Ruppen Sandrine, BMA 11 - 14, MCL Niederwangen, Spezial Chemie Akkreditierungskonforme Evaluation des Parameters Amiodaron von aktuell HPLC auf HPLC-MS 1. Zusammenfassung / Abstract Quellenverzeichnis: 1 Dr. Vögtli, A. [Stand 22.02.2014] Amiodaron. http://www.pharmawiki.ch/wiki/index.php?wiki=Amiodaron 2 Dr. Volkmann und Kollegen. [Stand 25.02.2014] Desethylamiodaron. http://www.laborvolkmann.de/analysenspektrum/HTML/index.html Abbildungsverzeichnis: Abb. 5.1 Ruppen, S. (2014) Korrelationsanalyse der Amiodaronbestimmung mit den 74 Seren/Plasma. Niederwangen, eigene Abbildung Amiodaron ist ein Herzmedikament welches gefährliche Nebenwirkungen hat. Weil eine falsche Medikamentendosierung tödlich enden kann, wird empfohlen, den Amiodaronspiegel im Serum/Plasma regelmässig kontrollieren zu lassen. Der Goldstandard beim Therapeutic Drug Monitoring (TDM) ist die HPLC-MS Methode. Das MCL Labor in Niederwangen analysiert den Parameter Amiodaron bislang auf der HPLC- Methode. Um einen Wechsel der Methoden zu ermöglichen, wird zuerst ein Methodenvergleich durchgeführt. In dieser Arbeit wurden 74 Proben von Patienten, welche Amiodaron zu sich nehmen, getestet. Die Proben wurden zuerst auf der herkömmlichen HPLC Methode analysiert und dann auf der neuen HPLC-MS Methode. Mit diesen Resultaten wurde ein Methodenvergleich nach Passing & Bablok erstellt. Daraus ergibt sich, beim Amiodaron, eine Proportionalität von 1.25. Die Präzision liegt bei einem Variatonskoeffizient von <10% und die Richtigkeit beträgt zwischen 85-115%. 6.1. Korrelationsanalyse nach Passing & Bablok Wie in der Abb. 5.2 ersichtlich ist, eine Abweichung von der Regressionsgeraden (schwarze Linie) zur Identitätsgeraden (graue Linie). Idealerweise entspricht die Regressionsgerade der Identitätsgeraden, welche durch den 0-Punkt geht und einen Winkel von 45° aufzeigt. Der Achsenabschnitt der Korrelationsanalyse des Parameters Amiodaron beträgt 0.11, ideal wäre 0 und die Steigung beträgt 1.25, ideal wäre 1. Das MCL Labor lässt eine Abweichung von maximal 15% zu. Somit wird das Kriterium, mit einer nicht erklärbaren Abweichung von 25%, nicht erfüllt. Schlussfazit ist, dass die Methodenevaluation keinen Erfolg zeigt und der Parameter Amiodaron kann nicht auf dem HPLC-MS Gerät übernommen werden. Die Zielsetzung dieser Diplomarbeit ist die akkreditierungskonforme Evaluation des Herzmedikamentes Amiodaron von HPLC auf HPLC-MS. 1.Fragestellung: Korrelieren die Messergebnisse des Massenspektrometers mit der herkömmlichen Methode? - Beträgt die Differenz der Patientenergebnisse von HPLC und HPLC-MS weniger als 15%? - Ist die Präzision von weniger als 10% erfüllt? - Ist die Richtigkeit unter 15%? 2.1. Amiodaron Dieses Herzmedikament „ist in Form von Tabletten oder als Injektionslösung im Handel“ erhältlich. „Amiodaron ist ein jodiertes Benzofuran-Derivat, welches vom Kumarin Khellin abgeleitet ist.“ „Es hat eine sehr lange Halbwertszeit von 20 – 100 Tagen.“ Amiodaronhydrochlorid ist „ein weisses, feines, kristallines Pulver, das in Wasser sehr schwer löslich ist.“ 1 2.2. Desethylamiodaron „Desethylamiodaron ist ein Stickstoff desethyliertes Derivat des Amiodarons. Es ist der wirksamste Metabolit des Amiodaron.“ 2 2.3. Klinische Bedeutung •Pharmakokinetik: Nicht jedes Individuum hat denselben Stoffwechsel und Medikamentenmetabolismus. •Die Arzneimittelspiegel im Blut korrelieren besser mit der therapeutischen Wirkung, als mit der verabreichten Dosis. •Viele Pharmazeutika wirken, bei zu hoher Dosis, toxisch. 4.1. Material Um das Herzmedikament Amiodaron im Blut bestimmen zu können, wird Serum/Plasma verwendet. Ansonsten werden noch viele Reagenzien, Lösungen, Kalibratoren und Kontrollen verwendet, welche aus Platzgründen nicht alle aufgelistet werden. Natürlich wird auch ein HPLC Gerät und ein HPLC-MS Gerät benötigt. 4.2. Methodik Messprinzip HPLC (Hochdruck-Flüssigkeitschromatographie) Messprinzip MS (Massenspektrometrie) 4.3. Vorgehen Mit dem sogenannten „Tuning“ wird das HPLC-MS Gerät richtig eingestellt. (Einmalige Installation des Parameters) Danach werden die Proben, nach einer bestimmten Vorschrift, zur Messung vorbereitet. Zum Schluss werden die vorbereiteten Proben auf dem HPLC-MS Gerät analysiert und ausgewertet. Amiodaron HPLC ( mol/l) Amiodaron HPLC ( mol/l) 5.1. Methodenvergleich nach Passing & Bablok (Korrelationsanalyse) In der Abb. 5.1 sind alle 74 Patientenresultate erfasst. Diese Korrelationsanalyse stellt den Methodenvergleich der Amiodaron- bestimmung dar. Die Regressionsgerade nach Passing & Bablok beträgt y = 0.11 + 1.25x. Der schwarze Strich kennzeichnet die Regressionsgerade und die graue Linie stellt die Identitätsgerade dar. Abbildung 5.1 Korrelationsanalyse der Amiodaron- bestimmung mit den 74 Seren/Plasma 2. Einleitung 3. Ziele und Fragestellungen 4. Material, Methodik, Vorgehen 5. Ergebnisse / Resultate 6. Diskussion