Transcript
PUSTAKA Cannel, R.J.P., 1998, How to Approach the Isolation of A Natural Product dalam Natural Products Isolation, Cannell, R.J.P. (eds), Humana Press, New Jersey.
Sarker, S. D., Latif, Z. & Gray, A. I., 2006, Natural Products Isolation, second edition, 368, Humana Press, United States of America.
Definisi Isolasi
Bahan Alam
ISOLASI
Isolasi adalah sebuah metode yang digunakan untuk
memisahkan senyawa yang bercampur dalam tumbuhan
sehingga kita dapat menghasilkan senyawa tunggal yang
murni. Tumbuhan mengandung ribuan senyawa sebagai
metabolit primer dan metabolit sekunder. Biasanya proses
isolasi senyawa dari bahan alami mengisolasi senyawa
metabolit sekunder,karena dapat memberikan manfaat bagi
kehidupan manusia.
Beberapa tahapan untuk melakukan Isolasi :
1.Ektraksi
Ekstraksi merupakan proses pemisahan, penarikan atau pengeluaran
suatu komponen cairan/campuran dari campurannya. Biasanya
menggunakan pelarut yang sesuai dengan kompnen yang diinginkan.
2. kromatografi
Kromatografi adalah teknik pemisahan campuran didasarkan atas
perbedaan distribusi dari komponen-komponen campuran tersebut diantara
dua fase, yaitu fase diam (padat atau cair) dan fase gerak (cair atau gas).
3. Isolat Baru
4. Uji Identifikasi
5. Uji Efektifitas
Faktor-faktor yang harus diperhatikan untuk isolasi
senyawa :
1. Sifat dari senyawa target :
a. kelarutan
b. sifat asam basa
c. stabilitas
d. ukuran molekul
2. Biaya
3. Jenis kromatografi yang cocok
ISOLASI
Teknik kromatografi yang digunakan dalam isolasi berbagai jenis produk alami
dapat secara luas diklasifikasikan ke dalam dua kategori: klasik, dan modern.
ISOLASI
KLASIK MODERN
• Kromatografi lapis tipis (TLC) • Kromatografi lapis tipis preparatif (HPTLC) • Kromatografi kolom terbuka (CC) • Flash kromatografi (FC).
• High performance kromatografi lapis tipis (HPTLC) • Kromatografi Multiflash (misalnya, Biotage) • Kromatografi cair vakum (VLC) • Chromatotron • Ekstraksi Solid-fase • Droplet countercurrent chromatography (DCCC) • High-performance liquid chromatography (HPLC) • Hyphenated techniques (misalnya, HPLC-PDA, LC-MS, LC-NMR, LC-MS-NMR).
Isolation of
Spirocardins A and
B From Nocardia sp
ALLPPT.com _ Free PowerPoint Templates, Diagrams and Charts
Isolasi Spirocardins A dan B Dari Nocardia sp
Garis besar protokol umum yang diuraikan oleh Nakajima et al. Untuk isolasi antibiotik diterpene, spirocardins A dan B, dari fermentasi Nocardia sp berikut ini adalah bagan alir proses isolasinya :
Sumber : http://www.idimages.org
Isolasi Spirocardins A dan B Dari Nocardia sp
Senyawa hadir dalam filtrat kaldu, yang diekstraksi dua kali dengan EtOAc
(setengah volume supernatan). fraksi EtOAc (etil asetat) yang dikumpulkan
dipekatkan dengan penguapan dalam vakum, dicuci dengan volume air yang
sama jenuh dengan natrium klorida (NaCl), dan selanjutnya dikurangi untuk
memperoleh minyak. Minyak mentah ini dilarutkan kembali dalam volume minimal
EtOAc dan dikenakan CC (column chromatography) silika gel eluasi dengan n-
heksana mengandung peningkatan jumlah aseton. Baru membawa hasil dua
fraksi yang mengandung spirocardin A dan spirocardin B, masing-masing, sebagai
komponen utama. pemurnian lebih lanjut dicapai dengan CC silika gel dan RP-
HPLC (reversed-phase HPLC). Untuk silika gel CC pada tahap ini, eluen
campuran benzena-EtOAc digunakan. Saat ini, benzena tidak lagi digunakan
sebagai pelarut kromatografi karena karsinogenisitas nya.
Isolation of
Cispentacin From
Bacillus cereus
ALLPPT.com _ Free PowerPoint Templates, Diagrams and Charts
Isolation of Cispentacin From Bacillus cereus
Metode yang paling cocok untuk penerapan kromatografi pertukaran
ion dalam isolasi bahan alami. Filtrat supernatan diaplikasikan langs
ung ke kolom pertukaran ion tanpa perlakuan khusus sebelumnya. La
ngkah terakhir dari proses isolasi yang digunakan CC pada arang akt
if untuk menghasilkan cispentacin dengan kemurnian 96%, yang sela
njutnya dimurnikan dengan rekristalisasi menggunakan aseton-etan
ol-air. ( Konishi et al ).
(Sarker , et al )
Isolasi
phytoecdysteroids
dari limnanthes
douglasii
Isolasi phytoecdysteroids dari limnanthes douglasii
Nama ilmiah : Limnanthes douglasii
Tingkatan takson : Spesies
Klasifikasi lebih tinggi : Limnanthes
Isolasi dari moschatine,
sebuah glikosida
steroid, dari Centaurea
moschata
ALLPPT.com _ Free PowerPoint Templates, Diagrams and Charts
Secara Ilmiah
Moschatine, glikosida steroid diisolasi dari biji C. moschata. Protocol isolasi termasuk berturut-turut extraksi soxhlet dari biji tanah dengan n-hexane, chcl3 dan MeOH diikuti dengan persiapan RP-HPLC (persiapan C18, isocratic eluasi dengan 55% MeOH pada air, 5ml/min). pemurnian akhir adalah pengangkatan keluar dengan RP-HPLC menggunakan semipreparative kolom C6, eluasi secara iso cratis dengan 45% MeOH dalam air, 2 mL/min, hasil yang didapatkan mochatine dengan kemurnian > 98%
Isolasi Saponin dari
Serjania
salzmanniana
ALLPPT.com _ Free PowerPoint Templates, Diagrams and Charts
Isolasi Saponin dari Serjania salzmanniana
Isolasi saponin digunakan untuk obat antijamur dan moluskisida. Pada ekstrak dari Serjania salzmanniana menggunaan uji kromatografi lapis tipis dengan fase diam silika gel CC. Uji KLT menggunaan air sebagai penampak '' Noda'' agar tak rusak. pelat KLT berubah gelap saat disemprot dengan air (basah), kecuali daerah-daerah yang terdapat sapogenins karena bersifat hidrofobik tetap berwarna putih (kering).
Isolasi saponin dari Sarjania salzmanniana
• Mengekstraksi serbuk batang serjania salzmanniana dengan metanol (uapkan sampai kering)
• Disuspensikan dengan Metanol, aquasest (1:2)
• Residu diekstraksi dengan CHCl3 sebanyak 3 kali (uapkan sampai kering)
• Residu ditotolkan pada plat silica CC
• Fase gerak menggunakan CHCl3, MeOH, H2O (7,3,1)
• Noda berwarna putih menunjukan adanya saponin.
(Natural Products Isolation Second Edition halaman 27)
(How to Approach the Isolation of a Natural Product halaman 45)
Penelitian tentang isolasi, identifikasi serta uji aktifitas senyawa alkaoid daun binahong (Anredera cordifolia (Tenore) Steenis). Serbuk daun binahong dimaserasi menggunakan pelarut n-heksana, kemudian etanol, diperoleh ekstrak n-heksana dan ekstraketanol. Dari ekstrak etanol dilakukan isolasi alkaloid total. Pemisahan alkaloid dilakukan dengan KLT preparatif dan analisis dengan spektrofotometer UV-Vis, FTIR dan LC-MS. Dari analisis yang dilakukan diduga isolat alkaloid adalah senyawa betanidin (C18H16N2O8) yang bersifat tidak sitotoksik dengan LC50 sebesar 85,583 ppm.
top related