This document is posted to help you gain knowledge. Please leave a comment to let me know what you think about it! Share it to your friends and learn new things together.
honlap: http://immunologia.elte.huImmunológiai Tanszék: Déli Tömb 5. emelet
11 09.12. Bevezetés az immunrendszer működésébe
Tematika – Immunológia módszerek
22 09.19. Ellenanyagok előállítása Poliklonális ellenanyagok jellemzése és előállítása. Monoklonális ellenanyagok jellemzése és előállítása. Ellenanyag tisztítási módszerek; kisózás, ioncserélő kromatográfia, gélszűrés, affinitás kromatográfia. Ellenanyagok módosítása enzimatikus hasítással. Molekuláris genetikai módszekkel létrehozott rekombináns ellenanyagok. Az ellenanyagok felhasználásának területei. Ellenanyagok jelölésének lehetőségei.
10 03 Kí é l ti áll t k t tá k lé i i álá3.3. 10.03. Kísérleti állatok tartása, kezelése, immunizálásaAz immunizálás menete. Az antigének általános jellemzése. Adjuvánsok alkalmazása. Állatmodellek; immunhiányos, autoimmun, génkiütött és transzgénikus modellek.
4.4. 10.10. Az antigén és ellenanyag kapcsolódást követő másodlagos reakciókon alapuló (szerológiai) módszerekImmunelektroforézis. Folyadék fázisban végzett precipitáció; precipitációs görbe, gél közegben végzett immundiffúziós eljárások; Ouchterlony módszer Mancini módszer Agglutinációs reakcióimmundiffúziós eljárások; Ouchterlony módszer, Mancini módszer. Agglutinációs reakció.
5.5. 10.17. elmarad
6.6. 10.24. Az antigén-ellenanyag kapcsolódás kimutatásán alapuló, jelöléses módszerek I.A jelöléses mérési technikák elve. Enzyme Linked Immuno-Sorbent Assay (ELISA) tecnikák; direkt, indirekt, szendvics. Az ELISPOT módszer. A Western blot technika alapjai. Az immunhisztokémia módszer.
11 07 A ti é ll k lódá ki t tá á l ló j lölé ód k II7.7. 11.07. Az antigén-ellenanyag kapcsolódás kimutatásán alapuló, jelöléses módszerek II.Áramlási citofluorimetria (FACS), konfokális lézer pásztázó mikroszkópia (CLSM). A módszerek működésének alapjai, eredményeinek értékelése és felhasználási lehetőségei.
8.8. 11.14. A komplementrendszer aktivitásának vizsgálataÖsszkomplement titrálás. Komplementkomponensek mennyiségi meghatározása. Komplement mérések a klinikai gyakorlatban. Komplement mediált lízis.gy p
9.9. 11.21. Steril körülmények között végzett munka feltételei és műszeres háttereSejtkultúra előállítása és fenntartása. Primer sejtkultúrák; humán és állat modellek. Sejtvonalak alkalmazási lehetőségei.Immunsejtek elválasztásaImmunsejtek izolálása, primer sejtkultúra előállítása és fenntartása. Sűrűség-gradiens centrifugálás. Sejtszeparálás mikrogyöngyökkelmikrogyöngyökkel.
11.11. 12.05. Monociták, makrofágok, neutrofil granulociták és dendritikus sejtek funkcionális vizsgálata. A sejtek aktivációjának, antigén felvételének, sejtes kölcsönhatásainak, migrációjának és citokin termelésének maghatározására alkalmazott mérési lehetőségek.
12.12. 12.12. ZH
Immunológiai módszerekMiről lesz szó az előadáson?- Miről lesz szó az előadáson?
1. A legfontosabb immunológiai modellek megismerése, egér ésemberi eredetű sejtek izolálása a steril munka fogalmaemberi eredetű sejtek izolálása, a steril munka fogalma
4. Az immunrendszer sejtjeinek funkcionális vizsgálata –jt kti á ió ff kt f k iók d fi i iáksejtaktiváció, effektor funkciók, deficienciák
A mai előadás szerkezete
Az immunrendszer biológiai funkciói.
A veleszületett és az adaptív immunrendszer.
Az immunrendszer felépítése és szerveződéseAz immunrendszer felépítése és szerveződése,
az immunrendszer sejtes és molekuláris elemei.
Az immunrendszer szerepe
Normál funkciók:Normál funkciók:
• Az immunrendszer fő feladata a fertőzések elleni védelem.
immunitas (lat.) = védettség, mentesség
Véd egyes tumorok ellen is• Véd egyes tumorok ellen is.
Szerepe betegségekben, terápiás vonatkozások:
• Nem megfelelő működése betegséget okozhat (pl. autoimmunitás, allergia)
• Gátja lehet pl. szervátültetésnek.j p
(A. Abbas nyomán)
Immunválasz: az antigén felismerésétől annak eliminálásáig tartóImmunválasz: az antigén felismerésétől annak eliminálásáig tartó immunológiai folyamat.
Kezdeti fázisában az antigén felismerése, felvétele és feldolgozása történik antigén-bemutató sejtek révén.
A központi fázisban az antigénre specifikus B- és T-sejt klónok felszaporodása és végrehajtó (effektor) sejtté érése történik.
Az effektor fázisban zajlik az antigén semlegesítése vagy eliminációja az antigén-specifikus és nem antigén-specifikus (pl. komplementrendszer,
k fá k ált li f itó i ) f l t k ütt h tá ké tmakrofágok általi fagocitózis) folyamatok együttes hatásaként.
Nyirokszervek
Antigén és immunsejtek kapcsolata, az immunsejtek effektor sejtté érése
Immunsejtek fejlődése
Erdei A. (szerk.): Immunológia (Medicina)
j jj
Veleszületett és adaptív immunitás
mikrobák
veleszületett immunitás adaptív immunitás
epitélium
B-limfocita ellenanyagok
epitélium
fagociták
T-limfocita
g
NK jtk l t
órák napok0 6 12 1 4 7
NK-sejtkomplement
0 6 12 1 4 7
(A. Abbas nyomán)
Veleszületett immunrendszer
veleszületett immunitás a fertőzések kivédéséreveleszületett immunitás a fertőzések kivédésére
• születéstől fogva jelen van
• nem antigén-specifikus (patogén-specifikus)
• többszöri találkozás után nem javul a válasz
• nincs memória
• sejtes és humorális elemeket tartalmaz
Az adaptív immunválasz kialakulásához nélkülözhetetlen, aktiválásában, szabályozásábannélkülözhetetlen, aktiválásában, szabályozásában is fontos szerepet játszik.
Adaptív immunrendszer
A fertőzések leküzdésére kialakult immunitás
t lá ” d é• „tanulás” eredménye
• antigén-specifikus
több ö i t lálk á tá h ték bb• többszöri találkozás után hatékonyabb
• memória van
jt é h áli l k t t t l• sejtes és humorális elemeket tartalmaz
• a veleszületett immunrendszer nélkül nem hatékony
A szervezetben jelenlévő antitestek tükrözik
a fertőzéseket, amelyeket az adott egyed
leküzdött (mikroba-ellenes ellenanyagok)
- diagnosztikai jelentőség
Erdei A. (szerk.): Immunológia (Medicina)
Immunhomeosztázisa veleszületett és az adaptív immunrendszer kölcsönhatása- a veleszületett és az adaptív immunrendszer kölcsönhatása
Erdei A. (szerk.): Immunológia (Medicina)
Az immunválaszkialakulásakialakulása
Erdei A. (szerk.): Immunológia (Medicina)
Az immunrendszer működésében résztvevő sejtek
Az immunrendszer fő sejttípusai
i é b ó j k• antigén-bemutató sejtekaz antigén felvételét, feldolgozását és limfociták számára való bemutatásátvégző sejtek (pl. makrofágok, dendritikus sejtek)
• limfocitákaz adaptív immunrendszer sejtjei, az antigén felismerése után védekező funkciótb töltő jt kké f jlőd k (diff iálód k) T é B li f itákbetöltő sejtekké fejlődnek (differenciálódnak) – T- és B-limfociták
• effektor sejtekf hé é jt k (l k iták) l k ik bák t l títják ( l li f itákfehérvérsejtek (leukociták), amelyek a mikrobákat elpusztítják (pl. limfociták, neutrofil granulociták)
3.1. ábra A vérsejtek képződésének helyszínei az élet folyamán
3.2. ábra A hemopoetikus őssejt aszimmetrikus osztódása
3.3. ábraHemopoézis
A vér összetevői
%-os arány45-651-31-3< 1
20-305-10
(fehérvérsejtek)
A veleszületett immunrendszer elemei
A veleszületett immunitás szerepe
• kezdeti válasz• kezdeti válasz- mikrobákra: alapvető korai válasz fertőzések ellen- szöveti sérülésre, elpusztult sejtekre: fontos szerep a sebgyógyulásban,
szöveti regenerációban
• korlátozott típusú védekező reakciók- gyulladás- antivirális aktivitás- antivirális aktivitás
d tí i itá kti álá• adaptív immunitás aktiválása- a veleszületett immunitás „veszély“ jelzést küld
(A. Abbas nyomán)
A veleszületett immunitás jellemzői
• fejlődéstanilag ősibb mint az adaptív immunrendszer• fejlődéstanilag ősibb, mint az adaptív immunrendszer
• azonnal rendelkezésre áll- mikrobával való találkozás nélkül is működik
• gyorsan aktiválódik v. a helyszínre érkezik
• nincs memórianincs memória
(A. Abbas nyomán)
A veleszületett immunrendszer - 1.
• epitélsejtek• epitélsejtek- defenzinek és egyéb antimikrobiális peptidek
• citokinek- gyulladásos citokinek (pl IL-1 TNF)gyulladásos citokinek (pl. IL 1, TNF)- kemokinek (pl. IL-8)- antivirális (pl. interferon)
IL: interleukinTNF: tumor nekrózis faktor (A. Abbas nyomán)
Mit ismer fel a veleszületett immunrendszer?immunrendszer?
• mikrobák általános struktúráit amelyek a saját sejteken• mikrobák általános struktúráit, amelyek a saját sejtekennincsenek jelen– patogén-asszociált molekuláris mintázatok (PAMP)p g ( )- gyakran olyan molekulák, amelyek a mikrobák túléléséhez vagyfertőzőképességéhez nélkülözhetetlenek (pl. kettősszálú RNS)
• olyan struktúrákat, molekulákat, amelyek sérült vagyelpusztuló saját sejtek(b)en találhatók meg – sérülés/veszély-asszociált molekuláris mintázatok (DAMP)- pl. hősokkfehérjék, ATPp j ,
kulcsszerepet játszó limfociták:kulcsszerepet játszó limfociták:a B- és a T-sejtek
Az adaptív immunitás szerepe
• fertőzések ellen hosszan tartó hatékony védettséget ad• fertőzések ellen hosszan tartó, hatékony védettséget ad
• adott antigénre specifikus- az effektor funkciók az adott immunválaszt kiváltó antigénre irányulnak
• immunológiai memória biztosításaó i jt k h ú él tű l jt k é é- memóriasejtek, hosszú életű plazmasejtek révén
Az adaptív immunitás jellemzői
• fejlődéstanilag újabb, ráépült a veleszületett rendszerre- gerincesekkel jelenik meg az evolúció soráng j g
• a B- és T-sejtek jelen vannak, aktivációjukhoz több idő kell- mikrobával való találkozás után a veleszületett immunrendszer aktiválja“- mikrobával való találkozás után a veleszületett immunrendszer „aktiválja
• lassabb reakció- a végrehajtó funkciók ellátását végző, antigénspecifikus sejtklónok megfelelő
számban való felszaporodásához és differenciálódásához napok, akár hetekkellenek
• van memória
• átvihető más egyedbe (specifikus sejtek, ellenanyagok révén)