Biotechnologija Algimantas Paulauskas Vytauto Didžiojo universitetas 2015
Biotechnologija
Algimantas Paulauskas
Vytauto Didžiojo universitetas
2015
Biotechnologija Algimantas Paulauskas
Vytauto Didžiojo universitetas
2015
Dalyko turinys
Biotechnologijos istorija. Pagrindinės šakos.
Plazmidė, jos struktūra ir savybės. Vektorius, jo sandara ir paskirtis.
Ląstelių kultūros
Baltymų inžinerija. Baltymų konstravimo in vitro principai. Baltymų kūrimas de
novo ir in silico. Baltymų producentų kūrimas.
Abzimų – katalitinėmis savybėmis pasižyminčių antikūnių modeliavimas, inžinerija
ir gamyba. Ribozimai ir aptamerai.
Fermentų specifiškumo, termostabilumo ir kitų savybių keitimas norima linkme.
Kombinatoriniai polipeptidų sintezės metodai.
Fermentų panaudojimas organinėje chemijoje.
Baltoji biotechnologija.
Stereoselektyvios sintezės.
Metabolizmo kelių konstravimas.
Mikroorganizmų panaudojimas biotechnologijoje
Genų terapija.
Nanobiotechnologijos.
Biotechnologija Dalyko turinys
Laboratoriniai darbai
1. Kompetentinių E. coli ląstelių paruošimas ir jų transformacija naudojant
plazmidinę DNR
2. Plazmidinės DNR hidrolizė restrikcijos endonukleaz÷mis
3. Plazmidinės DNR išskyrimas ir jos koncentracijos nustatymas
4. DNR ligavimas ir elektroforetinis analizavimas
5. DNR gryninimas iš agarozinio gelio
6. PGR taikymas DNR fragmento padauginimui
Literatūra
1. Sasnauskas K. Genų inžinerijos pagrindai. Biotechnologijos
institutas, 2006.Vilnius
2. Glick.BR, Pastternak J.J. Molecular biotechnology 1998 /rusų kl. 2002/
3. An introduction to Molecular Biotechnology. Ed. Wink M. WILEY-VCH. 2006
Biotechnologija
Studijų krypčių grupė – technologijos
J700 Biotechnologijos
J710 Augalų biotechnologija
J720 Gyvūnų biotechnologija
J730 Aplinkos biotechnologija
J740 Pramonės biotechnologija
J750 Medicinos biotechnologija
J760 Bioinžinerija
Raudonoji biotechnologija
Žalioji biotechnologija
Mėlynoji biotechnologija
Baltoji biotechnologija.
Nanobiotechnologijos = Sintetinė biologija.
Biotechnologijos vystymosi
etapai
8000-4000 I.M.E.
Žmogus domestikuoja grūdines
kultūras ir gyvūnus
Pirmieji kultūriniai augalai maistui
- Bulvės.
www.futuresalon.org/2005/08/index.html
http://redpuma.net/longview/tree/biotech-html/
Biotechnologijos vystymosi
etapai 2000 I.M.E.
Biotechnologija
Naudojamos mieles duonos rauginimui
ir alaus fermentacijai, (Egyptas)
Sūrių gamyba, vyno fermentacijos
pradžia
(Šumeriai, Kinija, Egyptas).
Biotechnologijos vystymosi
etapai 500 I.M.E.
Pirmas antibiotikas: Sojos pupelių pelenų varškė
(tofu) naudota šunvočių gydimui (Kinija).
Biotechnologijos vystymosi
etapai 100 M.E.
Pirmas insekticidas:
į miltelius
susmulkintos
chryzantemos
(Kinija)
Biotechnologijos vystymosi
etapai 1797
Pirma vakcinacija
Edward Jenner
karvių raupų pūliais
užkrėtęs vaiką
(prapjovęs vaiko ranką),
sukėlė atsparumą raupams.
Biotechnologijos vystymosi
etapai 1830-1833
1830 Atrandami baltymai.
1833 Išskiraimas pirmas
fermentas.
Model of a 5-peptide protein.
Biotechnologijos vystymosi
etapai
1857
Louis Pasteur teigia
kad mikrobai sukelia
fermentaciją.
Vėliau jis vadovauja
eksperimentams,
davusiems pradžią užkrečiamų
lygų gydimo teorijai.
Biotechnologijos vystymosi
etapai
1859
Charles Darwin publikuoja
Evoliucijos teoriją.
Biotechnologijos vystymosi
etapai 1865
Gregor Mendel tyrinėdamas
augalus atranda paveldimumo
dėsnius.
Prasideda genetikos mokslas
Biotechnologijos vystymosi
etapai 1915
Atrandami
Fagais — virusai
kurie infekuoja tik
bakterijas.
Biotechnologijos vystymosi
etapai
1927
Herman Muller aptinka
kad radiacija sukelia
chromosomų defektus
Biotechnologijos vystymosi
etapai 1928
Seras Alexander Fleming
atranda antibiotiką peniciliną
žudanti bakterijas
1945 jam ir Ernst Boris Chain
su Seru Howard Walter Florey suteikiama Nobel Premija Medicinoje
Biotechnologijos vystymosi
etapai 1944
Oswald Avery,
Colin MacLeod,
Maclyn McCarty
įrodo, kad DNR nešą
genetinė informacija.
DNA modelis iš LEGO.
Biotechnologijos vystymosi
etapai
1953 James Watson
Francis Crick aprašo
dvigubą grandininę
DNR strukturą.
1962 Nobelio Prize
Medicinoje ir Fyziologijoje
(kartu su) Maurice Wilkins.
Biotechnologijos vystymosi
etapai 1955
Frederick Sanger
nustato insulino
amino rūgščių seką.
1982 Žmogaus insulinas gaminamas genetiškai modifikuotų bacterijų -pirmas biotechnologinis vaistas įteisintas FDA.
3D model of insulin
Biotechnologijos vystymosi
etapai
1958
● pirmą kartą išskiriama DNR į megintuvėlį.
● nustatoma , kad
pjautuvinę anemiją
sukelia vienos amino
rūgšties pakeitimas baltymo grandinėje.
Biotechnologijos vystymosi
etapai
1966
DNR genetinis kodas išsigimęs.
1968 Pasidalijama Nobelio Prprėemijo Physiology or Medicine
.
Marshall Nirenberg Robert Holley Har Gobind Khorana
Biotechnologijos vystymosi
etapai 1971
● Susintetinamas pirmas genas
● Atrandami restrikcijos fermentai, karpantys
genetinę medžiagą labai specifinėse vietose.
Prasideda genų klonavimas .
Biotechnologijos vystymosi
etapai 1973 Stanley Cohen ir Herbert Boyer patobulino
genetinės inžinerijos technologijas karpant ir
sujungiant DNR naudojant restrikcijos fermentus.
(1977 stebima pirma žmogaus geno ekspresija bakterijose.)
Stanley Cohen Herbert Boyer and a recombinant bacterium
1986 S. Cohen apdovanojamas Nobelio Premija
Biotechnologijos vystymosi etapai
• Pagrindinė prielaida moderniajai biotechnologijai atsirasti –
restrikcijos modifikacijos reiškinio tyrimai ir II klasės
restrikcijos – modifikacijos fermentų suradimas
EcoRI BamHI SmaI EcoRI
..aatcgaattcctttccagttggatcccccaaaagggcccattaaccctgaattctt...
• II klasės RM sistemos atpažįsta specifinę DNR nukleotidų seką ir ją
skelia
5’-G’AATTC-3’
3’-CTTAA’G-5’
• 2013 m. – apie 300 skirtingas sekas skaldančių fermentų
Biotechnologijos vystymosi
etapai
1975 Georges Kohler ir Cesar Milstein
sukuria monokloninių antikūnių
gamybos technologijas
— labai specifiški antikūniai išskiriami
Iš vienos ląstelės klono ir gamina vieną
antigeną.
1984 Nobel Premija Physiology ir
Medicinoje
su Neils Jerne.
Biotechnologijos vystymosi
etapai 1981
Pirmas transgeninis gyvūnas perkeliant genus iš kitų gyvūnų į peles.
Pirmas patentas už genetiškai modifikuotą organizmą —bakterijas, kurios sunaikiną žaliavinę naftą.
Biotechnologijos vystymosi
etapai 1983
Sukuriama PCR
(The polymerase chain reaction (PCR) technique), atkurianti vieno geno ir geno fragmento kopijas,.
Kary Mullis,
1993 Nobel Prize in Chemistry
Biotechnologijos vystymosi
etapai 1986
Pirma rekombinantinė vakcina
aprobuota žmogaus naudojimui:
hepatitis B.
Panaudojus biotechnologijas
Sukuriamas pirmas anti-vėžinis
preparatas: interferonas.
Biotechnologijos vystymosi
etapai
1987 Pirmas genetiškai modifikuotų
maistinių augalų patikrinimas
lauko sąlygomis:
virusams-atsparūs pomidorai.
1994 Pirmą kartą GM
pomidorai JAV pateikti
pardavimui
Biotechnologijos vystymosi
etapai 1990
The Human Genome Project — HUGO
Žmogaus genomo projektas.
2002.
Francis Collins, M.D., Ph.D.
Director, Human Genome Project
Biotechnologijos vystymosi
etapai 1997
Klonuota Dolly, pirmas gyvūnas klonuotas iš
suaugusio organizmo ląstelės
Dolly (1996-2003) as an adult Dolly and her surrogate mother
Biotechnologijos vystymosi
etapai 1998
Žmogaus embrioninės kamieninės ląstelės.
Biotechnologijos vystymosi
etapai 2003
The SARS (severe acute respiratory
syndrome) virus is sequenced
three weeks after its discovery.
SARS, which began in China,
spreads quickly — and
spreads fear throughout the
Far East and the world. The
last reported cases occurred
in 2004 and resulted from
laboratory-acquired infections.
Biotechnologijos vystymosi
etapai 2004
Pirmas klonuotas
kačiukas
perduotas
jo šeimininkams.
Jo vardas CopyCat (or Cc for short).
Biotechnologijos vystymosi
etapai 2006
A recombinant vaccine
against human papillomavirus
(HPV) receives FDA approval.
The virus causes genital warts
and can cause cervical cancer.