Teoria Curso Practico Hplc

7/25/2019 Teoria Curso Practico Hplc

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1PROHIBIDA LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL DEL DOCUMENTO SIN EL PERMISODEL AUTOR.

Antecedentes: anlisis capilar de colorantesEn 1861 se publ!" el #$%#%&' (%n)lss !%pl%$*

El descubrimiento: Tswett y pigmentos vegetalesTS+ETT 1,-. Sep%$%!"n &e p/0en#'s e/e#%les 0e&%n#e un%!'lu0n% &e !%$b'n%#' !)l!!'.

23un 4 Le&e$e$ 1,-. Sep%$%!"n &e p/0en#'s 0e&%n#e %l50n% 4

!%$b'n%#'. Des%$$'ll' &e l% C$'0%#'/$%7% en !%p% n% !'0' #9!n!%%n%l7#!%.Cromatografa de reparto

M%$#n 4 S4n/e :1,;1< %pl!%$'n #9!n!%s !$'0%#'/$)!%s p%$%es#u&%$ l% !'0p's!"n &e %% en l%n%. E0ple%$'n un 09#'&' p'$el !u%l un l7=u&' :%/u%< e$% $0e0en#e enl%>%&' % un s"l&'/$%nul%&' :/el &e s7l!e< 4 se e0p%=ue#%b% en un #ub' &e &$'.

Un se/un&' l7=u&' n0s!ble :!l'$''$0'< e$% p%s%&' % #$%9s &el% !'lu0n%.Cromatografa en papel y capa na

M%$#n 4 sus !'l%b'$%&'$es e0pe>%$'n % #$%b%?%$ en un #p' &e!$'0%#'/$%7% &'n&e l% %se es#%!'n%$% e$% p%pel &e l#$'. Elp$'!e&0en#' &' $esul#%&'s $ep$'&u!bles % !'0en>'s &e 1,;-.P's#e$'$0en#e I>0%4l' 4 S3$%4ne$ &s#$bu4e$'n el 0%#e$%l &es'p'$#e s'b$e un% pl%!% &e &$'. @n%l0en#e es#e ss#e0% se!'n'!" !'0' C$'0%#'/$%7% en C%p% @n% :TLC< :E/'n S#%3lAUTOR @ERNANDO TAPIA PANIAUA


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Cromatografa de gasesM%$#b 4 %0es publ!%$'n en 1,F l% elu!"n &e /%ses &e)!&'s '$/)n!'s 4 %0n%s. Pe=ueG%s p%$#7!ul%s &el 0%#e$%l

&e s'p'$#e ue$'n $e!ube$#%s !'n un l7=u&' n' 'l)#l 4e0p%=ue#%&%s en #ub' &e &$' !%len#e. L%s 0e>!l%s sen4e!#%b%n % l% en#$%&% 4 e$%n 0puls%&%s p'$ /%s!'0p$0&'.'l%4 :1,< !'n!lu4" =ue !'lu0n%s 0u4 l%$/%s :,-18- 0

Cromatografa lquida de alta resolucin&&n/s p$e&?' en 1,; l% %pl!%!"n &e l's 0s0'sp$n!p's &e l% C % l% !$'0%#'/$%7% l7=u&% :#%0%G's 0u4pe=ueG's &e %se es#%!'n%$% &s#$bu&'s en un% n% !%p%en l%s p%$e&es &e l% !'lu0n% en p%$e&es &e p'!' &)0e#$'


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Cromatografa de intercambio inicoL's n#e$!%0b%&'$es s'n sus#%n!%s n%#u$%les ' %$#!%les!'n 'nes p's#'s ' ne/%#'s %n!l%&'s % l% es#$u!#u$% &eln#e$!%0b%&'$ l' =ue pe$0#e $e#ene$ !'n 0%4'$ ' 0en'$ue$>% l's 'nes &e s/n' 'pues#' p$esen#es en l% 0ues#$%.Pue&e se$ %pl!%&% % l% sep%$%!"n &e 'nes '$/)n!'s p'$#%n#' #ene un% p%$#!ul%$ 0p'$#%n!% en l% sep%$%!"n &e%0n')!&'s 4 )!&'s nu!le7!'s.

Cromatografa de eclusinEn 1,, @l'&n 4 P'$%#3 &es%$$'ll%$'n p'l70e$'s &e !elul's%=ue %!#u%b%n !'0' #%0!es 0'le!ul%$es p%$% sus#%n!%s&spe$s%s en l7=u&'s. L%s 0'l9!ul%s /$%n&es n' en#$%b%n enl's p'$'s &el #%0>. Sn e0b%$/' l%s 0'l9!ul%s pe=ueG%sen n#e$$u0p&%s su 0/$%!"n

El #9$0n' /en9$!' p%$% es#%s sep%$%!'nes es el &eC$'0%#'/$%7% &e EK!lus"n M'le!ul%$

PROHIBIDA LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL DEL DOCUMENTO SIN EL PERMISODEL AUTOR.

AUTOR @ERNANDO TAPIA PANIAUA


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!A"E E"TAC#$%AA: 0%#e$%l n0"l 0pl!%&' en elp$'!es' C$'0%#'/$)!'. L%s n#e$%!!'nes =u70!%s !$u!%les#enen lu/%$ en#$e el %n%l#' 4 l% %se es#%!'n%$%. Pue&e se$un s"l&' un l7=u&' enl%>%n&' % un s"l&' :!$'0%#'/$%7% &e

$ep%$#'< ' $%&!%les =u70!'s enl%>%&'s % un s"l&':!$'0%#'/$%7% &e %&s'$!"n ' n#e$!%0b' "n!'%&%.




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12u3 pasa dentro de lacolumna41 L% !$'0%#'/$%7% se b%s% en

ue$>%s !'0pe##%s =ue &'s%ses un% ?% 4 '#$% 0"les#%ble!en p'$ l%s 0'l9!ul%s &els'lu#'.F L% #en&en!% % s'lubl>%$ l%s0'l9!ul%s &e s'lu#' p'$ p%$#e &els'len#e % l% l%$/% 3%b$) &e

0pe$%$ s'b$e l%s ue$>%s &e$e#en!"n &el $ellen' &e l%!'lu0n% !'ns/uen&' %n#es '&espu9s %$$%s#$%$ ese s'lu#'. L%s ue$>%s &e $e#en!"n p'$p%$#e &e l% %se es#%!'n%$% 4 l%s&e &s'lu!"n &epen&en &e l%s

es#$u!#u$% 0'le!ul%$




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L% !%us% &e l% &e$en#e 0'l&%& &el's %n%l#'s en el ss#e0% es l%

&e$en!% % l% #en&en!% % se$ $e#en&'en l% . es#%!'n%$% en $el%!"n %pe$0%ne!e$ en l% . 0"l

Un% e> sep%$%&'s l's %n%l#'s p%s%np'$ un &e#e!#'$ !u4% seG%l es#$%s'$0%&% en un% p$esen#%!"n &e l%seG%l. C&$(AT$/&A(A

El !$'0%#'/$%0% !'n#ene l%n'$0%!"n $el%#% l% 0ues#$% ' &el

un!'n%0en#' &el ss#e0%.

C%&% !'0pues#' %b%n&'n% l%!'lu0n% en '$0% &e p!'s09#$!'.

C%&% p!' %p%$e!e % un#e0p' &e $e#en!"n!%$%!#e$7s#!'

Cu%n#' 0%4'$ se% l%&e$en!% &e #e0p's en#$e&'s p!'s 0%s )!l es susep%$%!"n

C%&% p!' es !%$%!#e$7s#!' ,PROHIBIDA LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL DEL DOCUMENTO SIN EL PERMISODEL AUTOR.



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Se/5n l%s !%$%!#e$7s#!%s &elle!3' !$'0%#'/$)!'

%be$#' en p%pel en!%p% n%

!e$$%&' en !'lu0n%Se/5n l% p$es"n &el elu4en#e

B%?% p$es"nAl#% p$es"n

Se/5n el es#%&' 7s!' &e l% .

0'l !$'0%#'/$%7% &e /%ses!$'0%#'/$%7% &e l7=u&'s

Se/5n el es#%&' 7s!' &el le!3'l7=u&'l7=u&'

s"l&'l7=u&'

Se/5n l% !'0p's!"n &elelu4en#e

Is'!$)#!%De /$%&en#e

Se/5n l% p'l%$&%& &e l% %sees#%!'n%$%@%se n'$0%l.@%se ne$s%

Se/5n el 0e!%ns0' &e$e#en!"n

De $ep%$#'De l#$%!"n en /el ' &eeK!lus"n 0'le!ul%$De %&s'$!"nDe n#e$!%0b' "n!'

De %n&%& 1-PROHIBIDA LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL DEL DOCUMENTO SIN EL PERMISODEL AUTOR.



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Interaccionesanalito-faseestacionaria

Fasemvil

Disposicin faseestacionaria

Composicinfase mvil

Polaridad deeluyentes

Temperaturafase mvil

Adsorcin Lquida Columna Isocrtica Fase normal Isoterma

Particin/

Reparto

Gaseosa Placa Gradiente Fase inversa Gradiente

Exclusinmolecular

Fluidossupercrti

cos

Papel

Intercamio

inico

A!inidad

"uiral

RETENCIN FUNDAMENTO.

Adsorcin Inter. No Covalentes

Particin Polaridad

Cambio inico Cara

E!cl"sin Tama#o molec"lar

A$inidad Actividad biolica

%"iral Actividad &tica




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L% !$'0%#'/$%7% se !l%s!%

@%se 0"l %s C.%ses

@%se 0"l L=u&' C. L7=u&%

A su e> l% C$'0%#'/$%7% L7=u&%

S'b$e un s'p'$#e s"l&' C. C%p% @n%

E0p%=ue#%&% en un% !'lu0n% C.C'lu0n%

1FPROHIBIDA LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL DEL DOCUMENTO SIN EL PERMISODEL AUTOR.



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C$'0%#'/$%7% en p%pel 4 en!%p% n% C$'0%#'/$%7% &e $ep%$#' C'e!en#es &e $ep%$#' (%* 4 &e$e#en!"n (Rf* !%$%!#e$7s#!'s p%$%!%&% s'lu#' en un%s !'n&!'nes&%&%s De#e!!"n p$e!s% $e%!!'nesespe!7!%s &e #n!"n:nn3&$n% en %0n')!&'s e#! s"l&%ne$#e =ue #ene /$up's !%$/%&'s ne/%#% ' p's#%0en#e 4

un&'s !'%len#e0en#e. L's %n%l#'s !'n !%$/% &e s/n' 'pues#'%l &e l% 0%#$> =ue&%$)n $e#en&'s en ell% sep%$)n&'se &el $es#'&e l's %n%l#'s !'n !%$/% &el 0s0' s/n' =ue l% 0%#$> ' neu#$'sEclusinmolecular l% %se es#%!'n%$% !'n#ene p%$#7!ul%sp'$'s%s !'n #%0%G' &e p'$' !'0p%$%ble %l #%0%G' &e l%s0'l9!ul%s =ue se =ue$en sep%$%$. L% sep%$%!"n se !'ns/uep'$=ue l's %n%l#'s 3%n &e $e!'$$e$ !%0n's &e$en#es :0)s '

0en's l%$/'s &epen&en&' &el PM< p%$% %l!%n>%$ el n%l &e l%!'lu0n%Anidad L%s n#e$%!!'nes =ue se &%n en#$e %se es#%!'n%$% 4%n%l#'s s'n espe!7!%s en#$e p%$es &e 0'l9!ul%s :e?. A/A! n' suele se$ p'sble 'b#ene$ %seses#%!'n%$%s !'0e$!%les2uiral L%s $e#en!'nes &el %n%l#' en l% %se es#%!'n%$% es#)nsu?e#%s % l% '$0% s'09$!% &el %n%l#'. 18PROHIBIDA LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL DEL DOCUMENTO SIN EL PERMISO

DEL AUTOR.



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Clasicacin general (3todo especco !ase estacionaria Tipo de equilibrio

C$'0%#'/$%7% &el7=u&'s :LC%&' =u70!%0en#e % l%sp%$#7!ul%s &el $ellen'.Se/5n l% $el%!"n &e p'l%$&%& &e l%s%ses #ene0's

!ase %ormal!ase #nversa

F1PROHIBIDA LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL DEL DOCUMENTO SIN EL PERMISODEL AUTOR.

AUTOR @ERNANDO TAPIA PANIAUAAUTOR @ERNANDO TAPIA PANIAUA


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C$'0%#'/$%7% &e n#e$!%0b' "n!'

el !%$/%&' ne/%#%0en#e n#e$!%0b'!%#"n!'

el !%$/%&' p's#%0en#e n#e$!%0b'

%n"n!'

El le!3' es#%!'n%$' #ene un%supe$!e !%$/%&%"n!%0en#e !'n !%$/%!'n#$%$% % l% &e l% 0ues#$%.Es#% #9!n!% se us% !%seK!lus%0en#e !'n 0ues#$%s"n!%s ' 'n>%bles.

Cu%n#' 0%4'$ se% l% !%$/% &e l%0ues#$% 0)s ue$#e0en#e se$)%#$%7&% 3%!% l% supe$!e"n!% 4 p'$ #%n#' 0)s #%$&%$)en se$ elu&%. L% %se 0"l esun #%0p"n %!u's' en el =ue elpH 4 l% p'l%$&%& se u#l>%np%$% !'n#$'l%$ el #e0p' &eelu!"n.

FFPROHIBIDA LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL DEL DOCUMENTO SIN EL PERMISODEL AUTOR.


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Se $ellen% l% !'lu0n%:n'$0%l0en#e &e s7l!e< !'n un0%#e$%l =ue p'se% p'$'s &e&0ens'nes !'0p$en&&%sen#$e !e$#'s l70#es !'n l' =uel% 0ues#$% es $e#en&% ' l#$%&%se/5n se% su #%0%G'0'le!ul%$.

L's p'$'s s'n su!en#e0en#epe=ueG's p%$% eK!lu$ l%s0'l9!ul%s /$%n&es &e s'lu#'pe$' n' l%s pe=ueG%s =ue$e=ue$en 0)s #e0p' p%$%p%s%$ % #$%9s &e l% !'lu0n%.

Se u#l>% p%$% sep%$%$

!'0pues#'s &e %l#' pes'0'le!ul%$ :p$'#e7n%s 4p'l70e$'s %>5!%$es )!&'s/$%s's ..% b'=u70!% :%n#!ue$p's!'%!#'$es n3b&'$esen>0)#!'s< &en'0n%&%sl/%n&'s &e %n&%& 4 enl%>%&'s=u70!%0en#e en s'p'$#es s"l&'s%&e!u%&'s $e#enen % l's s'lu#'s:%n%l#'s%b'=u70!% &e 0%ne$% $ee$sble 4sele!#%. L%s sep%$%!'nes seb%s%n en el %!'pl%0en#' ll%e!e$$%&u$% #7p!' &e l% b'l'/7%0'le!ul%$

F;PROHIBIDA LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL DEL DOCUMENTO SIN EL PERMISODEL AUTOR.



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L's en%n#"0e$'s &el %n%l#' '$0%n !'0ple?'s &%s#e$e'09$!'s

!'n l% sus#%n!% =u$%l &el $ellen' &e l% !'lu0n%. Un' &e l'sen%n#"0e$'s se enl%>% !'n 0)s ue$>% =ue el '#$' p'$ l' =ue se0uee 0)s len#%0en#e % #$%9s &e l% !'lu0n%.

L% n#e$%!!"n &e$en#e en#$e l's &%s#e$e"0e$'s 4 el $ellen' &e l%!'lu0n% es l% b%se &e l% !$'0%#'/$%7% =u$%l. Un &%s#e$e"0e$'n#e$%!#u%$) 0)s !'n el $ellen' &e l% !'lu0n% 0en#$%s =ue el '#$'&%s#e$e"0e$' =ue n#e$%!#5% 0en's pue&e p%s%$ % #$%9s &e l%!'lu0n% 4 s%l$ &e l% !'lu0n% p$0e$'.

FPROHIBIDA LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL DEL DOCUMENTO SIN EL PERMISODEL AUTOR.



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+. Eleccin de la t,cnica cromator)$ica( in$ormacin acerca de la m"estra.-. i contiene "na $raccin vol)til/ la 0C nos dar) in$ormacin relevante acerca

de esa $raccin.1. 2a $raccin no vol)til/ con la 2C.3. Dentro de la 2C/ a tener en c"enta el &eso molec"lar4 donde los ma'ores

tama#os &asar)n &or cromatora$5as de e!cl"sin.6. Para &esos molec"lares menores/ a tener en c"enta la sol"bilidad del

mismo en disolventes &olares. En disolventes no &olares "tili7aremos last,cnicas cromator)$icas en $ase normal 8$ases mviles con disolventes deba9a &olaridad/ in$eriores a las de la $ase estacionaria:.

;. i se dis"elve en disolventes &olares/ a tener en c"enta si se trata decom&"estos inicos o no. En caso neativo/ la t,cnica ser) cromatora$5asen $ase inversa 8$ase mvil m)s &olar *"e la estacionaria:.


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M"estra volatil

C00ases

&ermanentes

Cromatora$5a

0as>slido

Cromatora$5a0as>l5*"ido

Cromatora$5a25*"ida

Cromatora$5ainica

PM? 1@@@

ol"bleDisolventes&olares

ol"tosinicos

Cromatora$5aE!cl"sin

Por tama#o

Cromatora$5aen $asenormal

Electrolitosd,biles

Cromatora$5aen $aseinvertida

In=ibir laioni7acin

For7ar la

ioni7acin

si

no




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C&$(AT$/&A!$ +02,#.$

Detector

Eluyente

ColumnaBomba

Inyector

C&$(AT$/&A!$ .E /A"E"

Columna

HornoGas

carrier

Controlador de

fujo

Inyector

Detector

F8PROHIBIDA LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL DEL DOCUMENTO SIN EL PERMISODEL AUTOR.



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F,PROHIBIDA LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL DEL DOCUMENTO SIN EL PERMISODEL AUTOR.



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-PROHIBIDA LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL DEL DOCUMENTO SIN EL PERMISODEL AUTOR.

C&$(AT$/&A!$ +02,#.$

Detector/es

Eluyente/es

ColumnaBombaRecipro

ca

Inyector



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olventes de alta P"re7a. Calidad BP2Celocidades de $l"9o moderadas &ara "ntiem&o de an)lisis ra7onable.Necesario Filtracin de M"estras

2a FM se oblia a &asar a trav,s de lacol"mna/ instr"mento m)s elaborado *"e enC0Com&osicin constante de la Fase Mvil(El"cin Isocr)ticaCom&osicin &roramada de la Fase Mvil(

El"cin en 0radiente

SISTEMAS PARA EL

TRATAMIENTO EISOLVENTES

istemas de FiltracinDesasi$icadoresMe7cladores

CONICIONES E +N EL+ENTEDis&onible comercialmente ' a9o&recioAlta P"re7a ' EstabilidadDis"elva la m"estra ' &atrones

Miscible con otros disolventesNo deradar o disolver la F. E.Tener ba9a viscosidad 8ca5das &resin:Filtrable ' Desasi$icable.Com&atible con el Detector.



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Elucin #socrtica:L% @M se 0%n#ene !'ns#%n#e&u$%n#e #'&' el %n)lss:!'0p's!"n 4 !'0p'nen#es'n%bles.

C%0b' &e %ses.



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;PROHIBIDA LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL DEL DOCUMENTO SIN EL PERMISODEL AUTOR.

Debe p'&e$ /ene$%$ p$es'nesp'$ en!0% &e l's 6--- ps

Lb$e &e puls%!'nes

C%u&%les &e @lu?' en#$e l's -.10l 4 l's 1- 0l

H% &e #ene$ un% /$%n$ep$'&u!bl&%&.

Ress#en#e % l% !'$$'s"nTp's

B'0b%s $e!p$'!%sB'0b%s &e &espl%>%0en#'B'0b%s neu0)#!%s.



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Formada &or c)maras donde elFormada &or c)maras donde elsolvente se bombea ensolvente se bombea enmovimiento de vaiv,nmovimiento de vaiv,n

Consta de v)lv"las *"e se abrenConsta de v)lv"las *"e se abren' se cierran alternativamente' se cierran alternativamentecontrolando el $l"9ocontrolando el $l"9o

Obtiene &resiones de =astaObtiene &resiones de =asta+@@@@ &si+@@@@ &si



36/54


T#'$" .E#%-ECT$&E"(anuales

Automticos

Pue&en p$esen#%$ ' n'bu!le &e !%$/%: /ene$%l0en#e en l's

Au#'0)#!'s


37/54


'&EC$+,%A"'&EC$+,%A"

C'l'!%&%s %n#es &e l% !'lu0n%C'l'!%&%s %n#es &e l% !'lu0n%p%$% el0n%$ 0%#e$%s enp%$% el0n%$ 0%#e$%s en

suspens"n 4 !'n#%0n%#es &elsuspens"n 4 !'n#%0n%#es &el

&s'en#e&s'en#e C'0p's!"n se0e?%n#e %lC'0p's!"n se0e?%n#e %l

$ellen' &e l% !'lu0n%.$ellen' &e l% !'lu0n%.

C$+,(%A"C$+,(%A"

EK#e$'$ &e %!e$' n'K&%bleEK#e$'$ &e %!e$' n'K&%ble

1---- 00 &e l'n/#u&1---- 00 &e l'n/#u&

; 1- 00 &e &)0e#$' n#e$n'; 1- 00 &e &)0e#$' n#e$n'

1 1-1 1- V0 &e #%0%G' &eV0 &e #%0%G' &ep%$#7!ul%p%$#7!ul%

;-.--- 6-.--- pl%#'s;-.--- 6-.--- pl%#'s#e"$!'s0e#$'#e"$!'s0e#$'



38/54


&E++E%$" C$+,(%A -'&EC$+,(%A"

'elicular

B'l%s &e &$' ' p'l70e$' n' p'$'s%s 4

es9$!%sS'b$e su supe$!e se &ep's#% un% !%p%&el/%&% &e s7l!e %l50n% ' un% $esn% &en#e$!%0b' "n!'

Se u#l>%n %0pl%0en#e en p$e!'lu0n%s

'artcula porosa

@'$0%&' p'$ M!$' p%$#7!ul%s &e s7l!e



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,PROHIBIDA LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL DEL DOCUMENTO SIN EL PERMISODEL AUTOR.

=tt&(.analitica.clPDFINUMOCol"mnasG-@BP2C.&d$

=tt&(.c=em.ailent.com2ibrar'selection"ideP"blic6HH@>3316Elo.&d$

SELECCI.N E +NA COL+MNA HPLC

http://www.analitica.cl/PDF/INSUMOS/Columnas%20HPLC.pdfhttp://www.chem.agilent.com/Library/selectionguide/Public/5990-4435ES_low.pdfhttp://www.chem.agilent.com/Library/selectionguide/Public/5990-4435ES_low.pdfhttp://www.chem.agilent.com/Library/selectionguide/Public/5990-4435ES_low.pdfhttp://www.chem.agilent.com/Library/selectionguide/Public/5990-4435ES_low.pdfhttp://www.analitica.cl/PDF/INSUMOS/Columnas%20HPLC.pdf


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;-PROHIBIDA LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL DEL DOCUMENTO SIN EL PERMISODEL AUTOR.

Wn&!e $e$%!!"nWn&!e $e$%!!"nAbs'$b%n!% UsAbs'$b%n!% Us@lu'$es!en!%@lu'$es!en!%Ele!#$'=u70!'sEle!#$'=u70!'sM%s%sM%s%s

,*;*#" !luorescencia (asas

&espuesta Une$s%lSele!#

'Sele!#'

Sele!#'

"ensibliidad ; V/ n/ p/ 1 p/lienalidad 1- 1- 1- 1-

"ensible al9u5o S N' N' S

"ensible a latemperatura

S N' N' N'



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;1PROHIBIDA LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL DEL DOCUMENTO SIN EL PERMISODEL AUTOR.

.ETECT$& .E A


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.ETECT$& #%.> &E!&ACC#)%El &s'len#e p%s% % #$%9s &e l%0#%& &e un% !ube#% 4 elelu4en#e &e l% !'lu0n% p'$ l%'#$% 0#%&

L's &'s !'0p%$#0en#'s es#)nsep%$%&'s p'$ un% pl%!% &e&$' 0'n#%&% % un )n/ul' #%l=ue s l%s &'s &s'lu!'nes&e$en en el 7n&!e &e $e$%!!"nse p$'&u!e un% &es%!"n &el

3%> &e lu>Resp'n&e % !%s #'&'s l'ss'lu#'s.

P'!' sens#'s.

Mu4 sensble % l% #e0pe$%#u$% 4

!%0b's en el elu4en#e.AUTOR @ERNANDO TAPIA PANIAUA


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;;PROHIBIDA LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL DEL DOCUMENTO SIN EL PERMISODEL AUTOR.



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2a m"estra tras la se&aracincromator)$ica(

istema de eneracin de Ionesistema de seleccin de Iones

Detector de Iones



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APLICACIONES HPLC#ioqu7mica Cl7nica A$roqu7mica Petr "leo Farmac9utica Industria %&A Alimentaria Forense Pol7meros

aa Anticolvunsionantes Pesticidas Aceites Antii"ticos Alco'oles Contantes %icotoxinas Alcaloides Antioxidantes

(alesiliares

)eo!ilina *ericidas Luricantes Anticonceptivos Aminas Polaci"nacu)tica

Aromas )oxinas Aceleradores

AG #arit5ricos Fertili+antes Productossint9ticos

Cosm9ticos Arom)ticos )rat&Residuos

A+5cares )intes

Gl5cidos *ormonas sexuales *ormonasve$etales

%edicamentos Isocianatos Pla$uicidas ,itrosaminas Plasti!icantes

*ormonas Antidepresivostric7clicos

*ormonas deinsectos

*ormonas Ionesmet)licos

Conservantes (ur!actantes

,ucle"tidos Fenoles -itaminas Pinturas

Is"meros"pticos

.eter$entes Resinas

Por!irinas

P9ptidos

Pp

PG

Purinas

Pirimidinas

Esteroides



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Es#u&' &e 16- pl%/u!&%s CMS




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HPA p'$ HPLC@lu'$es!en!%




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Coeciente de .istribucin 6'8

De#e$0n% l% !'ns#%n#e !'n l% =ue se $ep$esen#% ele=ulb$' &e un s'lu#' en#$e l% &'s %ses

%$%bles

C'0p's!"n %se 0"l 4 es#%!'n%$%Te0pe$%#u$%

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[ ]movil!aseenniConcentraciaestacionar!aseenniConcentrac

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Te0p' &e $e#en!"n 4 %!#'$ &e !%p%!&%&

E!en!%

Sele!#&%&

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;,PROHIBIDA LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL DEL DOCUMENTO SIN EL PERMISODEL AUTOR.



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Tiempo de retencinTe0p' =ue #%$&% en $e!'$$e$ el ss#e0% un/$up' &e 0'l9!ul%s &e un 0s0' !'0pues#'.

Se eKp$es% en 0nu#'sTiempo muerto>Te0p' en#$e l% n4e!!"n 4 l% s%l&% 4 &e un%sus#%n!% =ue n' n#e$%!!'n% !'n l% %sees#%!'n%$%.Tiempo de retencin corregidoTe0p' &e $e#en!"n #e0p' 0ue$#'!actor de capacidadC'!en#e en#$e el #e0p' =ue pe$0%ne!e el!'0pues#' en l% %se es#%!'n%$% &&&' el#e0p' =ue pe$0%ne!e el !'0pues#' en l% %se

0"l.Es un% 0e&&% &e l% $e#en!"n &e l's!'0pues#'s 4 es un!"n &e l% =u70!% &e l%!'lu0n% 4 &e l% p'l%$&%& &e l% %se 0"l.Cu%n#' 0%4'$ se% es#e %!#'$ 0)s $e#en&'es#%$) el s'lu#' en %se es#%!'n%$%.

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-PROHIBIDA LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL DEL DOCUMENTO SIN EL PERMISODEL AUTOR.



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Ecacia>

C%p%!&%& &e 'b#ene$ p!'s es#$e!3's. A 0%4'$ e!%!% 0en'$ens%n!3%0en#' &e l% b%n&%. Se eKp$es% !'0' N50e$' &e Pl%#'s#e"$!'s.

%?mero de platos tericos 6%8Un pl%#' #e"$!' es un% se!!"n 0%/n%$% &e l% !'lu0n% &'n&ese %l!%n>% el e=ulb$' en#$e l% %se es#%!'n%$% 4 l% %se 0"l%n#es &e p%s%$ % l% s/uen#e se!!"n :pl%#'


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"electividadM&e l% sep%$%!"n en#$e &'s !'0pues#'s 4 se eKp$es%0e&%n#e l% $e#en!"n $el%#%.

Cu%n&' 0)s p%$e!&'s se%n Z[F4 Z[10en's sep%$%&'s es#)nl's p!'s. Se !'ns&e$% un% sele!#&%& %!ep#%ble %=uell% !'n%l'$es supe$'$es % 11;

Es#e %!#'$ % % &epen&e$ &eN%#u$%le>% &e l%s %ses N%#u$%le>% &e l's s'lu#'s Te0pe$%#u$% N' &epen&e &e l%s !%$%!#e$7s#!%s !$'0%#'/$)!%s &el ss#e0%.

1

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2

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&esolucin 6&s 8

Sele!#&%&Re#en!"nE!%!%Me&&% !u%n##%#% &e el /$%&' &e sep%$%!"n ' $es'lu!"n &e&'s b%n&%s %&4%!en#es se &ene !'0' l% &s#%n!% en#$e l'sp!'s &e l%s b%n&%s &&&% en#$e el %n!3' p$'0e&' &e l%sb%n&%s.%l'$es &e R Y 1 &%n lu/%$ % sep%$%!"n &e p!'s !e$!%n's3%s#% l% l7ne% &e b%se !'ns&e$)n&'se un% $es'lu!"n #'#%l.%l'$es R 0%4'$ ' /u%l % 1 $ep$esen#%n un% buen% $es'lu!"n 4

0en'$es &e -8 s'n nsu!en#es.L% $es'lu!"n &epen&e &eE!%!%. N\ pl%#'s #e"$!'s. Rel%!"n ]Re#en!"n. @%!#'$ &e !%p%!&%&Sele!#&%&. A &e se$ supe$'$ % 1.

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!actor de asimetra 6As80&e l% s0e#$7% &e l's p!'s !u%n&' el p!' es%s09#$!' n&!% =ue el s'lu#' es#) s%len&'0pe$e!#%0en#e.

Teoria Curso Practico Hplc

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