-
การเปรยีบเทียบปริมาณ 15-HETE
ที่หลั่งจากเม็ดเลือดขาวภายหลังกระตุนดวยแอสไพรินในผูปวยที่มีภาวะ
Aspirin intolerance
รวมกับริดสีดวงจมูก และ/หรือหอบหืด กับกลุมคนปกติ
Aspirin triggered 15-HETE generation in peripheral blood
leukocytes in aspirin intolerance patients with nasal polyp and/or
asthma compare with
normal subjects
นายแพทย ไตรภูม ิสุวรรณเวช
ภาควิชาโสต นาสิก ลาริงซวิทยา คณะแพทยศาสตรศิริราชพยาบาล
มหาวิทยาลัยมหิดล
-
การเปรยีบเทียบปริมาณ 15-HETE
ที่หลั่งจากเม็ดเลือดขาวภายหลังกระตุนดวยแอสไพรินในผูปวยที่มีภาวะ
Aspirin intolerance
รวมกับริดสีดวงจมูก และ/หรือหอบหืด กับกลุมคนปกติ
Aspirin triggered 15-HETE generation in peripheral blood
leukocytes in aspirin intolerance patients with nasal polyp and/or
asthma compare with
normal subjects
โดย
นายแพทย ไตรภูม ิสุวรรณเวช
การวิจัยนี้ถือเปนสวนหนึ่งของการศึกษาและการฝกอบรมตามหลักสูตร
เพ่ือวุฒิบัตรแสดงความรูความชํานาญในการประกอบวิชาชีพเวชกรรม
สาขาโสต ศอ นาสิก ของแพทยสภา พุทธศักราช 2551
ลิขสิทธิ์ของสถาบันฝกอบรม ภาควิชาโสต นาสิก ลาริงซวิทยา
คณะแพทยศาสตรศิริราชพยาบาล มหาวิทยาลัยมหิดล
-
คํารับรองจากสถานฝกอบรม
ขาพเจาขอรับรองวา รายงานฉบับนีเ้ปนผลงานของ นายแพทย ไตรภูมิ
สุวรรณเวช
ที่ไดทําการวิจยัขณะรับการฝกอบรมตามหลักสูตรการอบรมแพทยประจําบานและแพทยใชทนุสาขา
โสต ศอ นาสิกวทิยา ภาควิชาโสต นาสิก ลาริงซวิทยา
คณะแพทยศาสตรศิริราชพยาบาล มหาวทิยาลัยมหิดล ระหวางป พ.ศ. 2549-2552
จริง
ลงชื่อ…………………………….…………. อาจารยที่ปรึกษาหลัก
(ศ.พญ. ฉวีวรรณ บุนนาค)
ลงชื่อ…………………………….…………. อาจารยที่ปรึกษารวม (ผศ.นพ. พงศกร
ตันติลิปกร)
ลงชื่อ…………………………….…………. อาจารยที่ปรึกษารวม (ดร. นิทัศน
สุขรุง)
ลงชื่อ…………………………….…………. (รศ.นพ. โชคชยั เมธีไตรรัตน)
หัวหนาภาควชิาโสต นาสกิ ลาริงซ วิทยา คณะแพทยศาสตรศิริราชพยาบาล
มหาวทิยาลยัมหดิล
-
กิตติกรรมประกาศ ขอขอบพระคุณศาสตราจารยเกียรติคุณ แพทยหญิง ฉวีวรรณ
บนุนาค, ผูชวยศาสตราจารย นาย
แพทย พงศกร ตันติลิปกร ที่ชวยใหคาํปรึกษา แนะนํา
และสนับสนนุในการทําวิจัยตลอดมา ขอขอบพระคุณศาสตราจารย ดร.วนัเพ็ญ
ชัยคําภา และอาจารย ดร. นิทัศน สุขรุง ภาควิชาปรสติ
วิทยา ที่อนุญาตใหใชหองปฏิบัติการ
ใหคําแนะนําและอนุคราะหอุปกรณที่ใชในการทดสอบ
รวมถึงเจาหนาทีทุ่กคนที่ชวยเหลือในหองปฏิบัติการ
ขอขอบพระคุณ ผศ. ดร.จุฬาลักษณ โกมลตรี ที่ใหคําปรึกษา
และวิเคราะหผลเชงิสถิติ ขอขอบพระคุณหัวหนาภาควิชา, คณาจารย,
แพทยประจําบาน, พยาบาล และเจาหนาที่ฝายเวช
ระเบียนในภาควิชาโสต นาสิก ลาริงซวทิยา คณะแพทยศาสตรศิริราชพยาบาล
มหาวทิยาลยัมหดิล รวมทัง้ผูปวยที่ไดใหความรวมมืออยางดียิง่
จนงานวิจยันี้สําเร็จลุลวงไปดวยด ี
นายแพทย ไตรภูมิ สุวรรณเวช แพทยประจําบาน ภาควิชาโสต นาสิก
ลาริงซวิทยา
คณะแพทยศาสตรศิริราชพยาบาล
-
บทคัดยอภาษาไทย
ชื่อเรื่อง การเปรียบเทยีบปริมาณ 15-hydroxyeicosatetraenoic acid
(15-HETE)
ทีห่ลั่งจากเม็ดเลือดขาวภายหลงักระตุนดวยแอสไพรนิในผูปวยที่มภีาวะ
Aspirin intolerance รวมกับริดสีดวงจมูก และ/หรือหอบหืด กับกลุมคนปกต
ิ
ชื่อผูวิจัย นายแพทย ไตรภูมิ สุวรรณเวช อาจารยผูควบคุม ศาสตราจารย
แพทยหญิง ฉวีวรรณ บุนนาค ผูชวยศาสตราจารย นายแพทย พงศกร ตนัติลิปกร
อาจารย ดร. นทิัศน สุขรุง บทนํา
ริดสีดวงจมกูเปนกอนเนื้องอกในโพรงจมกูชนิดที่พบไดบอย
สาเหตุและพยาธิกาํเนิดของ
ริดสีดวงจมูกยงัไมเปนทีท่ราบแนชัด
สวนหนึง่พบความสัมพันธระหวางริดสีดวงจมกู หอบหืดรวมกับภาวะ Aspirin
intolerance โดยทีแ่อสไพริน จะยับยั้ง Cyclooxygenase pathway
มีผลทาํใหการทาํงานของ Lipoxygenase pathway เดนขึ้น
และไดผลผลิตตัวแรก คือ 15-HETE กอนที่เปลีย่นแปลงเปนสาร leukotrienes
ซึ่งมีผลทําใหเกิดอาการทางจมูก และทางเดินหายใจในผูปวยที่แพแอสไพรินได
ปจจุบันสามารถวัดปริมาณ 15-HETE
จากเม็ดเลือดขาวที่มชีีวิตภายในหลอดทดลอง ดวยวธิี ELISA
จึงอาจนํามาใชในการทดสอบผูปวยที่สงสัยวาจะมีความไวตอแอสไพรินได
วัตถุประสงค เปรียบเทียบระดับสาร 15-HETE ที่หลัง่จากเม็ดเลือดขาว
หลงัการกระตุนดวย Aspirin
ภายในหลอดทดลอง ระหวางกลุมผูปวย ASA triad กับกลุมคนปกต
ิรูปแบบและวิธีการศึกษา Cross-sectional with control study
ผลการศึกษา สรุปผลการศกึษา คําสําคัญ Aspirin intolerance, ASA triad,
Samter triad, 15-HETE, Nasal polyp, Asthma,
Leukotriene
-
Abstract Title Aspirin triggered 15-HETE generation in
peripheral blood leukocytes in aspirin
intolerance patients with nasal polyp and/or asthma compare with
normal subjects Name of researchers Triphoom Suwanwech, M.D.
Chaweewan Bunnag, M.D. (Consultant) Pongsakorn Tantilipikorn, M.D.
(Consultant) Nitat Sookrung, PhD. (Consultant) Objectives Study
design Cross-sectional with control study Methods Results
Conclusion Keyword Aspirin intolerance, ASA triad, Samter triad,
15-HETE, Nasal polyp, Asthma,
Leukotriene
-
สารบัญ หนา คํารับรอง...…………………………………………………………………….…………………..3
กิตติกรรมประกาศ……………………………………………………....………………………...4
บทคัดยอภาษาไทย…………………………………………………….…………….…………....5
บทคัดยอภาษาอังกฤษ…………………………………………………….…….………………...6
สารบัญเรื่อง………………………….………………………………………..……….……...…...7
สารบัญรูปและตาราง……………………………………….....……….………………….………8
หลักการและเหตุผล………………………………………….………..….………….…………….9
การทบทวนวรรณกรรม……………………………………………………..…….………………11
วัตถุประสงคการวิจัย………………………………………………………….…….……………12
ระเบียบวิธกีารศึกษา………………………………………………………………..……………13
ผลการศึกษา…………………………………………………………...…………….…………..16
อภิปรายผล…………………………………………………………………………….…………21
สรุปผลการศึกษา…………………………………………………………………………..……..23
เอกสารอางอิง…………………………………..………………………………...……………...24
-
สารบัญรปูและตาราง หนา รูปที่ 1 ผลของยาแอสไพรินตอ Arachidonic
acid metabolism……………………….……..10 รูปที่ 2
แสดงชั้นของเม็ดเลือดขาวแยกจากสวนประกอบอื่นของเลือดหลังการปนเหวีย่ง…......13
ตารางที่ 1
ขอมูลพื้นฐานผูเขารวมการวิจยั………………………………………………….....15
ตารางที ่2 แสดงปริมาณ 15-HETE
เฉลี่ยของประชากรแตละกลุม……………….……..…….16
ตารางที ่3 แสดงยา NSAIDs ที่มี cross reaction
กับยาแอสไพริน……………….…………..18
-
หลักการและเหตผุลที่มาของการวิจยั
ริดสีดวงจมูกเปนกอนเนื้องอกในโพรงจมกูชนิดทีพ่บไดบอยที่สุด
พบไดทุกเชื้อชาติ ทกุชนชัน้
แตสาเหตุและพยาธิกาํเนิดของริดสีดวงจมูกยงัไมเปนทีท่ราบแนชัด
เชื่อวามีหลายสาเหตุรวมกัน สวนหนึง่พบความสัมพันธระหวางริดสีดวงจมกู
หอบหดืรวมกับภาวะไวตอแอสไพริน (aspirin intolerance) เรียกกนัทั่วไปวา
Samter triad หรือ ASA triad
Acetylic salicylic acid (aspirin, ASA)
เปนสารที่พบไดในชีวิตประจาํวนั ไดแก ในอาหาร พืชผักและผลไม เชน สม
แอปเปล กลวย พริก มะเขือเทศ14 รวมถงึยารกัษาโรค ซึ่งมีปริมาณของ
salicylate ที่แตกตางกนั สําหรับอาการทางคลินิกของ Aspirin
intolerance มีได 3 แบบ คือ bronchospasm, urticaria หรือ angioedema,
rhinitis โดยสวนใหญของ aspirin intolerance ในผูปวยริดสีดวงจมูก
มักจะเปนแบบ bronchospasm1
ในผูปวยริดสดีวงจมกู พบอบุัติการณของ aspirin intolerance
ประมาณรอยละ 22.5 ซึ่งในจํานวนนี้ ไดจากประวัตกิารแพยารอยละ 14.2
และจากการทํา aspirin challenge test อีกรอยละ 8.31 จากการศึกษาของ
Schiavino และคณะ9 พบวาผูที่ม ี aspirin intolerance
พบรวมกับริดสีดวงจมูก รอยละ 11.4 ผูทีเ่ปนหอบหืดรวมกับมีภาวะ aspirin
intolerance พบรอยละ 16.4 กลุมผูปวยASA triad มกัเร่ิมจากมีอาการของ
perennial rhinitis ในชวงอายุ 20 ถึง 30 ป ตอมาจึงเริ่มมีอาการหอบหืด
และมีความไวตอแอสไพรินเกิดขึ้น โดยริดสีดวงจมูกมักจะตรวจพบภายใน 5 ป
และพบวารอยละ 30 มีริดสีดวงจมูกกอนที่จะมีอาการหอบหืด11,12
ผูปวยกลุมนี ้จะพบวามกีารอักเสบของไซนัสและริดสีดวงจมูกที่รุนแรง
และมีการกลบัเปนซ้าํภายหลังการรักษาดวยการผาตัดไดบอย
โดยระยะเวลาการกลับเปนซ้าํของริดสีดวงจมูก จะสั้นกวาในคนที่ไมม
ีaspirin intolerance
กลไกการเกิด aspirin intolerance
เชื่อกันวาเกี่ยวของกับความไมสมดุลของ arachidonic acid metabolism
โดยที่แอสไพรินจะยับยั้ง cyclooxygenase pathway
มผีลทําใหการทาํงานของ lipoxygenase pathway เดนขึ้นมา
จงึมผีลผลิตตัวแรก คือ 15-hydroxyeicosatetraenoic acid (15-HETE)
มากขึ้น ซึ่งตอมาจะเปลี่ยนแปลงเปนสารกลุม leukotrienes
ซึ่งมีฤทธิท์ําใหเกิดหลอดลมตีบที่มีความแรง
ทาํใหผูปวยที่ความไวตอแอสไพรินเกิดอาการหอบหืดได
แผนภูมิแสดงกลไกการเกิด aspirin intolerance แสดงไวในรูปที ่1
-
รูปที่ 1 ผลของแอสไพรินตอ Arachidonic acid metabolism
สวนใหญแลวการวนิิจฉัยภาวะ aspirin intolerance มักจะอาศัยประวตัิ
acute asthma attack
เมื่อไดรับแอสไพริน หรือยากลุม NSAIDs, มี perennial rhinitis
และมีริดสีดวงจมูก
หากประวัติอาการไมชัดเจนจําเปนตองใชการตรวจทดสอบชวยยืนยันความไวตอแอสไพริน
ดวยวธิีทาํ oral aspirin challenge ซึ่งเปนการทดสอบภายในกาย (in vivo)
ถือเปน gold standard ในการวินิจฉัย แตตองทําในสถานทีท่ี่มีความพรอม
เพราะมีความเสี่ยงของการเกิด asthmatic attack
และการแพยาแอสไพรินชนิดรุนแรงได
จึงไดมีความพยายามที่จะคนควาหาการทดสอบโดยวิธนีอกกาย (in vitro) แทน
ที่ผานมามีรายงานการทดสอบโดยวดัปริมาณสาร leukotrienes
ที่ออกมาในสารคัดหลั่งตาง ๆ และจากเซลลเม็ดเลือด ภายหลงัการทาํ oral
aspirin challenge หรือ nasal provocation test เชน bronchoalveolar
lavage fluid (Sladeck K, et al), nasal secretion (Picado C, et al),
urine (Kumlin M and Christie PE, et al) และ peripheral blood cell
(D. Schafer,et al and G. Ce Elick, et al) โดย leukotrienes ซึ่งเปน
metabolites product ของ 15-HETE ที่เกดิขึ้นจาก lipoxygenase pathway
นั้นมหีลายชนิด หากวัดปริมาณการเกดิขึ้นของ 15-HETE
ซึ่งเปนสารตั้งตนของ leukotrienes
ภายหลังการกระตุนดวยแอสไพรินจึงนาจะมีความเหมาะสมกวา
แตทั้งหมดที่กลาวมานัน้ก็ยังตองมีการทํา oral หรือ nasal challenge
ซึ่งเปนวธิีการทดสอบในกายเชนกนั
-
ทบทวนวรรณกรรม
ในป พ.ศ. 2465 Widal และคณะ15
ไดอธิบายลักษณะทางคลินิกของผูปวยที่มีความไวตอแอสไพริน
รวมกับอาการหอบหืด และริดสีดวงจมกู ซึง่นําไปสูการรักษาโดยการทาํ
aspirin desensitization อีกหลายปตอมา Samter และ Beers16
ไดอธิบายลกัษณะโรคที่มกีารเปลี่ยนแปลงของเยื่อบุผิว
ของผูปวยที่ไวตอแอสไพริน โดยใหชื่อวา Samter triad หรือ ASA triad
และเปนที่นยิมใชเรียกตอกันมาจนถึงปจจุบัน การวินิจฉัยผูปวย ASA triad
มักอาศยัจากประวัติ ซึ่งมีความเชื่อถือไดไมแนนอน
การทดสอบเพื่อยนืยนัความไวตอแอสไพริน โดยทาํ oral aspirin challenge
ที่ถือเปนมาตรฐานนั้นมีความเสีย่งสูง ปจจุบันจงึมีผูศึกษาโดยวัดปริมาณ
15-HETE และ leukotrienes ซึ่งเปนผลผลิตจาก lipoxygenase pathway
จากเม็ดเลือดขาวที่มีชีวิตที่ไดสัมผัสกับแอสไพรินภายในหลอดทดลองดวยวธิี
ELISA2,4
และเสนอวานาจะนํามาใชในการทดสอบผูปวยที่สงสัยวามคีวามไวตอแอสไพรินได
การศึกษาของ D. Schafer พบวามีการเปลี่ยนแปลงของ eicosanoids
ที่หลัง่จากเม็ดเลือดขาวภายในหลอดทดลอง ในระหวางการทาํ bronchial
provocation ดวย lysine-aspirin ของผูปวยหอบหืดรวมกับความไวตอแอสไพริน
(aspirin intolerant asthmatics) ผลการทดลองพบวา มีการหลัง่ของ
peptidoleukotrienes และ PGE2 เพิ่มข้ึนอยางมีนยัสําคัญ
ของผูปวยหอบหืดรวมกับความไวตอแอสไพริน เทียบกับกลุมคนปกต ิ
จากการศึกษาของ M.L. Kowalski
ทําการเปรียบเทยีบกลุมผูที่มีความไวตอแอสไพริน
กลุมผูที่ไมไวตอแอสไพริน (aspirin tolerant) และกลุมคนปกติ
ทีม่ีอาการหอบหืดและไซนัสอักเสบ
โดยวธิีเจาะเลือดและนําเม็ดเลือดขาวมากระตุนดวย lysine-aspirin
ที่ระดับความเขมขนตางกัน เพื่อวัดปริมาณ 15-HETE ที่เกิดขึ้น
พบวาในกลุมผูที่มีภาวะไวตอแอสไพริน มีปริมาณของ 15-HETE
สูงจากระดับเดิมกอนการกระตุนประมาณ 4 เทา
สวนในกลุมผูที่ไมไวตอแอสไพรินและกลุมคนปกตินัน้
ไมพบการเปลีย่นแปลงของระดับ 15-HETE
ดังนัน้ถาพบวาระดับสาร 15-HETE ที่หลัง่จากเม็ดเลือดขาว
หลงัการกระตุนดวยแอสไพรินภายในหลอดทดลอง
ระหวางกลุมผูที่มอีาการริดสีดวงจมูก หอบหืด และความไวตอแอสไพริน
กับกลุมคนปกติ มีความแตกตางกนัอยางมนีัยสาํคัญ
นาจะชวยในการวนิิจฉัยผูปวยที่สงสยั aspirin intolerance ได
ทั้งยังชวยลดความเสี่ยงของการเกิด asthmatic attack
และการแพแอสไพรินชนิดรุนแรง ถาจําเปนตองทําการทดสอบโดยการทํา aspirin
challenge
-
รูปแบบและวิธีการศึกษา
การศึกษานี้เปนการศึกษาแบบ Cross-sectional with control study
ประชากรที่เขารับการศึกษาแบงเปน 2 กลุม คือ
กลุมผูที่ไดรับการวินจิฉัยวามีภาวะ Aspirin intolerance ริดสีดวงจมูก
และ/หรือ หอบหืด กับกลุมคนปกต ิ
เกณฑการคัดเลือกประชากร (Inclusion criteria) • กลุมที ่1
– ผูที่ไดรับการวนิิจฉัยวามีภาวะ Aspirin intolerance (Diagnosed
by a clinically documented respiratory/skin/systemic response after
ingestion of ASA) ริดสีดวงจมกู และ/หรือ หอบหืด
– ในชวง 4 สัปดาห ไมมีอาการของ severe asthmatic attack และใชยา
Inhaled anti-inflammatory drugs, long-acting หรือ short-acting β2
agonist ตามปกติ
• กลุมที ่2 – ผูที่มีสุขภาพสมบูรณ (Control: Patients with
Aspirin tolerance having no problem in
taking ASA and/or NSAIDs) เกณฑการคัดออกประชากร (Exclusion
criteria)
- ไดรับ systemic corticosteroid, antihistamine, chromoglycic
acid - กําลังรักษาดวยวธิี Immunotherapy - ไดรับยา aspirin
หรือยากลุม NSAIDs ใน 2 สัปดาห - มีโรคประจําตัวอื่น เชน โรคเบาหวาน,
ความดนัโลหิตสูง, โรคที่เกีย่วของกับความผิดปกติ ของเม็ดเลือด
จํานวนประชากรในแตละกลุม
เนื่องจากวัตถปุระสงคของการศึกษาเพื่อเปรียบเทียบระดับสาร 15-HETE
ในหลอดทดลองจาก
การแยกเม็ดเลือดขาว และกระตุนดวย aspirin ระหวางกลุมผูที่มีอาการ
ASA triad กับกลุมคนปกติ และการ ศึกษาในอดีต (Aspirin-triggered
15-HETE generation in peripheral blood leukocytes is a specific and
sensitive Aspirin-Sensitive Patients Identification Test (ASPITest)
ของ Kowalski และคณะ2 ) ในคนที่มี aspirin intolerance 43 ราย
และคนปกติ 17 ราย พบวามีคาเฉลี่ย (SD) ของระดับ15-HETE 420 (500) และ
10 (30) ตามลําดับ ดังนั้นการศึกษาในกลุมที่ม ีaspirin intolerance
และ กลุมคนปกต ิ กลุมละ 15 ราย จะทาํใหพบความแตกตางในคาเฉลี่ยของ
15-HETE เทากับ 90 (420 vs.10) เมื่อ SD = 75, 2-sided type I error =
5% และ power = 80% ดังรายละเอียดการคํานวณ คือ
-
n /กลุม = 2 (zα/2 + zβ)σ 2 µ1- µ2 เมื่อ σ = Common standard
deviation ของคา15-HETE ในกลุม Aspirin intolerance และกลุมคนปกติ =
400 µ1- µ2 = ความแตกตางในคาเฉลี่ยของ 15-HETE ระหวางกลุม Aspirin
intolerance และกลุมคนปกติ = 420-10 = 410 α = โอกาสที่จะเกิด type I
error = 0.05 (2-sided), z0.025 = 1.96
β = โอกาสที่จะเกิด type II error = 0.2, z0.2 = 0.842 ดังนั้น n
/กลุม = 2 [ (1.96+0.842)400 ]2 = 14.9 = 15 คน
วิธีการศึกษา การเตรยีมประชากร
- ผูทีไ่ดรับการวินิจฉัยวามีความไวตอแอสไพริน
ซึ่งไดจากประวัติที่บนัทกึในเวชระเบียนผูปวย วาไวตอแอสไพริน หรือยา
NSAIDs รวมกับไดรับการวนิิจฉัยวามีริดสีดวงจมกู และ/หรือ หอบหดื
ที่เขารับการตรวจรักษาที่โรงพยาบาลศิริราช จํานวน 15 คน
และผูที่มีสุขภาพสมบูรณ จํานวน 15 คน โดยสมัครใจ
และลงชื่อในหนังสือแสดง เจตนายนิยอมเขารวมการศึกษา
การเตรยีมเม็ดเลือดขาว -
เก็บตัวอยางเลือดทางหลอดเลือดดําจากอาสาสมัคร 10 ml ใน BD Vacutainer®
K2 EDTA
(BD Franklin Lakes NJ, USA) เก็บที่อุณหภูมิหอง
นําสงหองปฏิบัติการใน 2 ชั่วโมง - ใสตัวอยางเลือดใน……………tube
แยกเซลลเม็ดเลือดขาวดวยเครื่องปนเหวี่ยง
(Multifuge® Sorvall Legand Mach 1.6 centrifuge, Germany) ที่
1500 RCF (Relative Centrifugal Force) เปนระยะเวลา 20 นาที
จะไดชั้นของเม็ดเลือดขาวแยกจากสวนประกอบอื่นของเลือด
รูปที่ 2
แสดงชั้นของเม็ดเลือดขาวแยกจากสวนประกอบอื่นของเลือดหลังการปนเหวีย่ง
410
-
- ใช micropipette ดูดชั้นเม็ดเลือดขาวออกมาใส…… tube เติมดวย
phosphate buffered saline (PBS) นับเซลลเม็ดเลือดขาวที่มีชวีิต
ดวยวธิี Trypan blue exclusion test (exclusion test >90%) บน
Neubauer chamber โดยเซลลเม็ดเลือดขาวที่ตายแลวจะติดสีน้ําเงนิของ
trypan blue จากนั้นเตรียมสารละลายแขวนเซลลเม็ดเลอืดขาวที่มีชวีติ ดวย
PBS ใหไดจํานวนเซลลเม็ดเลือดขาวประมาณ 3x106 cell/ml
- ใช micropipette ดูดสารละลายแขวนเซลลเม็ดเลือดขาว ใสใน tube แยก
ผสมดวยสารละลายแอสไพริน (lysine-aspirin, Bayer®, AG, Leverkusen,
Germany) ใหไดความเขมขน 200 µM ภายในตูปลอดเชื้อ (ABS1200-EU/A, Astec
Microflow, Advanced biosafety cabinate Class II, Bioquell, U.K. )
ดูดสารละลายทัง้หมด ปริมาตร……..ml ใสลงใน plate เลี้ยงเซลล (96 well
cell culture, Costar® 3799, USA) เพือ่ Incubate ในตูเลี้ยงเซลล (CO2
uniterm 170®, Uniequip) ที ่5% CO2 อุณหภูมิ 37 ºc เปนระยะเวลา 60
นาท ี
- หลังจาก ครบ 60 นาท ี ใช micropipette
ดูดสารละลายแขวนเซลลเม็ดเลือดขาวที่กระตุนแอสไพรินทั้งหมด ใส tube
มาปนตกตะกอนที ่8000 rpm ที่อุณหภูม ิ4 ºc เปนระยะเวลานาน 10 นาท ี
จากนั้นดูด supernatant เกบ็ที่ -70 ºc
การวัดปริมาณ 15-HETE - ตรวจวัดระดับ 15-HETE ดวย 15(S)-HETE
Enzyme Immunoassay Kit ® (Assay Designs,
Inc. U.S.A.) ตามคูมือการ ปฏิบัติการ ซึ่งมีความไว (sensitivity)
ตอการตรวจพบปริมาณ 15-HETE 69.2 pg/ml และไมมี cross-reactivity กับ
eicosanoids ตัวอ่ืน
วิธวีัดผลการวิจัย
การเปรียบเทยีบคา 15-HETE ระหวางกลุมที่ม ีAspirin intolerance
กับกลุมคนปกติ ใชการทดสอบ Unpaired t-test หรือ Mann-Whitney U test
วิเคราะหผลทางสถิตทิั้งหมดใชโปรแกรม SPSS version 11.5
-
ผลการศึกษา
ผูที่ไดรับการศึกษาทั้งหมดจาํนวน 30 คน
โดยกลุมผูที่ไดรับการวินจิฉัยวามีภาวะ Aspirin intolerance
รวมกับริดสีดวงจมูก และ/หรือ หอบหืด จํานวน 15 คน อายุเฉล่ีย…..ป
แบงเปน ผูทีไ่ดรับการวนิิจฉัยวามีภาวะ Aspirin intolerance
รวมกับมีริดสีดวงจมกู และหอบหืด จํานวน X คน
ผูที่ไดรับการวินิจฉัยวามีภาวะ Aspirin intolerance
รวมกบัมีริดสีดวงจมูก (ไมมีหอบหืด ) จํานวน Y คน
และผูที่ไดรับการวินิจฉัยวามภีาวะ Aspirin intolerance รวมกับหอบหดื
(ไมพบริดสดีวงจมกู) จํานวน Z คน ซึ่งลักษณะอาการไวตอแอสไพริน
สวนใหญเปนแบบมีอาการทางระบบหายใจหรือหลอดลมตีบ ( /15) รอยละ…..
เปนผืน่ ลมพิษ บวม ( /15) รอยละ….. และม ีanaphylaxis ( /15) รอยละ…..
และกลุมคนปกติที่มีสุขภาพสมบูรณ จํานวน 15 คน อายุเฉล่ีย…..ป
ดังตารางที่ 1
ตารางที่ 1 ขอมูลลักษณะประชากร
Group ASA triad Normal N 15 15
Age (years) Sex (F/M) F/M F/M
Aspirin intolerant Characteristic • Respiratory symptom •
Urticaria/rash • Anaphylaxis
ผลการวัดปริมาณ 15-HETE
ทีห่ลั่งจากเมด็เลือดขาวภายหลงักระตุนดวยแอสไพริน
พบวาในกลุมผูที่ไดรับการวนิิจฉัยริดสีดวงจมูก หอบหืดรวมกับภาวะ
Aspirin intolerance มีปริมาณ 15-HETE โดยเฉลี่ย…A..
ในจาํนวนนี้แบงเปน ผูที่ไดรับการวนิิจฉัยวามีภาวะ Aspirin intolerance
รวมกับมีริดสีดวงจมูก และหอบหืด มีปริมาณ 15-HETE โดยเฉลี่ย..X..
ผูที่ไดรับการวนิจิฉัยวามีภาวะ Aspirin intolerance
รวมกบัมีริดสีดวงจมูก (ไมมีหอบหืด ) มีปริมาณ 15-HETE โดยเฉลี่ย… Y…
และผูที่ไดรับการวินิจฉัยวามภีาวะ Aspirin intolerance รวมกับหอบหืด
(ไมพบริดสีดวงจมกู) มีปริมาณ 15-HETE โดยเฉลีย่…Z..
โดยไมพบความแตกตางอยางมนีัยสําคัญ ของปริมาณ 15-HETE เฉล่ีย
ในแตละกลุมที่มี ภาวะ Aspirin intolerance
สวนในกลุมคนปกตทิี่มสุีขภาพสมบูรณ มีปริมาณ 15-HETE โดยเฉลีย่…B..
เมือ่เปรียบเทียบปริมาณ 15-HETE เฉล่ีย ของกลุมที่มีภาวะ Aspirin
intolerance สูงกวากลุมคนปกต ิถึง…C….เทา
อยางมีความแตกตางอยางมีนัยสาํคัญ? ?
-
ตารางที่ 2 แสดงปริมาณ 15-HETE เฉล่ียของประชากรแตละกลุม
Group Mean 15‐HETE (pg) P value Normal subjects Aspirin
intolerance + Nasal polyp + Asthma Aspirin intolerance + Asthma
Aspirin intolerance + Nasal polyp
-
อภิปรายผล
ผูปวยที่มีความไวตอแอสไพริน อาจแบงไดเปน 2 กลุม คือ กลุมที ่1
เมื่อไดรับแอสไพริน จะมีอาการทางระบบทางเดินหายใจ ไดแก หอบหืด,
เยื่อบุโพรงจมูกอักเสบ, ริดสีดวงจมูก กลุมที ่2 มีอาการลมพิษ,
ผ่ืนคัน, angioedema และผ่ืนแพยา เชน multiform erythema, fixed
exanthema, Stevens-Johnson’s syndrome, Lyell’s syndrome
จากการศกึษานี้ พบวาผูที่ไดรับการวนิิจฉัยวามีภาวะ aspirin
intolerance จะมีคาเฉลี่ยของปริมาณ 15-HETE สูงกวากลุมคนปกติ
เนือ่งจากชุดทดสอบ 15(S)-HETE Enzyme Immunoassay Kit® นั้นวัดปริมาณ
15-HETE ซึ่งเปนผลผลิตจาก Lipoxygenase pathway
ที่สรางจากเม็ดเลือดขาวของผูที่มีความไมสมดุลของ arachidonic acid
metabolism หรือมีความไวตอแอสไพริน แมวาจะมีหรือไมมีริดสีดวงจมูก
และหอบหืดกต็าม การศึกษาของ Kowalski2
ทําการเปรียบเทียบกลุมผูที่มีความไวตอแอสไพริน
กบักลุมผูที่ไมไวตอแอสไพริน
พบวากลุมผูที่มีความไวตอแอสไพรินมีปริมาณของ 15-HETE
สูงขึ้นจากระดับเดิมกอนการกระตุนประมาณ 4 เทา
สวนในกลุมผูที่ไมไวตอแอสไพรินและกลุมคนปกตินัน้
ไมพบการเปลีย่นแปลงของระดับ 15-HETE แตการศึกษาของ Pierzchaska
และคณะ7 ไมพบวามีความแตกตางของคาเฉลี่ย leukotrienes
ที่หลั่งจากเม็ดเลือดขาวภายหลังกระตุนดวยแอสไพริน
ในกลุมหอบหืดที่ไวตอแอสไพรินกับกลุมหอบหืดที่ไมไวตอแอสไพริน
การศึกษาของ MAY และคณะ5 พบวาผูที่มีความไวตอแอสไพริน
เมื่อวัดปริมาณของ leukotrienes ภายหลงักระตุนเม็ดเลือดขาวดวยแอสไพรนิ
จะมีความไวสูงกวาการกระตุนเม็ดเลือดขาวดวยสวนผสมของยา indomethacin
และ diclofenac
ขอบงชี้ในการทาํ aspirin desensitization
ในผูที่มคีวามไวตอแอสไพริน ไดแก
ผูปวยที่มีริดสีดวงจมูกที่รุนแรงและกลับเปนซ้ําภายหลงัการรักษาดวยวธิีการผาตัด,
มีอาการหอบหืดที่เกิดจากความไวตอแอสไพริน
หรือมีผลขางเคียงจากการใชยาสเตรอยด
ผูที่มีความไวตอแอสไพริน อาจมี cross reaction กับยาในกลุม NSAIDs
ได แมวายาในกลุมนี้มีฤทธิ์ในการยับยั้ง cyclooxygenase แตกตางกนั
ดังนัน้ผูที่มีความไวตอแอสไพรินจึงควรเลือกหรือหลีกเลี่ยงที่จะใชยาในกลุม
NSAIDs ดวย
-
ตารางที่ 3 แสดงยา NSAIDs ที่มี cross reaction กับยาแอสไพริน
Inhibitor Pathways NSAIDs
Predominant COX‐1 and COX‐2 inhibitors (there can also be
reactions at the time of first administration of the drug with low
doses)
Piroxicam, Indomethacin, Sulindac, Tolmetin, Diclofenac,
Naproxen, Naproxen sodium, Ibuprofen, Fenoprofen, Ketoprofen,
Flubiprofen, Mefenamic acid, Meclofenamate, Ketorolac, Etodolac,
Diflunisal, Oxyphenbutazone, Phenylbutazone
Poor COX‐1 and COX‐2 inhibitors (a small percentage of patients
with aspirin sensitivity cross reacts with high doses of these
drugs)
Acetaminophen, Salsalate
Poor COX‐1 and COX‐2 inhibitors and minor inhibitors of COX‐1
(there can be a cross reaction at high doses, but less serious)
Nimesulide, Meloxicam
Relative inhibitors of COX‐2 (there are no controlled clinical
trials but these drugs should not cross react)
Celecoxib, Rofecoxib
ดัดแปลงจาก Szezcklik และคณะ17
-
สรุปผลการศึกษา
ผูปวยที่มีความไวตอแอสไพริน รวมกับหอบหืด และริดสีดวงจมกู
มีลักษณะอาการทางจมกูที่รุนแรงและกลบัเปนซ้าํภายหลังการรักษาไดบอย
การวนิิจฉัยมกัไดจากประวัติและตรวจรางกาย การทดสอบ oral aspirin
challenge เพื่อยนืยันความไวตอแอสไพริน ถือเปนวิธมีาตรฐาน
นาํไปสูการพยากรณโรคและวางแผนการรักษา ตลอดจนการทํา aspirin
desensitization ในผูปวย
แตมีความเสีย่งการศึกษานี้แสดงวาการทดสอบโดยวัดปริมาณ 15-HETE
ที่หลัง่จากเม็ดเลือดขาวมคีวามแมนยาํในการวินิจฉัยผูปวยที่มีความไวตอแอสไพริน
(ผลดังนี)้ จึงเปนวิธทีี่ลดความเสี่ยงจากการทดสอบโดยการทาํ oral
aspirin challenge
และสามารถใชชวยในการวินิจฉัยผูปวยที่สงสัยวาจะมีความไวตอแอสไพรินกอนที่โรคจะเกิดขึ้น
หรือผูที่มีอาการทางจมูกที่รุนแรงและกลับเปนซ้ําบอยภายหลงัการรักษาได
-
เอกสารอางอิง
1. พีรพันธ เจรญิชาศรี. ริดสีดวงจมกู. ใน ฉวีวรรณ บุนนาค
บรรณาธิการ. หวัดเรื้อรัง. กรุงเทพฯ: โรงพิมพเรือนแกว การพิมพ; พ.ศ.
2539; 307-22.
2. Kowalski ML, Ptasinska A, Jedrzejczak M, Bienkiewicz B,
Cieslak M et al. Aspirin-triggered 15-HETE generation in peripheral
blood leukocytes is a specific and sensitive aspirin-sensitive
patients identification test (ASPITest). Allergy 2005; 60:
1139-45.
3. Ambulatorio di Allergologia, Clinica San Carlo, Paderno
Dugnano. Oral aspirin challenges in patients with a history of
intolerance to single non-steroidal anti-inflammatory drugs.
Clinical and experimental allergy 2001; 56: 688-92.
4. Celik G, Bavbek S, Misirligicl Z, Melli M. Release of
cysteinyl leukotrienes with aspirin stimulation and the effect of
prostaglandin E2 on this release from peripheral blood leucocytes
in aspirin-induced asthmatic patients. Clinical and experimental
allergy 2001; 31: 1615-22.
5. May A, Webber A, Gall H, Kaufmann R, Zollner TM. Means of
increasing sensitivity of an in vitro diagnostic test for aspirin
intolerance. Clinical and experimental allergy 1999; 29:
1402-11.
6. Lebel B, Messaad D, Kvedariene V, Rongier M, Bousquet J,
Demoly P. Cysteinyl-leukotriene release test (CAST) in the
diagnosis of immediate drug reaction. Allergy 2001; 56: 688-92.
7. Pierzchalska M, Mastalerz L, Sanak M, Zazula M, Szczeklik A.
A moderate and unspecific release of cysteinyl leukotrienes by
aspirin from peripheral blood leucocytes precludes its value for
aspirin sensitivity testing in asthma. Clinical and experimental
allergy 2000; 30: 1785-91.
8. Schäfer D, Schmid M, Göde UC, Baenkler HW, Dynamics of
eicosanoid in peripheral blood cells during bronchial, in:
Aspirin-intolerantasthmatics. Eur Respir J 1999; 13: 638–46.
9. Schiavino D, Nucera E, Milani A, Del Ninno M, Buenomo A, Sun
J, Patriarca G: The aspirin disease. Thorax 2000; 55: 66–9.
10. A. Szczeklik, E. NizÊ ankowska, Natural history of
aspirin-induced asthma, Eur Respir J 2000; 16: 432-436.
11. K. Morwood, D. Gillis, W. Smith, Aspirin-sensitive asthma,
Internal medicine journal 2005; 35: 240-246. 12. Jaime L Robinson,
MD, Susan Griest, MPH; Timothy L Smith, MD MPH, Impact of aspirin
Intolerance on outcomes of sinus surgery, Otolaryngology-head and
neck surgery 2006; 135.
-
13. Pfaar O, Klimek L. Aspirin desensitization in aspirin
intolerance: update on current standards and recent improvements,
Curr Opin Allerg Clin Immunol 2006; 6: 161-166.
14. Hanns-Wolf Baenkler, Salictlate intolerance pathophysiology,
clinical spectrum, diagnosis and treatment, Dtsch Arztebl Int 2008;
105: 137-42. 15. Widal MF, Abrami P, Lenmoyez J. Anaphylaxie et
idiosyncrasie. Presse Med 1922; 30: 189-192.
16. Samter M, Beers RF. Intolerance to aspirin. Clinical studies
and consideration of its pathogenesis. Ann Intern Med 1968; 68:
975-983. 17. Szezcklik A, Stevenson DD. Aspirin-induced asthma:
advances in pathogenesis and management. J Allergy Clin Immunol
1999; 104: 5-13.
-
เอกสารชี้แจงผูเขารวมการวิจัย (Participant Information Sheet)
ในเอกสารนี้อาจมีขอความที่ทานอานแลวยังไมเขาใจ
โปรดสอบถามหัวหนาโครงการวิจัย หรือผูแทน
ใหชวยอธิบายจนกวาจะเขาใจดี
ทานอาจจะขอเอกสารนี้กลับไปอานที่บานเพื่อปรึกษาหารือกับญาติพี่นอง
เพื่อนสนิท แพทยประจําตัวของทาน หรือแพทยทานอื่น
เพื่อชวยในการตัดสินใจเขารวมการวิจัย
ชื่อโครงการ(ภาษาไทย) การเปรียบเทียบปริมาณ 15-HETE
ที่หล่ังจากเม็ดเลือดขาวภายหลังกระตุนดวย
Aspirin ในผูปวยริดสีดวงจมูก หอบหืด รวมกับภาวะ Aspirin
intolerance กับกลุมคนปกติ
ชื่อผูวิจัย นายแพทยไตรภูมิ สุวรรณเวช สถานที่ทํางานภาควิชาโสต
นาสิก ลาริงซวิทยา โรงพยาบาลศิริราช หมายเลขโทรศัพทที่ติดตอได
ในเวลา
ราชการ โทรศัพท 02-4198040 และนอกเวลาราชการ โทรศัพท
0819150986
ผูใหทุน คณะแพทยศาสตรศิริราชพยาบาล ริดสีดวงจมูกเปนปญหาทาง หู คอ
จมูก ที่พบไดเปนประจํา เกิดจากการบวมของเยื่อบุโพรงจมูกยื่นออกมา
เปน
กอนเนื้องอกในโพรงจมูกชนิดที่พบไดบอยที่สุด พบไดทุกเชื้อชาติ
สาเหตุและพยาธิกําเนิดของริดสีดวงจมูกยังไมเปนที่ทราบแนชัด
เชื่อวามีหลายสาเหตุรวมกัน สวนหนึ่งพบความสัมพันธระหวางริดสีดวงจมูก
หอบหืด รวมกับภาวะไวตอยาแอสไพริน ซึ่งปจจุบันการวินิจฉัยที่
แนนอนตองอาศัยการทดสอบโดยการรับประทานยาแอสไพริน
ซึ่งมีความเสี่ยงของการเกิดหืดหอบ และแพยาแอสไพริน ชนิดรุนแรงได
ถาสามารถใชการตรวจเลือดวัดระดับ 15-HETE(สารส่ือกลางที่เซลลสรางขึ้น)
ชวยในการวินิจฉัยโรคได ก็จะไมเกิดความเสี่ยงดังกลาว
โครงการวิจัยนี้ทําขึ้นเพื่อ เปรียบเทียบระดับสาร 15-HETE
ที่หล่ังจากเม็ดเลือดขาว หลังการกระตุนดวยยาแอสไพริน Aspirin
ภายในหลอดทดลอง ระหวางกลุมผูที่มีอาการริดสีดวงจมูก หอบหืด
และภาวะไวตอยาแอสไพริน กับกลุมคนปกติ
ซึ่งจะมีประโยชนที่คาดวาจะไดรับคือ ทราบคาเฉล่ียของระดับสาร 15-HETE
ในคนไทยปกติ กับกลุมผูที่มีอาการริดสีดวงจมูก หอบหืด
และภาวะไวตอยาแอสไพริน
ซึ่งความแตกตางจะชวยวินิจฉัยผูปวยที่สงสัยภาวะไวตอยาแอสไพรินไดแลว
การหลีกเลี่ยงการใชยา Aspirin หรือยากลุม NSAIDs และการรักษาผูปวย เชน
การทํา ASA desensitization ในกรณีที่มีขอบงชี้
อาจปองกันอาการของโรคหืด และการกลับเปนซ้ําของริดสีดวงจมูกได
ผูที่มีอาการริดสีดวงจมูก หอบหืด และมีประวัติไวตอยาแอสไพริน
นักศึกษาแพทย หรือ
บุคคลทั่วไปที่มีความสนใจเขารวมโครงการขอเชิญใหเขารวมการวิจัยนี้
จะมีผูเขารวมการวิจัยนี้ทั้งส้ินประมาณ 30 คน
ระยะเวลาที่จะทําวิจัยทั้งส้ินประมาณ 1 ป
ระยะเวลาที่จะทําวิจัยทั้งส้ิน มิถุนายน 2550 – พฤษภาคม 2551
เมื่อทานเขารวมการวิจัยแลว แพทยผูวิจัยจะเก็บขอมูล 1. เก็บขอมูล
จากผูเขารวมวิจัย ซึ่งประกอบดวย Demographic data เชน อายุ, เพศ,
โรคประจําตัว 2. เจาะเลือดจากผูเขารวมทําการวิจัย 1 คร้ัง ปริมาณ 1
ชอนชา โดยไมตองงดน้ํา งดอาหารกอนเจาะเลือด
-
ความเสี่ยงที่อาจจะเกิดขึ้นเมื่อเขารวมการวิจัย คือ อาการเจ็บ
รอยชํ้าจากการเจาะเลือดตรวจ ซึ่งไมมีอันตราย และสามารถหายไดเอง
ผูเขารวมวิจัยครั้งนี้ไมตองเสียคาใชจายใดๆเพิ่มเติมจากคาใชจายในการตรวจรักษาตามปกติ
หากทานมีขอของใจใดๆ เกี่ยวกับโครงการวิจัย ทานจะสามารถติดตอกับ
นพ.ไตรภูมิ สุวรรณเวช ไดตาม
หมายเลขโทรศัพท 0819150986
หากมีขอมูลเพิ่มเติมทั้งดานประโยชนและโทษที่เกี่ยวของกับการวิจัยนี้
ผูวิจัยจะแจงใหทราบโดยรวดเร็วไม
ปดบัง ขอมูลสวนตัวของผูเขารวมการวิจัยจะถูกเก็บรักษาไว
ไมเปดเผยตอสาธารณะเปนรายบุคคล แตจะรายงาน
ผลการวิจัยเปนขอมูลสวนรวม ขอมูลของผูเขารวมการวิจัยเปน
รายบุคคลอาจมีคณะบุคคลบางกลุมเขามาตรวจสอบได เชน ผูใหทุนวิจัย ,
สถาบัน หรือองคกรของรัฐที่มี
หนาที่ตรวจสอบ , คณะกรรมการจริยธรรมฯ เปนตน
ผูเขารวมการวิจัยมีสิทธิ์ถอนตัวออกจากโครงการวิจัยเมื่อใดก็ได
โดยไมตองแจงใหทราบลวงหนา และการไม
เขารวมการวิจัยหรือถอนตัวออกจากโครงการวิจัยนี้ไมมีผลกระทบตอการบริการและการรักษาที่สมควรจะไดรับแตประการใด
หากทานไดรับการปฏิบัติที่ไมตรงตามที่ไดระบุไวในเอกสารชี้แจงนี้
ทานจะสามารถแจงใหประธานคณะกรรมการจริยธรรมฯ ทราบไดที่
สํานักงานคณะกรรมการจริยธรรมการวิจัยในคน ตึกอดุลยเดชวิกรม ชั้น 5
ร.พ.ศิริราช เบอรโทร (02)419-7000 ตอ 6405
ขาพเจาไดอานรายละเอียดในเอกสารนี้ครบถวนแลว
ลงชื่อ....................................................../
วันที่..................... ( )
-
วันที่................. เดือน....................
พ.ศ................ ขาพเจา
........................................................
อายุ..........ป อาศัยอยู
บานเลขที่.....................................................
ถนน ............................................. ตําบล
....................................... อําเภ
อ.........................................................................
จังหวัด .................................................
รหัสไปรษณีย .........................................
โทรศัพท.................................................
ขอแสดงเจตนายินยอมเขารวมโครงการวิจัย (1) เร่ือง
การเปรียบเทียบปริมาณ 15-HETE
ที่หล่ังจากเม็ดเลือดขาวภายหลังกระตุนดวย Aspirin ในผูปวยริดสีดวงจมูก
หอบหืด รวมกับภาวะ Aspirin intolerance กับกลุมคนปกติ
โดยขาพเจาไดรับทราบรายละเอียดเกี่ยวกับที่มาและจุดมุงหมายในการทําวิจัยรายละเอียดขั้นตอนตางๆ
ที่จะตองปฏิบัติหรือไดรับการปฏิบัติ
ประโยชนที่คาดวาจะไดรับของการวิจัยและความเสี่ยงที่อาจจะเกิดขั้นจากการเขารวมการวิจัย
โดยไดอานขอความที่มีรายละเอียดอยูในเอกสารชี้แจงผูเขารวมการวิจัยโดยตลอด
อีกทั้งยังไดรับคําอธิบายและตอบขอสงสัยจากหัวหนาโครงการวิจัยเปนที่เรียบรอยแลว
ขาพเจาจึงสมัครใจเขารวมในโครงการวิจัยนี้ (2) :
หากขาพเจามีขอของใจเกี่ยวกับขั้นตอนของการวิจัย
หรือหากเกิดผลขางเคียงที่ไมพึงประสงคจากการวิจัย
ขึ้นกับขาพเจา (*)ขาพเจาจะสามารถติดตอกับ นายแพทยไตรภูมิ สุวรรณเวช
ที่โรงพยาบาลศิริราช โทรศัพท 0819150986 ได 24 ชม.
หากขาพเจา(*)
ไดรับการปฏิบัติไมตรงตามที่ไดระบุไวในเอกสารชี้แจงผูเขารวมการวิจัย
ขาพเจาจะสามารถติดตอกับประธานคณะกรรมการจริยธรรมการวิจัยในคน
หรือผูแทน ไดที่ สํานักงานคณะกรรมการจริยธรรมการวิจัยในคน
ตึกอดุลยเดชวิกรม ชั้น 5 ร.พ.ศิริราช โทร (02) 419-7000 ตอ 6405
ขาพเจาไดทราบถึงสิทธิ์ที่ขาพเจาจะไดรับขอมูลเพิ่มเติมทั้งทางดานประโยชนและโทษจากการเขารวมการวิจัย
และสามารถถอนตัวหรืองดเขารวมการวิจัยไดทุกเมื่อ
โดยจะไมมีผลกระทบตอการบริการและการรักษาพยาบาลที่ขาพเจาจะไดรับตอไปในอนาคต
และยินยอมใหผูวิจัยใชขอมูลสวนตัวของขาพเจาที่ไดรับจากการวิจัย
แตจะไมเผยแพรตอสาธารณะเปนรายบุคคล
โดยจะนําเสนอเปนขอมูลโดยรวมจากการวิจัยเทานั้น
ขาพเจาไดเขาใจขอความในเอกสารชี้แจงผูเขารวมการวิจัย
และหนังสือแสดงเจตนายินยอมนี้โดยตลอดแลว จึงลงลายมือชื่อไว
ลงชื่อ.....................................................ผูเขารวมการวิจัย/ผูแทนโดยชอบธรรม
(......................................................)
วันที่................................................
ลงชื่อ....................................................ผูใหขอมูลและขอความยินยอม/หัวหนาโครงการวิจัย
(......................................................)
วันที่................................................
หนังสือแสดงเจตนายนิยอมเขารวม
-
Code No. ..................... วันที่.......................
โครงการวิจยัเรื่อง การเปรยีบเทียบปริมาณ 15-HETE
ที่หลัง่จากเม็ดเลือดขาวภายหลังกระตุน
ดวย Aspirin ในผูปวยริดสดีวงจมกู หอบหืด รวมกับภาวะ Aspirin
intolerance กับกลุมคนปกต ิ อายุ............ป เ พศ ชาย หญิง อาชีพ
_______________ ประวัติแพยา _______________ โรค
ประจําตัว..............................................................................................................................................................................................................................................................................................................
ยาที่รับประทานเปนประจํา..............................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
สําหรับเจาหนาทีท่ี่ทาํวิจยั ระดับ15-HETE
………...........................................................................................................,,,.........................
Note.
..................................................................................................................................................
แบบฟอรมการเก็บขอมูล