Page 1
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
ปญหาพเศษ
การศกษาฤทธการตานอนมลอสระของสารสกดหยาบพอลแซกคาไรดจาก
เสนใยของเชอเหดตบเตา
STUDY ON ANTIOXIDANT ACTIVITY OF CRUDE POLYSACCHARIDES
FROM MYCELIA OF BOLETUS COLOSSUS HEIM.
นางสาวพรพมล กจวชา
โครงการจดตงภาควชาเคม คณะศลปศาสตรและวทยาศาสตร มหาวทยาลยเกษตรศาสตร
พ.ศ. 2558
Page 2
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
ใบรบรองปญหาพเศษ
โครงการจดตงภาควชาเคม คณะศลปศาสตรและวทยาศาสตร มหาวทยาลยเกษตรศาสตร
วทยาศาสตรบณฑต
ปรญญา
เคม สาขา
โครงการจดตงภาควชาเคม ภาควชา
เรอง การศกษาฤทธการตานอนมลอสระของสารสกดหยาบพอลแซกคาไรดจากเสนใยของเชอเหดตบเตา
Study on Antioxidant Activity of Crude Polysaccharides from Mycelia of Boletus colossus Heim.
นามผวจย นางสาวพรพมล กจวชา
ไดพจารณาเหนชอบโดย
ประธานกรรมการ ( อาจารยวนเพญ เหลาศรไพบลย, Ph.D. )
กรรมการ ( อาจารยนงพงา จรสโสภณ, ปร.ด.. )
โครงการจดตงภาควชาเคม คณะศลปศาสตรและวทยาศาสตร มหาวทยาลยเกษตรศาสตรรบรองแลว
( ผชวยศาสตราจารยฐตยา แซปง, Ph.D. )
ประธานคณะกรรมการดาเนนงานโครงการจดตงภาควชาเคม วนท เดอน พ.ศ.
Page 3
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
ปญหาพเศษ
เรอง
การศกษาฤทธการตานอนมลอสระของสารสกดหยาบพอลแซกคาไรดจากเสนใยของเชอเหดตบเตา
Study on Antioxidant Activity of Crude Polysaccharides from Mycelia of Boletus colossus Heim.
โดย
นางสาวพรพมล กจวชา
เสนอ
โครงการจดตงภาควชาเคมคณะศลปศาสตรและวทยาศาสตรมหาวทยาลยเกษตรศาสตร เพอความสมบรณแหงปรญญาบตรวทยาศาสตรบณฑต (เคม)
พ.ศ. 2558
Page 4
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
พรพมล กจวชา 2558: การศกษาฤทธการตานอนมลอสระของสารสกดหยาบพอลแซกคา
ไรดจากเสนใยของเชอเหดตบเตาปรญญาวทยาศาสตรบณฑต (เคม) โครงการจดตง
ภาควชาเคม ประธานกรรมการทปรกษา: อาจารยวนเพญ เหลาศรไพบลย, Ph.D. 56
หนา
สรปเนอหาของปญหาพเศษ วาทาอะไร มจดประสงคอะไร ดวยวธอะไร ไดผลอยางไร ใน 1 ยอหนา (ไมควรมรป ตาราง หรอการอางอง)
การศกษาสารสกดหยาบจากเสนใยเชอเหดตบเตาเพอใชเปนสารตานอนมลอสระ โดยสกดเสนใยเชอเหดตบเตาดวยโดยการสกดเยนดวยวธการหมกและการสกดรอนดวยวธการกลนแบบไหลกลบจากนนนามาตกตะกอนพอลแซกคาไรดดวย 95% เอทานอล สารสกดทไดแยกไดเปน 4 ประเภท คอ พอลแซกคาไรดสกดเยน นาสกดเยน พอลแซกคาไรดสกดรอน และนาสกดรอน จากนนทดสอบความสามารถในการตานอนมลอสระโดยวธ DPPH radical scavenging capacity และวธ Reducing power ผลการทดสอบพบวาจากนาสกดรอนมความสามารถในการตานอนมลอสระไดดทสด (IC50 = 85.59 μg/mL) และมความสามารถในการเปนตวรดวซไดดทสด จากการวเคราะหโครงสรางสารโดยวธฟเรยรทรานฟอรมอนฟราเรดสเปกโทรสโกป พบวา สารสกดทง 4 สวน เปนสารประกอบพอลแซกคาไรด ทมทง α-configuration และ β-configuration ซงจากผลการทดลองนสรปไดวาสารสกดจากเสนใยเชอเหดตบเตามศกยภาพในการใชเปนสารตานอนมลอสระจากธรรมชาตได
/ /
ลายมอชอนสต ลายมอชอประธานกรรมการ
Page 5
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
Pornpimol Kitwicha 2015: Study on antioxidant activity of crude Polysaccharides from Mycelia of Boletus Colossus Heim., Bachelor of Science (Chemistry), Department of Chemistry. Special Problem Advisor: Ms. Wanpen Laosripaiboon, Ph.D. 56 p.
This study was to investigate the inhibitory effect of crude extracts from Boletus colossus Heim. on antioxidant activity. The mycelia of Boletus colossus Heim. was extracted with deionized water. Two methods of extractions: cold extraction by maceration and hot extraction by reflux were carried out. Polysaccharides were precipitated from the aqueous solution by 95% ethanol. There were four fractions of crude extracts: cold water polysaccharide extract, cold water extract, hot water polysaccharide extract and hot water extract. DPPH radical scavenging capacity assay and the reducing power assay had been used to evaluate the antioxidant activities. Hot water extract showed the highest activity of DPPH inhibition (with IC 5085.59 μg/mL)and reducing power. Analysis of these extracts by FT-IR showed the spectra of polysaccharide compounds in α and β-
configurations. Therefore, these results indicated that all crude extracts from B. colossum Heim. mycelia could potentially be used as natural antioxidants.
/ /
Student’s signature Advisor’s signature
Page 6
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
กตตกรรมประกาศ
ขอขอบพระคณอาจารยวนเพญ เหลาศรไพบลย อาจารยทปรกษาปญหาพเศษทกรณาให
ความร คาแนะนา คาปรกษา ตลอดระยะเวลาในการทาปญหาพเศษครงน และขอบพระคณ
คณะกรรมการปญหาพเศษและคณาจารยทกทานทใหคาแนะนาในการแกไขรายงานปญหาพเศษ
ขอขอบคณเจาหนาทโครงการจดตงภาควชาเคม คณะศลปศาสตรและวทยาศาสตรทกทาน
ทใหความชวยเหลอในเรองของอปกรณการทดลอง สารเคม และเครองมอตางๆ
ขอขอบคณเพอนๆ ทกทานทใหความชวยเหลอ ใหคาปรกษา และคอยเปนกาลงใจใหในการ
การทาปญหาพเศษ
ทายสดขอขอบคณบดา มารดา ทคอยใหกาลงใจ และชวยเหลอสนบสนนในการศกษาเปน
อยางดตลอดมา
พรพมล กจวชา
พฤษภาคม2558
Page 7
i
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
สารบญ
หนา
สารบญ i
สารบญตาราง ii
สารบญภาพ iii
คาอธบายสญลกษณ คายอ และอกษรยอทใช iv
คานา 1
วตถประสงค 3
การตรวจเอกสาร 4
งานวจยทเกยวของ 4
อปกรณและวธการ 6
อปกรณและสารเคม 6
วธการ 7
สถานทและระยะเวลาทาการวจย 9
ผลและวจารณผล 11
การสกดสารจากเชอเหดตบเตา 11
การหาปรมาณสารประกอบฟนอลกทงหมด 14
สรปและขอเสนอแนะ 17
เอกสารและสงอางอง 18
ภาคผนวก 19
ภาคผนวก ก) การเตรยมสารเคม 20
ประวตการศกษา และการทางาน 23
Page 8
ii
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
สารบญตาราง
หนา
ตารางท 1 สวนตางๆทสกดไดจากเหดตบเตา 12
ตารางท 2 เปอรเซนตการยบยงอนมลอสระ DPPH 12
ตารางท 3 ปรมาณสารประกอบฟนอลกในสารสกดหยาบ 15
Page 9
iii
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
สารบญภาพ
หนา
ภาพท 1 เหดตบเตาทโตเตมท 2
ภาพท 2 เปอรเซนตการยบยงอนมลอสระ 14
ภาพท 3 กลไกการเกดปฏกรยา 16
ภาพท 4 IR สเปกตรมของสารสกดหยาบ 16
Page 10
iv
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
คาอธบายสญลกษณ คายอ และอกษรยอทใช
UV = ultraviolet VIS = visible FTIR = Fourior Transform Infrared PDA = potato dextrose agar PDB = Potato dextrose broth DPPH = 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl
Page 11
1
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
การศกษาฤทธการตานอนมลอสระของสารสกดหยาบพอลแซกคาไรดจากเสนใยของเชอเหดตบเตา
Study on Antioxidant Activity of Crude Polysaccharides from Mycelia of Boletus colossus Heim.
คานา
กลาวถงพนฐานความเปนมา ปญหาและเหตผลททาการวจยโดยเนนความสาคญของงานททา อธบายวตถประสงคและขอบเขตทแนนอน ทฤษฎและแนวคด ประโยชนทจะไดจากการวจย ทงนตองไมคดลอกจากเนอหาของผอนแตใหเรยบเรยงเปนภาษาของตนเอง
ตงแตอดตมนษยรบประทานเหดกนอยางแพรหลายในทกชนชาตเนองจากรสชาตทอรอยและ
กลนทเปนเอกลกษณ ทาใหมการพฒนาการเพาะเหดจนเกดเปนอตสาหกรรมทมมลคาทางการตลาด
สง เหดทเปนทนยมและมมลคาทางการตลาด เชน เหดฟาง เหดนางฟา และ เหดหอม นอกจากจะ
นามาใชเปนอาหารไดแลว เหดหลายชนดยงมคณสมบตในการรกษาโรค ซงมาการนาไปใชกนในหลาย
ประเทศโดยเฉพาะแถบเอเชยตะวนออก เชน ประเทศจน ญปน เกาหล และรสเชยตะวนออก
การใชเหดในทางยานนแตโบราณใชวธสกดสารสาคญในเหดดวยนารอน ซงตอมาพบวาสาร
สกดเหลานเปนคารโบไฮเดรตพวกพอลแซกคาไรด โดยพอลแซกคาไรดทพบมากทสดในดอกเหดคอ
เบตากลแคน (ß glucans) ตอมาเมอนาพอลแซกคาไรดทเตรยมไดจากเหดเหลานมาทดสอบ
คณสมบตทางยาแลวพบวามคณสมบตหลายอยางทสามารถนามาใชในทางการแพทยและเภสชกรรม
ได เชน คณสมบตชวยตานมะเรงเนองอก ชวยกระตนภมคมกน ชวยใหแผลประสานและลดการตด
เชอ ชวยลดนาตาลในเลอด เปนตน คณสมบตการตานมะเรงของกลแคนจะออกฤทธไดดขนเมอใช
รวมกบการใชเคมบาบด (Chemotherapy) มการคนพบวาเหดอยางนอย 700 ชนด (species) จาก
182 สกล (Genera) สามารถสรางพอลแซกคาไรดทมคณสมบตเปนยาตานมะเรงได
เหดตบเตา (Bolete) เปนเหดพนบานของไทยมชอวทยาศาสตรคอ Boletus colossus
Heim.อยในวงศ Boletaceae ชอเรยกอนไดแก เหดหา เหดผง เหดเผง หรอเหดผงคราม หมวกเหดม
ลกษณะโคงนนรปกระทะควา เสนผาศนยกลางประมาณ 15 เซนตเมตร มขนละเอยด คลายกามะหย
สนาตาลดา เมอบานเตมทกลางหมวกเวาเลกนอย ผวสนาตาลดาเมอถกความชนจะลนมอ เนอส
Page 12
2
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
เหลองออนหนา เมอดอกเหดบานเตมทจะเปลยนเปนสเหลองอมเขยวหรอเหลองอมนาตาล กานส
นาตาลดาใตหมวกลงมาสออนกวาเปนสนาตาลเหลองออนยาว 4-6 เซนตเมตร (ภาพท 1) ใช
รบประทานได เชอวามสรรพคณทางยาเชน เปนยาบารงหวใจ บารงกาลง บารงตบ บารงปอด
กระจายโลหต ดบพษรอนภายในรางกายบาบดอาการปวดหลง ปวดขอ ปวดเสนเอนและกระดก
ปองกนการชกกระตก คนจนใชเปนสมนไพร แกเคลดขดยอก และปวดกระดก
ภาพท 1 เหดตบเตาทโตเตมท
จากสรรพคณของเหดทกลาวมาขางตน จงทาใหผวจยเกดความสนใจทจะสกดสารพอล
แซกคาไรดจากเชอเหดตบเตา และนามาทดสอบฤทธการตานอนมลอสระ และศกษาเกยวกบ
คณสมบตของสารสกดทมฤทธทางชวภาพ
Page 13
3
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
วตถประสงค
จดมงหมายของการวจย มขอบเขตทแนนอน (เชนระบแหลงทมา สายพนธ หรอกระบวนการทจาเพาะ) เขยนสน ๆ ใหไดใจความชดเจน
1. เพอศกษาคณสมบตของสารสกดหยาบพอลแซกคาไรดจากเสนใยเชอเหดตบเตา
2. เพอทดสอบฤทธตานอนมลอสระของสารสกดหยาบพอลแซกคาไรดจากเสนใยเชอเหด
ตบเตา
Page 14
4
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
การตรวจเอกสาร
ทฤษฎทเกยวของโดยตรง (หากตองการใสขอมลความรทวไป รายละเอยดเกยวกบเทคนควธ หรอทฤษฎพนฐาน ควรใสในสวนของภาคผนวก) สรปขอมลหรอผลงานทมผทามาแลวเฉพาะสวนทมความสาคญตองานวจยน (ใชเพออางอง) ควรอานเอกสารใหเขาใจและเรยบเรยงขนใหมเปนสานวนของตวเองทกระชบ ถกตอง เขาใจงาย ไมลอกมา อยานาบทคดยอมาใส การอางองควรอางองจากตนฉบบหรองานทมความแรกเรม หากเปนเนอหาทแพรหลายอยแลวอาจอางองจากผเขยนทไดรบการยอมรบอยางแพรหลายในแวดวงนน
งานวจยทเกยวของ
จากการศกษาสรรพคณทางยาของเหดหงเกอกมา (Phellinus rimosus) ซงอยในวงศ
Hymenochaetaceae ซงมการนามาใชเปนสวนผสมในตารบยารกษามะเรง รกษาโรคเรม อาการ
ปวดห และอาการผนคนปวดรอน โดยเปรยบเทยบฤทธตานอนมลอสระและฤทธตานการกอกลาย
พนธของสารสกดจากเหดหงเกอกมาทสกดดวยเอทานอลนา และการสกดดวยสารละลายดาง
ทาการศกษาฤทธตานอนมลอสระโดยวธ 2,2-Diphenyl-picrylhydrazyl radical assay (DPPH
assay) และ Ferric reducing antioxidant power assay (FRAP assay) รวมถงการศกษาฤทธตาน
การกอกลายพนธโดยวธ Ames test ซงทดสอบกบเชอแบคทเรย คอ Salmonella typhimurium
strain TA98 และ TA100 สารสกดทออกฤทธตานอนมลอสระ และฤทธตานการกอกลายพนธทด
ทสด คอ สารสกด P.rimosus โดยการสกดดวยเอทานอล (ชลดา 2555)
มการรายงานวาสารชโซไฟแลน (Schizophyllan) ซงเปนสวนหนงของสารสกดจากเหด
แครงเปนสารพอลแซกคาไรดทไมสามารถยอยสลายโดยเอนไซมในกระเพาะอาหารได ดงนนจงม
คณสมบตเปนสารทเรยกวา probiotics เปนอาหารของจลนทรยทมประโยชนในลาไสใหญไดเปน
อยางด ชวยใหระบบการยอยอาหารเปนไปอยางมประสทธภาพ รวมทงยงลดความเสยงการเกดมะเรง
ลาไสอกดวยและยงชวยลดคอเรสเตอรอลในเลอดอกดวย (Aida 2009)
Isabel และคณะ (2007) ไดรายงานการศกษาคณสมบตสารตานอนมลอสระของเหดสนส
แดง (Lactarius deliciosus) และเหดฟางอสราเอล (Tricholomaportentosum) โดยสกดสารจาก
หมวกเหดและกานดอกเหดดวยเมทานอล เพอหาความสามารถในการรดวซและความสามารถยบยง
อนมลอสระโดยวธทดสอบทางเคม และวดปรมาณฟนอลกทงหมดหาเพอประเมนผลตอฤทธตาน
Page 15
5
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
อนมลอสระของสารสกดของเหดทงสอง และพบวาเหดทงสองชนดแสดงใหเหนวามศกยภาพของสาร
ตานอนมลอสระ แตเหดสนสแดงจะมฤทธมากกวาเหดฟางอสราเอล
อจฉราและจรเวท (2552) ไดศกษาชนดของนาตาลในดอกเหด โดยการสกดพอลแซกคาไรดจากดอกเหดตนแรด สกดดวยนารอนผสมเอทลแอลกฮอล ทอณหภม 95 องศาเซลเซยส และจาแนกชนดของนาตาล ดวยเครองโครมาโทกราฟฟของเหลวสมรรถนะสง ผลการสกดและจาแนกพอลแซกคาไรดของดอกเหดตนแรด 7 สายพนธ จากดอกเหดสด ไดนาตาลหลกเปนทรฮาโรส
อภชาตและประกตตสน (2551) ไดทาการศกษาฤทธทางชวภาพของสารประกอบเชงซอนพอลแซกคาไรด-โปรตน (polysaccharide-protein complex) ทสกดไดจากเสนใยของเหดตบเตาดา (Phaeogyroporus portentosus) ซงเปนเหดทนยมบรโภคอยางแพรหลายในประเทศไทยเรมตนดวยการสกดสารสกดหยาบจากเสนใยเหดดวยนารอน และตกตะกอนดวยเอทานอล ผลการทดลองยนยนวาสารประกอบเชงซอนทสกดไดจากเหดตบเตาดาเปนแหลงของสารทมฤทธตานอนมลอสระ และฤทธยบยงการเจรญของเซลลมะเรงทมศกยภาพในการพฒนาเปนผลตภณฑทางเภสชกรรมได
นฤมล (2557) ไดศกษาการนาเหดพนบานของไทยมาพฒนาเปนเวชสาอาง โดยทดสอบสารตานอนมลอสระในเหดกวา 10 ชนด พบวาเหดแครงมสารตานอนมลอสระมากกวาเหดอนๆ และสามารถนามาพฒนาสตรผลตภณฑบารงผวจากเหดแครงซงมคณสมบตชวยเพมความชมชนใหเซลลผวหนงได
รนฤดและคณะ (2549) จากการทดลองสกดพอลแซกคาไรดจากเหดกนไดมาใชทดสอบฤทธในการเปนสารแอนตออกซแดนทและการกาจดอนมลอสระ โดยเปนเหดพนบานในเมองไทย 4 ชนด และเหดยามาบชตาเกะ จากการศกษาคณสมบตของพอลแซกคาไรดสกดจากเหดทงหมด 5 ตวอยาง พบวา เหดทกชนดมสารทมฤทธเปนสารแอนตออกซแดนทและกาจดอนมลอสระในระดบทตางกนออกไป โดยเหดยามาบชตาเกะ (Hericium erinaceus) มประสทธภาพสงสด รองลงมาคอ เหดขอนขาว (L. polychrous) เหดแครง (S. commune BUB-1) และเหดผงหลวง (Boletus sp.) ตามลาดบ
Page 16
6
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
อปกรณและวธการ
เฉพาะทจาเปนและสาคญตองานวจย อปกรณในหองปฏบตการทวไปไมจาเปนตองระบ ยกเวนมความจาเพาะ เชน กระดาษกรองเบอร 34
อปกรณและสารเคม
อปกรณและเครองมอ
1. เครอง UV-VIS spectrophotometer (T60 UV-Visible Spectrophotometer)
2. เครองระเหยแบบหมน (Rotary Evaporator, Buchi, R-210, Switzerland)
3. เครองปนเหวยง (Centrifuge, Sorval, RC26Plus, USA)
4. เครองฟเรยรทรานฟอรมอนฟราเรดสเปกโทรมเตอร (Fourier Transfrom Infrared
Spectrometer, FTIR, PerkinElmer, UATR Two)
5. แผนใหความรอน (Hot plate Stirrer, Beurer, Germany)
6. เครองชง 4 ตาแหนง (Mettler Toledo, PG802-S)
7. เครองวด pH (Sper Scientific, USA)
8. เครองทาแหงแบบแชแขง (Freeze Dryer, Snijders scientific type 2040)
9. ชดกรองสญญากาศ (Gast, DOA-P504-BN)
สารเคม
1. เอทานอล 95% (95% ethanol, C2H5OH)
2. เมทานอล (Methanol, CH3OH) (AR, QReC, New Zealand)
3. โซเดยมคลอไรด (Sodium chloride, NaCl) (Sigma-ALORICH, Switzerland)
4. กรดซลฟรก (Sulfuric acid) (Sigma-ALORICH, Switzerland)
5. โฟลนซโอแคลทรรเอเจนต (folin-ciocalteu reagent) (Carlo erba, France)
6. 3.6 DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, C18H12N5O6) (Sigma-ALORICH,
Switzerland)
Page 17
7
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
ตวอยางทใชในการศกษา
เชอเหดตบเตา (Boletus colossus Heim.) ไดรบความอนเคราะหจาก รศ.ดร. ประภาพร
ตงกจโชค ภาควชาพชสวน คณะเกษตรกาแพงแสน มหาวทยาลยเกษตรศาสตร วทยาเขตกาแพงแสน
วธการ
วธดาเนนงานวจย การวางแผนการทดลอง อาจแบงเปนหวขอแยกใหชดเจน
1. การเตรยมเชอเหดตบเตา
นาเชอเหดตบเตาเลยงบนอาหารวน PDA เกบรกษาไวทอณหภมเฉลย 26-30 องศาเซลเซยส
และเปลยนถายเชอทก 1-2 เดอน เตรยมเชอเหดโดยยายเสนใยบรสทธจากสตอกเชอทเตรยมไว ลง
บนอาหารเชอพดเอใหมในจานเลยงเชอเพมปรมาณเชอเหดบมทอณหภมหองเปนเวลาประมาณ 28
วน ใชเครองมอเจาะจกคอรก เจาะเสนใยและอาหารเลยงวนบรเวณรอบนอกของโคโลนใหเปนชน
กลม สาหรบใชในการศกษาตอไป
2. การสกดสารจากเชอเหดตบเตา
นาสารละลายเชอเหดตบเตาทเลยงในอาหารเลยงเชอ PDB ปรมาตร 5 ลตร บมท
อณหภมหองเปนเวลาประมาณ 60-70 วน แยกเสนใยและของเหลวออกจากกนโดยการกรอง
สญญากาศ นาสวนทเปนเสนใยทกรองไดไปลางนาสะอาด ผงลมเยน ทาใหแหงโดยเครองทาแหงแบบ
แชแขงบดใหละเอยด เกบไวทอณหภม -20 องศาเซลเซยส จนกวาจะนาไปสกดในขนตอไป
Page 18
8
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
2.1 การสกดเยนโดยวธการหมก (Maceration) ดดแปลงจากวธของ Ming-Chi และคณะ
(2007) โดยนาเสนใยเชอเหดตบเตาบดแหง 10 กรม สกดดวยนาปราศจากไอออน 1 ลตร ทอณหภม
30 องศาเซลเซยส เปนเวลา 24 ชวโมง จากนนกรองดวยกระดาษกรองเบอร 4 เพอแยกกากและ
สารละลาย นาสวนทเปนสารละลายไประเหยตวทาละลายออกโดยเครองระเหยแบบหมนจนเหลอ
ปรมาตร 200 มลลลตร จากนนนาสารละลายทเขมขนมาตกตะกอนพอลแซกคาไรด โดยการเตม
95% เอทานอล ปรมาตร 800 มลลลตร (4 เทา) ทงไวทอณหภม 4 องศาเซลเซยส เปนเวลา 24
ชวโมง นาสารละลายไปปนเหวยงทความเรวรอบ 5,000 รอบตอนาท เปนเวลา 15 นาท ไดตะกอน
พอลแซกคาไรดและสารละลายใส นาสวนตะกอนพอลแซกคาไรดไปทาใหแหงโดยใชเครองทาใหแหง
แบบแชแขง และสวนสารละลายนาไประเหยตวทาละลาย 95% เอทานอล ออกโดยเครองระเหยแบบ
หมนและทาใหแหงโดยใชเครองทาใหแหงแบบแชแขง ไดสาร 2 สวน คอ พอลแซกคาไรดสกดเยน
และนาสกดเยน
2.2 การสกดรอนโดยวธการกลนแบบไหลกลบ ดดแปลงจากวธของ Ming-Chi et al. (2007)
โดยนาเสนใยเชอเหดตบเตาบดแหง 10 กรม สกดดวยนาปราศจากไอออน 1 ลตร ทอณหภม 95
องศาเซลเซยส เปนเวลา 6 ชวโมง จากนนกรองดวยกระดาษกรองเบอร 4 เพอแยกกากและ
สารละลาย นาสวนทเปนสารละลายไประเหยตวทาละลายออกโดยเครองระเหยแบบหมนจนเหลอ
ปรมาตร 200 มลลลตร จากนนนาสารละลายทเขมขนมาตกตะกอนพอลแซกคาไรด โดยการเตม
95% เอทานอล ปรมาตร 800 มลลลตร (4 เทา) ทงไวทอณหภม 4 องศาเซลเซยส เปนเวลา 24
ชวโมง นาสารละลายไปปนเหวยงทความเรวรอบ 5,000 รอบตอนาท เปนเวลา 15 นาท ไดตะกอน
พอลแซกคาไรดและสารละลายใส นาสวนตะกอนพอลแซกคาไรดไปทาใหแหงโดยใชเครองทาใหแหง
แบบแชแขง และสวนสารละลายนาไประเหยตวทาละลาย 95% เอทานอล ออกโดยเครองระเหยแบบ
หมนและทาใหแหงโดยใชเครองทาใหแหงแบบแชแขง ไดสาร 2 สวน คอ พอลแซกคาไรดสกดรอน
และนาสกดรอน
Page 19
9
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
3. การทดสอบการตานอนมลอสระโดยวธ DPPH
3.1 DPPH radical scavenging capacity assay การทดสอบการตานอนมลอสระโดยวธ
DPPH ทดสอบโดยดดแปลงจากวธของ Maja et al. (2011) โดยนาสารละลาย DPPH ในเมทานอล
ความเขมขน 0.2 มลลโมลาร ปรมาตร 1 มลลลตร เตมในสารสกดทไดทง 4 สวนทความเขมขนตาง
25, 50, 100, 150, 200, 300 และ 400 ไมโครกรมตอมลลลตร ปรมาตร 2 มลลลตร บมไวท
อณหภมหองในทมดเปนเวลา 30 นาท วดคาการดดกลนแสงทความยาวคลน 514 นาโนเมตร ดวย
เครอง UV-VIS Spectrophotometer เปรยบเทยบความสามารถในการกาจดอนมลอสระโดยใชสาร
มาตรฐานบวทลเลทเตดไฮดรอกซโทลอน (BHT) ทาการทดลองตวอยางละ 3 ซา คานวณหา
เปอรเซนตการตานอนมลอสระจาก
3.2 ความสามารถในการเปนตวรดวซ (Reducing Power) การทดสอบการตานอนมลอสระ
โดยวธ Reducing Power ทดสอบโดยดดแปลงจากวธของ Isabel และคณะ. (2007) นาสารสกดท
ไดทง 4 สวนทความเขมขนตาง 25, 50, 100, 150, 200, 300 และ 400 พพเอม 2.5 มลลลตร ผสม
กบโซเดยมฟอสเฟตบฟเฟอร (ความเขมขน 200 มลลโมลาร พเอช 6.6) ปรมาตร 2.5 มลลตร และ
1% โดยมวลตอปรมาตร โพแทสเซยมเฟอรรคไซยาไนด ปรมาตร 2.5 มลลลตร ทาการบมทอณหภม
50 องศาเซลเซยส เปนเวลา 20 นาท หลงจากนนเตม 10% โดยมวลตอปรมาตร กรดไตรคลอโรอะซ
ตก ปรมาตร 2.5 มลลลตร นาสารผสมปนเหวยงท 650 รอบตอนาท เปนเวลา 10 นาท นา
สารละลายในชนบน 5 มลลลตร เตมนาปราศจากไอออน 5 มลลลตร และ 0.1% โดยมวลตอปรมาตร
เฟอรรคคลอไรด ปรมาตร 1 มลลลตร วดคาการดดกลนแสงท 700 นาโนเมตร โดยใชบวทลเลทเตด
ไฮดรอกซโทลอน (BHT) เปนตวควบคมบวก (positive control) ความเขมขน 5, 10, 25, 50, 100,
150, 200, 300 และ 400 พพเอม ทาการทดลองตวอยางละ 3 ซา คานวณเปอรเซนตความสามารถ
ในการเปนตวรดวซโดยใชสตร
สถานทและระยะเวลาทาการวจย
สถานท
หองปฏบตการเคม โครงการจดตงภาควชาเคม คณะศลปศาสตรและวทยาศาสตร
มหาวทยาลยเกษตรศาสตร วทยาเขตกาแพงแสน จงหวดนครปฐม
Page 20
10
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
ระยะเวลาในการทดลอง
ตงแตเดอนพฤศจกายน พ.ศ. 2557 – เดอนเมษายน พ.ศ. 2558
Page 21
11
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
ผลและวจารณผล
ผลการทดลองคอขอมลทไดจากการวดหรอศกษาโดยตรง แสดงโดยใช ภาพ ตาราง กราฟ แผนผง ประกอบคาอธบาย วจารณผลการทดลอง คอการนาขอมลมาวเคราะหตอ และเชอมโยงกบวตถประสงค อธบายวาผลทไดเปนไปตามเปาหมายหรอสมมตฐานหรอไม คลายหรอตางจากงานอนอยางไร เพราะอะไร โดยใชทฤษฎหรอเหตผลประกอบทชดเจน และประโยชนทไดจากการทดลองน
ผลการทดลองในการศกษานแบงออกเปน 3 สวนไดแกการสกดสารจากเชอเหนตบเตา การ
วเคราะหสารทได การทดสอบสมบตของสาร
การสกดสารจากเชอเหดตบเตา
เมอบมเชอเหดตบเตาทอณหภมหองเปนเวลา 63 วน สารละลายใสสเหลองออนจะเปลยน เปนส
นาตาลเขมจนดา เราสามารถแยกเสนใยเชอเหดตบเตาและของเหลวออกจากกนโดยการกรอง จะได
ของเหลวสนาตาลเขมและเสนใยเชอเหดตบเตา เมอสกดสวนทเปนเสนใยเชอเหดตบเตาบดแหงดวย
ตวทาละลายนาปราศจากไอออน โดยการสกด 2 วธ ไดแกการสกดเยนโดยวธการหมก (Maceration)
และสกดรอนวธการกลนแบบไหลกลบ (Reflux) โดยการสกดเยนโดยวธการหมก (Maceration) ได
สารสกดสารละลายสนาตาลเขม เมอระเหยตวทาละลายออกโดยเครองระเหยแบบหมน นา
สารละลายทเขมขนมาตกตะกอนพอลแซกคาไรด โดยการเตม 95% เอทานอล (4 เทา) ทงไวท
อณหภม 4 องศาเซลเซยส เปนเวลา 24 ชวโมง นาสารละลายไปปนเหวยง ไดสาร 2 สวน คอ พอล
แซกคาไรดสกดเยนและนาสกดเยน สวนการสกดรอนโดยวธการกลนแบบไหลกลบ (Reflux) จะได
สารสกดสารละลายสนาตาลเขม ระเหยตวทาละลายออกโดยเครองระเหยแบบหมน นาสารละลายท
เขมขนมาตกตะกอนพอลแซกคาไรด โดยการเตม 95% เอทานอล (4 เทา) ทงไวทอณหภม 4 องศา
เซลเซยส เปนเวลา 24 ชวโมง นาสารละลายไปปนเหวยง ไดสาร 2 สวน คอ พอลแซกคาไรดสกดรอน
และนาสกดรอนโดยเปอรเซนตและสของสารสกดหยาบจากเสนใยเชอเหดตบเตาแสดงใน ตารางท 1
Page 22
12
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
ตารางท 1 สวนตางๆทสกดไดจากเหดตบเตา
สารสกดหยาบ เปอรเซนตสารสกดหยาบ สของสารละลาย
พอลแซกคาไรดสกดรอน 24.54 สนาตาลออน
นาสกดรอน 15.80 สนาตาลออน
พอลแซกคาไรดสกดเยน 20.19 สนาตาลเขม
นาสกดเยน 19.22 สนาตาลเขม
จากตารางท 1 พบวา ไดสารสกดทมลกษณะเปนของแขงสนาตาลเขม จะไดสารสกดทง 4
สวน คอ พอลแซกคาไรดสกดรอนและนาสกดรอน และพอลแซกคาไรดและนาสกดเยน โดยพอล
แซกคาไรดสกดรอนและนาสกดรอนมเปอรเซนตสารสกดหยาบเทากบ 24.54 และ 20.29 ตามลาดบ
พอลแซกคาไรดสกดเยนและนาสกดเยนมเปอรเซนตสารสกดหยาบเทากบ 15.80 และ 19.22
ตามลาดบ จากนนนาไปละลายดวยนาปราศจากไอออนเพอใชในการศกษาตอไป
การทดสอบความสามารถในการตานอนมลอสระ
จากการทดสอบความสามารถของสารสกดทง 4 สวนทความเขมขนตางๆ โดยวธ DPPH ซง DPPH
เปนเรดคล (radical) โดยปกตจะมสมวง เมอ DPPH ทาปฏกรยากบสารทมฤทธในการตานอนมล
อสระ สมวงของ DPPH จะกลายเปนสเหลอง โดยจะวดคาการดดกลนแสงทความยาวคลน 514 นาโน
เมตร ดวยเครอง UV-Vis spectrometer และใชบวทเลเตดไฮดรอกซโทลอน (BHT) เปนตวควบคม
บวกพบวาไดผลดงแสดงใน ตารางท 2
Page 23
13
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
ตารางท 2 เปอรเซนตการยบยงอนมลอสระ DPPH
ความเขมขน
(μg/mL)
เปอรเซนตการยบยงอนมลอสระ DPPH
พอลแซกคาไรดสกดรอน
นาสกดรอน พอลแซกคาไรดสกดเยน
นาสกดเยน BHT
25 28.84±3.83 17.99±2.35 24.03±1.05 14.45±1.57 89.03±0.36
50 33.28±4.58 31.35±0.51 27.51±1.29 25.24±0.58 91.55±0.36
100 40.49±1.60 59.11±2.15 36.45±0.71 49.22±0.68 92.03±0.10
150 44.32±3.20 82.61±2.56 42.43±0.92 68.17±2.53 91.25±0.10
200 46.03±1.38 87.60±1.43 49.55±0.91 77.30±0.54 89.25±1.16
300 54.51±0.18 87.88±0.34 57.65±0.37 90.36±1.01 90.18±0.09
400 61.76±0.96 88.15±0.67 61.65±1.58 90.64±3.93 90.08±0.16
จากตารางท 2
Page 24
14
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
ตารางท 2 พบวาสารสกดทง 4 สวนทความเขมขน 25, 50, 100, 150, 200, 300 และ400
ไมโครกรมตอมลลลตร ใหผลการยบยงอนมลอสระ DPPH ไดด พอลแซกคาไรดสกดรอนความเขมขน
400 ไมโครกรมตอมลลลตร มเปอรเซนตการยบยงอนมลอสระสงทสดเทากบ 61.76 และเปอรเซนต
การยบยงอนมลอสระตาทสดทความเขมขน 25 ไมโครกรมตอมลลลตร เทากบ 28.84 นาสกดรอน
ความเขมขน 400 ไมโครกรมตอมลลลตร มเปอรเซนตการยบยงอนมลอสระสงทสดเทากบ 88.15
และเปอรเซนตการยบยงอนมลอสระตาทสดทความเขมขน 25 ไมโครกรมตอมลลลตร เทากบ 17.99
พอลแซกคาไรดสกดเยนความเขมขน 400 ไมโครกรมตอมลลลตร มเปอรเซนตการยบยงอนมลอสระ
สงทสดเทากบ 61.65 และเปอรเซนตการยบยงอนมลอสระตาทสดทความเขมขน 25 ไมโครกรมตอ
มลลลตร เทากบ 24.03 นาสกดเยนความเขมขน 400 ไมโครกรมตอมลลลตรจากขอมลตารางท 2 นา
คามาพลอตกราฟระหวางเปอรเซนตการตานอนมลอสระกบความเขมขนของสารสกดทง 4 สวนเพอ
หาคา IC50 พบวาไดผลดงภาพท 2
(ก) (ข)
ภาพท 2 เปอรเซนตการยบยงอนมลอสระ
ความสามารถในการเปนตวรดวซ (Reducing power assay)
การทดสอบความสามารถในการเปนตวรดวซ ของสารสกดทง 4 สวนทความเขมขนตางๆ โดยวธ
Reducing power ซงเปนการศกษาความสามารถในการรดวซ หรอใหอเลกตรอนของสารสกดแก
สารอนมลอสระแลวทาใหเปลยนเปนสารทคงตว โดยวดปฏกรยารดกชนของ Fe3+(CN-)6 ไปเปน
Fe2+(CN-)6 ซงถาสารสกดมความสามารถในการรดวซไดมากจะทาใหสารละลายเปนสนาเงนเขมขน
ซงจะแสดงถงความสามารถในการตานออกซเดชนทด โดยจะวดคาการดดกลนแสงทความยาวคลน
700 นาโนเมตร ดวยเครอง UV-Vis spectrometer โดยใชบวทเลเตดไฮดรอกซโทลอน (BHT) เปน
Page 25
15
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
สารละลายมาตรฐานเปรยบเทยบโดยทาการทดลองตวอยางละ 3 ซา และคานวณเปอรเซนต
ความสามารถในการเปนตวรดวซของสารสกดทง 4 สวน ซงไดผลดงแสดงตารางท 3
การหาปรมาณสารประกอบฟนอลกทงหมด
การหาปรมาณสารประกอบฟนอลกทงหมด (ภาพท 3) โดยนาสารสกดทง 4 สวนมาทดสอบ
กบ 10% Folin-Ciocalteu’s Phenol reagent ใชกรดแกลลกความเขมขน 5, 10, 25, 50, 100,
150 และ200 พพเอม เปนสารมาตรฐาน นาไปวดคาการดดกลนแสงทความยาวคลน 725 นาโนเมตร
Page 26
16
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
ตารางท 3 ปรมาณสารประกอบฟนอลกในสารสกดหยาบ
สารสกดหยาบ ปรมาณสารประกอบฟนอลกทงหมด
(mg กรดแกลลก/g สารสกดหยาบ)
พอลแซกคาไรดสกดรอน 21.03±0.96
นาสกดรอน 69.66±1.47
พอลแซกคาไรดสกดเยน 47.28±2.80
นาสกดเยน 62.30±1.91
จากสเปกตรมอนฟราเรดสเปกโทสโกปของสารสกดซงแสดงในภาพท 4 พบวาสเปกตรมสาร
สกดทง 4 สวนใหผลการทดลองทมแนวโนมในทางดยวกน คอ พบหมฟงกชนท1000-1200 cm-1
(pyranose ring), 3200-3400 cm-1 (O-H stretching), 2927-2929 cm-1(C-Hstretching), 1654
และ 1560 cm-1(protein), 844 cm-1 (α-configuration) และ 891 cm-1 (β-configuration)
สเปกตรมทศกษาสามารถระบไดวาเปนทง α-configuration และ β-configurationซงสเปกตรมท
ไดสอดคลองกบงานวจยของ Zuofa et al. (2013)ทไดทาการศกษาพบหมฟงกชนท 3300-3500cm-
1 (O-H stretching), 2927-2930 cm-1(C-Hstretching), 1640 cm-1(เอไมดของ C=O), 1485-1350
cm-1(–CH (C-CH2)), 1000-1200 cm-1(pyranose ring) 850 cm-1(α-configuration),1080 cm-1
(β-configuration) และ 350-600 cm-1โครงรางหลกของวงไพราโนส
Page 27
ภาพท 3 กลไ
ภาพท 4 IR ส
จาก
ผลการวจยกอ
การศกษาคน
ตวอยา
ไกการเกดปฏ
สเปกตรมของ
การศกษาพบ
อนหนาน และ
นควาเพมเตมใ
างตวเลมปญหาพเ
ฏกรยา
งสารสกดหยา
บวาสารสกดห
ะมความเปนไ
นรายละเอยด
ศษ (ดดแปลงจากเน
าบ
ยาบเชอเหดต
ไปไดในการพฒ
ดตอไป
นอหาจรง) แกไข 2
ตบเตาสามารถ
ฒนาเพอนาไป
4 พฤษภาคม 255
ถตานอนมลอส
ปใชในเชงการ
9
สระไดด ซงสน
รคา ซงจาเปน
17
นบสนน
นจะตองม
Page 28
18
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
สรปและขอเสนอแนะ
สรปสาระสาคญของการทดลองและผลทได ปญหาและจดออน ประโยชนของงานน และขอเสนอแนะสาหรบการวจยในขนตอไป
จากการสกดสารออกฤทธจากสารสกดหยาบเชอเหดตบเตาโดยนาปราศจากไอออน ใน
อตราสวน 10:1 (กรมตอลตร) ตกตะกอนพอลแซกคาไรดดวยตวทาละลาย 95% เอทานอล โดยการ
สกด 2 วธ การสกดเยนโดยวธการหมก และการสกดรอนโดยวธสกดแบบไหลกลบ พบวาไดสารสกดท
มลกษณะเปนของแขงสนาตาลเขม จะไดสารสกดทง 4 สวน พอลแซกคาไรดสกดรอนไดเปอรเซนต
ของสารสกดหยาบสงทสดเทากบ 24.54 และ พอลแซกคาไรดสกดเยนไดเปอรเซนตสารสกดหยาบตา
ทสดเทากบ 15.80
การทดสอบการตานอนมลอสระดวยวธ DPPH ทความเขมขน 25, 50, 100, 150, 200, 300
และ 400 ไมโครกรมตอมลลลตร พบวาเปอรเซนตการตานอนมลอสระมแนวโนมสงขนเมอความ
เขมขนของสารสกดสงขนและนาสกดรอนสามารถยบยงอนมลอสระไดดทสดทความเขมขน 400
ไมโครกรมตอมลลลตร มคาเทากบ 88.15±0.67%
จากการศกษาพบวาสารสกดหยาบเชอเหดตบเตา สามารถตานอนมลอสระได ซงนาจะเปน
ประโยชนสงมากถอเปนอกทางเลอกหนงทนาสนใจ และสามารถนาเชอเหดตบเตาไปศกษาคนควาใน
ขนสงตอไป
Page 29
19
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
เอกสารและสงอางอง
หนงสอ: ผแตง. ปทพมพ.ชอหนงสอ. ครงทพมพ (ถาม). สานกพมพ, สถานทพมพ
รายงานการประชม สมนา: ผเขยน. ปทพมพ. ชอเรอง, หนาทพมพ. ใน ชอบรรณาธการ (ถาม). ชอการประชม ครงท. สานกพมพหรอหนวยงานทจดการประชม, สถานทพมพ
วทยานพนธ : ผเขยน. ปทพมพ. ชอวทยานพนธ. ระดบวทยานพนธ, ชอมหาวทยาลย
บทความในวารสาร: ผเขยน. ปทพมพ. ชอบทความ. ชอวารสาร ปท (ฉบบท): หนา.
ขอมลจากเวบไซต: ผเขยน. ปทพมพ. ชอเรอง. ชอหวของเวบไซต. แหลงทมา: วนทสบคนขอมล
การอางองในตวเลมสาหรบภาษาไทย (บหรน, 2556) (วชยและสมศกด, 2558) (ชลดาและคณะ 2555)
การอางองในตวเลมสาหรบภาษาตางประเทศ (Ming-Chi, 2007) (Roland and Simpson, 2008) (Aida et.al., 2009)
การอางอง (บางสวน)
ชลดา จดประกอบ, พรพรรณ เหลาวชระสวรรณ และเมธน ผดงกจ. 2555. ฤทธตานอนมลอสระและฤทธตานการกอกลายพนธของสารสกดเหดหงเกอกมา. วารสารเภสชศาสตรอสาน 10 (5): 175-179.
บหรน พนธสวรรค. 2556. อนมลอสระ สารตานอนมลอสระและการวเคราะหฤทธตานอนมลอสระ. วารสารวทยาศาสตรและเทคโนโลย 21 (3): 275-286.
Aida, F. M. N. A., M. Shuhaimi, M. Yazid, and A. G. Maaruf. 2009. Mushroom as a potential source of probiotics: a review. Trend in Food Science &Technology 20: 567-575.
Ming-Chi, T., T. Song, P. Shih, and G. Yen. 2007. Antioxidant properties of water-soluble polysaccharides from Antrodia cinnamomeain submerged culture. Food Chemistry 104: 1115-1122.
Page 30
20
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
ภาคผนวก
Page 31
21
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
ภาคผนวก ก) การเตรยมสารเคม
สารละลาย BHT ความเขมขน 1,000 ppm
เตรยมสารละลาย BHT ทความเขมขนเดยวกบเหดตบเตา โดยชง BHT 0.0100 กรม มา
ละลายในนาปราศจากไอออน 10 มลลลตร จะได BHT ความเขมขน 1,000 พพเอม
สารละลายฟอสเฟตบฟเฟอร เขมขน 200 mM pH 6.6 ปรมาตร 250 mL
เตรยมไดจากไดโซเดยมไฮโดรเจนฟอสเฟต (Na2HPO4) มวลโมเลกลเทากบ 141.96 กรม/
โมล และ โซเดยมไดไฮโดรเจนฟอสเฟต (NaH2PO4) มวลโมเลกลเทากบ 120 กรม/โมล
Page 32
22
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
ภาคผนวก ข) อนมลอสระและสารตานอนมลอสระ
อนมลอสระ
อนมลอสระ (Free radicals) คอโมเลกลหรอไอออนทมอเลกตรอนโดดเดยว พบไดทงใน
สงแวดลอม ในสงมชวต โดยเฉพาะอยางยงกระบวนการเมตาบอลซม (metabolism) ในเซลล
โมเลกลของออกซเจนทกลายเปนอนมลอสระจะมความวองไวในการเขาทาปฏกรยามาก และสามารถ
ดงอเลกตรอนจากโมเลกลอนมาแทนทอเลกตรอนทขาดหายไปเพอใหตวเองเกดความสมดลหรอ
เสถยร ซงปฏกรยานจะเกดขนอยางตอเนองเปนปฏกรยาลกโซในเซลล อนมลอสะทสาคญ ไดแก
oxygen radical, superoxide radical, hydroxyl radical, hydrogen peroxide, transition
metals, carbonate radical (CO3•), nitrate radical (NO3•), methyl radical (CH3•),
superoxide radical (O2•), peroxy radical (ROO•), reactive oxygen species (ROS) เปนตน
อนมลอสระสามารถทาลายชวโมเลกลทกประเภททงในเซลลและสวนประกอบของเซลล
สงมชวต เชน ลพด โปรตน เอนไซม ดเอนเอ อารเอนเอ เซลลเมนเบรน ซงเปนสาเหตใหเซลลตาย
การเกดการกลายพนธของดเอนเอในเซลล และกอใหเกดโรคตางๆ ไดแก โรคชรา โรคมะเรง โรคหวใจ
ขาดเลอด โรคความจาเสอม โรคขออกเสบ โรคภมแพ อนมลอสระนอกจากจะเกดภายในสงมชวตแลว
ยงเกดจากปจจยภายนอก ไดแก การไดรบเชอโรคเกยวกบภมคมกน จากรงส จากมลภาวะ เชน ควน
บหร และแกสจากทอไอเสย จากอาหารทไหมเกรยม หรอ จากยาบางชนด เชน โดโซรบซน
(doxorubicin) เพนนซลลามน (penicillamine) พาราเซตามอล (paracetamol) เปนตน ซงโมเลกล
ทมความสามารถทจะกาจดอนมลอสระและปองกนโรคทเกดไดเรยกวา สารตานอนมลอสระ
(Antioxidant) สารอาหารและแรธาตตางๆ ทสาคญทเปนสารตานอนมลอสระ เชน วตามนซ
สารตานอนมลอสระ
สารตานอนมลอสระถอวามความสาคญตอกระบวนการออกซไดซอนมลอสระ หรอสามารถ
ยบยงปฏกรยาออกซเดชน โดยในสงมชวตจะมระบบการปองกนการทาลายเซลลและเนอเยอจาก
อนมลอสระ ประกอบดวยสารตานอนมลอสระมากมายหลายชนดททาหนาทแตกตางกนไป ซงมทงท
เปนเอนไซมและไมเปนเอนไซม สารประกอบทละลายในนาและสารประกอบทละลายในไขมน
โดยสารตานอนมลอสระเหลานมกลไกการทางานตานอนมลอสระดวยกนหลายแบบ เชน ดกจบอนมล
อสระ (radical scavenging) การยบยงการทางานของออกซเจนทขาดอเลกตรอน (singlet oxygen
quenching) จบกบโลหะทสามารถเรงปฏกรยาออกซเดชนได (metal cheation) หยดปฏกรยาการ
Page 33
23
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
สรางอนมลอสระ (chain-breaking) เสรมฤทธ (synergism) และยบยงการทางานของเอนไซม
(enzyme inhibition) ทเรงปฏกรยาอนมลอสระ เปนตน
Page 34
24
ตวอยางตวเลมปญหาพเศษ (ดดแปลงจากเนอหาจรง) แกไข 24 พฤษภาคม 2559
ประวตการศกษา และการทางาน
ชอ-นามสกล
วนเดอนปเกด
สถานทเกด
ประวตการศกษา
ระดบประถมศกษา โรงเรยน (จงหวด)
ระดบมธยมศกษาตอนตน โรงเรยน (จงหวด)
ระดบมธยมศกษาตอนปลาย โรงเรยน (จงหวด)
ผลงานดเดนและรางวลทางวชาการ
1.
ทนการศกษาทไดรบ 1.