UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA Alumno: Gisella Denisse López Tinoco Curso: Quinto Bioquimica y Farmacia Paralelo: "B" Profesor: Bioq. Farm. Carlos García Grupo N°1 Fecha de Elaboración de la Práctica: Martes 30 de junio del 2015 Fecha de Presentación de la Práctica: Martes 14 de julio del 2015 PRÁCTICA N° 5 TÍTULO DE LA PRÁCTICA: INTOXICACIÓN POR CETONA - Animal de Experimentación: Rata wistar. - Tóxico: acetona - Vía de Administración: Vía Intraperitoneal - Volumen suministrado: 10 ml TIEMPOS - Inicio de la práctica: 08:08 am - Deceso del animal: 08:26 am - Diseccion del animal: 8:30 am - Final de la práctica: 10:30 am SINTOMAS - Vomito - Convulsiones - Vértigo - Cefaleas - Nauseas TODO ES TOXICO, NADA ES TOXICO, TODO DEPENDE DE LA DOSIS 1 10
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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
Alumno: Gisella Denisse López Tinoco
Curso: Quinto Bioquimica y Farmacia Paralelo: "B"
Profesor: Bioq. Farm. Carlos García
Grupo N°1
Fecha de Elaboración de la Práctica: Martes 30 de junio del 2015
Fecha de Presentación de la Práctica: Martes 14 de julio del 2015
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PROCEDIMIENTO:
1. Preparar el mesón de trabajo y con ello materiales y sustancias, además de
implementos de bioseguridad.
2. Preparar la solución de acetona, colocar en una jeringuilla.
3. Administrar 8 ml de solución de formaldehido por vía intraperitoneal al animal de
experimentación
4. Colocarlo en la panema y observar las manifestaciones antes de su deceso..
5. Atar el cobayo a una tabla de disección y procedemos a rasurarle toda la parte
abdominal donde se hará la incisión.
6. Seguido abrir el abdomen para colocar las vísceras en un vaso de precipitación,
recogiendo todo.
7. Preparar la solución de ácido tartárico en agua destilada y agregar las vísceras.
8. Agregar las 50 perlas de vidrio, y llevar a destilación por 20 minutos a fuego lento.
9. Una vez finalizada la destilación, realizar las reacciones de identificación con la
solución madre.
10. Desarmar y lavar el equipo de destilación.
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO:
Después de destilar el material de investigación, en el destilado se
realizan las reacciones de reconocimiento.
1. Reacción de Nessler.- La acetona reacciona con el reactivo yodo-mercúrico en
medio alcalino un precipitado blanco, formado por un producto de adición.
2. Reacción de Yodoformo.- Al calentar una pequeña cantidad de la muestra
con una solución yodo-yodurada en medio alcalino con KOH se produce
yodoformo reconocible por su olor particular y su color amarillo.
I2 + 2KOH INA + IOK + H2O
CI3
CH3 CI3
CO + 3IOK CO + 3KOH
CH3 CH3
CO + KOH CHI3 + CH3-COOK
CH3
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3. Con nitroprusiato de Sodio.- Con este reactivo, al que se le añade solución de
carbonato de sodio o NaOH, orina una coloración amarilla-rojiza que al agregarle
ácido acético, dará un color violeta.
4. Reacción de Fritsh.- Se mezcla la solución problema con un volumen igual de
ácido clorhídrico concentrado que contiene 5% de ramnosa, se calienta en baño
de vapor. Aparece un color rojo, apreciable aún en concentración de 0.01 g de
acetona por ml de solución.
5. Reacción de Frommer.- La muestra problema, al ser condensada con
aldehído salicílico en medio alcalino, produce un color rojo que permite su
determinación colorimétrica o fotométrica por su gran sensibilidad y
especificidad.
6. Con la 2:4 Dinitrofenilhidracina: Disuelva una ó dos gotas del compuesto
que se va investigar en 2 ml de etanol y añada a 3ml del reactivo de 2,4-
dinitrofenilhidracina. Agite vigorosamente y si no se forma inmediatamente Un
precipitado de color amarillo, anaranjado o rojo, deje reposar la solución
durante 15 minutos.
Reactivo. El reactivo se prepara disolviendo 3 g de 2,4-dinitrofenilhidracina en 15
ml de ácido sulfúrico concentrado. Entonces se añade esta solución, a 20 ml de agua
destilada y 70 ml de etanol al 95%. Se mezcla perfectamente la solución y se filtra.
Comentarios: La mayoría de las cetonas producen dinitrofelhidrazonas que son
sólidos insolubles. Al principio, el precipitado puede ser aceitoso y al reposar,
volverse cristalino. Sin embargo, algunas cetonas dan dinitrofenilhidrazonas que son
aceites.
GRÁFICOS:
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1 Preparar la rata wistar 2 inyectar 10 ml de acetona
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7 destilar gota a gota 8 Solución madre
5 colocar las vísceras en un vaso 6 cortar lo más
3 observar sintomatología 4 realizar disección
GRÁFICOS DE REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN EL DESTILADO
REACCIÓN DE NESSLER
Reacción positivo no característico (formación de precipitado blanco)
nos dio un precipitado naranja
REACCIÓN DE YODOFORMO
Reacción positivo característico (se produce yodoformo
reconocible por su olor particular y su color amarillo.)
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DESPUÉS ANTES
DESPUÉS ANTES
CON NITROPRUSIATO DE SODIO:
Reacción positivo característico (coloración violeta al agregar acido)
REACCIÓN DE FRITSH:
Reacción positivo no característico (aparición de color rojo)
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DESPUÉS
DESPUÉS ANTES
ANTES
REACCIÓN DE FROMMER:
Reacción positivo no característico (formación de coloración rojiza)
CON LA 2:4 DINITROFENILHIDRACINA
Reacción positivo característico (color amarillo)
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DESPUÉS
ANTES
DESPUÉS ANTES
OBSERVACIONES:
Se observó la presencia de convulsiones en el animal de experimentación.
Así también dificultad en respirar y cefaleas
Al realizar la disección de la rata se observó inflamación de los intestinos.
CONCLUSIÓN
Se concluye manifestando que se logró cumplir los objetivos de esta práctica, es decir se observó las manifestaciones que presenta la rata wistar ante la intoxicación por acetona, se controló el tiempo en el cual se dio el deceso del animal siendo rapida lo que nos da a entender que es altamente toxico, se determinó que la cetona está presente en las vísceras del animal y la cual fue causante de su muerte mediante reconocimiento en medios biológicos.
RECOMENDACIONES
La acetona es un toxico volátil, por ello se recomienda usar implementos de
bioseguridad.
Tener cuidado con las sustancias de uso restringido o peligroso, para evitar
accidentes en el laboratorio.
Preparar correctamente las soluciones en las concentraciones indicadas.
Se debe desechar los restos de la rata en su correcto lugar para evitar daños a la
sociedad.
GLOSARIO:
Anestésico: son fármacos universalmente utilizados por multitud de profesionales
de salud(anestesiólogos, cirujanos, enfermeros, odontólogos, podólogos,
dermatólogos, internistas, médicos veterinarios,etc.) a diario que, a
concentraciones suficientes, evitan temporalmente la sensibilidad en el lugar del
cuerpo de su administración.
Fosfogeno: el fosgeno es un gas venenoso. Si es enfriado y presurizado, el gas de
fosgeno puede ser convertido en líquido, de forma que pueda ser transportado y
almacenado. Cuando se libera fosgeno líquido, éste se transforma rápidamente en
gas que permanece cerca del suelo y se propaga con rapidez (es más denso que el
aire y por esa razón se expande hacia áreas más bajas). Al fosgeno también se le
conoce por su denominación militar.
Hipoxia: es un estado en el cual el cuerpo completo (hipoxia generalizada), o una
región del cuerpo (hipoxia de piel loca), se ven privado del suministro adecuado de
oxígeno.
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CUESTIONARIO: ¿Qué es la acetona? La acetona o cuerpos cetónicos son sustancias creadas por el hígado cuando la glucosa se encuentra en niveles muy bajos y que a grandes dosis resultan tóxicas. El organismo halla en ellas una fuente alternativa de energía hasta que los niveles de azúcares vuelven a la normalidad.
¿Cómo se reconoce en el niño? El aliento de un niño con acetona tiene un olor particular a manzanas ácidas, tipo reineta, especialmente a primera hora de la mañana. A veces el niño con acetona también se encuentra muy cansado y vomita. Si no estás segura, lo mejor es que utilices unas tiras reactivas que se venden en las farmacias sin receta médica, que te confirmarán o no la presencia de acetona en su orina. ¿Por qué se produce la acetona? Porque las necesidades de glucosa del niño son entre dos y cuatro veces superiores a las de un adulto, mientras que sus reservas son mucho más limitadas. Así, sucede que ante largos periodos de ayuno, provocados por algún trastorno digestivo, por alguna molestia que le impida comer con normalidad o por una infección, el niño es capaz de generar azúcar a través de las grasas (y las grasas generan acetona) para que su organismo tenga suficiente energía y pueda hacer frente a una posible crisis de hipoglucemia o bajada del azúcar en sangre. ¿Cómo puedo tratar la acetona del niño en casa? Ofrece al niño bebidas azucaradas (agua con azúcar, zumos...) o un refresco de cola, si tiene edad para tomarlo. Si lo tolera bien, dale un yogur con azúcar o unas galletas, para mantener los niveles de glucosa hasta la siguiente comida. No des al niño agua con bicarbonato o leche condensada, estos remedios tradicionales no le ayudarán a dejar de producir acetona. ¿Qué hago si no para de vomitar? Ésta es una situación muy común en niños con acetona, porque a partir de ciertos niveles, los cuerpos cetónicos provocan vómitos por sí solos. Estos vómitos impiden que el niño coma o beba y, por tanto, termine con la situación de ayuno, que es la causante del aumento de acetona. La solución es ofrecerle el zumo en pequeñas dosis, cucharaditas de entre 5 y 15 cc cada 5-10 minutos, para evitar que cantidades mayores provoquen vómitos y la situación empeore.
BIBLIOGRAFÍA:
Matute, M. cloroformo disponible en emergencias urbanas y rurales