اختبارات كشف آثار منوية

اختبارات كشف آثار منوية

د.ھاورێ دلزار كۆیى

رئیس قسم الشؤن العلمیة في معھد الطب الشرعي

مكونات السائل المنوييفرز السائل المنوي من البروستات، الحويصالت المنوية•

:يتألف السائل المنوي•

من قسم يحتوي بالتركيب األساسي على •

البروتينات المخاطية –أ

السكريات–ب

الخمائر -جـ

:يتألف منخلوي و على قسم أخر •

، (Yاو Xتكون )النطاف •

(ليستين+ كولين )و خاليا بشروية •

:مننطفةتألف الت•

( ميكرون5ـ 4)بطول كمثري او بيضوي رأس –أ

و عنق –ب

( . ميكرون60ـ 50)ذيل بطول –ج

النطفةرأس •

عنق•

ذيل•

خصائص النطاف

( مل/مليون حيوان120ـ 60)يبلغ عدد النطاف عند اإلنسان الطبيعي •

ض عند بعنطافو قد تختفي ال, و يختلف العدد من إنسان إلى آخر•(. غير المنجببين)األشخاص

خالل الساعة %( 80)بحركتها التي ال تقل عن فاطويقاس نشاط الن•. األولى

. بعد الوفاة ( ساعات10)في الجثة بحركة مقبولة حتى نطفةحتفظ الت•

خصائص النطاف

كقيمة عظمى ( ساعة72>) حتى داخل مهبل المرأةطفةعيش النت•

, متص تو نحل تثم

ال لفة لفترات مختداخل المهبلموتها بعدفاطو يمكن إن تبقى الن•.أيام/5> / تزيد عن خمسة

فياللطاخات المهبليةترجى من إجراء فائدةهناك ليسولذلك •على أيام( 7-5< )أكثر من بمرور االغتصابحوادث

. االغتصاب

النطاف مجهرياً

النطاف و الخاليا البشروية المهبلية مجهرياً

خصائص السائل المنويلونه األبيض الحليبي •

المميزة و رائحته الخاصة •

، و لزوجته العالية •

•PHقلوي

دقيقة يصبح سائل ألن الخمائر تحله30–15بعد •

خصائص السائل المنوي

غمق من السائل القديم يصبح اصفر اللون ولونه األصفر في المحيط أ•لون المركز

حموضة المهبل تقتل النطاف•

ايام7–6قد تبقى النطفة بين رتوج الرحم وعنقه حية لمدة •

مل من السائل المنوي 5–2يفرز الشخص الطبيعي من •

مليون نطفة80–50من السائل المنوي يحوي ³كل سم•

خصائص السائل المنوي

، و عند جفافه يختلف شكل البقعة حسب السطح الحامل لها •

فعلى السطوح غير الماصة •

) تلقائياً شكل قشيرات رقيقة في الحواف قد تتقشر و تسقطتت، ( على الصوف و الزجاج مثالً

( األلبسة القطنية و األخشاب ) و على السطوح الماصة •

. اً تشكل بقعة ملتصقة تأخذ لوناً ابيضاً مصفرت

دة و يجب زيا، تنحل البقع المنوية في الماء المحمض الخفيف •. تركيز الحمض كلما زاد عمر البقعة

تحري البقع المنوية

:الجرائم الجنسيةتحري السائل المنوي في يجرى •

، اغتصاب

زنا،

، فحشاء

لواطة،

جرائم القتل المترافقة بهأو في

ةاماكن البحث عن البقع والتلوثات المنوي

المسحات تؤخذ •

: من مسرح الجريمة•

االرضيات ،

االغطية ،

السرير،

الفراش،

.. فرش السيارة،

: ومن الضحية والمتهم في االماكن التالية•

االلبسة الخارجية والداخلية ،

حول شعر العانة،

بين الفخذين،

حول االعضاء التناسلية

.ومن االعضاء التناسلية

يةاماكن البحث عن البقع والتلوثات المنو‘ حيةللشفرين الكبيرين وما حول المهبل والشرج عند الضوكثيرا ما تؤخذ مسحات•

أو للقلفة والحشفة لدى المتهم

بواسطة شاش معقم مبلل بالماء

( الرتوج الخلفية وباطن الشفرين الصغيرين)تؤخذ المسحات من عمق المهبل و•

بواسطة حامل قطني

لتجف بحرارة الغرفة العادية المسحات وتترك •

.ثم ترسل للمختبر •

وكثيرا ما ترسل األلبسة الداخلية للضحية مع أغطية السرير في مكان الحادث•.لدراستها

رفع البقع المنوية

قطعة شاش ثم نجففها ←االثار المنوية الرطبة •

قشط←االثار المنوية الجافة •

تؤخذ كما هي( المالبس)على اشياء يمكن نقلها •

ودة طرائق رفع البقع والتلوثات المنوية الموج(الضحية)على المجني عليه

. تؤخذ المسحات من الخارج الى الداخل•

فال تؤخذ المسحات من المهبل قبل اخذها من المحيط كي اليتم ادخال •، سائل منوي الى المهبل ان كان موجودا خارج المهبل ولم يتم ايالج

.وكذلك للشرج فنبدأ مما حول الشرج ثم الشرج•

يترافق مع ايالج←االغتصاب •

يترافق مع سائل منوي على جلد الناحية التناسلية وما←الفحشاء •.حولها فقط

جودة طرائق رفع البقع و التلوثات المنوية المو(الضحية)على المجني عليه

أي تؤخذ مسحة خارجية على محيط المنطقة التناسلية•

وهكذا ثم... ثم مسحة اخرى اقرب للمركز •

..(االغتصاب والزنا والفاحشة)ثم مسحتان من المهبل •

..(اللواطة واالغتصاب والزنا والفاحشة)ومسحتان من الشرج •

ساعة ال داعي للمسحة الشرجية الداخلية الن الخمائر 48بعد •.تّخرب النطاف

تحري البقع المنوية

: عند تحري البقع المنوية يجب اإلجابة على األسئلة التالية •

. ـ هل البقعة المشتبهة منوية ؟ 1

. ـ هل البقعة المنوية إنسانية ؟ 2

.ـ من هو صاحب البقعة ؟ 3

هل البقعة منوية؟؟؟

.نقوم اوال باالستدالل عن طريق معرفة خصائص تلك البقعة بالعين المجردة•

على قماش ماص•

:البقعة المنوية الحديثة•

لزجة •

(رائحة غبار طلع النخيل) ذات رائحة نفاذة •

بلون ابيض عاجي مصفر•

:البقعة المنوية القديمة•

جافة •

خشنة•

بلون اصفر يزداد غماقة بالمحيط•

هل البقعة منوية؟؟؟قماش غير ماص او قليل االمتصاص•

بقعة جافة•

قشيرات بيضاء المعة•

لون البقعة اصفر باهت←فاذا كان لون القماش ابيضا

لون البقعة رمادي←فاذا كان لون القماش غامقا

: قد تلتبس مع بعض البقع األخرى

كاللعاب

و البول

و المفرزات المهبلية

و المفرزات االنفية

....والبقع الغذائية

هل البقعة منوية؟؟؟ -االختبارات الموجهة -

.A االشعة فوق البنفسجية استخدامUV عادة

بتسليطها على السطح المراد فحصه

، لتحديد مكان البقعة المشتبهة

، حيث تعطي لمعاناً ابيضاً صافياً مائالً نحو األصفر المزرق

و هو ايجابي

: ايضا مع بعض البقع األخرى

كاللعاب

و البول

و المفرزات المهبلية

و المفرزات االنفية

....والبقع الغذائية

هل البقعة منوية؟؟؟ -االختبارات الموجهة المنوية -

•B ـ اختبار فلورنس:ن و يعتمد على تحري مادة الكولين الموجودة بكميات عالية في المني أكثر م•

، السوائل األخرى للجسم

و يحتوي الكاشف على •

( +غ1.65)يوديد البوتاسيوم K Iملح

I ( + غ 2.54)اليود

H₂O (³سم30)ماء مقطر

تشكيل بلورات يوديد الكولين ←مع السائل المنوي + حين مزج الكاشف •

. و هي بلورات حمراء بنية، متطاولة، حجومها مختلفة •

–االختبارات الموجهة المنوية -B ـ اختبار فلورنس-

:و يجرى االختبار كما يلي•

بأخذ بلورة ساعة زجاجية•

بماء محمض في بلورة الساعة+ تنقع البقعة المشتبهة •

ثم توخذ صفيحة زجاجية •

وتوضع عليها •

قطرة من الكاشف ( سم1-½ )و إلى جانبها على بعد + قطرة من منقوع البقعة •

و توضع عليها ساترة بشكل عامودي على المنتصف•

تحت المجهر ( الخط الفاصل) و تفحص منطقة االمتزاج •

) +(. لرؤية بلورات يوديد الكولين اذا كانت موجودة في حال االيجابية

(اختبار فلورانس)بلورات يوديد الكولين

(اختبار فلورانس)بلورات يوديد الكولين

–االختبارات الموجهة المنوية Bـ اختبار فلورنس-

:االختبارات الموجهة تتميز بأنها•

سهلة وسريعة•

سلبيتها تنفي منوية البقعة( -)•

: مثل. مع كل المواد الحاوية على الكولين...! ايجابيتها كاذبة )+( •

... معظم سوائل البدن

كالحليب،

،...(انفي، مهبلي،) المخاط

لعاب،

عصير نباتات

فالبد في حال االيجابية من اجراء االختبارات المؤكدة •

ي عبوات كاشف فلورانس حساس للضوء ويتميز بسهولة تخربه، لذلك يجب حفظه ف•سوداء اللون او مستورة من الضوء

-االختبارات الموجهة المنوية -C ـ اختبار الفوسفاتاز الحامضة-

. يرة منهاالفوسفاتاز الحامضة موجودة في كل سوائل الجسم، لكن مفرزات البروستات تحوي كميات كب•

ارنة لذلك يعتمد االختبار على كشف هذه الخميرة الموجودة بأعلى مستوى لها في السائل المنوي مق•. بسوائل الجسم األخرى

: يحتوي الكاشف على قسمين•

: ـ قسم منحل يتالف من 1ً•

(غ23)NaClكلوريد الصوديوم -

³)سم0.5) حمض الخل الثلجي -

( غ2)خالت الصوديوم المبلرة -

(³سم90) H₂Oماء مقطر -

: ـ قسم معلق يحوي 2ً•

(ملغ30)ديازونيوم -1ملح انتراكيون -

(ملغ50)Kنفتول فوسفات البوتاسيوم ( (αألفا -

(³سم1% )1محلول ايروسيل -

خميرة الفوسفات الحامضية تدخل وري الرابطة الفوسفورية في االستر الفوسفبتحطيم

ليتحرر مرتكب االلفانفتول و يتحد ملح الديازونيوم

. جري مشكالً االلفانفتول الديازونيوم ذو اللون األحمر األ---------------------------------------------------

(استر فوسفوري)Kنفتول فوسفات البوتاسيوم ( (αألفا

↓ Acid Phos-ase بللورات تاكاياما

ملح ديازونيوم + نفتول ( (αألفا ↓

(لونه احمر اجري) نفتول الديازونيوم ( (αألفا

Acid Phos-aseاجراء االختبار : يجري االختبار •

بوضع ورقة نشاف مبللة على السطح المراد فحصه •

و ضغطها لمدة دقيقة •

ثم غمس الورقة في الكاشف •

يعني وجود الخميرة ) +( ←( دقائق5–3)فيتحول اللون إلى األحمر االجري خالل فترة قصيرة •

: ـ مالحظات •

. لذلك فهو نادر االستعمال ، ـ االختبار غير حساس إذ يعطي سلبيات كاذبة 1ً•

كوجود رذاذ ، فيها UV ـ يستعمل االختبار فقط في الحاالت التي ال يمكن استعمال االختبار األول 2ً•و في حال عدم إمكانية تخريب حامل البقعة ، ( الزجاج ) المني على سطوح واسعة غير ماصة

.ألسباب مختلفة

راز والشاي يعطي االختبار ايجابيات كاذبة مع سوائل الجسم األخرى وبعض المركبات النباتية كالب-3•.وتظهر االيجابية بشكل سريع وأني مع الشاي بينما تتأخر قليال في األحوال الطبيعية

(دليل بالمحكمة)مؤكدة ←³سم/وحدة4000–450كمية الخميرة •

االختبارات الموجهة D - (خمائرية)حديثة نسبيا

ري يمكن استعمال طرق حديثة نسبياً إلثبات وجود المني كتح•

،( ES)خميرة االسيراز•

•LDH

. و الفوسفاتاز القلوية •

االختبارات المؤكدة-كشف النطفة -1

, بعد حل البقعة و تلوين اللطاخةالنطفة الكاملةو أهمها رؤية •

و لما كانت النطاف تتخرب بالجفاف •

وغالباً ما تنفصل أذنابها •

الساحة المجهرية في رؤوس( 5–3)ثالثة إلى خمسة فان رؤية •. إلثبات وجود المني مؤكدا كافياً يعتبر الواحدة

(العمل وإجراء االختبار ) كشف النطفة -1منقوع بقعة←ساعة ½ ماء محمض وتترك لمدة + تؤخذ البقعة •

تفرش قطرة من منقوع البقعة على صفيحة زجاجية •

باإليترأو الهادئ باللهب تثبت إما بالتجفيف و •

.دقيقة/ 1/كان مركزا لمدة واذادقائق ( 10–5) لمدة هيماتوكسيللينفي ملون تغمس ثم •

الصفيحةثم تغسل •

لمدة دقيقة % 1االيوزينو تغمس في محلول •

ثم تغسل •

، بحرارة الغرفة وتجفف •

. تفحص تحت المجهر بالعدسة الغاطسة أو بالتكبير القوي و •

احمر زاهي في مقدمتها -) النتيجة بوجود نطفة كاملة تقرأ •

( احمر داكن مائل نحو البنفسجي في قاعدتها ـ •

( . المجهريةرؤوس منوية في الساحة 5ـ3) أو بوجود •

مراحل إجراء مؤكد منوي لكشف نطفة

كشف النطفة-1

ها في القع القديمة تنفصل مقدمة النطفة او رأسها عن ذيل•

وتلتبس مع بذور المونيليا •

وبعض الخمائر•

في حال كانت االختبارات الموجهة ايجابية •

حالة فقد ) و لم نتمكن من رؤية الحيوانات المنوية --( رؤوس منوية 3الحيوانات المنوية ـ أو رؤية اقل من

.ننتقل إلى اختبار المصول المرسبة -

اختبارات مؤكدة منوية-اختبار المصول المرسبة -2

يحتوي المني اإلنساني على •

، كما في الدم Human Agالمستضد اإلنساني الدموي •

. Human Seminal Agإضافة إلى وجود المستضد المنوي الخاص بالمني •

و يتم تحضير المصل المرسب •

بالعضل AgH Sبحقن األرنب ثالث زرقات متوالية من المني اإلنساني الكامل •

H S Abيتكون مصل ارنب حاوي على اضداد منوية انسانية •

. ثم يستنزف دم األرنب عندما تبلغ قوته الراصة الحد المطلوب •

H Abللتخلص من األضداد اإلنسانية الدموية •

H agيمزج المصل المأخوذ من األرنب مع دم إنساني •

فتترسب األضداد اإلنسانية الدموية •

H S Abوتبقى فقط األضداد المنوية االنسانية •

. التي يجب معاملتها للوصول إلى التراكيز المطلوبة

يجرى االختبار •

، ( كما ورد في بحث الدم ) بطريقة الرحالن المناعي الكهربائي باالغار على صفيحة •

. ولهذه الطريقة كامل خصائص طريقة كاليفورد •

اختبارات مؤكدة منوية-اختبار المصول المرسبة -2

:المباشرالتسباختبار •

ل من منقوع البقعة المشتبهةمكرو10يوضع •

•

( H Abانسانيةاضداد(كومبسل من محلول مكرو10يضاف لها •دقائق / 5/لمدة التسدون جزيئات االنسانيةالدموية المستضداتلرص

دون رص االنسانيالمني مستضداتوبذلك يبقى

Antiانسانيةمنوية اضداد+ كومبسنضيف لمزيج المنقوع ومحلول •Human Seminal Ab

تكوثرانسانيدقائق لنرى في حال وجود مني / 5/ثم تقرأ النتيجة بعد •بسبب ارتباطها المناعي الكيميائي المستضداتاألضداد حول

( مستضد-التس-ضد )•

اختبارات مؤكدة منوية انسانية

Esterase E2رحالن كهربائي مناعي لخميرة استراز •

↓

(ترى تحت المجهر) ترسيب

↓

منوية انسانية

تحديد صاحب البقعة

يمكن االعتماد على •

80)في السائل المنوي عند المفرزين ABOتحديد الزمر الدموية •–85 )%

و لكن مستضدات الزمر الدموية في المني ضعيفة•

لذلك فتحريها صعب نسبياً •

، لذلك يجب استعمال كريات حمر ممنعة و مصول قوية •

و التي تعطي ( DNA) و تبقى الطريقة األفضل هي بصمة الـ •. دقة نسبية مطلقة

االهمية الطبية الشرعية

اثبات واقعة الجرائم الجنسية•

التعرف على المجرمين •

بالتعرف على الزمر الدموية

DNAوالبصمة الوراثية