ÏÐÎÄÓÊÒÛ ÏÈÙÅÂÛÅiso_6579-2002)_meto… · ÔÅÄÅÐÀËÜÍÎÅ ÀÃÅÍÒÑÒÂÎ ÏÎ ÒÅÕÍÈ×ÅÑÊÎÌÓ ÐÅÃÓËÈÐÎÂÀÍÈÞ È ÌÅÒÐÎËÎÃÈÈ

ÔÅÄÅÐÀËÜÍÎÅ ÀÃÅÍÒÑÒÂÎ

ÏÎ ÒÅÕÍÈ×ÅÑÊÎÌÓ ÐÅÃÓËÈÐÎÂÀÍÈÞ È ÌÅÒÐÎËÎÃÈÈ

Í À Ö È Î Í À Ë Ü Í Û É

Ñ Ò À Í Ä À Ð Ò

Ð Î Ñ Ñ È É Ñ Ê Î É

Ô Å Ä Å Ð À Ö È È

ÃÎÑÒ Ð52814—

2007(ÈÑÎ 6579:2002)

ÁÇ

3—

20

08

/46

ÏÐÎÄÓÊÒÛ ÏÈÙÅÂÛÅ

Ìåòîä âûÿâëåíèÿ áàêòåðèé ðîäà Salmonella

ISO 6579:2002Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal måthod

for the detection of Salmonella spp.(MOD)

Èçäàíèå îôèöèàëüíîå

Ïðåäèñëîâèå

Öåëè è ïðèíöèïû ñòàíäàðòèçàöèè â Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè óñòàíîâëåíû Ôåäåðàëüíûì çàêîíîì îò27 äåêàáðÿ 2002 ãîäà ¹ 184-ÔÇ «Î òåõíè÷åñêîì ðåãóëèðîâàíèè», à ïðàâèëà ïðèìåíåíèÿ íàöèîíàëüíûõñòàíäàðòîâ Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè — ÃÎÑÒ Ð 1.0—2004 «Ñòàíäàðòèçàöèÿ â Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè.Îñíîâíûå ïîëîæåíèÿ»

Ñâåäåíèÿ î ñòàíäàðòå

1 ÐÀÇÐÀÁÎÒÀÍ Ãîñóäàðñòâåííûì íàó÷íûì ó÷ðåæäåíèåì «Âñåðîññèéñêèé íàó÷íî-èññëåäîâàòåëü-ñêèé èíñòèòóò êîíñåðâíîé è îâîùåñóøèëüíîé ïðîìûøëåííîñòè» (ÃÍÓ ÂÍÈÈÊÎÏ) íà îñíîâå àóòåíòè÷íî-ãî ïåðåâîäà ñòàíäàðòà, óêàçàííîãî â ïóíêòå 4

2 ÂÍÅÑÅÍ Òåõíè÷åñêèì êîìèòåòîì ïî ñòàíäàðòèçàöèè ÒÊ 93 «Ïðîäóêòû ïåðåðàáîòêè ôðóêòîâ,îâîùåé è ãðèáîâ»

3 ÓÒÂÅÐÆÄÅÍ È ÂÂÅÄÅÍ Â ÄÅÉÑÒÂÈÅ Ïðèêàçîì Ôåäåðàëüíîãî àãåíòñòâà ïî òåõíè÷åñêîìóðåãóëèðîâàíèþ è ìåòðîëîãèè îò 27 äåêàáðÿ 2007 ã. ¹ 441-ñò

4 Íàñòîÿùèé ñòàíäàðò ÿâëÿåòñÿ ìîäèôèöèðîâàííûì ïî îòíîøåíèþ ê ìåæäóíàðîäíîìó ñòàíäàðòóÈÑO 6579:2002 «Ìèêðîáèîëîãèÿ ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ è êîðìîâ äëÿ æèâîòíûõ. Ãîðèçîíòàëüíûé ìåòîäâûÿâëåíèÿ Salmonella spp.» (ISO 6579:2002 «Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontalmåthod for the detection of Salmonella spp.») â ÷àñòè ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ. Ïðè ýòîì äîïîëíèòåëüíûå ïîëî-æåíèÿ è òðåáîâàíèÿ, âêëþ÷åííûå â òåêñò ñòàíäàðòà äëÿ ó÷åòà ïîòðåáíîñòåé íàöèîíàëüíîé ýêîíîìèêèÐîññèéñêîé Ôåäåðàöèè è îñîáåííîñòåé ðîññèéñêîé íàöèîíàëüíîé ñòàíäàðòèçàöèè, âûäåëåíû â òåêñòåñòàíäàðòà êóðñèâîì.

Íàèìåíîâàíèå íàñòîÿùåãî ñòàíäàðòà èçìåíåíî îòíîñèòåëüíî íàèìåíîâàíèÿ óêàçàííîãî ìåæäó-íàðîäíîãî ñòàíäàðòà äëÿ ïðèâåäåíèÿ â ñîîòâåòñòâèå ñ ÃÎÑÒ Ð 1.5—2004 (ïîäðàçäåë 3.5).

Ïðè ïðèìåíåíèè íàñòîÿùåãî ñòàíäàðòà ðåêîìåíäóåòñÿ èñïîëüçîâàòü ñâåäåíèÿ î ñîîòâåòñòâèèññûëî÷íûõ ìåæäóíàðîäíûõ ñòàíäàðòîâ íàöèîíàëüíûì ñòàíäàðòàì Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè, èñïîëüçî-âàííûì â íàñòîÿùåì ñòàíäàðòå â êà÷åñòâå íîðìàòèâíûõ ññûëîê, óêàçàííûå â ïðèëîæåíèè Ã

5 ÂÂÅÄÅÍ ÂÏÅÐÂÛÅ

Èíôîðìàöèÿ îá èçìåíåíèÿõ ê íàñòîÿùåìó ñòàíäàðòó ïóáëèêóåòñÿ â åæåãîäíî èçäàâàåìîìèíôîðìàöèîííîì óêàçàòåëå «Íàöèîíàëüíûå ñòàíäàðòû», à òåêñòèçìåíåíèé è ïîïðàâîê — â åæåìå-ñÿ÷íî èçäàâàåìûõ èíôîðìàöèîííûõ óêàçàòåëÿõ «Íàöèîíàëüíûå ñòàíäàðòû».  ñëó÷àå ïåðåñìîòðà(çàìåíû) èëè îòìåíû íàñòîÿùåãî ñòàíäàðòà ñîîòâåòñòâóþùåå óâåäîìëåíèå áóäåò îïóáëèêîâàíîâ åæåìåñÿ÷íî èçäàâàåìîì óêàçàòåëå «Íàöèîíàëüíûå ñòàíäàðòû». Ñîîòâåòñòâóþùàÿ èíôîðìà-öèÿ, óâåäîìëåíèå è òåêñòû ðàçìåùàþòñÿ òàêæå â èíôîðìàöèîííîé ñèñòåìå îáùåãî ïîëüçîâà-íèÿ — íà îôèöèàëüíîì ñàéòå Ôåäåðàëüíîãî àãåíòñòâà ïî òåõíè÷åñêîìó ðåãóëèðîâàíèþ èìåòðîëîãèè â ñåòè Èíòåðíåò

© Ñòàíäàðòèíôîðì, 2008

Íàñòîÿùèé ñòàíäàðò íå ìîæåò áûòü ïîëíîñòüþ èëè ÷àñòè÷íî âîñïðîèçâåäåí, òèðàæèðîâàí è ðàñ-ïðîñòðàíåí â êà÷åñòâå îôèöèàëüíîãî èçäàíèÿ áåç ðàçðåøåíèÿ Ôåäåðàëüíîãî àãåíòñòâà ïî òåõíè÷åñêî-ìó ðåãóëèðîâàíèþ è ìåòðîëîãèè

II

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007

Ñîäåðæàíèå

1 Îáëàñòü ïðèìåíåíèÿ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1

2 Íîðìàòèâíûå ññûëêè . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1

3 Òåðìèíû è îïðåäåëåíèÿ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2

4 Ñóùíîñòü ìåòîäà . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2

5 Ïèòàòåëüíûå ñðåäû, ðåàêòèâû è ñûâîðîòêè . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2

6 Àïïàðàòóðà, ìàòåðèàëû è ðåàêòèâû. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3

7 Îòáîð è ïîäãîòîâêà ïðîá . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4

8 Ïðîâåäåíèå èñïûòàíèÿ. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4

9 Îáðàáîòêà ðåçóëüòàòîâ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9

10 Ïðîòîêîë èñïûòàíèÿ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9

Ïðèëîæåíèå À (îáÿçàòåëüíîå) Èíòåðïðåòàöèÿ áèîõèìè÷åñêèõ òåñòîâ . . . . . . . . . . . . . . . . . 10

Ïðèëîæåíèå Á (ñïðàâî÷íîå) Ñõåìà âûÿâëåíèÿ áàêòåðèé ðîäà Salmonella . . . . . . . . . . . . . . . 11

Ïðèëîæåíèå Â (îáÿçàòåëüíîå) Ñîñòàâ è ïðèãîòîâëåíèå ïèòàòåëüíûõ ñðåä è ðåàêòèâîâ . . . . . . . 12

Ïðèëîæåíèå à (ñïðàâî÷íîå) Ñâåäåíèÿ î ñîîòâåòñòâèè ññûëî÷íûõ ìåæäóíàðîäíûõ ñòàíäàðòîâ

íàöèîíàëüíûì ñòàíäàðòàì Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè, èñïîëüçîâàííûì â íàñòîÿùåì

ñòàíäàðòå â êà÷åñòâå íîðìàòèâíûõ ññûëîê . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19

III

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007

ÏÐÎÄÓÊÒÛ ÏÈÙÅÂÛÅ

Ìåòîä âûÿâëåíèÿ áàêòåðèé ðîäà Salmonella

Food products. Method for the detection of Salmonella

Äàòà ââåäåíèÿ — 2009—01—01

1 Îáëàñòü ïðèìåíåíèÿ

Íàñòîÿùèé ñòàíäàðò ðàñïðîñòðàíÿåòñÿ íà ïèùåâûå ïðîäóêòû è óñòàíàâëèâàåò ìåòîä âûÿâëåíèÿ âîïðåäåëåííîé ìàññå èëè îáúåìå ïðîäóêòà áàêòåðèé ðîäà Salmonella, âêëþ÷àÿ Salmonella Typhi èSalmonella Paratyphi.

2 Íîðìàòèâíûå ññûëêè

 íàñòîÿùåì ñòàíäàðòå èñïîëüçîâàíû íîðìàòèâíûå ññûëêè íà ñëåäóþùèå ñòàíäàðòû:ÃÎÑÒ Ð 51446—99 (ÈÑÎ 7218—96) Ìèêðîáèîëîãèÿ. Ïðîäóêòû ïèùåâûå. Îáùèå ïðàâèëà ìèêðî-

áèîëîãè÷åñêèõ èññëåäîâàíèéÃÎÑÒ Ð 51652—2000 Ñïèðò ýòèëîâûé ðåêòèôèêîâàííûé èç ïèùåâîãî ñûðüÿ. Òåõíè÷åñêèå óñëî-

âèÿÃÎÑÒ 4209—77 Ðåàêòèâû. Ìàãíèé õëîðèñòûé 6-âîäíûé. Òåõíè÷åñêèå óñëîâèÿÃÎÑÒ 6672—75 Ñòåêëà ïîêðîâíûå äëÿ ìèêðîïðåïàðàòîâ. Òåõíè÷åñêèå óñëîâèÿÃÎÑÒ 6691—77 Ðåàêòèâû. Êàðáàìèä. Òåõíè÷åñêèå óñëîâèÿÃÎÑÒ 6709—72 Âîäà äèñòèëëèðîâàííàÿ. Òåõíè÷åñêèå óñëîâèÿÃÎÑÒ 9284—75 Ñòåêëà ïðåäìåòíûå äëÿ ìèêðîïðåïàðàòîâ. Òåõíè÷åñêèå óñëîâèÿÃÎÑÒ 9536—79 Ñïèðò èçîáóòèëîâûé òåõíè÷åñêèé. Òåõíè÷åñêèå óñëîâèÿÃÎÑÒ 10444.1—84 Êîíñåðâû. Ïðèãîòîâëåíèå ðàñòâîðîâ ðåàêòèâîâ, êðàñîê, èíäèêàòîðîâ è

ïèòàòåëüíûõ ñðåä, ïðèìåíÿåìûõ â ìèêðîáèîëîãè÷åñêîì àíàëèçåÃÎÑÒ 24104—2001 Âåñû ëàáîðàòîðíûå. Îáùèå òåõíè÷åñêèå òðåáîâàíèÿÃÎÑÒ 24363—80 Êàëèÿ ãèäðîîêèñü. Òåõíè÷åñêèå óñëîâèÿÃÎÑÒ 26668—85 Ïðîäóêòû ïèùåâûå è âêóñîâûå. Ìåòîäû îòáîðà ïðîá äëÿ ìèêðîáèîëîãè÷åñêèõ

àíàëèçîâÃÎÑÒ 26669—85 Ïðîäóêòû ïèùåâûå è âêóñîâûå.Ïîäãîòîâêà ïðîá äëÿ ìèêðîáèîëîãè÷åñêèõ àíà-

ëèçîâÃÎÑÒ 26670—91 Ïðîäóêòû ïèùåâûå. Ìåòîäû êóëüòèâèðîâàíèÿ ìèêðîîðãàíèçìîâÃÎÑÒ 30425—97 Êîíñåðâû. Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ ïðîìûøëåííîé ñòåðèëüíîñòè

Ï ð è ì å ÷ à í è å — Ïðè ïîëüçîâàíèè íàñòîÿùèì ñòàíäàðòîì öåëåñîîáðàçíî ïðîâåðèòü äåéñòâèå ññûëî÷-íûõ ñòàíäàðòîâ â èíôîðìàöèîííîé ñèñòåìå îáùåãî ïîëüçîâàíèÿ — íà îôèöèàëüíîì ñàéòå Ôåäåðàëüíîãî àãåíò-ñòâà ïî òåõíè÷åñêîìó ðåãóëèðîâàíèþ è ìåòðîëîãèè â ñåòè Èíòåðíåò èëè ïî åæåãîäíî èçäàâàåìîìó èíôîðìàöèîííî-ìó óêàçàòåëþ «Íàöèîíàëüíûå ñòàíäàðòû», êîòîðûé îïóáëèêîâàí ïî ñîñòîÿíèþ íà 1 ÿíâàðÿ òåêóùåãî ãîäà, à òàêæåïî ñîîòâåòñòâóþùèì åæåìåñÿ÷íî èçäàâàåìûì èíôîðìàöèîííûì óêàçàòåëÿì, îïóáëèêîâàííûì â òåêóùåì ãîäó.Åñëè ññûëî÷íûé ñòàíäàðò çàìåíåí (èçìåíåí), òî ïðè ïîëüçîâàíèè íàñòîÿùèì ñòàíäàðòîì ñëåäóåò ðóêîâîäñòâî-âàòüñÿ çàìåíÿþùèì (èçìåíåííûì) ñòàíäàðòîì. Åñëè ññûëî÷íûé ñòàíäàðò îòìåíåí áåç çàìåíû, òî ïîëîæåíèå, â êî-òîðîì äàíà ññûëêà íà íåãî, ïðèìåíÿåòñÿ â ÷àñòè, íå çàòðàãèâàþùåé ýòó ññûëêó.

1

Èçäàíèå îôèöèàëüíîå

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007(ÈÑÎ 6579:2002)

Í À Ö È Î Í À Ë Ü Í Û É Ñ Ò À Í Ä À Ð Ò Ð Î Ñ Ñ È É Ñ Ê Î É Ô Å Ä Å Ð À Ö È È

3 Òåðìèíû è îïðåäåëåíèÿ

 íàñòîÿùåì ñòàíäàðòå ïðèìåíåíû ñëåäóþùèå òåðìèíû ñ ñîîòâåòñòâóþùèìè îïðåäåëåíèÿìè:3.1 áàêòåðèè ðîäà Salmonella: Ìèêðîîðãàíèçìû, êîòîðûå íà àãàðèçîâàííûõ ñåëåêòèâíî-äèàã-

íîñòè÷åñêèõ ñðåäàõ îáðàçóþò òèïè÷íûå èëè íå ñîâñåì òèïè÷íûå êîëîíèè.

Ï ð è ì å ÷ à í è å — Îïèñàíèå è ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ áèîõèìè÷åñêèõ è ñåðîëîãè÷åñêèõ õàðàêòåðèñòèê ýòèõìèêðîîðãàíèçìîâ ïðèâåäåíû â íàñòîÿùåì ñòàíäàðòå.

3.2 âûÿâëåíèå áàêòåðèé ðîäà Salmonella: Îïðåäåëåíèå ïðèñóòñòâèÿ èëè îòñóòñòâèÿ áàêòåðèéðîäàSalmonellaâ îïðåäåëåííîéìàññåèëèîáúåìåïðîäóêòàâ ñîîòâåòñòâèèñ íàñòîÿùèìñòàíäàðòîì.

4 Ñóùíîñòü ìåòîäà

4.1 Îáùèå ïîëîæåíèÿ

Ìåòîäâûÿâëåíèÿáàêòåðèéðîäà Salmonella â îïðåäåëåííîéìàññå èëèîáúåìå ïðîäóêòà ñîñòîèòèç÷åòûðåõ ýòàïîâ (ñì. 4.2; 4.3; 4.4; 4.5 è ïðèëîæåíèå À).

4.2 Ïðåäâàðèòåëüíîå îáîãàùåíèå â íåñåëåêòèâíîé æèäêîé ñðåäå

Áàêòåðèè ðîäà Salmonella ìîãóò ïðèñóòñòâîâàòü â ïðîäóêòå â íåáîëüøîì êîëè÷åñòâå âìåñòå ñ áîëü-øèì êîëè÷åñòâîì äðóãèõ áàêòåðèé èç ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae èëè äðóãèõ ñåìåéñòâ. Ïîýòîìó ïðåä-âàðèòåëüíîå îáîãàùåíèå íåîáõîäèìî äëÿ âûÿâëåíèÿ íåáîëüøîãî ÷èñëà áàêòåðèé ðîäà Salmonella èëèñóáëåòàëüíî ïîâðåæäåííûõ áàêòåðèé ðîäà Salmonella.

Çàáóôåðåííóþ ïåïòîííóþ âîäó èíîêóëèðóþò ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå íàâåñêîé ïðîäóêòà,çàòåì èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 � 1) °C â òå÷åíèå (18 � 2) ÷.

Äëÿ íåêîòîðûõ ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ èñïîëüçóþò äðóãîå ïðåäâàðèòåëüíîå îáîãàùåíèå (ñì. 8.1.2).Äëÿ áîëüøåãî ýôôåêòà ïåðåä âíåñåíèåì íàâåñêè ïðîäóêòà çàáóôåðåííóþ ïåïòîííóþ âîäó íàãðå-

âàþò äî òåìïåðàòóðû (37 � 1) °C.

4.3 Îáîãàùåíèå â ñåëåêòèâíîé æèäêîé ñðåäå

Ñðåäó Ðàïïàïîðòà-Âàññèëèàäèñà ñ ñîåé (RVS-áóëüîí) è îäíó èç äâóõ ñðåä: Ìþëëåð-Êàóôôìàíòåòðàòèîíàòíûé áóëüîí (ÌÊÒ-áóëüîí) èëè ñåëåíèòîâóþ ñðåäó — èíîêóëèðóþò êóëüòóðîé, ïîëó÷åííîé ïî4.2. Ïîñëå ïîñåâà RVS-áóëüîí èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (41,5 � 1,0) °C â òå÷åíèå (24 � 3) ÷,à ÌÊÒ-áóëüîí è ñåëåíèòîâóþ ñðåäó — ïðè òåìïåðàòóðå (37 � 1) °C â òå÷åíèå (24 � 3) ÷.

4.4 Ïåðåñåâ íà ÷àøêè äëÿ èäåíòèôèêàöèè

Êóëüòóðû, ïîëó÷åííûå ïî 4.3, ïåðåñåâàþò íà äâå ñåëåêòèâíûå àãàðèçîâàííûå ñðåäû:- êñèëîçà-ëèçèí-äåçîêñèõîëàòíûé àãàð (XLD-àãàð) è- íà îäíó èç ñëåäóþùèõ àãàðèçîâàííûõ ñðåä: âèñìóò-ñóëüôèò àãàð, ñðåäó Ïëîñêèðåâà, ñðåäó

Ýíäî, ñðåäó Ëåâèíà èëè áðèëëèàíòîâûé çåëåíûé àãàð.Ïîñåâû íà àãàðèçîâàííûõ ñðåäàõ èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 � 1) °C â òå÷åíèå (24 � 3) ÷.

4.5 Ïðîâåäåíèå èäåíòèôèêàöèè

Êîëîíèè, ïðåäïîëîæèòåëüíî îòíîñÿùèåñÿ ê áàêòåðèÿì ðîäà Salmonellà, ïîëó÷åííûå íà ÷àøêàõ ïî4.4, èäåíòèôèöèðóþò ñ ïîìîùüþ áèîõèìè÷åñêèõ è ñåðîëîãè÷åñêèõ òåñòîâ.

5 Ïèòàòåëüíûå ñðåäû, ðåàêòèâû è ñûâîðîòêè

5.1 Îáùèå ïîëîæåíèÿ

Õèìè÷åñêèå âåùåñòâà, èñïîëüçóåìûå äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ïèòàòåëüíûõ ñðåä è ðåàêòèâîâ, äîëæíûáûòü àíàëèòè÷åñêîãî êà÷åñòâà.

5.2 Ïèòàòåëüíûå ñðåäû è ðåàêòèâû

Ñîñòàâ è ïðèãîòîâëåíèå ïèòàòåëüíûõ ñðåä è ðåàêòèâîâ óêàçàíû â ïðèëîæåíèè Â.5.2.1 Ñðåäà äëÿ íåñåëåêòèâíîãî ïðåäâàðèòåëüíîãî îáîãàùåíèÿ: çàáóôåðåííàÿ ïåïòîííàÿ âîäà

ïî Â.1.5.2.2 Ïåðâàÿ ñåëåêòèâíàÿ îáîãàòèòåëüíàÿ ñðåäà: ñðåäà Ðàïïàïîðòà-Âàññèëèàäèñà ñ ñîåé

(RVS-áóëüîí) ïî Â.2.

2

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007

5.2.3 Âòîðàÿ ñåëåêòèâíàÿ îáîãàòèòåëüíàÿ ñðåäà: ñåëåíèòîâàÿ ñðåäà ïî Â.3.5.2.4 Òðåòüÿ ñåëåêòèâíàÿ îáîãàòèòåëüíàÿ ñðåäà: òåòðàòèîíàòíûé áóëüîí Ìþëëåð-Êàóôìàíà

(ÌÊÒ-áóëüîí) ïî Â.4.5.2.5 Àãàðèçîâàííûå ñåëåêòèâíûå ñðåäû äëÿ ÷àøåê.5.2.5.1 Ïåðâàÿ ñðåäà: êñèëîçà-ëèçèí-äåîêñèõîëàòíûé àãàð (XLD-àãàð) ïî Â.5.5.2.5.2 Âòîðàÿ ñðåäà ïî Â.6.5.2.6 Ïèòàòåëüíûé àãàð ïî Â.7.5.2.7 Ìÿñî-ïåïòîííûé àãàð èëè ÃÐÌ-àãàð (ïèòàòåëüíûé àãàð äëÿ êóëüòèâèðîâàíèÿ ìèêðîîðãà-

íèçìîâ íà îñíîâå ãèäðîëèçàòà ðûáíîé ìóêè) ïî Â.8.5.2.8 Ìÿñî-ïåïòîííûé áóëüîí ñ ãëþêîçîé ïî Â.9.5.2.9 Ñðåäû ñ óãëåâîäàìè (ñðåäû Ãèññà) ïî Â.10.5.2.10 Òðåõñàõàðíûé æåëåçèñòûé àãàð (TSI-àãàð) èëè àãàð Êëèãëåðà, èëè àãàð Îëüêåíèöêîãî

ïî Â.11.5.2.11 Àãàð ñ ìî÷åâèíîé (Êðèñòåíñåíà) ïî Â.12.5.2.12 L — ëèçèí-äåêàðáîêñèëàçíàÿ ñðåäà ïî Â.13.5.2.13 Ðåàêòèâ äëÿ îïðåäåëåíèÿ �-ãàëàêòîçèäàçû (èëè èñïîëüçóþòñÿ â ñîîòâåòñòâèè ñ èíñòðóêöè-

åé èçãîòîâèòåëÿ ãîòîâûå áóìàæíûå äèñêè) ïî Â.14.5.2.14 Ðåàêòèâ äëÿ ðåàêöèè Ôîãåñ-Ïðîñêàóåðà (VP) ïî Â.15.5.2.15 Ðåàêòèâû äëÿ èíäîëüíîé ðåàêöèè ïî Â.16.5.2.16 Òðèïòîí/òðèïòîôàíîâàÿ ñðåäà ïî Â.17.5.2.17 Áóëüîí Õîòòèíãåðà ïî Â.18.5.2.18 Ìÿñî-ïåïòîííûé áóëüîí ñ 0,05 % L-òðèïòîôàíà ïî Â.19.5.2.19 Ïîëóæèäêèé ïèòàòåëüíûé àãàð ïî Â.20.5.2.20 Ïîëóæèäêèé ìÿñî-ïåïòîííûé àãàð ïî Â.21.5.2.21 Ôèçèîëîãè÷åñêèé ðàñòâîð ïî Â.22.

5.3 Ñûâîðîòêè

Èìååòñÿ íåñêîëüêî òèïîâ àããëþòèíèðóþùèõ ñûâîðîòîê, ñîäåðæàùèõ àíòèòåëà äëÿ îäíîãî èëèíåñêîëüêèõ Î-àíòèãåíîâ, ò.å. àíòèñûâîðîòêè, ñîäåðæàùèå îäíó èëè áîëåå «Î» ãðóïï (ìîíîâàëåíòíûåèëè ïîëèâàëåíòíûå àíòè-Î-ñûâîðîòêè), àíòè-Vi-ñûâîðîòêè è àíòèñûâîðîòêè, ñîäåðæàùèå àíòèòåëà äëÿîäíîãî èëè íåñêîëüêèõ Í-ôàêòîðîâ (ìîíîâàëåíòíûå èëè ïîëèâàëåíòíûå àíòè-Í-ñûâîðîòêè).

Êàæäîå îïûòíîå îïðåäåëåíèå äîëæíî äàâàòü ãàðàíòèþ, ÷òî èñïîëüçóåìàÿ àíòèñûâîðîòêà ïðèãîä-íà äëÿ âûäåëåíèÿ âñåõ ñåðîòèïîâ áàêòåðèé ðîäà Salmonella.

Ñóõèå àããëþòèíèðóþùèå àäñîðáèðîâàííûå Î-, Vi-, Í-ñàëüìîíåëëåçíûå ñûâîðîòêè ïðîìûøëåííî-ãî ïðîèçâîäñòâà ãîòîâÿò ïåðåä óïîòðåáëåíèåì ïî ïðèëàãàåìîé ê íèì èíñòðóêöèè.

6 Àïïàðàòóðà, ìàòåðèàëû è ðåàêòèâû

Ïðèåìëåìîé àëüòåðíàòèâîé ïîñóäå ìíîãîðàçîâîãî ïðèìåíåíèÿ ÿâëÿåòñÿ îäíîðàçîâàÿ ïîñóäà,åñëè îíà îòâå÷àåò ñîîòâåòñòâóþùèì òðåáîâàíèÿì.

Îáû÷íîå ëàáîðàòîðíîå îáîðóäîâàíèå è ðåàêòèâû äëÿ ìèêðîáèîëîãè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé ïîÃÎÑÒ Ð 51446, ÃÎÑÒ Ð 10444.1 ñî ñëåäóþùèìè äîïîëíåíèÿìè:

Àïïàðàò äëÿ ñóõîé ñòåðèëèçàöèè (ñòåðèëèçàöèîííûé ñóøèëüíûé øêàô) èëè âëàæíîé ñòåðèëèçà-öèè (àâòîêëàâ) ïî ÃÎÑÒ Ð 51446 (ïîäðàçäåëû 4.5 è 4.10).

Òåðìîñòàò, ïîääåðæèâàþùèé òåìïåðàòóðó (37 � 1) °C ïî ÃÎÑÒ Ð 51446 (ïîäðàçäåë 4.6).Âîäÿíàÿ áàíÿ, ïîääåðæèâàþùàÿ òåìïåðàòóðó (41,5 � 1,0) °C, èëè òåðìîñòàò, ïîääåðæèâàþùèé

òåìïåðàòóðó (41,5 � 1,0) °C ïî ÃÎÑÒ Ð 51446 (ïîäðàçäåë 4.9).Âîäÿíàÿ áàíÿ, ïîääåðæèâàþùàÿ òåìïåðàòóðó 44 °C — 47 °C è (37 � 1) °C, ïî ÃÎÑÒ Ð 51446 (ïîäðàç-

äåë 4.9).Ïðèáîð äëÿ ìåìáðàííîé ôèëüòðàöèè.Âåñû ëàáîðàòîðíûå îáùåãî íàçíà÷åíèÿ ïî ÃÎÑÒ 24104 ñ íàèáîëüøèì ïðåäåëîì âçâåøèâàíèÿ

200 ã (äëÿ âçâåøèâàíèÿ ðåàêòèâîâ) ñ ïðåäåëîì äîïóñêàåìîé àáñîëþòíîé ïîãðåøíîñòè îäíîêðàòíîãîâçâåøèâàíèÿ íå áîëåå � 0,01 ìã.

Âåñû ëàáîðàòîðíûå îáùåãî íàçíà÷åíèÿ ïî ÃÎÑÒ 24104 ñ íàèáîëüøèì ïðåäåëîì âçâåøèâàíèÿ1 êã (äëÿ âçâåøèâàíèÿ ïðîäóêòà) ñ ïðåäåëîì äîïóñêàåìîé àáñîëþòíîé ïîãðåøíîñòè îäíîêðàòíîãîâçâåøèâàíèÿ íå áîëåå � 20,0 ìã.

3

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007

Ìèêðîñêîï áèîëîãè÷åñêèé, îáåñïå÷èâàþùèé ïðîñìîòð â ïðîõîäÿùåì ñâåòå, ñ óâåëè÷åíèåì900x — 1000x.

Áàêòåðèîëîãè÷åñêàÿ ïåòëÿ äèàìåòðîì îêîëî 3 ìì.ðÍ-ìåòð ñ òî÷íîñòüþ êàëèáðîâêè � 0,1 ðÍ ïðè òåìïåðàòóðå 20 °C — 25 °C ïî ÃÎÑÒ Ð 51446 (ïîäðàç-

äåë 4.4).Ñòåêëà ïðåäìåòíûå ïî ÃÎÑÒ 9284.Ñòåêëà ïîêðîâíûå ïî ÃÎÑÒ 6672.Ïðîáèðêè èëè ôëàêîíû ñîîòâåòñòâóþùåé âìåñòèìîñòè.Ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû áóòûëêè èëè ôëàêîíû ñ íåòîêñè÷íûìè ìåòàëëè÷åñêèìè èëè ïëàñòèêîâû-

ìè çàâèí÷èâàþùèìèñÿ êðûøêàìè.Ãðàäóèðîâàííûå èëè àâòîìàòè÷åñêèå ïèïåòêè âìåñòèìîñòüþ 10, 2 è 1 ñì3 ñ ãðàäóèðîâêîé íà 0,5 è

0,1 ñì3.×àøêè Ïåòðè ñðåäíåãî ðàçìåðà (äèàìåòð 90 èëè 100 ìì) è/èëè áîëüøèå (äèàìåòð 140 ìì).Ñïèðò èçîáóòèëîâûé ïî ÃÎÑÒ 9536.Áðèëëèàíòîâûé çåëåíûé.Âîäà äèñòèëëèðîâàííàÿ ïî ÃÎÑÒ 6709.Æåë÷ü áû÷üÿ ñóõàÿ èëè íàòóðàëüíàÿ.Æåëåçî (III) àììîíèé öèòðàò.Æåëåçî (III) öèòðàò.Êàëèÿ ãèäðîîêèñü ïî ÃÎÑÒ 24363.Êàðáàìèä (ìî÷åâèíà) ïî ÃÎÑÒ 6691.Êîíòðîëüíûé øòàìì áàêòåðèé ðîäà Salmonella, íå îòíîñÿùèõñÿ ê òèôîçíîé ãðóïïå.Êðåàòèí ìîíîãèäðàò.Êñèëîçà.L-ëèçèí ãèäðîõëîðèä.4-äèìåòèëàìèíîáåíçàëüäåãèä.Ìàãíèé õëîðèñòûé ïî ÃÎÑÒ 4209.Íàòðèé êèñëûé ñåëåíèñòîêèñëûé (NaHSeO3).Íàòðèé ãèïîñóëüôèò (Na2S2O3 � 5 H2O).Íàòðèé äåîêñèõîëàò.î-íèòðîôåíèë � -D-ãàëàêòîïèðàíîçèä (ONPG).Íîâîáèîöèí íàòðèåâàÿ ñîëü.Ñóõèå àããëþòèíèðóþùèå àäñîðáèðîâàííûå ïîëèâàëåíòíûå ñàëüìîíåëëåçíûå Î-ñûâîðîòêè

îñíîâíûõ ãðóïï À, Â, Ñ, Ä, Å è ðåäêèõ ãðóïï.Vi- è Í-àããëþòèíèðóþùèå ñûâîðîòêè.Òîëóîë.Ôåíîëîâûé êðàñíûé.Ôåðìåíòàòèâíûé ãèäðîëèçàò ñîè.Ýêñòðàêò ìÿñíîé.Äîïóñêàåòñÿ ïðèìåíåíèå ñðåäñòâ èçìåðåíèé, âñïîìîãàòåëüíîãî îáîðóäîâàíèÿ ñ àíàëîãè÷íûìè

ìåòðîëîãè÷åñêèìè è òåõíè÷åñêèìè õàðàêòåðèñòèêàìè, à òàêæå ìàòåðèàëîâ è ðåàêòèâîâ ïî êà÷åñ-òâó íå õóæå óêàçàííûõ.

7 Îòáîð è ïîäãîòîâêà ïðîá

Îòáîð è ïîäãîòîâêà ïðîá — ïî ÃÎÑÒ 26668, ÃÎÑÒ 26669.Âàæíî, ÷òîáû äëÿ èñïûòàíèÿ ïîñòóïèëà ïðåäñòàâèòåëüíàÿ ïðîáà, íå ïîâðåæäåííàÿ è íå èçìåíåí-

íàÿ â õîäå òðàíñïîðòèðîâàíèÿ èëè õðàíåíèÿ.

8 Ïðîâåäåíèå èñïûòàíèÿ

Ñõåìà ïðîâåäåíèÿ èñïûòàíèÿ ïðèâåäåíà â ïðèëîæåíèè Á.

8.1 Íàâåñêà è èñõîäíîå ðàçâåäåíèå

8.1.1 Îáùèå ïîëîæåíèÿÄëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ èñõîäíîé ñóñïåíçèè èñïîëüçóþò êàê ðàçáàâèòåëü íåñåëåêòèâíóþ ñðåäó, óêàçàí-

íóþ â 5.2.1 è 4.2 (çàáóôåðåííóþ ïåïòîííóþ âîäó).

4

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007

Åñëè ìàññà ïðîáû èíàÿ, ÷åì 25 ã, èñïîëüçóþò íåîáõîäèìîå êîëè÷åñòâî íåñåëåêòèâíîé ñðåäû, èñõî-äÿ èç ñîîòíîøåíèÿ 1:10.

Äëÿ óìåíüøåíèÿ îáúåìà ðàáîòû, êîãäà èñïûòûâàþò áîëüøå îäíîé ïðîáû îò îïðåäåëåííîãî ïðî-äóêòà è êîãäà î÷åâèäíî, ÷òî îáúåäèíåííàÿ íàâåñêà íå âëèÿåò íà ðåçóëüòàò èñïûòàíèÿ, — íàâåñêè îáúå-äèíÿþò.

Ïðèìåð. Åñëè íåîáõîäèìî èññëåäîâàòü 10 íàâåñîê ïî 25 ã, èõ îáúåäèíÿþò è ê 250 ã äîáàâëÿþò2,25 äì 3 íåñåëåêòèâíîé ñðåäû.

8.1.2 Ñïåöèôè÷íîñòü ïðèãîòîâëåíèÿ èñõîäíîé ñóñïåíçèè äëÿ íåêîòîðûõ ïðîäóêòîâÓêàçàííàÿ ñïåöèôè÷íîñòü ïðèãîòîâëåíèÿ ìîæåò áûòü ïðèìåíåíà òîëüêî äëÿ âûÿâëåíèÿ áàêòåðèé

ðîäà Salmonella.8.1.2.1 Êàêàî è êàêàîñîäåðæàùèå ïðîäóêòû (ìàññîâàÿ äîëÿ êàêàî áîëåå 20 %)Äîáàâëÿþò â çàáóôåðåííóþ ïåïòîííóþ âîäó (ñì. 5.2.1) 50 ã íåêèñëîãî êàçåèíà èëè 100 ã/äì3 îáåç-

æèðåííîãî ìîëî÷íîãî ïîðîøêà è, åñëè ïèùåâûå ïðîäóêòû ïðåäïîëîæèòåëüíî ñîäåðæàò áîëüøîå êîëè-÷åñòâî ãðàìïîëîæèòåëüíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ, ïðèáàâëÿþò ïîñëå 2 ÷ èíêóáèðîâàíèÿ 0,018 ã/äì3

áðèëëèàíòîâîãî çåëåíîãî (3,6 ñì3/äì3 ðàñòâîðà, ïðèãîòîâëåííîãî ïî Â.4.4). Êàçåèí è ìîëî÷íûé ïîðîøîêäîáàâëÿþò ïðè ïðèãîòîâëåíèè çàáóôåðåííîé ïåïòîííîé âîäû äî ñòåðèëèçàöèè.

8.1.2.2 Êèñëûå è êèñëîòîñîäåðæàùèå ïèùåâûå ïðîäóêòûÏðè íåñåëåêòèâíîì îáîãàùåíèè äîëæíà áûòü ãàðàíòèÿ òîãî, ÷òî ðÍ íå áóäåò íèæå 4,5.ðÍ êèñëûõ è êèñëîòîñîäåðæàùèõ ïðîäóêòîâ ñòàáèëèçèðóþò ïóòåì èñïîëüçîâàíèÿ çàáóôåðåííîé

ïåïòîííîé âîäû äâîéíîé êîíöåíòðàöèè.Äîïóñêàåòñÿ òàêæå ïðè âûñåâå æèäêèõ âûñîêîêèñëîòíûõ ïðîäóêòîâ äëÿ ïðåäîòâðàùåíèÿ ñíè-

æåíèÿ ðÍ ñðåä íà 0,5 è áîëåå ðÍ ïðîäóêòà ïåðåä ïîñåâîì äîâîäèòü äî (7,0 � 0,2).Ïðè âûñåâå òâåðäûõ âûñîêîêèñëîòíûõ ïðîäóêòîâ äîâîäÿò ðÍ äî (7,0 � 0,2) â ïîñåâàõ.Äîâåäåíèå ðÍ ïðîâîäÿòñ ñîáëþäåíèåìïðàâèëàñåïòèêè ñ ïîìîùüþ ñòåðèëüíûõ ðàñòâîðîâãèä-

ðîîêèñè íàòðèÿ è ñîëÿíîé êèñëîòû, ïðèãîòîâëåííûõ ïî ÃÎÑÒ Ð 10444.1. Êîëè÷åñòâî äîáàâëÿåìûõðàñòâîðîâ óñòàíàâëèâàþò îïûòíûì ïóòåì.

8.2 Íåñåëåêòèâíîå îáîãàùåíèå

Èíêóáèðóþò èñõîäíóþ ñóñïåíçèþ (ñì. 8.1.1) ïðè òåìïåðàòóðå (37 � 1) °C â òå÷åíèå (18 � 2) ÷.

8.3 Ñåëåêòèâíîå îáîãàùåíèå

Êóëüòóðû, ïîëó÷åííûå ïîñëå èíêóáèðîâàíèÿ ïî 8.2, ïåðåñåâàþò â ñðåäû äëÿ ñåëåêòèâíîãî îáîãà-ùåíèÿ. Äëÿ ýòîãî ïî 1 ñì3 êóëüòóðû ïåðåñåâàþò â 10 ñì3 RVS-áóëüîíà è â 10 ñì3 ñåëåíèòîâîé ñðåäû èëèâ 10 ñì3 òåòðàòèîíàòíîãî áóëüîíà Ìþëëåð-Êàóôìàíà.

Ïîñåâû íà RVS-áóëüîíå èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (41,5 � 1,0) °C â òå÷åíèå (24 � 3) ÷ (ñëåäÿò çàòåì, ÷òîáû òåìïåðàòóðà íå ïðåâûøàëà 42,5 °C), à íà òåòðàòèîíàòíîì áóëüîíå è ñåëåíèòîâîé ñðåäåïîñåâû èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 � 1) °C â òå÷åíèå (24 � 3) ÷.

Åñëè èç îäíîãî ïèùåâîãî ïðîäóêòà ïðîâåäåí âûñåâ íåñêîëüêèõ íàâåñîê (êàæäîé îòäåëüíî) äëÿâûÿâëåíèÿ áàêòåðèé ðîäà Salmonella, òî äîïóñêàåòñÿ èç êàæäîãî ïîñåâà ïî 8.2 ïåðåñåâ ïðîâîäèòü â îäèíôëàêîí ñ êàæäîé ñåëåêòèâíîé ïèòàòåëüíîé ñðåäîé (RVS-áóëüîíîì, òåòðàòèîíàòíûì áóëüîíîì Ìþë-ëåð-Êàóôìàíà, ñåëåíèòîâîé ñðåäîé). Ïðè ýòîì êîëè÷åñòâî ñåëåêòèâíîé ñðåäû âî ôëàêîíå äîëæíîáûòü óâåëè÷åíî ïî ñðàâíåíèþ ñ 10 ñì3 âî ñòîëüêî ðàç, èç ñêîëüêèõ ïîñåâîâ ïðîâîäÿò ïåðåñåâ.

Ñâåæèå ïðîäóêòû, íå ñîäåðæàùèå ïîâðåæäåííûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ, ïîäâåðãíóòûå êàêèì-ëèáîâîçäåéñòâèÿì, íàïðèìåð ñóøêå, çàìîðîçêå è äðóãèì, äîïóñêàåòñÿ âûñåâàòü íåïîñðåäñòâåííî âñåëåêòèâíûå ñðåäû, ìèíóÿ ýòàï íåñåëåêòèâíîãî îáîãàùåíèÿ. Ñîîòíîøåíèå ìåæäó êîëè÷åñòâîìâûñåâàåìîãî ïðîäóêòà è ñðåäîé äîëæíî áûòü íå ìåíåå 1:10.

8.4 Ïåðåñåâ íà ÷àøêè è èäåíòèôèêàöèÿ

8.4.1 Êóëüòóðû ÷åðåç 24 ÷ èíêóáèðîâàíèÿ íà ñåëåêòèâíûõ ñðåäàõ ïåðåñåâàþò ïî ÃÎÑÒ 26670 òàê,÷òîáû ïîëó÷èòü õîðîøî èçîëèðîâàííûå êîëîíèè, íà XLD-àãàð è íà îäíó èç àãàðèçîâàííûõ ñðåä: âèñ-ìóò-ñóëüôèòàãàð,ñðåäó Ïëîñêèðåâà,ñðåäó Ýíäî,ñðåäó Ëåâèíàèëèáðèëëèàíòîâûéçåëåíûéàãàð.

Ïðèîòñóòñòâèèáîëüøèõ÷àøåêèñïîëüçóþòäëÿïîñåâàïåòëåéäâåñðåäíèå÷àøêè (îäíóçàäðóãîé).8.4.2 ×àøêè ïåðåâîðà÷èâàþò (ñì. 8.4.1) ââåðõ äíîì è ïîìåùàþò â òåðìîñòàò ïðè òåìïåðàòóðå

(37 � 1) °C.8.4.3 Ïîñëå èíêóáèðîâàíèÿ â òå÷åíèå (24 � 3) ÷, à íà áðèëëèàíòîâîì çåëåíîì àãàðå — 48 ÷, ïðî-

ñìàòðèâàþò ÷àøêè (ñì. 8.4.2) è îòìå÷àþò ïðèñóòñòâèå òèïè÷íûõ êîëîíèé áàêòåðèé ðîäà Salmonella è íåñîâñåì òèïè÷íûõ êîëîíèé, êîòîðûå ìîãóò áûòü áàêòåðèÿìè ðîäà Salmonella. Îòìå÷àþò èõ ìåñòîïîëîæå-íèå íà äíå ÷àøêè.

5

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007

Òèïè÷íûå êîëîíèè áàêòåðèé ðîäà Salmonella, âûðàñòàþùèå íà XLD-àãàðå, èìåþò ÷åðíûé öåíòð èñëåãêà ïðîçðà÷íóþ çîíó êðàñíîâàòîãî öâåòà, ÷òî ïðèíàäëåæèò öâåòó èíäèêàòîðà.

Áàêòåðèè ðîäà Salmonella H2S-îòðèöàòåëüíûå âàðèàíòû (íàïðèìåð S. Paratyphi A) îáðàçóþò íàXLD-àãàðå ðîçîâûå êîëîíèè ñ òåìíûì ðîçîâûì öåíòðîì, ëàêòîçîïîëîæèòåëüíûå áàêòåðèè ðîäàSalmonella íà XLD-àãàðå — æåëòûå êîëîíèè ñ ïî÷åðíåíèåì èëè áåç íåãî.

Íà âèñìóò-ñóëüôèò àãàðå áàêòåðèè ðîäà Salmonella îáðàçóþò ÷åðíûå êîëîíèè ñ õàðàêòåðíûììåòàëëè÷åñêèì áëåñêîì, à òàêæå çåëåíîâàòûå ñ òåìíî-çåëåíûì îáîäêîì è ñ ïèãìåíòèðîâàíèåì ñðå-äû ïîä êîëîíèÿìè.

Íà ñðåäå Ýíäî áàêòåðèè ðîäà Salmonella îáðàçóþò êðóãëûå áåñöâåòíûå èëè ñëåãêà ðîçîâàòûå,ïðîçðà÷íûå êîëîíèè.

Íà ñðåäå Ïëîñêèðåâà áàêòåðèè ðîäà Salmonella îáðàçóþò áåñöâåòíûå ïðîçðà÷íûå, íî áîëååïëîòíûå, ÷åì íà ñðåäå Ýíäî, êîëîíèè.

Íà ñðåäå Ëåâèíà áàêòåðèè ðîäà Salmonella îáðàçóþò ïðîçðà÷íûå, ñëàáî-ðîçîâûå èëè ðîçîâà-òî-ôèîëåòîâûå êîëîíèè.

Íà áðèëëèàíòîâîì çåëåíîì àãàðå áàêòåðèè ðîäà Salmonella îáðàçóþò êðàñíîâàòûå èëè ðîçî-âûå, ïî÷òè áåëûå êîëîíèè (èõ öâåò çàâèñèò îò øòàììà è ñðîêà èíêóáèðîâàíèÿ). Ëàêòîçîïîëîæè-òåëüíûå è ñàõàðîçîïîëîæèòåëüíûå ìèêðîîðãàíèçìû îáðàçóþò çåëåíîâàòûå êîëîíèè, îêðóæåííûåÿðêîé æåëòî-çåëåíîé çîíîé.

Àãàð ñ áðèëëèàíòîâûì çåëåíûì ïðèìåíÿþò äëÿ âûäåëåíèÿ ñàëüìîíåëë, êðîìå Salmonella Typhi èSalmonella Paratyphi.

Îòñóòñòâèå â ïîñåâàõ íà ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêèõ ñðåäàõ òèïè÷íûõ èëè íå ñîâñåì òèïè÷íûõêîëîíèé äëÿáàêòåðèé ðîäà Salmonella ñâèäåòåëüñòâóåò îá îòñóòñòâèè áàêòåðèé ðîäà Salmonella â àíàëè-çèðóåìîé íàâåñêå (îáúåìå) ïðîäóêòà.

Ïðè íàëè÷èè õîòÿ áû íà îäíîé ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêîé ñðåäå òèïè÷íûõ èëè íå ñîâñåì òèïè÷-íûõ êîëîíèé äëÿ áàêòåðèé ðîäà Salmonella ïðîâîäÿò èõ äàëüíåéøóþ èäåíòèôèêàöèþ.

8.5 Èäåíòèôèêàöèÿ

8.5.1 Îáùèå ïîëîæåíèÿÄëÿ îïðåäåëåíèÿ áèîõèìè÷åñêèõ ïðèçíàêîâ áàêòåðèé ðîäà Salmonella äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàíèå

íàáîðîâ òåñò-ñèñòåì. Ýòè íàáîðû èñïîëüçóþò â ñîîòâåòñòâèè ñ èíñòðóêöèåé èçãîòîâèòåëÿ.Äëÿ áèîõèìè÷åñêîé èäåíòèôèêàöèè äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàíèå òåñò-ñèñòåì ïðîìûøëåííîãî

ïðîèçâîäñòâà, çàðåãèñòðèðîâàííûõ â Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè, íàïðèìåð «API 20Å», «Rapid 20E».8.5.2 Âûäåëåíèå êîëîíèé äëÿ èäåíòèôèêàöèèÄëÿ èäåíòèôèêàöèè áåðóò ñ êàæäîé ÷àøêè (äâå ÷àøêè ñðåäíåãî èëè îäíó áîëüøîãî ðàçìåðà) êàæ-

äîé ñåëåêòèâíîé ñðåäû (ñì. 8.4.3) ñíà÷àëà îäíó êîëîíèþ òèïè÷íóþ èëè íå ñîâñåì òèïè÷íóþ, à çàòåì÷åòûðå êîëîíèè, åñëè ïåðâàÿ îêàæåòñÿ îòðèöàòåëüíîé.

Ðåêîìåíäóåòñÿ áðàòü ñðàçó ïÿòü êîëîíèé äëÿ èäåíòèôèêàöèè â ñëó÷àå ýïèäåìèîëîãè÷åñêîé ñèòóà-öèè. Åñëè íà îäíîé ÷àøêå ìåíåå ïÿòè òèïè÷íûõ èëè íå ñîâñåì òèïè÷íûõ êîëîíèé, òî äëÿ èäåíòèôèêàöèèáåðóò âñå êîëîíèè.

Ïåðåíîñÿò îòîáðàííûå êîëîíèè íà ïîâåðõíîñòü ïðåäâàðèòåëüíî ïîäñóøåííîãî ïèòàòåëüíîãî àãà-ðà (ñì. 5.2.6) èëè ìÿñî-ïåïòîííîãî àãàðà, èëè ÃÐÌ-àãàðà (ñì. 5.2.7) â ÷àøêàõ Ïåòðè èëè íà ñêîøåííóþïîâåðõíîñòü ñðåäû â ïðîáèðêàõ. Äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ áåðóò ïîëíîñòüþ èçîëèðîâàííûå êîëîíèè. Èíêóáè-ðóþò èíîêóëèðîâàííûå ÷àøêè èëè ïðîáèðêè ïðè òåìïåðàòóðå (37 � 1) °C â òå÷åíèå (24 � 3) ÷.

Èñïîëüçóþò òîëüêî ÷èñòûå êóëüòóðû äëÿ áèîõèìè÷åñêîé è ñåðîëîãè÷åñêîé èäåíòèôèêàöèè.8.5.2.1 Îêðàñêà ïî ÃðàìóÈç îòîáðàííûõ äëÿ áèîõèìè÷åñêîé èäåíòèôèêàöèè êîëîíèé ãîòîâÿò ìàçêè è îêðàøèâàþò ïî Ãðàìó

ïî ÃÎÑÒ 30425.Áàêòåðèè ðîäà Salmonella ÿâëÿþòñÿ ãðàìîòðèöàòåëüíûìè ïàëî÷êàìè ñ çàêðóãëåííûìè êîíöàìè.8.5.3 Áèîõèìè÷åñêàÿ èäåíòèôèêàöèÿÓ îòîáðàííûõè ïðåäâàðèòåëüíî ïåðåñåÿííûõãðàìîòðèöàòåëüíûõ êóëüòóð èçó÷àþò õàðàêòåð ðîñòà

íà òðåõñàõàðíîì æåëåçèñòîì àãàðå (TSI-àãàðå) èëè àãàðå Êëèãëåðà, èëè ñðåäå Îëüêåíèöêîãî, âîçìîæ-íîñòü ðàñùåïëåíèÿ ìî÷åâèíû, îáðàçîâàíèÿ àöåòîèíà, èíäîëà,�-ãàëàêòîçèäàçû, L-ëèçèíäåêàðáîêñèëà-çû, ôåðìåíòàöèè ñàõàðîçû è ìàííèòà, à òàêæå ïîäâèæíîñòü.

8.5.3.1 Îáùèå ïîëîæåíèÿÏåòëåéèíîêóëèðóþòñïåöèôè÷åñêèå ñðåäû,óêàçàííûå â 8.5.3.2 — 8.5.3.9, êàæäîéêóëüòóðîé,ïîëó-

÷åííîé èç êîëîíèé ïî 8.5.2.8.5.3.2 TSI-àãàð (ñì. 5.2.10), ñðåäà Îëüêåíèöêîãî èëè àãàð Êëèãëåðà

6

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007

Çàñåâàþò øòðèõîì ñêîøåííóþ ïîâåðõíîñòü àãàðà (ñðåäû Îëüêåíèöêîãî) è óêîëîì — ñòîëáèê.Èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 � 1) °C â òå÷åíèå (24 � 3) ÷.

Èíòåðïðåòèðóþò èçìåíåíèÿ â ñðåäå ñëåäóþùèì îáðàçîì:à) ñòîëáèê àãàðà (ñðåäû Îëüêåíèöêîãî)- æåëòûé — ãëþêîçà ïîëîæèòåëüíàÿ (ãëþêîçó ôåðìåíòèðóåò);- êðàñíûé èëè íåèçìåíèâøèéñÿ — ãëþêîçà îòðèöàòåëüíàÿ (ãëþêîçó íå ôåðìåíòèðóåò);- ÷åðíûé — îáðàçîâàíèå ñåðîâîäîðîäà;- ïóçûðüêè èëè ðàçðûâû — îáðàçîâàíèå ãàçà èç ãëþêîçû;á) ñêîøåííàÿ ïîâåðõíîñòü àãàðà (ñðåäû Îëüêåíèöêîãî)- æåëòàÿ — ëàêòîçà è/èëè ñàõàðîçà ïîëîæèòåëüíûå (ëàêòîçó è/èëè ñàõàðîçó ôåðìåíòèðóåò);- êðàñíàÿ èëè íåèçìåíèâøàÿñÿ — ëàêòîçà è ñàõàðà îòðèöàòåëüíûå (íè ëàêòîçó, íè ñàõàðîçó íå

ôåðìåíòèðóåò).Àãàð Êëèãëåðà ñîäåðæèò äâà ñàõàðà, ïîýòîìó ïî ñêîøåííîé ïîâåðõíîñòè ó÷èòûâàþò òîëüêî ôåð-

ìåíòàöèþ ëàêòîçû.Òèïè÷íûå êóëüòóðû áàêòåðèé ðîäà Salmonella ïîêàçûâàþò ùåëî÷íóþ (êðàñíóþ) ïîâåðõíîñòü è êèñ-

ëûé (æåëòûé) ñòîëáèê ñ îáðàçîâàíèåì ãàçà (ïóçûðüêîâ) è ïðèìåðíî â 90 % ñëó÷àåâ îáðàçóåòñÿ ñåðîâîäî-ðîä (÷åðíûé àãàð).

Åñëè èçîëèðîâàíû ëàêòîçîïîëîæèòåëüíûå áàêòåðèè ðîäà Salmonella, òî ïîâåðõíîñòü TSI-àãàðàæåëòàÿ. Ïðåäâàðèòåëüíîå îïðåäåëåíèå êóëüòóð áàêòåðèé ðîäà Salmonella íå ìîæåò îñíîâûâàòüñÿ òîëü-êî íà ðåçóëüòàòàõ òåñòà íà TSI-àãàðå.

Äàëüíåéøåìó èçó÷åíèþ ïîäâåðãàþò òàêæå ëàêòîçîïîëîæèòåëüíûå áàêòåðèè èëè áàêòåðèè, íåîáðàçóþùèå ñåðîâîäîðîä, íî îáÿçàòåëüíî ôåðìåíòèðóþùèå ãëþêîçó ñ îáðàçîâàíèåì èëè áåç îáðàçî-âàíèÿ ãàçà.

8.5.3.3 Àãàð ñ ìî÷åâèíîé (àãàð Êðèñòåíñåíà) (ñì. 5.2.11)Êóëüòóðû ïåðåñåâàþò øòðèõîì íà ïîâåðõíîñòü àãàðà Êðèñòåíñåíà ñ ìî÷åâèíîé. Ïîñåâû èíêóáèðó-

þò ïðè òåìïåðàòóðå (37 � 1) °C â òå÷åíèå (24 ÷ � 3) ÷, íàáëþäàÿ çà ïîñåâàìè ÷åðåç îïðåäåëåííûå ïðîìå-æóòêè âðåìåíè.

Ïðè ïîëîæèòåëüíîé ðåàêöèè — ðàñùåïëåíèè ìî÷åâèíû ñ âûäåëåíèåì àììîíèÿ öâåò ôåíîëîâîãîêðàñíîãî ìåíÿåòñÿ îò ðîçîâîãî äî ñâåòëî-âèøíåâîãî.

Äëÿóðåàçîïîëîæèòåëüíûõáàêòåðèéðåàêöèÿ÷àñòîñòàíîâèòñÿâèäèìîéïîñëå2÷èíêóáèðîâàíèÿ.Áàêòåðèè ðîäà Salmonella íå ðàñùåïëÿþò ìî÷åâèíó.8.5.3.4 L-ëèçèíäåêàðáîêñèëàçíàÿ ñðåäà (ñì. 5.2.12)Èíîêóëèðóþò ñíèçó æèäêóþ ñðåäó. Ïîñåâû èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 � 1) °C â òå÷åíèå

(24 � 3) ÷.Ïîìóòíåíèå è ïóðïóðíûé öâåò ñðåäû ïîñëå èíêóáèðîâàíèÿ óêàçûâàþò íà ïîëîæèòåëüíóþ ðåàêöèþ.

Æåëòûé öâåò óêàçûâàåò íà îòðèöàòåëüíóþ ðåàêöèþ.Salmonella Ðaratyphi A íå îáðàçóåò L-ëèçèíäåêàðáîêñèëàçó, îñòàëüíûå îáðàçóþò.8.5.3.5 Îïðåäåëåíèå �-ãàëàêòîçèäàçû (5.2.13)Ñóñïåíäèðóþò ïåòëåé êóëüòóðó â 0,25 ñì3 ôèçèîëîãè÷åñêîãî ðàñòâîðà, ïðèáàâëÿþò îäíó êàïëþ

òîëóîëà è âñòðÿõèâàþò ïðîáèðêó. Ïîìåùàþò ïðîáèðêó â âîäÿíóþ áàíþ ïðè òåìïåðàòóðå 37 °C è îñòàâëÿ-þò ïðèìåðíî íà 5 ìèíóò. Çàòåì äîáàâëÿþò 0,25 ñì3 ðåàêòèâà äëÿ îïðåäåëåíèÿ �-ãàëàêòîçèäàçû è ïåðå-ìåøèâàþò.

Îñòàâëÿþò ïðîáèðêó â âîäÿíîé áàíå ïðè òåìïåðàòóðå 37 °C â òå÷åíèå (24 � 3) ÷, íàáëþäàÿ çà èçìå-íåíèåì öâåòà ÷åðåç îïðåäåëåííûå ïðîìåæóòêè âðåìåíè.

Æåëòûé öâåò óêàçûâàåò íà ïîëîæèòåëüíóþ ðåàêöèþ. Èçìåíåíèå öâåòà îáíàðóæèâàåòñÿ ïðèìåðíî÷åðåç 20 ìèí.

Áàêòåðèè ðîäà Salmonella, êðîìå S.arizonae, íå îáëàäàþò �-ãàëàêòîçèäàçîé.Äëÿ îïðåäåëåíèÿ �-ãàëàêòîçèäàçíîé àêòèâíîñòè äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàíèå ONPG-äèñêîâ. Äëÿ

ýòîãî èñïûòóåìûå êóëüòóðû âûñåâàþò íà ñðåäó, ñîäåðæàùóþ ëàêòîçó â êîíöåíòðàöèè 0,1 %, èëè àãàðÊëèãëåðà, èëè òðåõñàõàðíûé àãàð, èëè àãàð Îëüêåíèöêîãî. Ïîñåâû èíêóáèðóþò â òå÷åíèå (18 � 2) ÷ ïðèòåìïåðàòóðå (37 � 1) °Ñ. Ïåòëåé îòáèðàþò âûðîñøóþ êóëüòóðó è ãîòîâÿò èç íåå ãóñòóþ ñóñïåíçèþ â0,5 ñì3 ñòåðèëüíîé äèñòèëëèðîâàííîé âîäû. Ê ïîëó÷åííîé ñóñïåíçèè äîáàâëÿþò îäèí ONPG-äèñê èïîìåùàþò â âîäÿíóþ áàíþ ïðè òåìïåðàòóðå (37 � 1) °Ñ. Æåëòîå îêðàøèâàíèå, ïîÿâèâøååñÿ ÷åðåç15 — 20 ìèí, óêàçûâàåò íà ïîëîæèòåëüíóþ ðåàêöèþ. Äëÿ îêîí÷àòåëüíîãî ó÷åòà îòðèöàòåëüíîãî ðåçóëü-òàòà ïîñåâû ïðîäîëæàþò èíêóáèðîâàòü â òå÷åíèå 2, 4 è 24 ÷.

8.5.3.6 Îïðåäåëåíèå îáðàçîâàíèÿ àöåòîèíà (ðåàêöèÿ Ôîãåñ-Ïðîñêàóåðà) (5.2.14)Ñóñïåíäèðóþò ïåòëåé èñïûòóåìóþ êóëüòóðó â ñòåðèëüíîé ïðîáèðêå, ñîäåðæàùåé 3 ñì3 VP ñðåäû

èëè ìÿñî-ïåïòîííîãî áóëüîíà ñ ãëþêîçîé.

7

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007

Ïîñåâû èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 � 1) °C â òå÷åíèå (24 � 3) ÷.Ïîñëå èíêóáàöèè ïðèáàâëÿþò äâå êàïëè ðàñòâîðà êðåàòèíà, òðè êàïëè ñïèðòîâîãî ðàñòâîðà

1-íàôòîëà è äâå êàïëè ðàñòâîðà ãèäðîîêèñè êàëèÿ, ïåðåìåøèâàþò ñîäåðæèìîå ïðîáèðêè ïîñëå ïðèáàâ-ëåíèÿ êàæäîãî ðåàêòèâà.

Ïîÿâëåíèå ÷åðåç 15 ìèí îò ðîçîâîãî äî ñâåòëî-êðàñíîãî îêðàøèâàíèÿ óêàçûâàåò íà ïîëîæèòåëü-íóþ ðåàêöèþ.

Áàêòåðèè ðîäà Salmonella íå îáðàçóþò àöåòîèíà (ðåàêöèÿ Ôîãåñ-Ïðîñêàóåðà îòðèöàòåëüíàÿ).Äîïóñêàåòñÿ îïðåäåëåíèå àöåòîèíà ïðîâîäèòü áåç ïðèìåíåíèÿ ðàñòâîðà êðåàòèíà. Äëÿ ýòîãî

ïîñëå èíêóáèðîâàíèÿ ê 1 ñì3 îòîáðàííîé êóëüòóðàëüíîé æèäêîñòè ïðèáàâëÿþò 0,6 ñì3 ðàñòâîðà1-íàôòîëà è 0,2 ñì3 ðàñòâîðà ãèäðîîêèñè êàëèÿ. Ïîñëå ïðèáàâëåíèÿ êàæäîãî ðåàêòèâà ïðîáèðêóâñòðÿõèâàþò. Ïîÿâëåíèå ðîçîâîãî îêðàøèâàíèÿ ÷åðåç 15 ìèí óêàçûâàåò íà ïîëîæèòåëüíóþðåàêöèþ.

8.5.3.7 Îïðåäåëåíèå îáðàçîâàíèÿ èíäîëà (ñì. 5.2.15)Êóëüòóðû ïåðåñåâàþò â ïðîáèðêó, ñîäåðæàùóþ 5 ñì3 òðèïòîí/òðèïòîôàíîâîé ñðåäû, èëè â áóëüîí

Õîòòèíãåðà, èëè â ìÿñî-ïåïòîííûé áóëüîí ñ L-òðèïòîôàíîì. Ïîñåâû èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå(37 � 1) °C â òå÷åíèå (24 � 3) ÷.

Ïîñëå èíêóáèðîâàíèÿ ê ïîñåâàì ïðèáàâëÿþò ïî êàïëÿì 1 ñì3 ðåàêòèâà Ýðëèõà èëè Êîâà÷à, ñîäåð-æèìîå ïðîáèðêè ïåðåìåøèâàþò.

Îáðàçîâàíèå êðàñíîãî êîëüöà óêàçûâàåò íà ïîëîæèòåëüíóþ ðåàêöèþ. Æåëòî-êîðè÷íåâîå êîëüöîóêàçûâàåò íà îòðèöàòåëüíóþ ðåàêöèþ.

Áàêòåðèè ðîäà Salmonella íå îáðàçóþò èíäîë.8.5.3.8 Îïðåäåëåíèå ôåðìåíòàöèè ìàííèòà è ñàõàðîçûÊóëüòóðû ïåðåñåâàþò â ñðåäû Ãèññà ñ ìàííèòîì èëè ñàõàðîçîé. Ïîñåâû èíêóáèðóþò ïðè òåì-

ïåðàòóðå (37 ± 1) °C â òå÷åíèå (24 � 3) ÷.Áàêòåðèè ðîäà Salmonella íå ôåðìåíòèðóþò ñàõàðîçó, íî ôåðìåíòèðóþò ìàííèò. Ïðè ñáðàæè-

âàíèè ìàííèòà öâåò ñðåäû èçìåíÿåòñÿ, îáðàçóåòñÿ èëè íå îáðàçóåòñÿ ãàç.8.5.3.9 Îïðåäåëåíèå ïîäâèæíîñòèÊóëüòóðû ïåðåñåâàþò óêîëîì â ïîëóæèäêèé ïèòàòåëüíûé àãàð èëè ïîëóæèäêèé ìÿñî-ïåïòîí-

íûé àãàð.Ïîñåâû èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 � 1) °C â òå÷åíèå (24 � 3) ÷.Ïðè ðîñòå ïîäâèæíûõ êóëüòóð îòìå÷àåòñÿ äèôôóçèîííûé ðîñò ïî âñåìó ñòîëáèêó àãàðà, ïðè

ðîñòå íåïîäâèæíûõ êóëüòóð — âîêðóã ìåñòà óêîëà.Áàêòåðèè ðîäà Salmonella ïîäâèæíû, êðîìå S. gallinarum è S. pullorum.8.5.3.10 Èíòåðïðåòàöèÿ áèîõèìè÷åñêèõ òåñòîâ ïðèâåäåíà â òàáëèöå À.1 (ïðèëîæåíèå À).8.5.4 Ñåðîëîãè÷åñêàÿ èäåíòèôèêàöèÿ8.5.4.1 Îáùèå ïîëîæåíèÿÎïðåäåëåíèå ïðèñóòñòâèÿ ñîìàòè÷åñêîãî Î-àíòèãåíà, àíòèãåíà âèðóëåíòíîñòè Vi-, æãóòèêîâîãî

Í-àíòèãåíà â èçîëèðîâàííûõ êîëîíèÿõ (ñì. 8.5.2) ïðîâîäÿò ñ ïîìîùüþ ðåàêöèè àããëþòèíàöèè íà ïðåä-ìåòíîì ñòåêëå ñ ñîîòâåòñòâóþùèìè ñûâîðîòêàìè ïîñëå èñêëþ÷åíèÿ ñàìîàããëþòèíèðóþùèõ øòàììîâ.Ñûâîðîòêè èñïîëüçóþò â ñîîòâåòñòâèè ñ èíñòðóêöèåé èçãîòîâèòåëÿ, åñëè åñòü îòëè÷èå îò îïèñàíèÿ,ïðèâåäåííîãî íèæå.

Ñåðîëîãè÷åñêóþ èäåíòèôèêàöèþ äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ ïðèíàäëåæíîñòè ê áàêòåðèÿì ðîäàSalmonella ïðîâîäÿò ñ êóëüòóðàìè, ïðåäâàðèòåëüíî ïåðåñåÿííûìè íà ïîâåðõíîñòü ìÿñî-ïåïòîííîãî àãà-ðà èëè ÃÐÌ-àãàðà.

8.5.4.2 Èñêëþ÷åíèå ñàìîàããëþòèíèðóþùèõ øòàììîâÏîìåùàþòêàïëþôèçèîëîãè÷åñêîãîðàñòâîðàíàòùàòåëüíîî÷èùåííîåïðåäìåòíîåñòåêëî.Äèñïåð-

ãèðóþò â ýòîé êàïëå ÷àñòü òåñòèðóåìîé êîëîíèè òàê, ÷òîáû ïîëó÷èëàñü ãîìîãåííàÿ è ãóñòàÿ ñóñïåíçèÿ.Äîïóñêàåòñÿ ðàçìåøèâàíèå ÷àñòè êîëîíèè â êàïëå âîäû è ïåðåìåøèâàíèå ýòîãî ðàñòâîðà ñ îäíîé

êàïëåé ôèçèîëîãè÷åñêîãî ðàñòâîðà.Ïîêà÷èâàþò îñòîðîæíî ñòåêëî â òå÷åíèå 30—60 ñ. Îòìå÷àþò ðåçóëüòàòû íà òåìíîì ôîíå, ëó÷øå ñ

ïîìîùüþ óâåëè÷èòåëüíîãî ñòåêëà. Åñëè íàáëþäàåòñÿ â ðàçíîé ñòåïåíè ñêëåèâàíèå áàêòåðèé, òî åñòüîáðàçîâàíèå îñàäêà, òî ñ÷èòàþò, ÷òî òåñòèðóåìûå øòàììû îáëàäàþò ñàìîàããëþòèíàöèåé.

Øòàììû áàêòåðèé, îáëàäàþùèå ñàìîàããëþòèíàöèåé, íå ïîäâåðãàþò äàëüíåéøåé ñåðîëîãè÷åñêîéèäåíòèôèêàöèè.

8.5.4.3 Îïðåäåëåíèå íàëè÷èÿ Î-àíòèãåíîâØòàììû, ó êîòîðûõ íå âûÿâëåíî ñàìîàããëþòèíàöèè, èñïûòûâàþò â ðåàêöèè àããëþòèíàöèè ñ àããëþ-

òèíèðóþùèìè àäñîðáèðîâàííûìè ïîëèâàëåíòíûìè ñàëüìîíåëëåçíûìè Î-ñûâîðîòêàìè îñíîâíûõãðóïï A, B, C, D, E, à çàòåì, åñëè íå âûÿâëåíî Î-àíòèãåíîâ ñ ñûâîðîòêàìè îñíîâíûõ ãðóïï, ñòàâÿòðåàêöèþ ñ ñûâîðîòêàìè ðåäêèõ ãðóïï.

8

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007

Ïîäãîòîâêà ñûâîðîòîê ê ïîñòàíîâêå ðåàêöèè àããëþòèíàöèè è ìåòîäèêà åå ïðîâåäåíèÿ óêàçàíû âèíñòðóêöèè, ïðèëàãàåìîé ê ñûâîðîòêàì.

Àããëþòèíàöèÿ (íàëè÷èå Î-àíòèãåíîâ) ïðîÿâëÿåòñÿ â âèäå ñêëåèâàíèÿ áàêòåðèàëüíîé ìàññû èïîëíîãî èëè ÷àñòè÷íîãî ïðîñâåòëåíèÿ æèäêîñòè.

Ïðè îòðèöàòåëüíîé ðåàêöèè àããëþòèíàöèè êóëüòóðà ïîñëå òùàòåëüíîãî ñìåøèâàíèÿ ñ êàïëåéñûâîðîòêè îáðàçóåò ãîìîãåííóþ ñìåñü.

Èñïîëüçóþò ïîëè- è ìîíîâàëåíòíûå ñûâîðîòêè, îäíó ïîñëå äðóãîé.8.5.4.4 Îïðåäåëåíèå Vi- è Í-àíòèãåíîâÍàëè÷èå Vi- è Í-àíòèãåíîâ îïðåäåëÿþò ïðè íåîáõîäèìîñòè ïî ñàíèòàðíî-ýïèäåìèîëîãè÷åñêèì

ïîêàçàíèÿì.Ïåðåä âûÿâëåíèåì Í-àíòèãåíîâ èñïûòóåìîé êóëüòóðîé èíîêóëèðóþò ïîëóæèäêèé àãàð. Ïîñåâû

èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 � 1) °Ñ â òå÷åíèå (24 � 2) ÷. Ïîëó÷åííóþ êóëüòóðó èñïîëüçóþò äëÿ âûÿâ-ëåíèÿ Í-àíòèãåíîâ.

Íàëè÷èå Vi- è Í-àíòèãåíîâ îïðåäåëÿþò, ïîëüçóÿñü óêàçàíèÿìè, ïðèâåäåííûìè â 8.5.4.3.8.5.5 Èíòåðïðåòàöèÿ áèîõèìè÷åñêèõ è ñåðîëîãè÷åñêèõ ðåàêöèéÈíòåðïðåòàöèÿ ïîäòâåðæäàþùèõ òåñòîâ (ñì. 8.5.3 è 8.5.4) äëÿ èñïûòàííûõ êîëîíèé (ñì. 8.5.2) ïðè-

âåäåíà â òàáëèöå 1.

Ò à á ë è ö à 1 — Èíòåðïðåòàöèÿ ïîäòâåðæäàþùèõ òåñòîâ

Áèîõèìè÷åñêèå ðåàêöèè Ñàìîàããëþòèíàöèÿ Ñåðîëîãè÷åñêèå ðåàêöèè Èíòåðïðåòàöèÿ

Òèïè÷íûå Íåò Î-, Vi- èëè Í-àíòèãåíûïîëîæèòåëüíûå

Øòàìì îòíîñèòñÿ ê áàêòåðèÿìðîäà Salmonålla

Òèïè÷íûå Íåò Âñå ðåàêöèè îòðèöàòåëüíûå

Ìîãóò áûòü áàêòåðèè ðîäàSalmonålla

Òèïè÷íûå Äà Íå òåñòèðóåòñÿ (ñì. 8.5.4.2)

Íåòèïè÷íûå ðåàêöèè Íåò/Äà Î-, Vi- èëè Í-àíòèãåíûïîëîæèòåëüíûå

Íåòèïè÷íûå ðåàêöèè Íåò/Äà Âñå ðåàêöèè îòðèöàòåëüíûå Íå îòíîñÿòñÿ ê áàêòåðèÿì ðîäàSalmonålla

Ïðè îïðåäåëåíèè áèîõèìè÷åñêèõ è ñåðîëîãè÷åñêèõ õàðàêòåðèñòèê âûäåëåííûõ êóëüòóð â êà÷åñ-òâå êîíòðîëÿ èñïîëüçóþòòèïè÷íûé ïî ýòèì ïîêàçàòåëÿì øòàìì áàêòåðèé ðîäà Salmonella, óêàçàí-íûé â ðàçäåëå 6.

Êóëüòóðû, ïðåäïîëîæèòåëüíî îòíåñåííûå ê áàêòåðèÿì ðîäà Salmonella, ïåðåäàþò â êîìïåòåíòíûåàêêðåäèòîâàííûå öåíòðû ïî èçó÷åíèþ ýòèõ áàêòåðèé äëÿ îêîí÷àòåëüíîé èäåíòèôèêàöèè. Êóëüòóðó ïðèýòîì ñîïðîâîæäàþò âñåé ïîëó÷åííîé èíôîðìàöèåé ñ óêàçàíèåì íàèìåíîâàíèÿ ïðîäóêòà, èç êîòîðîãîâûäåëåí øòàìì.

 ýòîì ñëó÷àå ðåçóëüòàòû âûÿâëåíèÿ áàêòåðèé ðîäà Salmonella âûäàþò ïîñëå ïîëó÷åíèÿ îòâåòà ïîîêîí÷àòåëüíîé èäåíòèôèêàöèè.

Ïðè âûÿâëåíèè áàêòåðèé ðîäà Salmonella èñïîëüçóþò ñõåìó, óêàçàííóþ â ïðèëîæåíèè Á.

9 Îáðàáîòêà ðåçóëüòàòîâ

9.1 Ðåçóëüòàòû îöåíèâàþò ïî êàæäîé ïðîáå â îòäåëüíîñòè.9.2 Ðåçóëüòàòû âûÿâëåíèÿ áàêòåðèé ðîäà Salmonella â îïðåäåëåííîé ìàññå èëè îáúåìå ïðîäóêòà

çàïèñûâàþò: «áàêòåðèè ðîäà Salmonella îáíàðóæåíû èëè íå îáíàðóæåíû â Õ ã (ñì3) ïðîäóêòà» (Õ — ìàñ-ñà (îáúåì) ïðîäóêòà, â êîòîðîì âûÿâëÿëè áàêòåðèè ðîäà Salmonella).

10 Ïðîòîêîë èñïûòàíèÿ

Ïðîòîêîë èñïûòàíèÿ äîëæåí ñîäåðæàòü èíôîðìàöèþ:- îá èñïîëüçóåìîì ìåòîäå îòáîðà ïðîá;- èñïîëüçîâàíèè êàêèõ-ëèáî îòêëîíåíèé â ìåòîäå îáîãàùåíèÿ èëè èíêóáèðîâàíèÿ;- îáî âñåõ óñëîâèÿõ èñïûòàíèÿ, íå óêàçàííûõ â íàñòîÿùåì ñòàíäàðòå, èëè ñ÷èòàþùèõñÿ íåîáÿçà-

òåëüíûìè, ñî âñåìè äåòàëÿìè, êîòîðûå ìîãëè ïîâëèÿòü íà ðåçóëüòàòû;- î ïîëó÷åííûõ ðåçóëüòàòàõ.Ïðîòîêîë èñïûòàíèÿ âêëþ÷àåò òàêæå èíôîðìàöèþ î òîì, ñ èñïîëüçîâàíèåì êàêîé ñðåäû äëÿ ÷àøåê

(ñì. 5.2.5) ïîëó÷åí ïîëîæèòåëüíûé ðåçóëüòàò.

9

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007

Ïðèëîæåíèå À(îáÿçàòåëüíîå)

Èíòåðïðåòàöèÿ áèîõèìè÷åñêèõ òåñòîâ

Ò à á ë è ö à À.1 — Êîëè÷åñòâî ïîëîæèòåëüíûõ ðåàêöèé äëÿ øòàììîâ áàêòåðèé ðîäà Salmonella ïðîöåíòàõ

Òåñòû

Øòàììû ñàëüìîíåëë

S. typhi S. paratyphi A

Äðóãèå øòàììû

S. arizonae S. choleraesuis S. gallinarum S. pullorum

Êèñëîòà èç ãëþêîçû 100 100 100 100 100 100

Ãàç èç ãëþêîçû 10 è ìåíåå 90 è áîëåå 90 è áîëåå 90 è áîëåå 100 è ìåíåå 90 è áîëåå

Êèñëîòà èç ëàêòîçû 10 è ìåíåå 10 è ìåíåå 10—25 10 è ìåíåå 10 è ìåíåå 10 è ìåíåå

Êèñëîòà èç ñàõàðîçû 0 0 1 0 0 0

H2S-ïðîäóêöèÿ 8 1 99 64 25 85

Ãèäðîëèç ìî÷åâèíû 0 0 0 0 0 0

Ëèçèíäåêàðáîêñèëîçà 99 0 97 99 100 75

�-ãàëàêòîçèäàçà 0 0 98 0 0 0

Ïðîäóêöèÿ àöåòîèíà 0 0 0 0 0 0

Ïðîäóêöèÿ èíäîëà 0 0 1 0 0 0

Ïîäâèæíîñòü 97 95 99 95 0 0

Êèñëîòà èç ìàííèòà 90 è áîëåå 90 è áîëåå 90 è áîëåå 90 è áîëåå 90 è áîëåå 90 è áîëåå

10

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007

Ïðèëîæåíèå Á(ñïðàâî÷íîå)

Ñõåìà âûÿâëåíèÿ áàêòåðèé ðîäà Salmonella

11

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007

Ïðèëîæåíèå Â(îáÿçàòåëüíîå)

Ñîñòàâ è ïðèãîòîâëåíèå ïèòàòåëüíûõ ñðåä è ðåàêòèâîâ

Â.1 Çàáóôåðåííàÿ ïåïòîííàÿ âîäà

Â.1.1 Ñîñòàâ:- ïåïòîí — 10,0 ã;- õëîðèñòûé íàòðèé — 5,0 ã;- äâóçàìåùåííûé ôîñôîðíîêèñëûé íàòðèé 12-âîäíûé (Na2HPO4 � 12H2O) — 9,0 ã;- îäíîçàìåùåííûé ôîñôîðíîêèñëûé êàëèé (KH2PO4) — 1,5 ã;- âîäà — 1000 ñì3.Â.1.2 ÏðèãîòîâëåíèåÏðè íàãðåâàíèè êîìïîíåíòû ðàñòâîðÿþò â âîäå. Óñòàíàâëèâàþò òàêîé ðÍ, ÷òîáû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè îí

ñîñòàâëÿë (7,0 � 0,2) ïðè òåìïåðàòóðå 25 °C. Ñðåäó ðàçëèâàþò âî ôëàêîíû ïîäõîäÿùåé âìåñòèìîñòè ñ ó÷åòîìäîáàâëåíèÿ íåîáõîäèìîé íàâåñêè ïðîäóêòà. Åñëè íàâåñêà ðàâíà 25 ã, òî çàáóôåðåííóþ ïåïòîííóþ âîäó ðàçëèâàþòïî 225 ñì3. Ñòåðèëèçóþò 15 ìèí â àâòîêëàâå ïðè òåìïåðàòóðå (121 � 1) °C.

Â.2 Ñðåäà Ðàïïàïîðòà-Âàññèëèàäèñà ñ ñîåé (RVS-áóëüîí)

Â.2.1 Ðàñòâîð ÀÂ.2.1.1 Ñîñòàâ:- ôåðìåíòàòèâíûé ãèäðîëèçàò ñîè — 5,0 ã;- õëîðèñòûé íàòðèé — 8,0 ã;- ôîñôîðíîêèñëûé îäíîçàìåùåííûé êàëèé (KH2PO4) —1,4 ã;- ôîñôîðíîêèñëûé äâóçàìåùåííûé êàëèé (K2HPO4) — 0,2 ã;- âîäà —1000 ñì3.Â.2.1.2 ÏðèãîòîâëåíèåÊîìïîíåíòû ðàñòâîðÿþò â âîäå ïðè íàãðåâàíèè äî òåìïåðàòóðû îêîëî 70 °C. Ðàñòâîð ãîòîâÿò çà äåíü äî ïðè-

ãîòîâëåíèÿ RVS-áóëüîíà.Â.2.2 Ðàñòâîð ÂÂ.2.2.1 Ñîñòàâ:- õëîðèñòûé ìàãíèé 6-âîäíûé (MgCI2 � 6H2O) — 400 ã;- âîäà — 1000 ñì3.Â.2.2.2 ÏðèãîòîâëåíèåÕëîðèñòûé ìàãíèé ðàñòâîðÿþò â âîäå. Ïîñêîëüêó ýòà ñîëü î÷åíü ãèãðîñêîïè÷íà, ðåêîìåíäóåòñÿ èç íîâîé

îòêðûòîé óïàêîâêè ðàñòâîðÿòü åå ïî îïðåäåëåííîé ñõåìå. Íàïðèìåð, ê 250 ã õëîðèñòîãî ìàãíèÿ 6-âîäíîãî äîáàâëÿ-þò 625 ñì3 âîäû, ïîëó÷àÿ ðàñòâîð îáúåìîì 788 ñì3 ìàññîâîé êîíöåíòðàöèè 31,7 ã/100 ñì3. Ñîñòàâ ðàñòâîðà ñîîò-âåòñòâóåò Â.2.2.1. Ðàñòâîð ïåðåíîñÿò â áóòûëêó èç òåìíîãî ñòåêëà ñ ïðèòåðòîé ïðîáêîé è õðàíÿò ïðè êîìíàòíîéòåìïåðàòóðå íå áîëåå äâóõ ëåò.

Â.2.3 Ðàñòâîð ÑÂ.2.3.1 Ñîñòàâ:- ìàëàõèòîâûé çåëåíûé îêñàëàò — 0,4 ã;- âîäà — 100 ñì3.Â.2.3.2 ÏðèãîòîâëåíèåÌàëàõèòîâûé çåëåíûé îêñàëàò ïåðåíîñÿò â ôàðôîðîâóþ ñòóïêó è ïîñòåïåííî ðàñòâîðÿþò â âîäå. Ðàñòâîð

ïåðåëèâàþò â ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì3 è äîâîäÿò âîäîé äî ìåòêè. Ðàñòâîð ïåðåíîñÿò â áóòûëêó èç òåì-íîãî ñòåêëà, õðàíÿò ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå íå áîëåå 8 ìåñ.

Â.2.4 Ãîòîâàÿ ñðåäàÂ.2.4.1 Ñîñòàâ- ðàñòâîð À (ñì. Â.2.1) — 1000 ñì3;- ðàñòâîð  (ñì. Â.2.2) — 100 ñì3;- ðàñòâîð Ñ (ñì. Â.2.3) — 10 ñì3.Â.2.4.2 ÏðèãîòîâëåíèåÏðèáàâëÿþò ê 1000 ñì3 ðàñòâîðà À 100 ñì3 ðàñòâîðà  è 10 ñì3 ðàñòâîðà Ñ. Óñòàíàâëèâàþò òàêîé ðÍ, ÷òîáû

ïîñëå ñòåðèëèçàöèè îí ñîñòàâëÿë (5,2 � 0,2). Ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì ñðåäó ðàçëèâàþò ïî ïðîáèðêàì ïî 10 ñì3. Ñòå-ðèëèçóþò 15 ìèí â àâòîêëàâå ïðè òåìïåðàòóðå (115 � 1) °C. Ðåêîìåíäóåòñÿ èñïîëüçîâàòü ñðåäó â äåíü ïðèãîòîâëå-íèÿ. Ïðè íåîáõîäèìîñòè äîïóñêàåòñÿ ãîòîâóþ ñðåäó õðàíèòü ïî ÃÎÑÒ 10444.1.

Ñëåäóåò ó÷èòûâàòü, ÷òî íà ýòîé ñðåäå íå ðàñòåò S. Typhi.

12

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007

Ï ð è ì å ÷ à í è å — Êîíå÷íûé ñîñòàâ ñðåäû: ôåðìåíòàòèâíûé ãèäðîëèçàò ñîè — 4,5 ã/äì3; õëîðèñòûé íà-òðèé — 7,2 ã/äì3; ôîñôîðíîêèñëûé îäíîçàìåùåííûé êàëèé — 1,26 ã/äì3 , ôîñôîðíîêèñëûé äâóçàìåùåííûé êà-ëèé — 0,18 ã/äì3; õëîðèñòûé ìàãíèé áåçâîäíûé — 13,4 ã/äì3 èëè õëîðèñòûé ìàãíèé 6-âîäíûé — 28,6 ã/äì3; ìàëàõè-òîâûé çåëåíûé îêñàëàò — 0,036 ã/äì3.

Â.3 Ñåëåíèòîâàÿ ñðåäà

Ñåëåíèòîâóþ ñðåäó ãîòîâÿò èç äâóõ ðàñòâîðîâ.Â.3.1 Ðàñòâîð 1

Â.3.1.1 Ñîñòàâ:- ïåïòîí — 5,0 ã;- äâóçàìåùåííûé ôîñôîðíîêèñëûé íàòðèé áåçâîäíûé — 7,0 ã;- îäíîçàìåùåííûé ôîñôîðíîêèñëûé íàòðèé — 3,0 ã;- ëàêòîçà — 4,0 ã;- âîäà — 1000 ñì3.Â.3.1.2 Ïðèãîòîâëåíèå

Ïðè íàãðåâàíèè ðàñòâîðÿþò êîìïîíåíòû â âîäå. Ïóòåì èçìåíåíèÿ ñîîòíîøåíèÿ ôîñôàòíûõ ñîëåéóñòàíàâëèâàþò ðÍ (7,0 � 0,1). Ñðåäó ðàçëèâàþò ïî 100 ñì3 â êîëáû èëè ôëàêîíû è ñòåðèëèçóþò òåêó÷èì ïàðîìïî 30 ìèí â òå÷åíèå äâóõ äíåé èëè ïðè òåìïåðàòóðå (112 � 1) °Ñ â òå÷åíèå 30 ìèí.

Â.3.2 Ðàñòâîð 2

Â.3.2.1 Ñîñòàâ:- êèñëûé ñåëåíèñòîêèñëûé íàòðèé (NaHSeO3) — 10,0 ã;- âîäà — 100 ñì3.Êèñëûé ñåëåíèñòîêèñëûé íàòðèé ðàñòâîðÿþò ñ ñîáëþäåíèåì ïðàâèë àñåïòèêè â ñòåðèëüíîé äèñòèëëè-

ðîâàííîé âîäå. Ðàñòâîð ãîòîâÿò íåïîñðåäñòâåííî ïåðåä óïîòðåáëåíèåì.Â.3.3 Ãîòîâàÿ ñðåäà

Â.3.3.1 Ñîñòàâ:- ðàñòâîð 1— 100 ñì3;- ðàñòâîð 2 — 4 ñì3.Â.3.3.2 Ïðèãîòîâëåíèå ñðåäû

Ê ðàñòâîðó 1 ïðèáàâëÿþò ðàñòâîð 2, ñðåäó ðàçëèâàþò ïî 10 ñì3 â ïðîáèðêè.Ñòåðèëèçàöèÿ ïðèãîòîâëåííîé ñðåäû íå äîïóñêàåòñÿ, òàê êàê ïðè ýòîì ïðîèñõîäèò ðåäóêöèÿ êèñëîãî

ñåëåíèñòîêèñëîãî íàòðèÿ, âûïàäàåò îñàäîê êðàñíîãî öâåòà è ñðåäà ñòàíîâèòñÿ íåïðèãîäíîé äëÿ èñïîëüçîâà-íèÿ.

Ñåëåíèòîâóþ ñðåäó âûïóñêàþò â ñóõîì âèäå è ãîòîâÿò ïî èíñòðóêöèè, óêàçàííîé íà ýòèêåòêå.

Â.4 Òåòðàòèîíàòíûé áóëüîí Ìþëëåð-Êàóôìàí

Â.4.1 Îñíîâà ñðåäû

Â.4.1.1 Ñîñòàâ:- ìÿñî-ïåïòîííûé áóëüîí — 100 ñì3;- óãëåêèñëûé êàëüöèé — 4,5 ã.Â.4.1.2 Ïðèãîòîâëåíèå ñðåäû

 ìÿñî-ïåïòîííûé áóëüîí, ïðèãîòîâëåííûé ïî ÃÎÑÒ 10444.1, ïîìåùàþò ñòåðèëüíûé óãëåêèñëûé êàëü-öèé. Óãëåêèñëûé êàëüöèé ñòåðèëèçóþò ïî ÃÎÑÒ 10444.1.

Ïðèãîòîâëåííóþ îñíîâó ñòåðèëèçóþò â àâòîêëàâå ïðè òåìïåðàòóðå (121 � 1) °Ñ â òå÷åíèå 20 ìèí.Â.4.2 Ðàñòâîð 1

Â.4.2.1 Ñîñòàâ:- ãèïîñóëüôèò íàòðèÿ (Na2S2O3 � 5H2O) — 50 ã;- âîäà — äî 100 ñì3.Â.4.2.2 Ïðèãîòîâëåíèå

Ãèïîñóëüôèò íàòðèÿ ïîìåùàþò â êîëáó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì3, ðàñòâîðÿþò â äèñòèëëèðîâàííîé âîäå èäîâîäÿò äèñòèëëèðîâàííîé âîäîé äî ìåòêè. Ðàñòâîð ïåðåëèâàþò â êîëáó èëè ôëàêîí è ñòåðèëèçóþò òåêó÷èìïàðîì â òå÷åíèå 30 ìèí èëè ïðè òåìïåðàòóðå (121 � 1) °Ñ â òå÷åíèå 20 ìèí. Ðàñòâîð õðàíÿò íå áîëåå 1 ìåñ ïðèòåìïåðàòóðå (3 � 2) °Ñ.

Â.4.3 Ðàñòâîð 2

Â.4.3.1 Ñîñòàâ:- éîäèñòûé êàëèé — 25 ã;- éîä êðèñòàëëè÷åñêèé — 20 ã;- âîäà — äî 100 ñì3.Â.4.3.2 Ïðèãîòîâëåíèå

Éîäèñòûé êàëèé ïîìåùàþò â êîëáó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì3, ðàñòâîðÿþò â íåáîëüøîì êîëè÷åñòâå äèñ-òèëëèðîâàííîé âîäû, ïðèáàâëÿþò êðèñòàëëè÷åñêèé éîä, ðàñòâîðÿþò åãî. Îáúåì ðàñòâîðà äîâîäÿò äèñòèëëè-

13

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007

ðîâàííîé âîäîé äî ìåòêè. Ðàñòâîð õðàíÿò ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå â ïëîòíî çàêðûòîì ñîñóäå èç òåìíîãîñòåêëà.

Â.4.4 Ðàñòâîð 3

Â.4.4.1 Ñîñòàâ:- áðèëëèàíòîâûé çåëåíûé — 0,5 ã;- âîäà — 100 ñì3.Â.4.4.2 Ïðèãîòîâëåíèå

Áðèëëèàíòîâûé çåëåíûé ïåðåíîñÿò â ôàðôîðîâóþ ñòóïêó è ïîñòåïåííî ðàñòâîðÿþò â äèñòèëëèðîâàí-íîé âîäå. Ðàñòâîð ïåðåëèâàþò â ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì3 è äîâîäÿò äèñòèëëèðîâàííîé âîäîé äîìåòêè. Ðàñòâîð õðàíÿò â çàêðûòîì ñîñóäå èç òåìíîãî ñòåêëà ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå íå áîëåå 3 ìåñ.

Â.4.5 Ðàñòâîð 4

Â.4.5.1 Ñîñòàâ:- ñóõàÿ áû÷üÿ æåë÷ü — 10 ã;- âîäà — äî 100 ñì3.Â.4.5.2 Ïðèãîòîâëåíèå

Ñóõóþ æåë÷ü ðàñòâîðÿþò â 100 ñì3 äèñòèëëèðîâàííîé âîäû èëè èñïîëüçóþò 100 ñì3 íàòóðàëüíîé æåë÷è.Ðàñòâîð æåë÷è èëè íàòóðàëüíóþ æåë÷ü ñòåðèëèçóþò ïðè òåìïåðàòóðå (121 � 1) °Ñ â òå÷åíèå 20 ìèí. Ðàñòâîðõðàíÿò íå áîëåå 1 ìåñ ïðè òåìïåðàòóðå (3 � 2) °Ñ.

Â.4.6 Ãîòîâàÿ ñðåäà

Â.4.6.1 Ñîñòàâ:- îñíîâà ñðåäû ïî Â.4.1 — 100 ñì3;- ðàñòâîð 1 — 10 ñì3;- ðàñòâîð 2 — 2 ñì3;- ðàñòâîð 3 — 0,2 ñì3;- ðàñòâîð 4 — 5 ñì3.Â.4.6.2 Ïðèãîòîâëåíèå

Óêàçàííûå ðàñòâîðû ïðèáàâëÿþò ê îñíîâå ñðåäû â ïðèâåäåííîì âûøå ïîðÿäêå, ïåðåìåøèâàÿ ñìåñü ïîñëåêàæäîãî ïðèáàâëåíèÿ, ñðåäó ðàçëèâàþò ïî 10 ñì3 â ïðîáèðêè.

Ñðåäó èñïîëüçóþò â äåíü ïðèãîòîâëåíèÿ.Äëÿ ïîâûøåíèÿ ñåëåêòèâíîñòè ñðåäû äîïóñêàåòñÿ äîáàâëÿòü ê ñðåäå ðàñòâîð íîâîáèîöèíà íàòðèåâîé ñîëè

èç ðàñ÷åòà 0,5 ñì3 ðàñòâîðà íîâîáèîöèíà íàòðèåâîé ñîëè íà 100 ñì3 îñíîâû ñðåäû.Â.4.7 Ðàñòâîð íîâîáèîöèíàÂ.4.7.1 Ñîñòàâ:- íîâîáèîöèí íàòðèåâàÿ ñîëü — 0,04 ã;- âîäà — 5 ñì3.Â.4.7.2 ÏðèãîòîâëåíèåÍîâîáèîöèí íàòðèåâóþ ñîëü ðàñòâîðÿþò â äèñòèëëèðîâàííîé âîäå. Ðàñòâîð ñòåðèëèçóþò ôèëüòðàöèåé ïî

ÃÎÑÒ 26670 ÷åðåç ìåìáðàííûé ôèëüòð ðàçìåðîì ïîð 0,22 ìêì, õðàíÿò ïðè òåìïåðàòóðå (3 � 2) °C â òå÷åíèå ÷åòû-ðåõ íåäåëü.

Â.5 Êñèëîçà-ëèçèí-äåîêñèõîëàòíûé àãàð (XLD-àãàð)

Â.5.1 Îñíîâà ñðåäûÂ.5.1.1 Ñîñòàâ:- äðîææåâîé ýêñòðàêò (ïîðîøîê) — 3,0 ã;- õëîðèñòûé íàòðèé (NaCl) — 5,0 ã;- êñèëîçà — 3,75 ã;- ëàêòîçà — 7,5 ã;- ñàõàðîçà — 7,5 ã;- L-ëèçèí ãèäðîõëîðèä — 5,0 ã;- òèîñóëüôàò íàòðèÿ — 6,8 ã;- æåëåçî III àììîíèé öèòðàò — 0,8 ã;- ôåíîëîâûé êðàñíûé — 0,08 ã (èëè 20 ñì3 ðàñòâîðà, ïðèãîòîâëåííîãî ïî 5.2, åñëè ñðåäà ñîñòîèò èç îòäåëü-

íûõ êîìïîíåíòîâ);- äåîêñèõîëàò íàòðèÿ —1,0 ã;- àãàð— îò 9 äî 18 ã1);- âîäà —1000 ñì3.Â.5.1.2 ÏðèãîòîâëåíèåÏðè íàãðåâàíèè ðàñòâîðÿþò äåãèäðàòèðîâàííûå êîìïîíåíòû îñíîâû èëè äåãèäðàòèðîâàííóþ îñíîâó â âîäå

ïðè ÷àñòîì ïîìåøèâàíèè. Äîâîäÿò äî êèïåíèÿ, íî íå êèïÿòÿò, èçáåãàÿ ïåðåãðåâà.

14

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007

1) Çàâèñèò îò æåëèðóþùèõ ñâîéñòâ.

Óñòàíàâëèâàþò ðÍ òàê, ÷òîáû ïîñëå ïðîãðåâà îí ñîñòàâëÿë (7,4 � 0,2) ïðè òåìïåðàòóðå 25 °C. Ðàçëèâàþòîñíîâó â ïðîáèðêè èëè ôëàêîíû ïîäõîäÿùåé âìåñòèìîñòè. Çàòåì ïðîãðåâàþò íà êèïÿùåé âîäÿíîé áàíå îêîëî5 ìèí.

Â.5.2 Ðàñòâîð ôåíîëîâîãî êðàñíîãîÂ.5.2.1 Ñîñòàâ:- ôåíîëîâûé êðàñíûé — 0,4 ã;- âîäà —100 ñì3.Â.5.2.2 ÏðèãîòîâëåíèåÔåíîëîâûé êðàñíûé ïåðåíîñÿò â ôàðôîðîâóþ ñòóïêó è ïîñòåïåííî ðàñòâîðÿþò â äèñòèëëèðîâàííîé âîäå.

Ðàñòâîð ïåðåëèâàþò â ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì3 è äîâîäÿò äèñòèëëèðîâàííîé âîäîé äî ìåòêè. Ðàñòâîðõðàíÿò â çàêðûòîì ñîñóäå èç òåìíîãî ñòåêëà ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå.

Â.5.3 Ïðèãîòîâëåíèå ÷àøåê ñî ñðåäîéÑðåäó ïîñëå ïðîãðåâà ïåðåíîñÿò â âîäÿíóþ áàíþ ïðè òåìïåðàòóðå îò 44 °C äî 47 °C, ïåðåìåøèâàþò è ðàçëè-

âàþò â ÷àøêè, äàþò çàòâåðäåòü. Ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì ñðåäó â ÷àøêàõ ïðåäïî÷òèòåëüíî ñ îòêðûòîé êðûøêîé èïîâåðõíîñòüþ ñðåäû âíèç ïîäñóøèâàþò â øêàôó ñ òåìïåðàòóðîé îò 37 °C äî 55 °C äî òåõ ïîð, ïîêà ïîâåðõíîñòü ñðå-äû íå ñòàíåò ñóõîé. Äîïóñêàåòñÿ õðàíèòü ÷àøêè ñî ñðåäîé ïðè òåìïåðàòóðå (3 � 2) °C íå áîëåå ïÿòè äíåé.

Â.6 Äèôôåðåíöèàëüíî-äèàãíîñòè÷åñêèå ñðåäû

Â.6.1 Âèñìóò-ñóëüôèò àãàð (àãàð Âèëüñîí-Áëåðà).Â.6.2 Ñðåäà Ïëîñêèðåâà.Â.6.3 Ñðåäà Ýíäî.Â.6.4 Ñðåäà Ëåâèíà.Ñðåäû ãîòîâÿò ïî èíñòðóêöèè, óêàçàííîé íà ýòèêåòêå.Â.6.5 Áðèëëèàíòîâûé çåëåíûé àãàðÂ.6.5.1 Ñîñòàâ:- äðîææåâîé ýêñòðàêò — 3 ã;- ïåïòîí — 10 ã;- õëîðèñòûé íàòðèé — 5 ã;- ëàêòîçà — 10 ã;- ñàõàðîçà — 10 ã;- ôåíîëîâûé êðàñíûé — 0,08 ã (èëè 20 ñì3 ðàñòâîðà, ïðèãîòîâëåííîãî ïî Â.5.2, åñëè ñðåäà ñîñòîèò èç

îòäåëüíûõ êîìïîíåíòîâ);- àãàð — 20 ã;- áðèëëèàíòîâûé çåëåíûé — 0,0125 ã (èëè 2,5 ñì3 ðàñòâîðà, ïðèãîòîâëåííîãî ïî Â.4.4);- âîäà — 1000 ñì3.Â.6.5.2 Ïðèãîòîâëåíèå

Ïðè íàãðåâàíèè ðàñòâîðÿþò äåãèäðàòèðîâàííûå êîìïîíåíòû îñíîâû èëè äåãèäðàòèðîâàííóþ îñíîâó ââîäå ïðè ÷àñòîì ïîìåøèâàíèè. Äîâîäÿò äî êèïåíèÿ, êèïÿòÿò 1 ìèí.

Óñòàíàâëèâàþò ðÍ òàê, ÷òîáû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè îí ñîñòàâëÿë (6,9 � 0,1) ïðè òåìïåðàòóðå 25 °C. Ðàç-ëèâàþò ñðåäó âî ôëàêîíû ïîäõîäÿùåé âìåñòèìîñòè. Ñòåðèëèçóþò 15 ìèí â àâòîêëàâå ïðè òåìïåðàòóðå(121 � 1) °C. Îõëàæäàþò äî òåìïåðàòóðû îò 45 °Ñ äî 50 °Ñ è ðàçëèâàþò â ÷àøêè Ïåòðè.

Â.7 Ïèòàòåëüíûé àãàð

Â.7.1 Ñîñòàâ:- ìÿñíîé ýêñòðàêò — 3 ã;- ïåïòîí — 5 ã;- àãàð — îò 9 äî 18 ã;- âîäà — 1000 ñì3.Â.7.2 ÏðèãîòîâëåíèåÊîìïîíåíòû ðàñòâîðÿþò â âîäå ïðè íàãðåâàíèè. Óñòàíàâëèâàþò ðÍ òàê, ÷òîáû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè îí ñîñòàâ-

ëÿë (7,4 � 0,2) ïðè òåìïåðàòóðå 25 °Ñ. Ïåðåíîñÿò ïèòàòåëüíóþ ñðåäóâ ïðîáèðêè èëè ôëàêîíû, ñòåðèëèçóþò 15 ìèí âàâòîêëàâå ïðè òåìïåðàòóðå (121 � 1) °Ñ.

Â.7.3 Ïðèãîòîâëåíèå ÷àøåê ñ ïèòàòåëüíûì àãàðîìÏåðåíîñÿò ïðèáëèçèòåëüíî 15 ñì3 ðàñïëàâëåííîé ñðåäû â ñòåðèëüíûå ÷àøêè Ïåòðè è ïîñòóïàþò ïî Â.5.3.

Â.8 Ìÿñî-ïåïòîííûé àãàð

Ìÿñî-ïåïòîííûé àãàð ãîòîâÿò ïî ÃÎÑÒ 10444.1 èëè èñïîëüçóþò ÃÐÌ-àãàð.ÃÐÌ-àãàð ãîòîâÿò ïî èíñòðóêöèè, óêàçàííîé íà ýòèêåòêå.

Â.9 Ìÿñî-ïåïòîííûé áóëüîí ñ ãëþêîçîé

Ìÿñî-ïåïòîííûé áóëüîí ñ ãëþêîçîé ãîòîâÿò ïî ÃÎÑÒ 10444.1. Äëÿ ïîñåâîâ èñïîëüçóþò ñðåäó, ðàçëèòóþâ ïðîáèðêè ïî 6—7 ñì3.

15

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007

Â.10 Ñðåäû ñ óãëåâîäàìè (ñðåäû Ãèññà)

Ñðåäû ñ óãëåâîäàìè (ñðåäû Ãèññà) ãîòîâÿò ïî ÃÎÑÒ 10444.1 èëè èñïîëüçóþò ñóõèå ñðåäû ñ óãëåâîäàìè,êîòîðûå ãîòîâÿò ïî èíñòðóêöèè, óêàçàííîé íà ýòèêåòêå.

Â.11 Òðåõñàõàðíûé æåëåçèñòûé àãàð (TSI-àãàð)

Â.11.1 Ñîñòàâ:- ìÿñíîé ýêñòðàêò — 3,0 ã;- äðîææåâîé ýêñòðàêò — 3,0 ã;- ïåïòîí — 20,0 ã;- õëîðèñòûé íàòðèé (NaCl) — 5,0 ã;- ëàêòîçà — 10,0 ã;- ñàõàðîçà — 10,0 ã;- ãëþêîçà — 1,0 ã;- æåëåçî (III) öèòðàò— 0,3 ã;- òèîñóëüôàò íàòðèÿ — 0,3 ã;- ôåíîëîâûé êðàñíûé — 0,024 ã (èëè 6 ñì3 ðàñòâîðà, ïðèãîòîâëåííîãî ïî Â.5.2, åñëè ñðåäà ñîñòîèò èç îòäåëü-

íûõ êîìïîíåíòîâ);- àãàð — îò 9 äî 18 ã;- âîäà — 1000 ñì3.Â.11.2 ÏðèãîòîâëåíèåÏðè íàãðåâàíèè ðàñòâîðÿþò êîìïîíåíòû èëè äåãèäðàòèðîâàííóþ îñíîâó ñðåäû â âîäå. Óñòàíàâëèâàþò òàêîé

ðÍ, ÷òîáû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè îí ñîñòàâëÿë (7,4 � 0,2) ïðè òåìïåðàòóðå 25 °C. Ïåðåíîñÿò ñðåäó â ïðîáèðêè ïî7 — 8 ñì3. Ñòåðèëèçóþò 15 ìèí â àâòîêëàâå ïðè (121 � 1) °C. Çàòåì ïðîáèðêè îñòàâëÿþò â íàêëîííîì ïîëîæåíèè òàê,÷òîáû âûñîòà ñòîëáèêà ñðåäû ñîñòàâëÿëà îêîëî 2,5 ñì, à ñêîøåííàÿ ïîâåðõíîñòü íàä íèì — 5 ñì.

Äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàíèå àãàðà Êëèãëåðà èëè ñðåäû Îëüêåíèöêîãî. Ñðåäû ãîòîâÿò ïî èíñòðóêöèÿì,óêàçàííûì íà ýòèêåòêàõ.

Â.12 Àãàð ñ ìî÷åâèíîé (àãàð Êðèñòåíñåíà)

Â.12.1 Îñíîâà ñðåäûÂ.12.1.1 Ñîñòàâ:- ïåïòîí — 1,0 ã;- ãëþêîçà — 1,0 ã;- õëîðèñòûé íàòðèé (NaCl) — 5,0 ã;- îäíîçàìåùåííûé ôîñôîðíîêèñëûé êàëèé (KH2PO4) — 2,0 ã;- ôåíîëîâûé êðàñíûé — 0,012 ã (èëè 3 ñì3 ðàñòâîðà, ïðèãîòîâëåííîãî ïî Â.5.2, åñëè ñðåäà ñîñòîèò èç îòäåëü-

íûõ êîìïîíåíòîâ);àãàð — îò 9 äî 18 ã;âîäà— 1000 ñì3.Â.12.1.2 ÏðèãîòîâëåíèåÏðè íàãðåâàíèè ðàñòâîðÿþò êîìïîíåíòû èëè äåãèäðàòèðîâàííóþ îñíîâó ñðåäû â âîäå. Óñòàíàâëèâàþò

òàêîé ðÍ, ÷òîáû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè îí ñîñòàâëÿë (6,8 � 0,2) ïðè òåìïåðàòóðå 25 °C. Îñíîâó ñðåäû â îïðåäåëåí-íûõ îáúåìàõ ðàçëèâàþò â êîëáû èëè ôëàêîíû è ñòåðèëèçóþò â àâòîêëàâå ïðè òåìïåðàòóðå (121 � 1) °Ñ â òå÷åíèå15 ìèí.

Â.12.2 Ðàñòâîð ìî÷åâèíûÂ.12.2.1 Ñîñòàâ:- ìî÷åâèíà — 40 ã;- âîäà äî êîíå÷íîãî îáúåìà — 100 ñì3.Â.12.2.2 ÏðèãîòîâëåíèåÌî÷åâèíó ïîìåùàþò â êîëáó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì3, ðàñòâîðÿþò â âîäå, îáúåì ðàñòâîðà äîâîäÿò âîäîé äî

ìåòêè. Ðàñòâîð ìî÷åâèíû ñòåðèëèçóþò ôèëüòðàöèåé ïî ÃÎÑÒ 26670 ÷åðåç ôèëüòðû ñ ðàçìåðîì ïîð 0,22 ìêì èëèòåêó÷èì ïàðîì â òå÷åíèå 30 ìèí.

Â.12.3 Ðàñòâîð ôåíîëîâîãî êðàñíîãîÂ.12.3.1 Ñîñòàâ è ïðèãîòîâëåíèå — ïî Â.5.2.Â.12.4 Ãîòîâàÿ ñðåäàÂ.12.4.1 Ñîñòàâ:- îñíîâà (ñì. Â.12.1) — 950 ñì3;- ðàñòâîð ìî÷åâèíû (ñì. Â.12.2) —50 ñì3.Â.12.4.2 ÏðèãîòîâëåíèåÏðèáàâëÿþò ñ ñîáëþäåíèåì ïðàâèë àñåïòèêè ðàñòâîð ìî÷åâèíû ê îñíîâå, ïðåäâàðèòåëüíî ðàñïëàâëåííîé

è îõëàæäåííîé äî òåìïåðàòóðû îò 44 °C äî 47 °C. Ðàçëèâàþò ãîòîâóþ ñðåäó â ñòåðèëüíûå ïðîáèðêè 7 — 8 ñì3.Ïîñëå ñòåðèëèçàöèè ñðåäó ñêàøèâàþò ïî Â.11.2.

16

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007

Â.13 L — ëèçèíäåêàðáîêñèëàçíàÿ ñðåäà

Â.13.1 Ñîñòàâ:- L — ëèçèí ìîíîãèäðîõëîðèä — 5,0 ã;- äðîææåâîé ýêñòðàêò — 3,0 ã;- ãëþêîçà — 1,0 ã;- áðîìêðåçîëîâûé ïóðïóðîâûé — 0,015 ã (èëè 5 ñì3 ðàñòâîðà, ïðèãîòîâëåííîãî ïî Â.13.3);- âîäà — 1000 ñì3.Â.13.2 ÏðèãîòîâëåíèåÊîìïîíåíòû ðàñòâîðÿþò â âîäå ïðè íàãðåâàíèè.Óñòàíàâëèâàþò ðÍ òàê, ÷òîáû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè îí ñîñòàâëÿë (6,8 � 0,2) ïðè òåìïåðàòóðå 25 °C.Ïåðåíîñÿò ñðåäó â ïðîáèðêè ïî 2 — 5 ñì3.Ñòåðèëèçóþò 15 ìèí â àâòîêëàâå ïðè òåìïåðàòóðå (121 � 1) °Ñ.Â.13.3 Ðàñòâîð áðîìêðåçîëîâîãî ïóðïóðîâîãîÂ.13.3.1 Ñîñòàâ:- áðîìêðåçîëîâûé ïóðïóðîâûé — 0,3 ã;- âîäà — 100 ñì3.Â.13.3.2 ÏðèãîòîâëåíèåÁðîìêðåçîëîâûé ïóðïóðîâûé ïåðåíîñÿò â ôàðôîðîâóþ ñòóïêó è ïîñòåïåííî ðàñòâîðÿþò â âîäå. Ðàñòâîð

ïåðåëèâàþò â ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì3 è äîâîäÿò âîäîé äî ìåòêè. Ðàñòâîð õðàíÿò â çàêðûòîì ñîñóäå èçòåìíîãî ñòåêëà ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå íå áîëåå 3 ìåñ.

Â.14 �-ãàëàêòîçèäàçíûé ðåàêòèâ

Â.14.1 Áóôåðíûé ðàñòâîðÂ.14.1.1 Ñîñòàâ:- ôîñôîðíîêèñëûé îäíîçàìåùåííûé íàòðèé (NaH2PO4) — 6,9 ã;- ãèäðîêñèä íàòðèÿ (NaOH) êîíöåíòðàöèè 10 ìîëü/äì3 — îêîëî 3 ñì3;- âîäà äî êîíå÷íîãî îáúåìà — 50 ñì3.Â.14.1.2 ÏðèãîòîâëåíèåÐàñòâîðÿþò ôîñôîðíîêèñëûé îäíîçàìåùåííûé íàòðèé ïðèáëèçèòåëüíî â 45 ñì3 âîäû â ìåðíîì ôëàêîíå.Óñòàíàâëèâàþò ðÍ ñ ïîìîùüþ ðàñòâîðà ãèäðîêñèäà íàòðèÿ (7,0 � 0,2) ïðè òåìïåðàòóðå 25 °C. Äîáàâëÿþò âîäó

äî îáúåìà 50 ñì3.Â.14.2 ONPG-ðàñòâîðÂ.14.2.1 Ñîñòàâ:- î-íèòðîôåíèë � -D-ãàëàêòîïèðàíîçèä (ONPG) — 0,08 ã;- âîäà — 15 ñì3.Â.14.2.2 ÏðèãîòîâëåíèåÐàñòâîðÿþò ONPG â âîäå òåìïåðàòóðîé îêîëî 50 °C. Ðàñòâîð îõëàæäàþò.Â.14.3 Ãîòîâûé ðåàêòèâÂ.14.3.1 Ñîñòàâ:- áóôåðíûé ðàñòâîð (ñì. Â.14.1) — 5 ñì3;- ONPG-ðàñòâîð (ñì. Â.14.2) — 15 ñì3.Â.14.3.2 ÏðèãîòîâëåíèåÃîòîâÿò ñâåæèé ðàñòâîð, ïðèáàâëÿÿ áóôåðíûé ðàñòâîð ê ONPG-ðàñòâîðó.

Â.15 Ñðåäà è ðåàêòèâû äëÿ ðåàêöèè Ôîãåñ-Ïðîñêàóåðà (VP)

Â.15.1 VP-ñðåäàÂ.15.1.1 Ñîñòàâ:- ïåïòîí — 7 ã;- ãëþêîçà — 5 ã;- ôîñôîðíîêèñëûé äâóçàìåùåííûé êàëèé (K2HPO4) — 5 ã;- âîäà — 1000 ñì3.Â.15.1.2 ÏðèãîòîâëåíèåÊîìïîíåíòû ðàñòâîðÿþò â âîäå ïðè íàãðåâàíèè. Óñòàíàâëèâàþò òàêîé ðÍ, ÷òîáû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè îí

ñîñòàâëÿë (6,9 � 0,2) ïðè òåìïåðàòóðå 25 °C. Ñðåäó ðàçëèâàþò â ïðîáèðêè ïî 3 ñì3. Ñòåðèëèçóþò 15 ìèí â àâòîêëàâåïðè òåìïåðàòóðå (121 � 1) °C.

Â.15.2 Ðàñòâîð êðåàòèíà (N-àìèäèíîñàðêîçèíà)Â.15.2.1 Ñîñòàâ:êðåàòèí ìîíîãèäðàò — 0,5 ã;âîäà — 100 ñì3.Â.15.2.2 ÏðèãîòîâëåíèåÊðåàòèí ìîíîãèäðàò ðàñòâîðÿþò â âîäå.Â.15.3 1-íàôòîë, ñïèðòîâîé ðàñòâîð

17

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007

Â.15.3.1 Ñîñòàâ:- 1-íàôòîë — 6 ã;- ñïèðò ýòèëîâûé ðåêòèôèêîâàííûé èç ïèùåâîãî ñûðüÿ îáúåìíîé äîëåé 96 % — 100 ñì3.Â.15.3.2 ÏðèãîòîâëåíèåÐàñòâîðÿþò 1-íàôòîë â ýòàíîëå.Â.15.4 Ðàñòâîð ãèäðîêñèäà êàëèÿÂ.15.4.1 Ñîñòàâ:- ãèäðîêñèä êàëèÿ (ÊÎÍ) — 40 ã;- âîäà — 100 ñì3.Â.15.4.2 ÏðèãîòîâëåíèåÃèäðîêñèä êàëèÿ ðàñòâîðÿþò â âîäå.

Â.16 Ðåàêòèâû äëÿ èíäîëüíîé ðåàêöèè

Â.16.1 Ðåàêòèâ Êîâà÷àÂ.16.1.1 Ñîñòàâ:- 4-äèìåòèëàìèíîáåíçàëüäåãèä — 5 ã;- ñîëÿíàÿ êèñëîòà ïëîòíîñòüþ � = 1,18 ã/ñì3 � 1,19 ã/ ñì3 — 25 ñì3;- 2-ìåòèëáóòàí-2-îë (èçîáóòèëîâûé ñïèðò) — 75 ñì3.Â.16.1.2 ÏðèãîòîâëåíèåÊîìïîíåíòû ïåðåìåøèâàþò.Â.16.2 Ðåàêòèâ Ýðëèõà

Â.16.2.1 Ñîñòàâ:- ïàðàäèìåòèëàìèíîáåíçàëüäåãèä — 1 ã;- ýòèëîâûé ñïèðò îáúåìíîé äîëåé 96 % — 95 ñì3;- ñîëÿíàÿ êèñëîòà ïëîòíîñòüþ � = 1,18 ã/ñì3 � 1,19 ã/ñì3 — 80 ñì3.Â.16.2.2 Ïðèãîòîâëåíèå

Êîìïîíåíòû ïåðåìåøèâàþò.

Â.17 Òðèïòîí/òðèïòîôàíîâàÿ ñðåäà

Â.17.1 Ñîñòàâ:- òðèïòîí — 10 ã;- õëîðèñòûé íàòðèé (NaCl) — 5 ã;- DL-òðèïòîôàí — 1 ã;- âîäà — 1000 ñì3.Â.17.2 ÏðèãîòîâëåíèåÊîìïîíåíòû ðàñòâîðÿþò â ãîðÿ÷åé âîäå. Óñòàíàâëèâàþò òàêîé ðÍ, ÷òîáû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè îí ñîñòàâëÿë

(7,5 � 0,2) ïðè òåìïåðàòóðå 25 °C. Ðàçëèâàþò ñðåäó ïî 5 ñì3 â ïðîáèðêè. Ñòåðèëèçóþò 15 ìèí â àâòîêëàâå ïðè òåìïå-ðàòóðå (121 � 1) °C.

Â.18 Áóëüîí Õîòòèíãåðà

Áóëüîí Õîòòèíãåðà ãîòîâÿò ïî ÃÎÑÒ 10444.1. Äëÿ ïîñåâîâ èñïîëüçóþò ñðåäó, ðàçëèòóþ â ïðîáèðêè ïî6—7 ñì3.

Â.19 Ìÿñî-ïåïòîííûé áóëüîí ñ 0,05 % L-òðèïòîôàíà

Â.19.1 Ñîñòàâ:- L-òðèïòîôàí — 0,05 ã;- ìÿñî-ïåïòîííûé áóëüîí — 100 ñì3.Â.19.2 Ïðèãîòîâëåíèå

L-òðèïòîôàí ðàñòâîðÿþò â ìÿñî-ïåïòîííîì áóëüîíå, ïðèãîòîâëåííîì ïî ÃÎÑÒ 10444.1, ðàçëèâàþò âïðîáèðêè ïî 6—7 ñì3 è ñòåðèëèçóþò ïðè òåìïåðàòóðå (121 � 1) °Ñ â òå÷åíèå 20 ìèí.

Â.20 Ïîëóæèäêèé ïèòàòåëüíûé àãàð

Â.20.1 Ñîñòàâ:- ìÿñíîé ýêñòðàêò — 3,0 ã;- ïåïòîí — 5,0 ã;- àãàð — îò 4 äî 9 ã1);- âîäà — 1000 ñì3.Â.20.2 ÏðèãîòîâëåíèåÊîìïîíåíòû ðàñòâîðÿþò â âîäå ïðè íàãðåâàíèè. Óñòàíàâëèâàþò òàêîé ðÍ, ÷òîáû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè îí

ñîñòàâëÿë (7,0 � 0,2) ïðè òåìïåðàòóðå 25 °C. Ðàçëèâàþò ñðåäó âî ôëàêîíû ïîäõîäÿùåé âìåñòèìîñòè. Ñòåðèëèçóþò15 ìèí â àâòîêëàâå ïðè òåìïåðàòóðå (121 � 1) °C.

18

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007

1) Çàâèñèò îò æåëèðóþùèõ ñâîéñòâ.

Â.20.3 Ïðèãîòîâëåíèå ïðîáèðîê ñ àãàðîì ñòåðèëüíûå ïðîáèðêè íàëèâàþò ïî 6 — 7 ñì3 ñâåæåïðèãîòîâëåííîãî àãàðà.

Â.21 Ïîëóæèäêèé ìÿñî-ïåïòîííûé àãàð

Ãîòîâÿò ïî ÃÎÑÒ 10444.1 òàê æå, êàê ìÿñî-ïåïòîííûé àãàð, íî ïðè ïðèãîòîâëåíèè äîáàâëÿþò 4,0—9,0 ãàãàðà íà 1 äì3 ìÿñî-ïåïòîííîãî áóëüîíà, ïåðåä ñòåðèëèçàöèåé ñðåäó ðàçëèâàþò ïî 6—7 ñì3 â ïðîáèðêè.

Â.22 Ôèçèîëîãè÷åñêèé ðàñòâîð

Â.22.1 Ñîñòàâ:- õëîðèñòûé íàòðèé (NaCl) — 8,5 ã;- âîäà — 1000 ñì3.Â.22.2 ÏðèãîòîâëåíèåÕëîðèñòûé íàòðèé ðàñòâîðÿþò â âîäå. Óñòàíàâëèâàþò òàêîé ðÍ, ÷òîáû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè îí ñîñòàâëÿë

( ,70 � 0,2) ïðè òåìïåðàòóðå 25 °C. Ðàçëèâàþò âî ôëàêîíû ïîäõîäÿùåé âìåñòèìîñòè, ñòåðèëèçóþò â àâòîêëàâå ïðèòåìïåðàòóðå (121 � 1) °C â òå÷åíèå 15 ìèí.

Äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàíèå ãîòîâûõ è äåãèäðàòèðîâàííûõ, â òîì ÷èñëå õðîìîãåííûõ, ïèòàòåëüíûõ ñðåäàíàëîãè÷íîãî ñîñòàâà, è çàðåãèñòðèðîâàííûõ íà òåððèòîðèè Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè.

Ïðèëîæåíèå Ã(ñïðàâî÷íîå)

Ñâåäåíèÿ î ñîîòâåòñòâèè ññûëî÷íûõ ìåæäóíàðîäíûõ ñòàíäàðòîâ íàöèîíàëüíûì ñòàíäàðòàìÐîññèéñêîé Ôåäåðàöèè, èñïîëüçîâàííûì â íàñòîÿùåì ñòàíäàðòå â êà÷åñòâå íîðìàòèâíûõ

ññûëîê

Ò à á ë è ö à Ã.1

Îáîçíà÷åíèå ññûëî÷íîãî ìåæãîñóäàðñòâåííîãî èíàöèîíàëüíîãî ñòàíäàðòà Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè

Îáîçíà÷åíèå è íàèìåíîâàíèå ññûëî÷íîãî ìåæäóíàðîäíîãî ñòàíäàðòà èóñëîâíîå îáîçíà÷åíèå ñòåïåíè åãî ñîîòâåòñòâèÿ ññûëî÷íîìó

íàöèîíàëüíîìó ñòàíäàðòó

ÃÎÑÒ Ð 51446—99 (ÈÑÎ 7218—96) ÈÑÎ 7218:1996 «Ìèêðîáèîëîãèÿ ïðîäóêòîâ ïèòàíèÿ è êîðìî-âûõ ïðîäóêòîâ. Îáùèå ïðàâèëà ìèêðîáèîëîãè÷åñêèõ èññëåäî-âàíèé» (MOD)

ÃÎÑÒ Ð 51652—2000 —

ÃÎÑÒ 4209—77 —

ÃÎÑÒ 6672—75 —

ÃÎÑÒ 6691—77 —

ÃÎÑÒ 6709—72 —

ÃÎÑÒ 9284—75 —

ÃÎÑÒ 9536—79 —

ÃÎÑÒ 10444.1—84 —

ÃÎÑÒ 24104—2001 —

ÃÎÑÒ 24363—80 —

ÃÎÑÒ 26668—85 —

ÃÎÑÒ 26669—85 —

ÃÎÑÒ 26670—91 —

ÃÎÑÒ 30425—97 —

Ï ð è ì å ÷ à í è å —  íàñòîÿùåé òàáëèöå èñïîëüçîâàíî ñëåäóþùåå óñëîâíîå îáîçíà÷åíèå ñòåïåíè ñî-îòâåòñòâèÿ ñòàíäàðòîâ:

- MOD — ìîäèôèöèðîâàííûå ñòàíäàðòû.

19

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007

ÓÄÊ 663.664.001.4:006.354 ÎÊÑ 07.100.30 Í09 ÎÊÑÒÓ 9109

Êëþ÷åâûå ñëîâà: íåñåëåêòèâíîå îáîãàùåíèå, ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêèå ñðåäû, ôåðìåíòàöèÿ óãëå-âîäîâ, èíäîë, ðåàêöèÿ àããëþòèíàöèè, èíêóáèðîâàíèå ïîñåâîâ, �-ãàëàêòîçèäàçà

ÃÎÑÒ Ð 52814—2007

Ðåäàêòîð Ë.Â. ÊîðåòíèêîâàÒåõíè÷åñêèé ðåäàêòîð Ë.À. Ãóñåâà

Êîððåêòîð Ì.È. ÏåðøèíàÊîìïüþòåðíàÿ âåðñòêà Ë.À. Êðóãîâîé

Ñäàíî â íàáîð 02.06.2008. Ïîäïèñàíî â ïå÷àòü 01.07.2008. Ôîðìàò 60

� 84 18. Áóìàãà îôñåòíàÿ. Ãàðíèòóðà Àðèàë.

Ïå÷àòü îôñåòíàÿ. Óñë. ïå÷. ë. 2,79. Ó÷.-èçä. ë. 2,67. Òèðàæ 433 ýêç. Çàê. 827.

ÔÃÓÏ «ÑÒÀÍÄÀÐÒÈÍÔÎÐÌ», 123995 Ìîñêâà, Ãðàíàòíûé ïåð., 4.www.gostinfo.ru [email protected]

Íàáðàíî âî ÔÃÓÏ «ÑÒÀÍÄÀÐÒÈÍÔÎÐÌ» íà ÏÝÂÌ.Îòïå÷àòàíî â ôèëèàëå ÔÃÓÏ «ÑÒÀÍÄÀÐÒÈÍÔÎÐÌ» — òèï. «Ìîñêîâñêèé ïå÷àòíèê», 105062 Ìîñêâà, Ëÿëèí ïåð., 6.