02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un bio tehnoloģijas katedra ML 1 1. laboratorijas darbs. Buferšķīdumi, Buferšķīdumi, vides pH, vides pH, enzimātiskās enzimātiskās reakcijas. reakcijas. Māris Lazdiņš LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra diju kurss Bioloģija (biologiem) Bloks Ievads šūnas bioloģijā - dzīvības ķīmija
61
Embed
1. laboratorijas darbs. Buferšķīdumi, vides pH, enzimātiskās reakcijas.
Studiju kurss Bioloģija (biologiem). Bloks Ievads š ūnas bioloģijā - dzīvības ķīmija. 1. laboratorijas darbs. Buferšķīdumi, vides pH, enzimātiskās reakcijas. Māris Lazdiņš LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra. Mācību materiāli. - PowerPoint PPT Presentation
Welcome message from author
This document is posted to help you gain knowledge. Please leave a comment to let me know what you think about it! Share it to your friends and learn new things together.
Transcript
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
14
Darba drošība laboratorijāDarba drošība laboratorijā
UGUNSDROŠĪBAS PRASĪBAS LU STUDĒJOŠIEM MĀCĪBU UN LABORATORIJU TELPĀS
INSTRUKCIJA Nr.UD-83.Rīcība ugunsgrēka gadījumā
8.Par ugunsgrēku nekavējoties paziņot:8.1.ugunsdzēsības dienestam pa tālr. 112, norādot adresi un vietu, kur ugunsgrēks ir izcēlies, savu vārdu, uzvārdu un tālruņa numuru;
8.2.Latvijas Universitātes Avārijas dienestam pa tālr. 703-4888;
8.3.ēkas apsardzei, administratoram vai jebkurai LU struktūr- vienības amatpersonai (pa tālruni; nospiežot “uguns trauksmes” pogu; mutiski u.c. veidā);
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
15
Darba drošība laboratorijāDarba drošība laboratorijā
UGUNSDROŠĪBAS PRASĪBAS LU STUDĒJOŠIEM MĀCĪBU UN LABORATORIJU TELPĀS
INSTRUKCIJA Nr.UD-8
4.Ugunsgrēka dzēšanas noteikumi
10.Evakuācijas laikā novērst panikas rašanās iespēju.
11.Elektroiekārtu (t.sk. datortehnikas) dzēšanai, kas atrodas zem elektriska sprieguma, izmantot tikai pulvera un ogļskābās gāzes ugunsdzēsības aparātus.
12.Ūdensputu aparātus, ugunsdzēsības krānus drīkst izmantot
dzēšanai tikai pēc sprieguma atslēgšanas.
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
16
Darba drošība laboratorijāDarba drošība laboratorijā
UGUNSDROŠĪBAS PRASĪBAS LU STUDĒJOŠIEM MĀCĪBU UN LABORATORIJU TELPĀS
INSTRUKCIJA Nr.UD-8
5.Uzvedības noteikumi, ja ugunsgrēka laikā nav iespējams izkļūt no telpas
13.Noblīvēt telpas durvis, lai mazinātu dūmu iekļūšanu tajā, izvietoties pie logiem.
14.Paziņot par savu atrašanās vietu un gaidīt palīdzību no ārpuses.
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
17
Darba drošība laboratorijāDarba drošība laboratorijā
- bioloģiski bīstams.
Stiklu šķembas ir asas!
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
18
Darba drošība laboratorijāDarba drošība laboratorijā
Kas jāievēro?
- liekām mantām laboratorijā - NĒ,
- pārtikas produktu lietošanai - NĒ,
- reaģentu nogaršošanai - NĒ,
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
19
Darba drošība laboratorijāDarba drošība laboratorijā
a) jābūt nolīdzsvarotiem (līmeņrāža burbulis centrā),
b) ieslēdzot jānogaida, kamēr rāda 0,00 g,
c) taras atskaitīšanai lieto taustiņu "tara" (T) (- spiest, kad rādījums vairs nemainas, - pārliecināties, vai pēc tam svari
rāda 0,00 g)
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
43
Pa īstam pie darba !Pa īstam pie darba !
Uzdevums 1;
uzdevums 2
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
44
pHpH
ūdens disociācija:
2 H2O H3O+ + OH- hidroksonija jons
( H2O H+ + OH-)
hidroksonija jonu koncentrācija tīrā ūdenī = 1,004*10-7 mol/l
neitrāls šķīdums
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
45
pHpH
( H2O H+ + OH-)
H3O++OH- jonu koncentrācijas saistītas, tāpēc uzrāda tikai vienu - H3O+ (H+) koncentrāciju.
pH = - lg[H+] <= molārā koncentrācija
Bioloģisko šķīdumu pH parasti ir robežās pH 6 – pH 8
Lietus ūdenim normāli pH 5 - 6, jo tajā šķīst CO2 un veidojas vāja skābe – ogļskābe.
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
46
pHpH
Ja ūdenim pievieno skābi:
HCl H+ + Cl-
H2O H+ + OH-
H+ koncentrācija palielinās
Ja ūdenim pievieno sārmu:
NaOH Na+ + OH-
H2O H+ + OH- H+ koncentrācija samazinās
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
47
BuferšķīdumsBuferšķīdums
(Bufersistēma)
šķīdums, kuram ir - noteikts pH, - kas praktiski nemainās
- to atšķaidot - vai pievienojot nedaudz skābes vai sārma.
Bufersistēmu veido vāja skābe un atbilstošā sāls - konjugētā bāze.
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
48
BuferšķīdumsBuferšķīdums
H2PO4 - H+ + HPO4
--
Ja pievieno skābi:
HCl H+ + Cl-
H2PO4 - H+ + HPO4
--
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
49
BuferšķīdumsBuferšķīdums
Ja pievieno sārmu:
NaOH Na+ + OH-
H2PO4 - H+ + HPO4
--
H2O
H2PO4 - H+ + HPO4
--
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
50
pH noteikšanapH noteikšana
Ar Indikatorpapīrīšiem
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
51
pH noteikšanapH noteikšana
Ar pH-metru
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
52
pH noteikšanapH noteikšana
Ar pH-metru
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
53
pH noteikšanapH noteikšana
pH-metra regulēšana
1) pH 7 (cal)
2) pH 4 (slope)
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
54
pH noteikšanapH noteikšana
Elektroda apkope
1) skalošana,
2) nosusināšana(ar filtrpapīru).
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
55
pH noteikšanapH noteikšana
Uzdevums 3
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
56
Enzīma aktivitāteEnzīma aktivitāte
Enzīmi (fermenti) - proteīnu (olbaltumvielu) molekulas, kurām piemīt katalizatora īpašības.
Tie regulē (vairumā gadījumu - ievērojami paātrina) daudzu bioķīmisko reakciju norisi organismā.
Enzīmu spējas paātrināt reakciju norisi raksturo ar jēdzienu - enzīma aktivitāte.
Jo lielāka aktivitāte enzīmam, jo izteiktāk tas palielina katalizētās reakcijas norises ātrumu.
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
57
Enzīma aktivitāteEnzīma aktivitāte
Enzīmu aktivitāti ietekmē dažādi reakcijas vides faktori: - noteiktu jonu klātbūtne, to koncentrācija, - vides pH, - ar reakciju saistīto vielu koncentrācija, - temperatūra un citi faktori.
Vislielākā enzīmu aktivitāte vērojama tad, ja reakcijas vidē ir enzīmam vispiemērotākie jeb optimālie apstākļi.
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
58
Enzīma aktivitāteEnzīma aktivitāte
Peroksidāze
peroksidāze (enzīma katalizēta reakcija)
H2O2 H2O + O
(patvaļīga reakcija)
O + TMB TMB-O (zils krāsojums)
TMB - tetrametilbenzidīns
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
59
Enzīma aktivitāteEnzīma aktivitāte
Būtiski:1) precīza reaģentu sapilināšana;2) precīza laika kontrole.
TMB-O vērtējums(zils krāsojums)
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
60
Veiksmi darbāVeiksmi darbā
Uzdevums 4
uzdevums 5
02.09.2013 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
61
Uz nākošo nodarbību Uz nākošo nodarbību (mājas darbs)(mājas darbs)