46 7. LAMPIRAN 7.1. Perhitungan efisiensi isolat protein Isolat protein diperoleh dengan menggunakan presipitasi dengan 3 metode berbeda. Isolat protein yang diambil berdasarkan perhitungan pada 3 batch dengan 3 kali pengulangan. Perhitungan efisiensi isolat protein dengan rumus: % = × 100% 7.1.1. Efisiensi isolat protein metode phenol/chloroform Berat sampel awal yang digunakan adalah 15 gram Berat isolat protein (gram) = 0.025 + 0.026 + 0.056 + 0.018 + 0.024 + 0.019 + 0.28 + 0.018 + 0.02 = 0.486. Efisiensi isolat protein = 0.486 15 x 100% = 3,24 % 7.1.2. Efisiensi isolat protein metode TCA/Asetone Berat sampel awal yang digunakan adalah 15 gram Berat isolat protein (gram) = 0.015 + 0.015 + 0.009 + 0.01 + 0.02 + 0.017 + 0.01 + 0.008 + 0.008 = 0.112 Efisiensi isolat protein = 0.112 15 x 100% = 0,75 % 7.1.3. Efisiensi isolat protein metode salting out Berat sampel awal yang digunakan adalah 15 gram Berat isolat protein (gram) = 0.033 + 0.022 + 0.037 + 0.017 + 0.019 + 0.03 + 0.027 + 0.023 + 0.027 = 0.235 % protein = 0.235 15 x 100% = 1,57 %
This document is posted to help you gain knowledge. Please leave a comment to let me know what you think about it! Share it to your friends and learn new things together.
Transcript
46
7. LAMPIRAN
7.1. Perhitungan efisiensi isolat protein
Isolat protein diperoleh dengan menggunakan presipitasi dengan 3 metode berbeda. Isolat
protein yang diambil berdasarkan perhitungan pada 3 batch dengan 3 kali pengulangan.
Perhitungan efisiensi isolat protein dengan rumus:
%𝑃𝑟𝑜𝑡𝑒𝑖𝑛 =𝑏𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑖𝑠𝑜𝑙𝑎𝑡 𝑝𝑟𝑜𝑡𝑒𝑖𝑛
𝑏𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑎𝑤𝑎𝑙× 100%
7.1.1. Efisiensi isolat protein metode phenol/chloroform
Berat sampel awal yang digunakan adalah 15 gram
Berat isolat protein (gram) = 0.025 + 0.026 + 0.056 + 0.018 + 0.024 + 0.019 + 0.28 +
0.018 + 0.02 = 0.486.
Efisiensi isolat protein = 0.486
15 x 100% = 3,24 %
7.1.2. Efisiensi isolat protein metode TCA/Asetone
Berat sampel awal yang digunakan adalah 15 gram
Berat isolat protein (gram) = 0.015 + 0.015 + 0.009 + 0.01 + 0.02 + 0.017 + 0.01 +
0.008 + 0.008 = 0.112
Efisiensi isolat protein = 0.112
15 x 100% = 0,75 %
7.1.3. Efisiensi isolat protein metode salting out
Berat sampel awal yang digunakan adalah 15 gram
Berat isolat protein (gram) = 0.033 + 0.022 + 0.037 + 0.017 + 0.019 + 0.03 + 0.027 +
0.023 + 0.027 = 0.235
% protein = 0.235
15 x 100% = 1,57 %
47
7.2. Perhitungan konsentrasi isolat protein
Konsentrasi isolat protein dihitung dengan menggunakan metode kurva standart metode
Bradford.
Tabel 7. Hasil absorbansi standart BSA (Bovine Serum Albumin)
BSA (ppm) Absorbansi
0 0.0002
10 0.0378
20 0.111
40 0.1878
60 0.2941
80 0.3947
100 0.4475
120 0.4899
140 0.5768
160 0.6306
180 0.7128
200 0.7514
Gambar 10. Kurva standart BSA
7.2.1. Konsentrasi Protein Metode Phenol/chloroform (mg/ml)
Absorbansi ulangan 1 = 0.0486
y.= 0,0049x – 0,0018
0,0486 = 0,0049x – 0,0018
X = 9,9
y = 0.0049x - 0.0018R² = 0.9969
-0.1
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0 20 40 60 80 100
Absobansi
BSA (ppm)
Kurva standart BSA
48
Karena 1 kali pengulangan, maka :
Konsentrasi x 10 = 99
Absorbansi ulangan 2 = 0,056
y.= 0,0049x – 0,0018
0,056 = 0,0049x – 0,0018
X = 11,796
Karena 1 kali pengulangan, maka :
Konsentrasi x 10 = 117,959
Absorbansi ulangan 3 = 0,0565
y.= 0,0049x – 0,0018
0,0565 = 0,0049x – 0,0018
X = 11,898
Karena 1 kali pengulangan, maka :
Konsentrasi x 10 = 118,979
Rata-rata = 99+117,959+118,979
3 = 112
7.2.2. Konsentrasi Protein Metode TCA/Aseton (mg/ml)
Absorbansi ulangan 1 = 0,0319
y.= 0,0049x – 0,0018
0,0319 = 0,0049x – 0,0018
X = 6,9
Karena 1 kali pengulangan, maka :
Konsentrasi x 10 = 69
Absorbansi ulangan 2 = 0,05
y.= 0,0049x – 0,0018
0,05 = 0,0049x – 0,0018
X = 10,571
Karena 1 kali pengulangan, maka :
Konsentrasi x 10 = 105,71
Absorbansi ulangan 3 = 0,0596
y.= 0,0049x – 0,0018
0,0596 = 0,0049x – 0,0018
X = 12,531
49
Karena 1 kali pengulangan, maka :
Konsentrasi x 10 = 125,31
Rata-rata = 69+105,71+125,31
3 = 100
7.2.3. Konsentrasi Protein Metode Salting out (mg/ml)
Absorbansi ulangan 1 = 0,0278
y.= 0,0049x – 0,0018
0,0278 = 0,0049x – 0,0018
X = 6
Karena 1 kali pengulangan, maka :
Konsentrasi x 10 = 60
Absorbansi ulangan 2 = 0,0533
y.= 0,0049x – 0,0018
0,0533 = 0,0049x – 0,0018
X = 11,245
Karena 1 kali pengulangan, maka :
Konsentrasi x 10 = 112,45
Absorbansi ulangan 3 = 0,0501
y.= 0,0049x – 0,0018
0,0501 = 0,0049x – 0,0018
X = 10,592
Karena 1 kali pengulangan, maka :
Konsentrasi x 10 = 105,92
Rata-rata = 60+112,45+105,92
3 = 9
50
7.3. Hasil Uji Beda Efisiensi isolat protein daun yakon
Tabel 8. Uji Beda Efisiensi isolat protein daun yakon
Dari Tabel 8, diperoleh hasil bahwa terdapat perbedaan antara efisiensi metode isolasi protein pada metode TCA/Acetone dan Salting Out
(0<0,05)
Independent Samples Test
Levene's Test
for Equality of
Variances t-test for Equality of Means
F Sig. t df Sig. (2-tailed) Mean Difference Std. Error Difference