Testy ekotoxicity s rybami - Masaryk University
Post on 31-Oct-2021
9 Views
Preview:
Transcript
Test
y ek
otox
icity
s ry
bam
i
Test
y to
xici
ty n
a ry
bích
mod
elec
h
Aku
tní t
esty
toxi
city
Pro
long
ovan
é te
sty
toxi
city
Chr
onic
ké te
sty
toxi
city
Test
y to
xici
ty n
a ry
bích
em
bryí
ch a
potěr
uE
mbr
yoná
lní t
esty
Em
bryo
larv
ální
test
y
Test
y ov
livně
ní rů
stu
na n
edos
pělý
ch ry
bách
Test
y bi
oaku
mul
ace
Che
mic
ké lá
tky
a ch
emic
ké příp
ravk
y –
hodn
ocen
í vla
stno
stí n
ebez
pečn
ých
pro
živo
tní p
rostře
dí•
Zák.
č. 3
56/2
003
Sb.
O c
hem
ický
ch lá
tkác
h a
chem
ický
ch příp
ravc
ích
•M
etod
y pr
o zk
ouše
ní v
last
nost
í lát
ek a
příp
ravků
uved
eny
v čá
stiI
. příl
ohy
č.2
Vyh
lášk
y M
ŽP č
. 222
/200
4 S
b., k
tero
u s
u ch
emic
kých
láte
k a
příp
ravků
stan
oví z
ákla
dní m
etod
y pr
o zk
ouše
ní fy
ziká
lně-
chem
ický
ch v
last
nost
í, vý
bušn
ých
vlas
tnos
tí a
vlas
tnos
tí ne
bezp
ečný
ch p
ro ž
ivot
ní p
rostře
dí
•-a
kutn
í tox
icita
pro
ryby
•-b
ioak
umul
ace
–průt
okov
á zk
oušk
a na
rybá
ch•
-růs
tu n
a ne
dospěl
ých
rybá
ch•
-tox
icity
na
rybí
ch e
mbr
yích
a p
otěr
u –
krát
kodo
bá z
kouš
ka
Aku
tní t
esty
ČS
N E
N IS
O 7
346-
1 (7
5 77
61) J
akos
t vod
–S
tano
vení
aku
tní l
etál
ní to
xici
ty
láte
k pr
o sl
adko
vodn
í ryb
y B
rach
ydan
iore
rioH
amilt
on-B
ucha
nan
(Tel
eost
ei,
Cyp
rinid
ae) –
Čás
t 1: S
tatic
ká m
etod
a
ČS
N E
N IS
O 7
346-
2 (7
5 77
61) J
akos
t vod
–S
tano
vení
aku
tní l
etál
ní to
xici
ty
láte
k pr
o sl
adko
vodn
í ryb
y B
rach
ydan
iore
rioH
amilt
on-B
ucha
nan
(Tel
eost
ei,
Cyp
rinid
ae) –
Čás
t 2: O
bnov
ovac
í met
oda
ČS
N E
N IS
O 7
346-
3 (7
5 77
61) J
akos
t vod
–S
tano
vení
aku
tní l
etál
ní to
xici
ty
láte
k pr
o sl
adko
vodn
í ryb
y B
rach
ydan
iore
rioH
amilt
on-B
ucha
nan
(Tel
eost
ei,
Cyp
rinid
ae) –
Čás
t 3: P
růtočn
á m
etod
a
OE
CD
203
: Tes
t aku
tnít
oxic
ity n
a ry
bách
–vý
sled
kem
je k
once
ntra
ce, k
terá
vyvo
lá50
% ú
hyn
ryb
(96h
LC
50)
Pou
žíva
né d
ruhy
Pimephalespromelas
(stře
vle)
Cyprinuscarpio
(kap
r obe
cný)
Oncorhynchusmykiss
(pst
ruh
d
Brachydaniorerio
(dan
iopr
uhov
aný)
Poeciliareticulata
(živ
orod
ka d
uhov
á,
paví
očko
)
Daniorerio
(dan
iopr
uhov
ané,
zebř
ička
pru
hova
ná)
Cho
v ry
b pr
o te
sty
Stře
vle
potočn
í Stře
vle
potočn
í ((Pimephales
promelas
)•
mal
á, m
alé
náro
ky n
a pr
osto
r•
mim
otěl
ní v
ývoj
•ši
roké
rozm
ezí t
eplo
t i sl
anos
ti•
snad
ná k
ultiv
ace
v la
bora
toři
•kr
átká
gen
erač
ní d
oba
•te
sty
rela
tivně
levn
é
Dan
iopr
uhov
aný(Brachydaniorerio
)
•Zn
ámý
geno
m, d
obře
cha
rakt
eriz
ovan
ý dr
uh
•Ti
síce
mut
antn
ích
druhů
•D
obře
pop
saný
mod
el v
ývoj
e ob
ratlo
vců
•M
odel
y pr
o ně
kter
á lid
ská
onem
ocně
nía
poru
chy
•Č
eleď
: Cyp
rinid
ae-k
apro
vití
Půvo
d: A
sie
Vel
ikos
t: do
4 c
mTe
plot
a: 2
0 -2
6 °C
pH: 6
,5 -
7,5
Tvrd
ost v
ody:
5 -
12 °d
KH
Potra
va: v
šežr
avec
(vločk
ové
krm
ivo,
nitě
nky,
daf
nie)
Roz
mno
žová
ní: S
ameč
ci js
ou v
ybar
veně
jší a
opr
oti s
amič
kám
dor
bněj
ší.
Roz
mno
žují
se v
e vě
tší,
hodně
zaro
stlé
, nád
rži s
níz
kou
hlad
inou
vody
, při
tepl
otě
okor
o25
°C. N
a vy
tírac
í nád
rž b
y měl
o do
pada
t den
ní sv
ětlo
. Nej
dřív
edo
nád
rže
umís
tíme
sam
ičku
a a
ž po
něk
olik
a dn
ech
přid
áme
sam
ce. P
okud
jsm
e by
li ús
pěšn
í, sa
mič
ka n
akla
de n
a ro
stlin
y až
500
jike
r. Po
těr s
e líh
ne p
o dv
ou d
nech
a
sobě
stač
ný je
po
dalš
ím d
ni.
halančíkjaponský
(Oryziaslatipes
):
•Zc
ela
průh
ledn
á va
jíčka
•D
ostu
pné
kříž
ené
/tran
sgen
ní/m
utan
tníd
ruhy
•Zn
ámý
geno
m•
X-Y
urč
ení p
ohla
ví L
ow
tum
or b
ackg
roun
d•
Sens
itivn
í odp
ověď
na
xeno
biot
ika
Test
aku
tní t
oxic
ity n
a ry
bách
Úče
l:Te
st s
louž
í ke
stan
oven
í vliv
u lá
tek
a od
padn
ích
vod
na c
hová
nía
přež
íván
í ryb
. P
rinci
p:Te
st s
počí
vá v
e sl
edov
ání c
hová
ní a
pře
žívá
ní ry
b v
odst
upňo
vaný
ch
konc
entra
cích
test
ovan
é lá
tky
po d
obu
48 a
ž 96
hod
in
Brachydaniorerio
(2,5
-3,5
měs
íců,
2,5
-3,5
cm
, 21-
25o C
)Poeciliareticulata
(1,5
-2,5
cm
, 3-3
,5 měs
íce,
21-
25o C
) Cyprinuscarpio
(2,5
-3,5
cm
, 20-
24o C)
Oncorhinchusmykiss
(4,5
-5,5
cm
, 13-
17o C
)
Dal
ší d
ruhy
: Oryziaslatipes
(hal
ančí
kja
pons
ký), Lepomis
macrochirus
(slu
nečn
ice
mod
rá), Leuciscusidus
(jele
c je
sen)
Při
náku
pu n
utná
akl
imat
izac
e 10
-14
dni,
stan
dard
ní k
rmen
í, ch
ov ja
ko při
test
uD
o te
stu
–buď
jen
jedn
o po
hlav
í neb
o vy
rovn
aný
poče
t po
hlav
í
Test
y ak
utní
toxi
city
na
rybá
chPo
dmín
ky te
stu:
Tepl
ota
23±2
°C, o
svět
lení
12-1
6 ho
d 2
000
lux,
48
hod
pře
d te
stem
pře
stat
krm
it, běh
em te
stu
bez
krm
ení;
bez
aera
ce,
expo
zice
96
h m
in. 1
00 m
l/jed
ince
, 3-1
0 je
dinců/
konc
entra
ci
Lim
itnít
est:
kont
rola
a 1
00 m
g/L,
3-5
ryb/
konc
entra
ciO
rien
tačn
ítes
t(př
edbě
žná
zkou
ška)
:3-5
ryb/
500m
l, ně
kolik
kon
cent
rací
-cíl:
zís
kat i
nfor
mac
e o
rozs
ahu
konc
entra
cípr
o hl
avní
zkou
šku
Zák
ladn
ítes
t (hl
avní
zkou
ška)
:7-1
0 ks
ve
3 lit
rech
, 3 o
pako
vání
, 5 -
10
konc
entra
cí
Usp
ořád
ání:
stat
ické
, sem
ista
tické
–ob
sádk
a m
ax. 1
g n
a L
průt
okov
ý sy
stém
–m
ožno
vyš
šíob
sádk
a
Aku
tní t
est
Par
amet
ry s
ledo
vané
v p
růbě
hu te
stu
•pH
, tep
lota
, O2
•zm
ěny
chov
ání (
aktiv
ita, n
eklid
, trh
avé
pohy
by a
pod.
)
•m
orta
lita
po 2
4, 4
8,72
h
•N
a ko
nci t
estu
-le
talit
a –
stan
oven
í 96L
C 5
0
Po
ukonče
ní te
stu
jsou
pok
usné
org
anis
my
usm
rcen
y ox
idem
uhl
ičitý
m d
le z
ákon
a Č
NR
č. 2
46/1
992
Sb
na
ochr
anu
zvířa
t pro
ti tý
rání
.
Exp
erim
entá
lníd
esig
n pr
ote
sty
toxi
city
Pře
koná
nípr
oble
mů
stat
ické
hode
sign
u: 1
. Zvý
šení
obj
emu
Pře
koná
nípr
oble
mů
stat
ické
hode
sign
u: 2
. Sem
i-sta
tické
upořá
dání
(o
bnov
ovac
í)
Pro
long
ovan
é te
sty
toxi
city
na
rybá
ch
OE
CD
č. 2
04: P
rolo
ngov
aný
test
toxi
city
na
rybá
ch–
výsl
edke
m
je k
once
ntra
ce, k
terá
vyvo
lá50
% ú
hyn
ryb
za d
obu
půso
bení
14
dnů
(14d
LC
50) a
kon
cent
race
, kte
ráne
způs
obuj
e po
škoz
enír
yb
(NO
EC
)
Exp
ozic
e 14
dnů
(OE
CD
-14
dnů,
ISO
21
dnů)
Pod
le ji
ných
nor
em -
doba
trvá
níte
stu
2 –
4 tý
dny
běhe
m te
stu
krm
eno
sem
ista
tická
nebo
prů
točn
áex
pozi
ce
Sled
ujem
e: z
rych
lené
dých
ání,
přek
rven
ížab
er, křečo
vité
pohy
by,
ztrá
ta s
tabi
lity,
nek
lid a
zry
chle
népo
hyby
, úhy
n (ih
ned
odst
rani
t z
nádo
by),
pH,
tepl
ota,
02
Na
konc
i tes
tu: s
tano
vení
14 d
LC
50, N
OE
C, L
OE
C
Test
y ch
roni
cké
toxi
city
(dob
a trv
ání t
estu
3 měs
íce)
. -n
ejča
stěj
i pst
ruh
duho
vý n
ebo
kapr
obe
cný
-dlo
uhod
obé
účin
ky te
stov
anýc
h lá
tek
a př
ípra
vků
Sle
dova
né p
aram
etry
: cho
vání
ryb,
příj
em p
otra
vy,
délk
ové
a hm
otno
stní
přírůs
tky,
he
mat
olog
ické
a b
ioch
emic
ké u
kaza
tele
, ku
mul
ace
test
ovan
é lá
tky
v ry
bách
apo
d..
Nár
očné
pro
vede
ní
Vyš
ší v
ypov
ídac
í sch
opno
st je
ve
srov
nání
s te
sty
akut
ní to
xici
ty
Pro
látk
y, u
kte
rých
se
před
pokl
ádá
cíle
ná a
plik
ace
do v
odní
ho
pros
tředí
, neb
o ex
istu
je p
oten
ciál
ní n
ebez
pečí
, že
jimi b
ude
vodn
í pr
ostře
dí k
onta
min
ován
o.
Test
chr
onic
kéto
xici
ty n
ary
bách
Dru
hy: Poeciliareticulata
(pav
íočk
o), Brachydaniorerio
(zebřička
pruh
ovan
á), Cyprinuscarpio
(kap
robe
cný)
a Oncorhynchusmykiss
(pst
ruh
duho
vý)
Test
ován
íse
prov
ádíp
odle
směr
nic
OE
CD
.
Em
bryo
náln
í a e
mbr
yola
rvál
níte
sty
toxi
city
na
rybá
chC
íl: P
osou
dit v
liv te
stov
ané
látk
y na
raná
vývo
jová
stad
ia ry
b,
Prin
cip:
Exp
ozic
e op
lodněn
ých
jiker
v p
růtočn
ém n
ebo
sem
ista
tické
msy
stém
u
ISO
128
90:1
999
Det
erm
inat
ion
ofto
xici
ty b
y em
bryo
-larv
alst
age
offre
shw
ater
fish.
OE
CD
č. 2
10: E
mbr
yola
rvál
níte
st to
xici
ty n
a ry
bách
–vý
sled
kem
je s
tano
vení
nejn
ižší
účin
néko
ncen
trace
(LO
EC
) a k
once
ntra
ce, k
terá
nezpůs
obuj
e po
škoz
enír
yb (N
OE
C).
OE
CD
č. 2
12: E
mbr
yoná
lnít
est t
oxic
ity n
a ry
bách
–vý
sled
kem
je s
tano
vení
nejn
ižší
účin
néko
ncen
trace
(LO
EC
) a k
once
ntra
ce, k
terá
nezpůs
obuj
e po
škoz
enír
yb (N
OE
C).
Embr
yoná
lní t
est n
a jik
rách
a p
lůdk
u–
6-7
dní e
xpoz
ice,
čis
tě e
mbr
yoná
lní s
tadi
um-1
1 dr
uhů,
nejča
stěj
i dan
io, p
stru
h, k
apr,
hala
nčík
-uko
nčen
í tes
tu tě
sně
před
tím
než
doj
de k
úpl
né a
bsor
pci ž
lout
kové
ho v
áčku
v
kont
role
Embr
yola
rvál
níte
st–
test
na
raný
ch v
ývoj
ovýc
h st
adiíc
h ry
b –
31 d
ní e
xpoz
ice
-nejča
stěj
i kap
r obe
cný
a pa
k da
lšíc
h 16
dru
hů
-krm
ení Artemiasalina
-100
ks
na n
ádob
u
Sle
dova
né p
aram
etry
:líh
nutí
a př
ežív
ání e
mbr
yí, v
zhle
d váčk
ovité
ho p
lůdk
u,
rozd
íly v
cho
vání
, poh
ybliv
ost,
na k
onci
test
u ve
likos
t -dé
lka
a hm
otno
st,
anom
álie
ve
vývi
nuT,
pH
, O2,
konc
entra
ce lá
tky
v te
stu
Výs
ledk
y:LO
EC
, NO
EC
, vliv
látk
y na
líhn
ivos
ta d
obu
líhnu
tí, d
élko
hmot
nost
nírů
st, v
ýsky
t mor
folo
gick
ých
odch
ylek
Val
idita
test
u–
jako
u a
kutn
ího
+ líh
nutí
v ko
ntro
le pře
s 80
%, pře
žití
v ko
ntro
le pře
s 75
%
Test
ovl
ivně
ní rů
stu
na n
edos
pělý
ch ry
bách
OE
CD
č. 2
15 F
ish
juve
nile
grow
thte
st (2
000)
Cíl:
pos
ouze
ní úči
nků
dlou
hodo
bé e
xpoz
ice
chem
ický
mi l
átka
mi n
a rů
st
nedo
spěl
ých
ryb
Dru
hy: d
opor
učov
án n
edos
pělý
pst
ruh
duho
vý (O
ncor
hync
hus
myk
iss)
, m
ožno
i Brachydaniorerio
(dan
iopr
uhov
aný)
, Oryziaslatipes
(hal
ančí
kja
pons
ký)
Prů
točn
é ne
bo s
emis
tatic
kéus
pořá
dání
28 d
ní e
xpoz
ice
Vys
tave
ní ry
b su
blet
ální
mko
ncen
trací
mS
ledo
vané
par
amet
ry: přír
uste
kry
b v
jedn
otliv
ých
nádr
žích
T, p
H, O
2, ko
ncen
trace
látk
y v
test
u
Výs
lede
k: L
OE
C, N
OE
C,
EC
X =
kon
cent
race
, kte
rá v
yvol
á X
% z
měn
u rů
stu
Met
oda
pro
stan
oven
í bio
akum
ulac
e–
průt
okov
á zk
oušk
a na
rybá
ch•
OE
CD
č. 3
05: B
ioac
cum
ulat
ion
flow
-thro
ugh
fish
test
(OE
CD
199
6b)
Dvě
fáze
: •
Fáze
příj
mu
-28
dní (
až 6
0 dnů
k do
saže
ní ro
vnov
ážné
ho s
tavu
)•
Fáze
vyl
učov
ání
•P
očet
ryb
-pro
kaž
dý o
dběr
4 ry
by (m
in. 5
odběrů
běhe
m příj
mu,
4
odbě
ry běh
em v
yluč
ován
í)
•B
ioak
umul
ační
fakt
or B
CF
= ry
chlo
st příj
mu/
rych
lost
vyl
učov
ání =
ko
ncen
trace
test
ovan
é lá
tky
v ry
bách
/kon
cent
race
látk
y v
okol
ním
med
iu
•-v
ztaž
en k
cel
kové
hm
otno
sti a
k o
bsah
u tu
ku•
Val
idita
: mor
talit
a m
enší
než
10%
Test
y to
xici
ty n
a ry
bách
VA
LID
ITA
Výs
ledk
y se
pov
ažuj
íza
plat
né-s
práv
né, j
sou-
li sp
lněn
a ná
sled
ujíc
íkrit
eria
:
Kon
cent
race
rozp
uště
ného
kys
líku
nekl
esla
pod
60%
na
syce
ní
Kon
cent
race
test
ovan
élá
tky
nekl
esla
pod
80%
Mor
talit
a ko
ntro
lníh
o vz
orku
nepře
sáhl
a 10
%
Tepl
ota
byla
po
celo
u do
bu te
stu
v ro
zmez
ísta
nove
ném
pr
o da
ný d
ruh
ryb
Zjiš
těná
konc
entra
ce L
C 5
0 je
v s
oula
du s
e st
anda
rdy
Test
y to
xici
ty n
a ry
bách
Pro
toko
l•
Úda
je o
látc
e -v
last
nost
i•
Úda
je o
org
anis
mec
h –
druh
, km
en, v
elik
ost,
stář
í dod
avat
el, o
šetře
ní•
Test
ovac
í pos
tup
–ae
race
, pH
, T, o
bjem
, ryb
í ob
sádk
a, k
once
ntra
ce, p
očet
ryb
na k
once
ntra
ci,
poče
t opa
ková
ní
•V
yhod
noce
ní –
výsl
edky
, LC
50 a
kon
fidenčn
íin
terv
aly,
gra
fy, L
OE
C a
NO
EC
, zho
dnoc
ení
všec
h sl
edov
anýc
h pa
ram
etrů
top related