서 론 양식 산업에서 널리 사용되는 대표적 항생제 tetracycline (Tc)은 Gram 음성 및 양성 세균, Rickettsia, Mycoplasma, Chlamydia, protozoa 등에 널리 작용하는 광범위 수산용 항 생제로서 어류 질병 치료에 있어 매우 중요한 위치를 차지하 고 있다. 구조적으로 acetate와 malonate가 환을 형성하여, 4 개의 연결된 환을 그 모핵으로 가지고 있으며, 세균 ribosome 의 30S subunit에 결합하여, aminoacyl tRNA가 50S subunit 의 acceptor site와 결합하는 것을 봉쇄하는 방법으로 단백질 합성을 억제시켜 정균 작용을 나타낸다(Roberts, 1996). 지난 수십 년간 이러한 Tc계 약물의 과도한 사용으로 인해, Tc 내성균이 많이 나타나게 되었는데, 주요 내성 유발 기작 으로 (1) 내재성 막 단백질에 의해 Tc를 energy 의존성 efflux 를 통해 밖으로 내보내어 ribosome에 축적되는 것을 막는 기 작(efflux pump)과 (2) 용해성 단백질에 의해 Tc가 붙지 못 하도록 ribosome을 변형시키는 기작(ribosomal protection), (3) 마지막으로 Tc를 불활성화 시키는 효소를 만들어 냄으로 써(enzymatic) 내성을 나타내는 세 가지가 있다(Chopra and Roberts, 2001). 내성 기작에 따라 Tc 내성 유전자인 tet gene 을 분류할 수 있는데, efflux에는 tet(A), tet(B), tet(C), tet(D), tet(E), tet(G), tet(H), tet(I), tet(J), tet(K), tet(L) 및 tet(Z), ri- bosomal protection에는 tet(M), tet(O), tet(Q), tet(S), tet(T) 및 tet(W) 등이 있으며, 효소적인 기능을 하는 것에는 tet(X) 가 있는 것으로 알려져 있다(Levy et al., 1999). 이러한 Tc 내 성 유전자는 아미노산 상동성이 80% 이상일 때 새로운 저 항성 유전자로서 정의되며 지금까지 약 43여종이 알려져 있 다(Levy et al., 1996; Chopra and Roberts, 2001; Roberts, 238 수입산 관상어로부터 분리된 tetracycline 내성 Aeromonas spp.에 tet (M) 및 tet (G) 유전자의 특성 분석 박신후 . 전려진 1 . 조기택 2 . 진지웅 3 . 정현도 3 * Characterization of tet(M) and tet(G) Genes among Tetracycline- resistant Aeromonas spp. Isolated from Imported Ornamental Fishes Future Aquaculture Research Center, National Fisheries Research & Development Institute, Jeju 690-192, Korea 1 School of Marine Biomedical Science, College of Ocean Science, Jeju National University, Jeju 690-756, Korea 2 Gyeonggi Province Freshwater Fisheries Research Institute, Yangpyeong 476-841, Korea 3 Department of Aquatic Life Medicine, Pukyong National University, Busan 608-737, Korea In this study, the molecular structures of tet(M) and tet(G) carried by tetracycline (Tc) resistant bacteria in intestinal microflora from the imported ornamental fish were characterized and compared with each other depend on the imported countries. Of the total isolates, approximately 8.9% of the Ent-lac+ (lactose fermentative bacteria on coliform media) Tc resistant isolates in fish from three different countries , Singapore, Taiwan and Brazil, were appeared to contain tet(M). Three representative isolates of different countries, Aeromonas spp. JSM-1 (Singapore), JTM-1 (Taiwan) and JBM-1 (Brazil), were isolated and analyzed the molecular structures of tet(M) gene. Interestingly, partial sequence of tet(M) genes (1099 bp) in JBM-1 (Brazil) showed 99.5% homology with the tet(M) found in the Vibrio spp. RV16 iso- late, obtained from marine fish in Korea and known to carry Tn1545 parent type of tet(M). In contrast, tet(M) gene in JSM-1 and JTM-1 showed mosaic structure of Tn1545 and Tn916, and 100% homology with each other. It may suggest the presence of various characteristics in terms of tet(M) gene structure. The determined sequence of the tet(G) from Aeromonas spp. JSG-1 and JBG-1 isolated from Singapore and Indonesia ornamental fish respectively showed similar nucleotide sequence homology but revealed a few nucleotide changes in comparison with the sequence of the prototype tet(G) gene (S52437 in GenBank). Key words: Tetracycline, Ornamental fish, Tet(M), Tet(G) Shin Hoo Park, Lyu Jin Jun 1 , Ki Taek Cho 2 , Ji Woong Jin 3 and Hyun Do Jeong 3 * 국립수산과학원 미래양식연구센터, 1 제주대학교 해양생명과학과, 2 경기도 민물고기연구소, 3 부경대학교 수산생명의학과 Kor J Fish Aquat Sci 45(3), 238-245 DOI : http: //dx.doi.org /10.5657/KFAS.2012.0238 한수지 45(3), 238-245, 2012 *Corresponding author: [email protected]