Proliferasi Limfosit dengan Kandungan Fenolik dan Flavonoid Subfraksi Etil Asetat Myrmecodia tuberosa (Non Jack) Bl. secara In Vitro pada Mencit BALB/C (Correlation Analysis between Lymphocyte Proliferation. Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia.13(1): 102-107.
Kim, S. J., Cho, A. R., & Han, J. (2013). Antioxidant and antimicrobial activities of
leafy green vegetable extracts and their applications to meat product preservation. Food Control. 29(1): 112-120.
Kumar, S., & Pandey, A. K. (2013). Chemistry and biological activities of
flavonoids: an overview. The Scientific World Journal, 2013. Lee, K. W., Kim, Y. J., Lee, H. J And Lee, C. Y. 2003. Cocoa Has More Phenolic
Phytochemical And Higher Antioxidant Than Teas And Red Wine. J. Agric. Food Chem. 51(25): 249-252.
Lenny, S. (2006). Senyawa flavonoida, fenilpropanoida dan alkaloida, USU
Repository@2006. Li, M. J., You, J. Y., Yao, S., Ding, L., Liu, Z. Y., & Zhang, H. Q. (2004).
Microwave-assisted Extraction of Rutin and Quercetin from Flos Sophorae. Chem Res Chin Univ. 20. 703-706.
Liazid, A., Palma, M., Brigui, J., & Barroso, C. G. (2007). Investigation on
phenolic compounds stability during microwave-assisted extraction. Journal of Chromatography A, 1140(1), 29-34.
Lin, Y. T., Labbe, R. G., & Shetty, K. (2004). Inhibition of Listeria monocytogenes
in fish and meat systems by use of oregano and cranberry phytochemical synergies. Applied and environmental microbiology, 70(9), 5672-5678.
Lu, Y., & Foo, L. Y. (2000). Antioxidant and radical scavenging activities of
polyphenols from apple pomace. Food chemistry, 68(1), 81-85. Magdalena, N. V., & Kusnadi, J. (2014). Antibakteri dari Ekstrak Kasar Daun
Gambir (Uncaria gambir var Cubadak) Metode Microwave-Assisted Extraction Terhadap Bakteri Patogen [In Press Januari 2015]. Jurnal Pangan dan Agroindustri. 3(1): 124-135.
Malangngi, L., Sangi, M., & Paendong, J. (2012). Penentuan kandungan tanin
dan uji aktivitas antioksidan ekstrak biji buah alpukat (Persea americana Mill.). Jurnal Mipa Unsrat Online. 1(1): 5-10.
an innovative and promising extraction tool for medicinal plant research. Pharmacognosy Reviews. 1(1): 7-18.
Miladi, H., Chaieb, K., Bakhrouf, A., Elmnasser, N., & Ammar, E. (2008).
Freezing effects on survival of Listeria monocytogenes in artificially contaminated cold fresh-salmon. Annals of microbiology, 58(3), 471-476.
Moektiwardoyo, M., Levita, J., Sidiq, S. P., Ahmad, K., Mustarichie, R., &
Subarnas, A. (2011). The determination of quercetin in Plectranthus scutellarioides (L.) R. Br. leaves extract and its In SilicoStudy on Histamine H4 Receptor. Indonesian Journal Pharmacy. 191-196.
Murcia, M. A., Jiménez, A. M., & Martínez-Tomé, M. (2009). Vegetables
antioxidant losses during industrial processing and refrigerated storage. Food Research International, 42(8), 1046-1052.
National Center for Biotechnology Information. https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/ Naufalin, R., Erminawati. (2013) Sifat Fisikokimia dan Aktivitas Antioksidan
Sarang Semut (Myrmecodia pendans) Sebagai Pengawet Alami Pangan. http://www.researchgate.net/publication/260336250
Ozturk, G., Dogan, M., & Toker, O. S. (2014). Physicochemical, functional and
sensory properties of mellorine enriched with different vegetable juices and TOPSIS approach to determine optimum juice concentration. Food Bioscience, 7, 45-55.
Pudjiastuti, S. 2014. Infrasruktur, Kendala Pengangkutan Hasil Laut. Harian Kompas, 20 November 2014, hal. 4
Riadi, M. 2016. Senyawa Polifenol pada Tanaman. http://www.kajianpustaka.com/2014/06/senyawa-polifenol-pada-tanaman.html
Sanjaya, R. E., Tedjo, Y. Y., Kurniawan, A., Ju, Y. H., Ayucitra, A., & Ismadji, S. (2014). Investigation on supercritical CO 2 extraction of phenolic-phytochemicals from an epiphytic plant tuber (Myrmecodia pendans). Journal of CO2 Utilization, 6, 26-33.
Sari, D. K., Wardhani, D. H., & Prasetyaningrum, A. (2012). Pengujian
Kandungan Total Fenol Kappahycus alvarezzi dengan Metode Ekstraksi Ultrasonik dengan Variasi Suhu dan Waktu. Prosiding SNST Fakultas Teknik, 1(1).
Scalbert, A. (1991). Antimicrobial properties of tannins. Phytochemistry, 30(12),
3875-3883. Setyani, W., Hertiani, T., & Murti, Y. B. (2012). Isolation and Identification of
Antimicrobial Compound From Sarang Semut Tubers (Myrmecodia tuberosa (non Jack.) Bl.). STIFAR-Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi, 7(1).
Salminen, S., Bouley, C., Boutron, M. C., Cummings, J. H., Franck, A., Gibson,
G. R., ... & Rowland, I. (1998). Functional food science and gastrointestinal physiology and function. British Journal of Nutrition, 80(S1), S147-S171.
Sankar, S., Sujith, P., & Jayalaxmi, S. (2013). Microbial study and proximate
composition of six marine fish species in Mudasalodai coastal region. International Journal of Pharmacy and Biological Sciences, 3(3), 398-404.
Shan, B., Cai, Y. Z., Sun, M., & Corke, H. (2005). Antioxidant capacity of 26 spice
extracts and characterization of their phenolic constituents. Journal of agricultural and food chemistry, 53(20), 7749-7759.
Shao, P., He, J., Sun, P., & Zhao, P. (2012). Analysis of conditions for
microwave-assisted extraction of total water-soluble flavonoids from Perilla Frutescens leaves. Journal of food science and technology, 49(1), 66-73.
Shelef, L. A., Naglik, O. A., & Bogen, D. W. (1980). SENSITIVITY OF SOME
COMMON FOOD‐BORNE BACTERIA TO THE SPICES SAGE, ROSEMARY, AND ALLSPICE. Journal of Food Science, 45(4), 1042-1044.
Situmeang, B., Kurnia, D., & Sumiarsa, D. Pentacyclic Triterpenes From Sarang
Semut Tuber (Myrmecodia pendans) and Their Antibacterial Activity Test Against Escherichia coli. Unpad. Bandung.
Soeksmanto, A., Subroto, M. A., Wijaya, H., & Simanjuntak, P. (2010). Anticancer
activity test for extracts of Sarang semut plant (Myrmecodya pendens) to HeLa and MCM-B2 cells. Pakistan journal of biological sciences: PJBS. 13(3): 148-151.
Su, Y. C., & Liu, C. (2007). Vibrio parahaemolyticus: a concern of seafood safety.
Food microbiology, 24(6), 549-558.
Subroto, A. 2006. Gempur Penyakit Dengan Sarang Semut. Penebar Swadaya. Jakarta.
Subuh, M. 2015. Mengenal Bakteri Lysteria monocytogenes. www.depkes.go.id/article/view/15015800001/mengenal-bakteri-lysteria-monocytogenes.html. 27 Januari 2015
Suryani, L., & Stepriyani, S. (2016). Daya antibakteri infusa daun mahkota dewa (Phaleria macrocarpa) terhadap Staphylococcus aureus dan Eschericia coli. Jurnal Mutiara Medika, 7(1 (s)), 23-28.
Susanti, E. (2016). Inventarisasi Tumbuhan Sarang Semut Di Kabupaten Fakfak,
Papua Barat. Skripsi. Institut Pertanian Bogor. Bogor. Susanto, E., Agustini, T. W., Swastawati, F., Surti, T., Fahmi, A. S., Albar, M. F.,
& Nafis, M. K. (2011). Pemanfaatan Bahan Alami Untuk Memperpanjang
Umur Simpan Ikan Kembung (Rastrelliger Neglectus). Journal of Fisheries Sciences. 13(2): 60-69.
Suwandi, A. C. (2015). Identification of Bioactive Compounds in Water Extract of
Sarang Semut (Myrmecodia pendans). National Taiwan University of Science and Technology. Taipei.
Taguri, T., Tanaka, T., & Kouno, I. (2004). Antimicrobial activity of 10 different
plant polyphenols against bacteria causing food-borne disease. Biological and Pharmaceutical Bulletin, 27(12), 1965-1969.
Tortora GJ., Funke, BR., Case CL. 2001. Microbiology an Introduction 7th edition.
Addison Wesley Longman. United States America. p. 323-324, 549-572,690-697.
US Food and Drug Administration (US FDA). 2007. Secondary direct food
additives permitted in food for human consumption. http://www.cfsan.fda.gov/~lrd/fr040402.html.
Utomo, A.B., Suprijono, A., Risdianto, A. 2011. Uji aktifitas antioksidan kombinasi ekstrak sarang semut (Myrmecodia pendans) dan ekstrak the hitam (Camellia sinensis O.K. var. assamica (mast.)) dengan metode DPPH. MFI. 6 (1) : 2-7 .
Vatai, T., Škerget, M., & Knez, Ž. (2009). Extraction of phenolic compounds from elder berry and different grape marc varieties using organic solvents and/or supercritical carbon dioxide. Journal of Food Engineering, 90(2), 246-254.
Xu, H. X., & Lee, S. F. (2001). Activity of plant flavonoids against antibiotic-resistant bacteria. Phytotherapy Research. 15(1): 39-43.