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COMISIÓN DE ENERGÍA ATÓMICA DE CUBA TITULO CONTROL FÍSICO QUÍMICO DE CALIDAD DEL HIPURAN- 131 I AUTORES J. Morín Zorrilla E. Olivé Alvarez M. Isaac Tejera J. Cruz Arencibia
32

TITULO - inis.iaea.org

Oct 20, 2021

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Page 1: TITULO - inis.iaea.org

COMISIÓN DE ENERGÍA ATÓMICA DE CUBA

TITULO

CONTROL FÍSICO QUÍMICO DE CALIDAD DEL HIPURAN-131I

AUTORES

J. Morín Zorrilla

E. Olivé Alvarez

M. Isaac Tejera

J. Cruz Arencibia

Page 2: TITULO - inis.iaea.org

Clasificación temática del INIS

B 13.30

Preparation of radioisotopes and radioactivity labelled compounds.

DESCRIPTORES

Quality Control Hippuran Radiopharmaceuticals Diagnostic Techniques

Aprobado por el Consejo Científico Ramal de

la Esfera Nuclear el día 25 de marzo de

1988.

Page 3: TITULO - inis.iaea.org

CONTROL FÍSICO QUÍMICO DE CALIDAD DEL HIPURAN-"1!

J. Morin Zorrilla

E. Olivé Alvares

M. Isaac Tejera »

J. Cruz Arencibia

Page 4: TITULO - inis.iaea.org

RESUMEN

Se camparan v a r i o s métodos para e l c o n t r o l a n a l í t i c o d e l

H. ipurán~ l M I y se recomiendan l o s mas c o n v e n i e n t e s para

a p l i c a r en l o s h o s p i t a l e s y en l a b o r a t o r i o s de c o n t r o l

e s p e c i a l i z á r t e l a . Se eva lúa también l a c a l i d a d d e l H ipa rán - 1 ' 1 1

p r o d u c i d o por l a f i r m a ÍSO'IOP (URSS). Se comprueba que e l

p r o d u c t o reúne l o s r e q u i s i t o s que e s t a b l e c e la Farmacopea

I n t e r n a c i o n a l .

ABSTRACT

Borne physico-chemical methods Tor analytical control., of

Hippuran-1'1! are compared. The most convenient to applicate

in hospital1» and in more specialised quality control

laboratories a.rB recommended. The quality of Hippuran-1'1!

produced by ':.v.-OTOP (USSR) is also evaluated. The protluc t met

the requirements of the International Pharmacopeia.

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G.QNIEQL FISICO-QUIMICQ DE CALIDAD DEL, HiEUBAN1*1!

lfílB:QP.uccij3ii

El hiparán es la sal sódica del ácido o-yorto hipurico. Se

excreta casi totalmente y con rapidez por via renal con una

-fracción despreciable en el ciclo enterohepático, por lo que

se utiliza ampliamente para la determinación del. flujo

plasmático renal y, en menor medida, psura. la obtención de

imágenes, renales [1].

En nuestro pais se emplea actualmente en 1.1. instituciones

hospitalarias, habiéndose incrementado el valor de las

importaciones en el quinquenio 81-85 desde 22,656 a 79,000

pesos por aho» Es probable que estas cifras se incrementen

¿si'tn mAs.

El producto se importa de la firma ISÜTÜP (URSS) sin

someterlo a un estricto control de calidad, tomando como

válidas las especificaciones del fabricante.

El objeto del presente trabajo es establecer los métodos

fundamentáis-, de control físico químico de calidad del

hipurán-lSiI, especialmente aquellos que son aplicables en

hospitales con un mínimo de recursos, y evaluar las

caracteristicas del producto de esa firma con el fin de

determinar si reúne desde el punto de vista fisico-quimico,

1

Page 6: TITULO - inis.iaea.org

los r e q u i s i t o s de c a l i d a d es tab lec idos por l a farmacopea.

BEEINICMN £ tUTOTANClQ DE LOS cpMTRPLgg fe REftUSftft

PUREZA RADIOQUÍMICA

Es e l parámetro mas importante a c o n t r o l a r en e l hipurán [ 2 -

4 ] . Be d e f i n e como l a f r a c c i ó n de l a a c t i v i d a d qué está

presente en forma de o-yodo h i p u r a t o . Las impurezas

radioquímicas pueden aparecer en e l hipurán por las

s i g u i e n t e s causas C5]s

—Producto de l a reacción de marcación. Debido a esto pueden

e s t a r presentes e l yoduro como residuo de l'a solución

u t i l i z a d a para marcar y en menor medida, e l 2 , 4 , 6 - t r i y o d o

h i p u r a t o de sodio que se forma producto de ' reacciones

c o l a t e r a l e s . '.

—Por descomposición o v a r i a c i ó n de l a molécula marcada debido

a l a temperatura , l a exposición a l a luz y l a descomposición

r a d i o l i t i e a (en dependencia de l a a c t i v i d a d e s p e c i f i c a de la

s o l u c i ó n ) . Una a c t i v i d a d e s p e c i f i c a mayor a O . i mCi/mg

provocar ía un aumento de l , i I e n t r e 4-6% en 2 semanas de

almacenamiento [ 4 3 . Debido a esto pueden e s t a r presentes e l

yoduro y e l o-yodo benzoato de sodio .

'L.a cantidad de impurezas presentes en e l hipurán e s , por

"tanto, una función del t iempo. La impureza más-importante es

e l yoduro l i b r e . "

2

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El control de las impurezas radioquímicas es importante para

lograr un diagnóstico certero. Se ha demostrado [¿O que la

presencia de un 57. de yoduro en el hipurán provoca un •

decremento del 497. de los valores de aclaramiento, lo que no

permite diferenciar los casos normales de los patológicos.

PUREZA RADIuNUCLlDICA

Es el valor, expresado en porciento, de la radiactividad del

l*lI en relación con la actividad total presente C73. La

actividad del m«*Xe (isótopo hijo del l3lI) no debe

sobrepasar el 1"/. y la debida a otros radionuclides no debe

ser mayor a 0 .Oí'/. [8].

De acuerdo con l a s d i f e r e n t e s farmacopeas c o n s u l t a d a s [8 - lC r i

se acos tumbra s ó l o a comparar e l e s p e c t r o d e l h i p u r á n - m I

con e l de una s o l u c i ó n ©standard de m . í , o b t e n i d o en i g u a l e s

c o n d i c i o n e s .

A n i v e l de l a b o r a t o r i o de c o n t r o l , s i n embargo, es n e c e s a r i o

d e t e r m i n a r e s t e parámet ro pues l a p r e s e n c i a de o t r o s

r a d i o n u c l i d e s , además d e l 1 3 1 I , puede aumentar l a carga

r a d i a . c i o n a l que se s u m i n i s t r a a l p a c i e n t e , d i s m i n u i r l á

e x a c t i t u d y a l t e r a r e l r e s u l t a d o d e l d i a g n ó s t i c o .

PUREZA QUÍMICA

Se d e f i n e como e l v a l o r , expresado en p o r c i e n t o , de . la masa

d e l m a t e r i a l p resen te en forma de o-yodo h i p u r a t o de s o d i o ,

3

Page 8: TITULO - inis.iaea.org

con respecto a la masa total de la muestra [7}. Este

parámetro, por tanto, depende de la presencia de sustancias

químicas ajenas al preparado. Se controlan de modo especial

los metales tóKicos, como Be, Cr, Mn, Fe, Pb, Hg, etc. Las

impurezas químicas producen no sólo cambios en la

farmacocinética del radiofármaco sino también pueden provocar

reacciones colaterales indeseables en órganos aislados o en

sistemas de órganos. Los preservativos que se alladen a los

radiofármacos no se consideran impurezas quimicas. El

hipurán-1'1! puede contener alcohol bencilico como

preservativo C123.

Tampoco se considera impureza quimica el ácido o-yodo

hipúrico inactivo que se aftade a la solución de hipurán--mI

para lograr una determinada actividad especifica, ni el NaCl

que se aftade para lograr la isotonicíclad requerida.

En la bibliografia hay divergencia.de criterios en relación

al control de este parámetro. En la farmacopea de Estados

Unidos CÍO] y en lá británica [9] no se establece su control,

en tanto que en la farmacopea soviética [8D y en el

Compendium Medicamentorum del CAME C13] se plantea controlar"

la concentración total de o-yodo hipurato de sodio, cbn el

fin de poder calcular la actividad especifica del- preparado.

El control de la isotonicidad y de los metales pesados no se

realiza a nivel de hospital sino sólo a ni'el de . laboratorio

4

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de c o n t r o l [ 3 3 .

OTROS CONTROLES

D e b i d o a que e l h i p u r á n - " l I se a p l i c a p o r v i a e n d o v e n o s a e s

n e c e s a r i o c o n t r o l a r ©1 pH [ 8 ~ 1 0 , . l 3 ] . O t r o s p a r á m e t r o s que

d e b e n c o n t r o l a r s e s o n l a c o n c e n t r a c i ó n r a d i a c t i v a y l a

a c t i v i d a d e s p e c i f i c a t 33«

PH

Se d e t e r m i n a p o t e n c i o m é t r a c á m e n t e . Su v a l o r l i m i t e v a r i a en

l a s d i f e r e n t e s f a r m a c o p e a s . La s o v i é t i c a [ 8 3 i n d i c a que debe

s e r 5 . 6 - 9 . 0 ; l a de E s t a d o s U n i d o s [ Í O ] 7 . 0 - 8 . 5 ; l a b r i t á n i c a

[ 9 ] 6 . 0 - 8 . 5 y l a d e l CAME [ 1 3 ] 6 . 5 - 3 . 5 .

CONCENTRACIÓN RADIACTIVA

Se d e f i n e como c o n c e n t r a c i ó n r a d i a c t i v a a l a r e l a c i ó n e n t r e

l a r a d i a c t i v i d a d d e l p r e p a r a d o y e l v o l u m e n de s o l u c i ó n en e l

c u a l e s t a d i s u e l t o [ 3 3 . A p a r t i r de e s t e p a r a r n e t r p , y l a

c o n c e n t r a c i ó n de o - y o d o ' h i p u r a t c el© s o d i o (p t i res-a q u í m i c a ) s e

c a l c u l a l a a c t i v i d a d e s p e c i f i c a d e l p r e p a r a d o .

S i l a a c t i v i d a d e s p e c i f i c a es menor de 0 . 1 mCi /mg e s p o c o

p r o b a b l e que o c u r r a n r e a c c i o n e s de r a d i ó l i s i s p o r l o q u e e l

p r o d u c t o s e m a n t e n d r á e s t a b l e d u r a n t e su v i d a ü t i l C4 ] . : En

c a s o c o n t r a r i o o c u r r i r á n r e a c c i o n e s de r a d i ó l i s i s q u e

d i s m i n u y e n l a p u r e z a r a d i o q u í m i c a d e l c o m p u e s t o c o n l o s

i n c o n v e n i e n t e s que se han s e ñ a l a d o a l r e s p e c t o . En a l g u n a s

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farmacopeas C9,133 se se f ta la como l i m i t e s u p e r i o r 0 . 2 mCi/mg,

en t a n t o que en l a U 8 P. ÉlOJ no se hace, n ingún sé r ta lamien to

a l r e s p e c t o . Las ámpülás de h i p ü r á n - l i í i qué se impor tan en

n u e s t r o p a i s t i e n e n una a c t i v i d a d e s p e c i f i c a menor a 0 . 1

mCi/mg. En g e n e r a l , se observa una t e n d e n c i a en l a s f i r m a s

p r o d u c t o r a s de no f a b r i c a r p r o d u c t o s con a l t a s a c t i v i d a d e s

e s p e c i f i c a s .

HftTERIALES Y. MÉTODOS

En e l t r a n s c u r s o d e l t r a b a j o se a n a l i z a r o n 8 ámpulas de

h ipuran- 1 5 »I de l a f i r m a ISDTOP (URSS).

3e t r a b a j ó ademas con á c i d o o-yodo h i p u r i c o de • la f i r m a

CHEMAPOL (R.S.Ch) y á c i d o o-yodo h i p u r i c o s i n t e t i z a d o en

nuestros laboratorios, cuya pureza fue comparada con muestras

del producto -.'de las firmas CHÉtiAPOL y MERCK.

Las ámpülas de hipurán se sometieron a los siguientes

controles s

-pureza radioquímica.

-pureza quimica.

-pH

-concent rac ión r a d i a c t i v a .

- a c t i v i d a d e s p e c i f i c a .

Nq se c o n t r o l ó l a pureza r a d i o n u c l i d i c a n i l a i so to r i i c i dad

por no.d isponer del equipamiento adecuado.

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PUREZA RADIOQUÍMICA

Para la determinación de la pureza radioquímica se ..coplearon

los métodos cromatográficos (cromatografia de papel y de capa

delgada) y la electroforesis de papel, que son los métodos

más utilizados. Se partió de los sistemas más empleados en la

bibliografia (tabla I), haciendo hincapié en los sistemas

butanol:ácido a %tico:agua (2:2si) y bencenoracido

acéticosagua (2:2:i) que permiten la separación del i6n

yoduro, el ion o-yodo hipurato (oyh) y el ion o-yodo benzoato

(oyb).

En todos los casos, antes de aplicar las muestras se aplicó

0.05 mi de una solución 0.2"/. en yoduro de potasio, 1.0% en

bicarbonato de sodio y 1.0"/. en tiosulfato de sodio [LOT-y ' se

dejó secar al aire,

P&rf\ el desarrollo de los cromatoyr&mas se aplicaron como

sustancias patrones yoduro de potasio, ácido o-yodo hipurico

y ácido o-yodo benzoico los que se corrieron conjuntamente ,

con el hipurán-15lI.

Las pruebas preliminares para establecer las condiciones,'

óptimas* para el desarrollo del cromatograma se desarrollaron-,

siempre con sustancias estables. '' 'Vr

Para la cromatografía sobre papel se utilizaron tiras "de "

papel de 28 >; 10 cm. El tiempo de desarrollo de \/lqs-

cromatogramas fue de 2 horas. En la tabla II se muestran''la'si

Page 12: TITULO - inis.iaea.org

T A B L A I

Sistesas de solventes tas usados en la crotatograüa del hipuran •¡

¡Referencia SOPORTE SOLVENTE Rf

aoyh

0.9

0.8

! Papel H-l I .

I Papel H-3

¡Papel H-l

n-butanol¡acido acético (4:1)

n-butanol¡acido aceticosagua (12:3:5)

I

0.3

0.3

aoyb

[14]

19]

n-butanol¡acido aceticosagua (4:1:1)

bencenos acido acetico:agua (2:2:1) 0-0.05 0.5

" ¡ [15] i -.z,-.-.,,-.-.-.„-.-.^-.-.-.z-.-.\ 0.B5-0.951 [3,16] ¡

Celulosa F 254

Silicagel 8

bencenoiacido acetico:agua (2:2:1)

acido clorhídrico IN

0 0.2-0.4

0.98-1 0.25

i [9]

[17]

I ¿yoduro aoyh=atido orto-yodo'hipOrico aoyb=ácido orto yodo benzoico

Page 13: TITULO - inis.iaea.org

S6'0=qto? S0'0-0=1 £fr'0=4Aoe m

19 ejia U03 ajJ03 as A jopadns asej t\ nqi as

uti 0£ ?1!^ as ?sase¿ sop UBUJOJ as a^uaAjos aiss iiojj (jijsz) eitfierosnase oppetouasuaq ¡

•api ¡(jij'Offrj en6e¡t>3i}a3e oppeijouei.nq-u ¡

————————————————————————————————— (

ajuaAios iap a?uaj^ ja uo3 uajjos sepuB}sns st\\ (i!i:>) enoesosnase opi3e:{ou6)nq-u ¡ i-m • i

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tmmmmmmtmmmmmmmmmmmmmmmmmmtmmtmmmmmmmm ! !

ajuaAjos tap a^a-T. . I • i i i

{a uo3 ajjos o}saj |a A optut {a ua spanb as opoA ia¡ (fi'OM) 03naae oppesauasuaq ¡ £-NJ * i i

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¡a uo3 8JJ03 o;saj \s 'oniui \a ua epanb as QjnpoA [a¡ (S'Q'T) 03?}a3e oppe:oua3uaq ¡ ! I I 1

9}uaAit)5 tap a;uaj( \a uo3 uajJ03 sepue^sns se{¡ (JÍJÍJ) en5e:o3H33B oppe¡ioue}nq-u ¡ J-NJ • i i i

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\a U03 a;jo3 o^saj \a A optui {a ua epanb as ojnpoA \a> (S'0!I) Q3i)33e oppetouasuaq ¡

.... ...... —— .... — — . .......... . ... i

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nap; i (jtj¡<?) en6e:oDj}aje oppe¡ioue}nq-u ¡ ........... — ... ....... ... ————————————. . ... .. . ... ..... t

map; !(T<£'0'fr) enüeiosnase oppe¡ioue}nq-u ¡

•ajuaAios jap ¡ i

3}uaj} ja uo3 uajjoi ojnpoA p souai sepuqsns s?i sspoj¡ (lU't) 5n6e¡03n»e npps:ioue}nq-u ¡ I-JJJ

soatfiins3a ; 3XH3AIQS : smodos .—— _——.——— .....i.———————..._..——„———'-.......

u?jndiq iap pdsd ajqos E|}SJ6O;?HIOJ3 t\ ua sepeziUT1 sa[tAqii A sepeuope^sa sasej

II « 1 8 tf 1

Page 14: TITULO - inis.iaea.org

T A B L A I I (continuación)

Fases estacionarias y «oviles utilizadas en la croaatografia sobre papel del hipurán

¡SOPORTE SOLVENTE OBSERVACIONES ¡ 1 1 . ¡ I FN-1A i n-butanoltacido acet.ico:agua (4¡0.3!i)ilas sustancias aenos el yoduro corren con el frente del

1 ¡solvente

n-butanol¡acido acetico:agua ¡2:2:1) isolo se identifica la «ancha del yoduro

benceno¡acido acético (1:0.5) i el yoduro se queda en el inicio, el resto corre con el i

¡frente del solvente

Page 15: TITULO - inis.iaea.org

fases estacionarias y móviles que fueron ensayadas en el

•"cranscursa del trabajo.

Para la cromatografía sobre capa delgada se utilizaron placas

de silieaqel , placas de silufol, y placas de zeolita.

Las placas dB silicagel se prepararon a partir de

silicagel-~G(¿»0) MERCK. Para cada placa se tomaron 2 g de

silicagel y se agitaron con 15 mi de agua, durante 20

minutos. La suspensión resultante se vertió sobre una placa

de 9 x 12 cm. Se dejó secar la placa al aire durante 15-16

horas.

Al igual que en la cromatografía de papel se realizó un

estudio previo de los sistemas de solventes más adecuados

para las distintas fases estacionarias. En la tabla III se

resumen los resultados del mismo.

Los trabajos de electroforesis en papel se .realiz-aron con

papel FN-2. Se emp.leó solución buffer de fosfato 0.1 li (pH =

7.1).

Para la determinación de los Rf se realizó la detección de

las manchas en los cronutogramas y electroforetogramas por

medio de -:

-revelado en cámara de yodo.

-luz ultravioleta.

-radioBKpíórádor (BÉRTHOLD serie LB 2723(RFA))

8

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T A B L A I I I

Fases estacionarias y lóviles utilizadas en la cromatografía sobre capa delgada 'del hipuran-I-131

•I-I SOPORTE SOLVENTE RESULTADOS

•I-Silicagel G(60)MERCK

dorofonosacetato de etilo:acido acético (1:2:0.5)1 Rf aoyh=0.6B Rf aoyb=0.92 Rf I =0

dorofono:acetato de etilo¡acido acético (1:2:0.3)! Rf aoyh=0.65 Rf aoyb-0.90 Rf 1 =0.09

c)oroforao:acetato de etilo:acido acético (1:2:0.2)! Rf aoyh=0.54 Rf aoyb=0.82 Rf 1 =0.04

! buena reproducibilidad i i

! tieapo de corrida 15 nin i i

immtmmtmmmtmtmtmmtmttmmmtmmtmmtmmmtmtumtmmmmmit Silufol n-butanol¡acido acetico:agua (4:1:1) í solo se observa la lancha del yoduro en

i i

! el punto de aplicación !

dorofonosacetato de etilo (1:2) ! Rf aoyh=0.45 Rf aoyb=0.8¿> Rf I =0 !

titmtttmtmtmttmtmmmmttmmmtmmtmmtmttttmmtmmmttmmmmtmt: Zeolita (

dorofonosacetato de etilo (1:2) I no hay corriaiento

dorofonosacetato de etilo:acido acético (1:2:0.2)! Rf aoyh=0.56 Rf aoyb=0.95 Rf I =0.05! i i

Page 17: TITULO - inis.iaea.org

-autorradiografia.

-corte de tiras y medición de estas en un

radiómetro.

Para la autorradiografia se utilizaron placas ORWG HS-lí de i

24 « 30 cm (RDA) Los tiempos de exposición fueron entre lé> y

24 horas. Como revelador se utilizó una solución con la

siguiente composición: 59 g de carbonato de sodio, 90 a. de

sulfito de sodio, 5 g de bromuro de potasio, 2 g de metol y 8

g de hidroquinona en 1 litro de agua.

Como fijador se empleó la solución siguiente: 250 g de

hiposulfito de sodio, 55 g de sulfito de sodio y de 3 .a 4

gotas de ácido sulfúrico en 1 litro de agua.

El proceso de revelado y fijación se realizó a 20°C. Las

placas se midieron posteriormente en un microdensitómetro

modelo MD-100 (RDA).

El corte en tiras con medición posterior en un radiómetro se

utilizó para las determinaciones cuantitativas. Se empleó un

radiómetro monocanal RM-3 (CUBA) previamente calibrado para

la energía de 364 Kev del " lI. Los resultados de estos

experimentos se elaboraron con el programa "PÚftÉZA"

confeccionado en lenguaje BASIC para la minicomputadora M-60.

PUREZA QUÍMICA

Los análisis de pureza quimica se realizaron con el producto

estable sintetizado en nuestros laboratorios y con - el

9

Page 18: TITULO - inis.iaea.org

compuesto marcado. Se utilizaron los siguientes métodos para

determinar la concentración de ácido o-yodo hipúrico en las

muestrass

-valoración potenciométrica.

-determinación polarográfica. '

-determinación espectrofotométrica.

La valoración potenciométrica se realizó con solución de NaOH

0.001 M en régimen diferencial utilizando un electrodo de

vidrio indicador y uno de calomel como referencia.

Se empleó un titulador automático Radiometer modelo RTS/822

con graficador incorporado.

La determinación polarográfica se realizó por reducción del

potencial de -i.3 voltios, en solución 0.2 Ñ de NaOH o KOH en

presencia de gelatina [13].

La determinación espectrofotométrica se realizó a 23S nm

según recomienda la farmacopea soviética [83.

pH

El pH se determinó potenciométricamente.^n-, un medidor de •«i -

acidez de la firma METHROM (Suiza) empleando electrodo de

vidrio combinado. -

CONCENTRACIÓN RADIACTIVA

La concentración radiactiva se determinó en un curimetro

ALOKA (JAPÓN) con calibración interna para el l3lI'. «

10

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ACTIVIDAD ESPECIFICA

Se calculó a partir de las mediciones de la concentración

radiactiva y la concentración de o-yodo hipurato de sodio

presente-

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

-Pureza radioquímica.

Después de ensayados todos los sistemas que se muestran en la

tabla II se escogió para los controles rutinarios por

cromatograf ia sobre papel el papel FN-4 como fase

estacionaria y como fase móvil el benceno:ácido acéticosagua

(2s2íl) por ser esta la combinación más efectiva. Este

resultado coincide con los reportados en [3] donde se expresa

qtif? este sistema es el mejor para la cromatcgrafia del

hipurÁri-1'1.!. Los valores que se obtienen d& los R, coinciden

con los de [33 para el mismo sistema. • • •

Se detectó que el solvente debe prepararse momentos antes dé

utilizarlo y emplearlo sólo para el desarrollo de un

cromatagrama, de lo contrario no se obtienen valores

reproducibles.

Se observó que el revelado con luz ultravioleta, y con.-'.¡el

radioexplorador no son efectivos para la cromatografía

cuantitativa pues su sensibilidad es baja. El corté ' del

cromatograma en tiras y la autorradiografia, en cambio,

11

Page 20: TITULO - inis.iaea.org

result •'•'•.ron ser métodos sensibles. Por su rapidez y comodidad

•se empleó el corte en tiras con posterior medición en el

radiómetro.

En la tabla IV se muestra, a modo de ejemplo, el control

periódico realizado a un ampul a durante 20 dias, con el fin

de conocer si la fecha de vencimiento que indica el

fabricante es o no adecuada.

Las figuras 1,2 y 3 correspondientes a los experimentos .1,6 y

11 respectivamente, muestran gráficamente los resultados.

Como se ve, a medida que transcurre el tiempo disminuye el

por ciento de hipurán en la muestra aumentando el por ciento

de yoduro. El por ciento de ácido a-yodo benzoico se mantiene

prácticamente constante. Los datos del pasaporte de esta

árnpula se dieron para-el 28-3-86 con fecha de vencimiento 10-

4-86. Como se aprecia el por ciento de yodura para la fecha

de vencimiento es inferior al 2 "/. que sefiala la farmacopea, e

incluso casi un mes después de la fecha del pasaporte se

mantiene por debajo de este limite.

Estudios realizados por otros autores [4] demuestran que la

cantidad de yoduro que se produce en las muestras de

hipurán-15lI depende de la actividad específica de estás. Se

señala en dicho trabajo que actividades especificas del orden

de 0.1 mCi/mq o menores no influyen prácticamente en la

estabilidad de las soluciones. La actividad especifica de las v . ' »

12

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T A B L A I V

Control periódico de la pureza radioquiíica de un áipula de hipuran-I-131

Expediento No.

1

2

3

4

5

6

7

8

9 •

10

v i l • ' ' ' . •

fecha

3-4-86

4-4-86

7-4-86

10-4-86

11-4-86

14-4-86

16-4-86

17-4-86

18-4-86

22-4-86

23-4-86

X yoduro-1-131

0.7

0.7

0.5

0.4

0.8

0.9

0.8

1.2

1.0

1.0

1.1

X hipurán-I-131

98.7

96.0

98.5

98.1

97.8

97.8

?7.2

97.2

97.7

97.4

97.2;

% ac. o-yodo ben2óico-I-131

0.2

0.2

0.2

0.4 •

0.3

0.4

0.3

0.4

0,3

0.2

0.3

Page 22: TITULO - inis.iaea.org

eo

60

40

« < * Actividad

90

80

O 8

cm

— JOMdtd

14

días dopnparax

60

40

so

so

10

a dt .«ctivkSjd

0 2

17 diae do praperado

t . . .

a cm' AettvMft*

10 14

40

90

20

«da Actividad

.

A

A i — _ j _ _

O 8

cm — Acflvldftl

\4

20 dW do preparado

: *"_. F i g . 1 , 2 , 3 .

Variación de "la pureza radioquímica de un ámpula de Hipuráñ—131I durante el periodo de vida útil

Page 23: TITULO - inis.iaea.org

ámpulas ensayadas no sobrepasó este Unvote. El ámpula que se

tomó para el experimento que se muestra en la tabla IV tenia

una actividad especifica de 0.06 mCi/mg, lo que explica el

bajo aontenido de yoduro.

Otro factor importante en la estabilidad del hipurán-mI es

la presencia de alcohol bencílico, el cuál tiene úh efecto

protector contra la radiólisis. Cifka J. [16] muestra que el

por ciento de yoduro inorgánico en la solución de hipurán-

titl depende de la concentración de alcohol bencílico. Cuando

la concentración de alcohol bencílico alcanaa el 1 7., la

concentración de yoduro se mantiene por debajo del 2 "/.. En

las ámpulas estudiadas la concentración de alcohol bencílico

osciló entre 0.94 y 0.97 "/..

Por tanto, la acción conjunta de ambos factores (actividad

especifica menor de 0.1 mCi/mg y concentración de* alcohol

bencílico de aproximadamente 1 7.) protegen al hipurán de los

efectos radioliticos, manteniéndose la concentración de

yoduro por debajo del 2 7. aún después de la fecha de

vencimiento del producto.

El control de pureza radioquímica" por cromatografía sobre

capa delgada puede efectuarse indistintamente con soportes de

silicagel, seolita y silufol. En los dos primeros casos él

solvente que brindó mejores resultados fue cloroformosacetato

13 •

Page 24: TITULO - inis.iaea.org

de etilorácido acético (l:2s0.2) y en el caso de las placas

de silufol los mejores resultados se obtuvieron con el

sistema cloroformo:acetato de etilo (1:2).

La detección de las manchas se realizó por radioexplorador y

por autoradiografia.

La figura 4a es la imagen de una placa de silicagel obtenida

en el radioexplorador y la figura 4b nos muestra la

autorradiografia realizada a la misma placa. Como se observa*,

en la figura 4a sólo se detecta la mancha correspondiente al

hipurán en tanto que la autorradiografia detecta las tres

manchas, correspondientes al yoduro, el hipurán y él ácido o-

yodo benzoico, lo que demuestra la alta sensibilidad del

método autorradiografico en comparación con el

rad.i. oe;-: plorado*..

La figura 5 es la representación gráfica de una placa

revelada por autorradiografía y medida con el

microdensitómetro.

Los resultados de la electroforesis se corresponden con los

reportados en la farmacopea soviética [S3. La figura 6 es la

representación gráfica de un electoforetograma cortado en

tiras y medido posteriormente en el radiómetro. Como se

observa, se definen sólo los picos del hipurán-l3tI y del

yoduro-131. El método no permite determinar la presencia del

o-yodo benzoato, pero sirve como análsis de rutina para

14

Page 25: TITULO - inis.iaea.org

Fig. 4 Imágenes de un cromatogr«ma sobre cap? delgada

empleando como soporte sUicage] y como solventé. „',

Cloroformo:Acetato de EtilosAcido Acético (1:2:0.2)/*^

a.- Revelada con el radioexploi^ador , .* /:

b.- Revelada con autorradiocjraf la /?*->.

Page 26: TITULO - inis.iaea.org

300

260

200

180

Figura 5

DtftMsJ (IJHdata mlttwa]

100

«0

_u 0 20 40 SO 60 100 120

mm

— Orafcítd

Oetanrtnaoién de pureza raaoquúitfoe por denestcmatrie

Figura 8

60

40

30

ft da Actividad

80

«

• i • i .

o 2 4 e e io ti H

cm

«dtAOtMCM

DetsffrtnauontO* purea radoqufaoa por ataulfofuaats os papal

Page 27: TITULO - inis.iaea.org

lograr una rápida información sobre la impureza principal.

Como método de rutina, a nivel de hospital,recomendamos la

cromatografía de papel utilizando papel FN-4 como fase

estacionaria y como fase móvil el sistema benceno:ácido

acético:agua (2s2:l)i Después de desarrollado el cromatograma

se corta en tiras y se mide en un radiómetro. Como segunda

opción recomendamos la electroforesis en papel.

La cromatografía sobre capa delgada con medición

densitométrica posterior la recomendamos para el nivel de

laboratorio de control por su alta sensibilidad.

-Pureza química

Los ensayos de pureza química se orientaron a la

determinación de la concentración de o-yodo hipúrato dé sodio

en las muestras.

Los ensayos de valoración potenciométrica y de polarografla

arrojaron los valores seftalados en los pasaporta de las

ámpulas. Los análisis realizados con el .producto estable

mostraron que el ácido o-yodo hipurico tiene comportamiento

de estandard primario.

Las mediciones espectrofotómétrlcas se realizaron a 235 ' nm

partiendo del método establecido en lá farmacopea soviética

,[SD. La curva de calibración se obtuvo partiendo de una

solución de o-yodo hipúrato de sodio dé ly -ng-.-'r-rV̂ realizando

15

Page 28: TITULO - inis.iaea.org

1 (•-'•i d i ! i <<: t ones necesarias para lograr valores adecuados de 3 a

densidad óptica. La ecuación de calibración utilizada es:

D. optic, -','.0425 [caneen tr,¡ci6n3-0.008

:'?' ín'..i.ii': ..!. • 1 .i. ¿ai la l6r...i.i.la de calculo que se? * f-.-rmnienda

en le farmacopea soviética [8], ñero no se obtuvieron

r e B u 1t a a a s r e p r o d u c i b 1 e r,.

fcii todas las Ampielas analizadas la concentración de o-yorío

h.ipurato quo se determine coincidió con los datos consignadas

e:-n el pasaporte.

N n fue p r i s i b 1 e r e a 1 i •/. a i d e term i. n a c i o n es da metales pesad o s a'.!

producto radiac"' i «...• por no disponer de su.ficientp'-

ranticlades, Mo obstante?, a nivel de hospital esta prueba nc

se realiza ya que rse acostumbra a hacerla s61o a nivel de

laboratorio de¡ corilrol, y especialmente por los productorro'--.

en el ácido o—yodt ú.púrico de partida.

CONCLUSIONES

1. Se pusieron a punto los métodos fundamentales de control

tisiro quimir .-• del hipuran-mI q " establecen las diferentes

farm* opeas, •, que permite recómridar los métodos adecuados

para el futt .o registro nacional d<-.- radiofármacos.

2. Se comprobó que el hipe ran-1311 ,.e la firma IS0T0V lUP-SS)

tiene una alta calidad y que los datos . que ronsiqnan sus

pasaportes son confiables.

Page 29: TITULO - inis.iaea.org

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18 •

Page 31: TITULO - inis.iaea.org

Agradecimiento

Agradecemos al Departamento de Medicina Nuclear del Instituto

de Nefrologia la donación de las émpulas de Hipurán-l,lI que

se emplearon en el presente trabajo.

Page 32: TITULO - inis.iaea.org

Impreso en el Centro de Información de la

Energía Nuclear.-

La Habana, Cuba, diciembre 1989.