Aislamiento de Microorganismos

“Año de la Promoción de la Industria Responsable y del Compromiso Climático”

Universidad NacionalFEDERICO VILLARREAL

Profesionales Formando Profesionales

Facultad de Ingeniería Geográfica, Ambiental y EcoturismoEscuela de Ingeniería Ambiental

Tema: ANÁLISIS DE AGUA: Coliformes

INTEGRANTES:

Juscamaita Santos Yenny Ana Arias muñoz Viviana

Lima 2014

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INTRODUCCIÓN

Debido a que existe en nuestro país el grave problema de

contaminación de ríos,lagos acuíferos y costas debido a que estos son

utilizados como depósito de todoslos desechos generados por las

actividades humanas. Estos microorganismos pueden sobrevivir al

tratamiento, por lo que su reúso p.ej., en riego agrícola, actividades

recreativas: Aguas de piscinas, baños de hidromasaje, aguas potables

naturales, actividades piscícolas y aguas marinas superficiales

(playas), representan un riesgo potencial a la salud pública.

La presencia y extensión de contaminación fecal es un factor

importante en la determinación de la calidad de un cuerpo de agua.

Las heces contienen una variedad de microorganismos y formas de

resistencia de los mismos, involucrando organismos patógenos, los

cuales son un riesgo para la salud pública al estar en contacto con el

ser humano.

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OBJETIVOS

Diferenciar los organismos coliformes totales de los

microorganismos coliformes fecales.

Aplicar las técnicas de cuantificación de microorganismos totales

y comparar con las técnicas de determinación de viables.

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MARCO TEÓRICOSon Organismos coliformes aquellos capaces de crecimiento aeróbico

ya sea 35 ó 37 ± 1°C en un medio de cultivo líquido lactosado con

producción de ácido y gas dentro de un periodo de 48 h.

Se encuentran en grandes cantidades en el tracto intestinal del

hombre y de los mamíferos y por lo tanto en sus heces y es fácil

diferenciar las especies coliformes de origen fecal de las que no lo

son.

La sobrevivencia de los coliformes en el agua es mayor que la de

cualquier bacteria es enteropatógena y su identificación es fácil y

confiable.

Por todo ello, el aspecto más importante del análisis bacteriológico del

agua es la determinación de coliformes que puede hacerse por el

método del número más probable (NMP) o por el método de filtración

de membrana (FM), el primero es el método oficial en nuestro país.

Existen otros métodos microbianos que son indicadores de otros tipos

de contaminación:

Bacterias mesófilas aerobias que reflejan la exposición de la muestra a

la contaminación en general, la existencia de condiciones favorables

para la multiplicación de microorganismos y la presencia de materia

orgánica. La determinación de bacterias mesófilas aerobias también

es rutinaria en el análisis bacteriológico del agua.

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Streptococcus de origen fecal, que son más abundantes que los

coliformes en el tracto intestinal y heces de los animales, pero

sobreviven menos que los coliformes porque prácticamente no se

multiplican en el agua, por ello su predominio en el agua indica

contaminación fecal proveniente de animales o contaminación

relativamente reciente.

La relación entre el número de coliformes y el número de

Streptococcus de origen fecal son: S. faecalis, S. faccium, S. durans,

S. equinus y S. bovis. Clostridium perfringens que también se

encuentra en la flora normal intestinal y, por ser esporulado, resiste la

presencia de sustancias tóxicas que se encuentran en aguas

residuales de industrias; por eso es indicador de contaminación fecal

en este tipo de aguas, en las que otros microorganismos no

sobreviven.

El método de la NPM es un método robusto por lo que puede aplicarse

en cualquier tipo de agua, aún aquellos que contienen gran cantidad

de materia orgánica.

Para la determinación del NMP de Coliformes Totales y Fecales en

este tipo de aguas, es necesario proceder a preparar diluciones

decimales de la muestra, debido a que se espera que la concentración

de coliformes sea superior en éstas que en un agua potable.

El número de diluciones varía mucho, dependiendo del origen de la

muestra a tratar. Por lo demás, para su análisis de procede en la

misma forma que para una muestra de agua potable.

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MATERIALES

Mechero Bunsen.

Cerillos ó encendedor

Muestra de Agua almacenada

9 tubos de 18 x 150 mm conteniendo 9 mL de agua de dilución estéril.

9 Pipetas de 1 mL estériles.

15 tubos de 18 x 150 mm con campana Durham.

Gradillas para tubos de 18 x 150 y de 13 x 100 mm.

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PROCEDIMIENTO

a) Preparación de los frascos

i) Lavar perfectamente el frasco, eliminando todo resto de jabón o detergente u otra sustancia.

b) Toma de la muestrai) Lavarse las manos y desinfectarlas con alcohol al 70%.

ii) Para la recolección de agua a partir de depósitos naturales y cuerpos receptores, retirar la cubierta de papel y sostener el frasco por la base e introducirlo en el agua 30cm.

iii) Destapar y llenar contra corriente o moviéndolo al frente, llenar hasta 2/3 del recipiente y tapar inmediatamente.

iv) En cada caso etiquetar el frasco y elaborar una hoja de registro de datos.

v) Llevar las muestras al laboratorio lo más pronto posible, para analizarlas antes de que transcurran 2 horas, o 5 horas si se transportan en hielo.

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vi) 1° Dia: Caldo Lauril Sulfato - (48 Horas)vii)3° Dia: Lectura y pasajesviii) 4° Dia: Lectura Pasajes y Resultados ix) 5° Dia: Lectura

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RESULTADO:

Para poder obtener resultados sobre el análisis de agua potable y agua subterrañea, se requieren de tres a cinco días mínimos.

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BIBLIOGRAFIA:

http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/P7_EnumeracionMicroorganismos_19616.pdf

http://www.upemor.edu.mx/labo/tarchivos/archivos/HEAL/practica_7.pdf

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RESULTADO DE LA COLUMNA DE WINOGRADSKY:

Se obtuvo como resultados la presencia de Ftoflagelados,

Compus, Larva de moscas.

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