SIMULASI PENGUMPULAN SPESIMEN MALARIA DAN TB

SIMULASI PENGUMPULAN SPESIMEN MALARIA DAN TB

RISKESDAS2010

Petugas untuk Pemeriksaan dan Penanganan

Spesimen Malaria dan TB

• Tim Enumerator

• Petugas Pengumpul Spesimen (PPS)

• Petugas Laboratorium PRM

• Petugas di Puslitbang BMF Balitbangkes

ENUMERATOR

1. Mengisi formulir MT1

2. Menentukan responden yang memenuhi kriteria (inklusi-eksklusi)

3. Membacakan PSP dan ART menandatangani Informed consent

4. Melakukan pemeriksaan RDT dan membuat sediaan apus darah tebal

5. Mengajarkan cara mengumpulkan dahak

6. Mempersiapkan formulir M1, M2 dan M3

7. Menginformasikan kepada ART akan ada PPS yang mengumpulkan dahak P dan S, keesokan hari.

PEMERIKSAAN RDT DAN SEDIAAN APUS DARAH TEBAL

• Mempersiapkan alat dan bahan pemeriksaan malaria

• Mengisi Formulir M1• Pemeriksan RDT dilakukan pada ART yang

memenuhi kriteria• Pembuatan sediaan apus darah tebal jika

panas

Pemeriksaan RDT dan pembuatan sediaan apus darah tebal (lanj…)

Alat dan bahan:• Sarung tangan• Stiker• Kaset RDT• Kaca sediaan (endfrosted sediaan)• Alcohol swab• Autoclick• Blood lancet• Kapas kering• Pensil 2B dan marker• Plastik sampah dan plastik biohazard

Cara pemeriksaan:• Gunakan sarung tangan• Tempel stiker di RDT (bagian belakang) dan kaca sediaan

(bagian buram)• Pasang blood lancet di autoclick• Jari manis atau jari tengah kiri dibersihkan dengan alcohol

swab, keringkan• Tusuk jari (perkirakan kedalaman blood lancet)• Bersihkan tetes darah yang pertama keluar• Tetesan kedua diambil dengan lup, tempelkan ke RDT• Jangan lupa bekas tusukan jarum ditutup dengan kapas

kering namun jangan ditekan


• Teteskan buffer sebanyak 5 tetes dan letakkan di permukaan yang rata

• Tulis jam penetesan di RDT dan form M1, tunggu 15-30 menit

• Tekan kembali bekas tusukan jarum hingga darah keluar• Tempelkan 3 tetes darah di kaca sediaan (darah berada

di bidang yang sama dengan stiker)• Memperlebar permukaan tetesan darah agar tidak terlalu

tipis atau terlalu tebal dengan ujung sediaan lain yang bersih sehingga berbentuk lingkaran dengan diameter

• 1-1,5 cm


• Cek ketebalan dengan meletakkan di atas buku, koran atau arloji

• Keringkan dalam posisi datar, jaga hingga terhindar dari serangga dan debu

• Lanjutkan pemeriksan RDT pada ART yang lain (bila ada)


Pengemasan RDT bekas pakai dan sediaan apus darah tebal

• Masukkan sediaan apus darah tebal ke dalam sediaan box dengan rapi

• Bila tidak ada sediaan box, bungkus sediaan dengan kertas polos

• Bahan berbahaya masukkan ke dalam plastik biohazard

• Menitipkan paket malaria ke PPS

Persiapan Pelatihan Mendahak

• Mempersiapkan alat dan bahan pengumpulan dahak

• 2 pot sputum Pagi dan Sewaktu yang telah dilabel P dan S untuk ART (bisa ditambahkan nama)

• Memberi 1 tablet GG @100 mg untuk memudahkan pengeluaran dahak bagi ART yang memiliki gejala batuk berdahak

• Pelatihan mendahak :

Tahap Pelatihan Mendahak

• Memotivasi dan mengajarkan waktu serta cara batuk/mengumpulkan dahak yang benar

• Mengingatkan mengeluarkan dahak tidak disembarang tempat yaitu : di kamar kecil, toilet, ruang tanpa ventilasi.

• Dianjurkan mendahak di luar ruangan / di luar gedung dan jauh dari orang

Teknis Mendahak• Cuci mulut terlebih dahulu untuk menghilangkan

sisa makanan / bakteri• Jika memakai gigi palsu lepaskan• Ambil nafas dalam 2-3 kali, tahan beberapa detik

setiap sesudah menghirup udara,• Keluarkan nafas perlahan, kemudian ambil nafas

kembali dan batukkan kuat-kuat . • Dekatkan pot dahak ke bibir, tampung dahak

setelah ada batuk produktif (sesuai yang diinginkan).

• Teknik inhalasi• Aktivitas fisik (berlari-lari kecil)• Minum larutan gula pekat• Tablet GG • Kartu peraga• Waktu pengambilan dahak Pagi dan Sewaktu

Hal-hal yang perlu diperhatikan untuk mendapatkan spesimen

dahak ideal

Cara mendahak Pot Dahak

Gambar Dahak Pada Kartu Peraga

Petugas Pengumpul Spesimen (PPS)

• PJT dan PJO Kabupaten berkoordinasi dengan Tim Enumerator dan Petugas Pengumpul Spesimen (PPS).

• PPS mempersiapkan alat dan bahan yang diperlukan:

Cool box; ice gel ; Kotak plastik (20 cm x10

cm x 7cm); Antiseptik Cair; Klip plastik; Parafilm• Ice gel direndam dalam air selama 20 menit kemudian

dibekukan di dalam freezer.• ice gel disusun sebagai berikut: 3 ice gel di bagian dasar

cool box; 1 ice gel masing-masing di samping kiri dan kanan kotak plastik; dan 2 ice gel di bagian atas kotak plastik.

• Bila tidak ada freezer dapat menggunakan es batu

Petugas Pengumpul Spesimen (PPS)

• PPS mengambil salinan formulir MT1 (dan paket malaria) dari Ka. Tim

Paket malaria yang dititipkan:Sediaan apus darah tebalRDT bekas pakaiFormulir-formulirPlastik biohazard yang berisi sampah medisPPS menandatangani formulir M1

• PPS mengunjungi ART sesuai daftar dalam formulir MT1

• Menggunakan sarung tangan dan masker• Mengumpulkan pot dahak pagi dan sewaktu,• Membimbing ART mendahak jika dahak

sewaktu belum ada• Memastikan kesesuaian stiker di pot dengan

Formulir MT1 dan T1• Memberi parafilm pada pot dahak • Memasukkan pot dahak ke plastik berklip

Penempelan stiker

Benar Salah

Pemberian parafilm Pot dalam plastik

• Menempatkan pot dahak pada kotak plastik

• Meletakkan pot sputum di dalam cool box yang telah berisi ice gel beku.

• Melepaskan sarung tangan dan masker (plastik biohazard)

• Menggunakan antiseptik untuk membersihkan tangan

• Mengisi Formulir T1

• Mengisi keterangan pada Form MT1 untuk pot dahak yang tidak tepat waktu

Pengiriman Pot Dahak ke PRM

• Pot dahak yang sudah dikumpulkan harus

segera di kirim ke PRM.• Pastikan dahak telah diberi stiker identitas ART • Pada pinggir tutup pot diberi parafilm untuk mencegah

cairan dahak keluar dari celah – celah tutup ulir.• Tutup kotak plastik • Masukkan ke dalam cool box yang sudah berisi ice

gel atau es batu.

• Tutup cool box

• Pastikan spesimen dalam posisi tegak tidak terbalik

• Bawa cool box, formulir MT1, T1 dan paket malaria ke PRM.

Cool box+ice gel

ice gel

Laboratorium PRM

• Petugas Lab PRM

- mengecek kesesuaian formulir T1

dengan pot dahak yang diterima

- melengkapi isian formulir T1 (bagian C)

- menandatangani formulir T1• Melakukan fiksasi, pewarnaan dan pembacaan

mikroskopik sediaan apus dahak • Jangan lupa memusnahkan sampah biomedis

yang berasal dari lapangan dan PRM (sarung tangan, kapas, blood lancet, dll) di PRM

• Mengelompokkan formulir MT1, T1, T2, M1, M2 dan M3 berdasarkan rumah tangga dan memasukkan ke dalam map plastik

• Mengemas sediaan apus TB dan malaria serta semua formulir.

• Mengisi formulir MT2 sesuai jenis bahan yang dikirimkan.

• Melakukan komunikasi dengan PJT untuk pengiriman paket TB dan malaria serta memusnahkan RDT bekas pakai.

TAHAPAN SAMPEL DAHAKPENGUMPULAN DAHAK (FORMULIR T1)

FIKSASI

PEWARNAAN

PEMBACAAN APUSAN

FORMULIR T2

Persiapan Pembuatan Sediaan Apus BTA

• Gunakan masker dan sarung tangan

• Beri label nomer identitas pada sediaan sesuai dengan identitas pada pot dahak.

• Ambil pot dahak dan kaca sediaan yang beridentitas sama dengan pot dahak.

• Buka pot di dalam tempat khusus /Bio Safety Cabinet dengan hati-hati untuk menghindari terjadinya tumpahan dahak

SOP Fiksasi Spesimen Dahak

1. Buka pot dahak, hindari tumpahan dahak

2. Panaskan ose diatas nyala api spiritus sampai merah dan biarkan sampai dingin

3. Ambil sedikit dahak dari bagian yang kental dan kuning kehijau-hijauan (purulen) menggunakan ose yang telah disterilkan di atas.

4. Oles dahak secara merata dengan

gerakan spiral kecil dari dalam keluar

(jangan terlalu tebal dan terlalu tipis)

pada kaca sediaan dengan ukuran

2 x 3 cm pada 1/3 bagian tengah kaca

sediaan.

5. Masukkan ose ke dalam botol yang berisi pasir alkohol 70%, kemudian digoyang goyangkan untuk melepaskan partikel yang melekat pada ose

6. Kemudian bakar ose sampai membara.

7.Keringkan sediaan di udara terbuka,

jangan terkena sinar matahari langsung

atau diatas api, biasanya sekitar 15 – 30

menit, sebelum difiksasi

8.Lewatkan sediaan apus yang sudah kering

di atas api spiritus sebanyak 3 kali (3-5

detik) untuk fiksasi, bagian yang berlabel

menghadap ke atas

SOP Pewarnaan BTA• Letakan sediaan dahak yang telah

difiksasi pada rak dengan hapusan dahak menghadap keatas. Beri Jarak antara tiap sediaan.

• Teteskan larutan Carbol Fuchsin 0,3% pada hapusan dahak sampai menutupi seluruh permukaan sediaan dahak.

Lalukan nyala api spiritus dibawah kaca sediaan sampai keluar uap, pertahankan uap selama 3-5 menit dengan cara menggerakkan api beberapa kali.

Singkirkan api spiritus. Diamkan sediaan selama sekurang-kurangnya 5 menit.

• Bilas sediaan dengan air mengalir pelan sampai zat warna merah yang bebas terbuang.

• Buang sisa air yang ada diatas kaca sediaan.

• Genangi permukaan kaca sediaan dengan asam alkohol (HCL alkohol 3 %), diamkan 3 menit kemudian buang. Bila warna merah masih tampak diatas kaca sediaan, ulangi atau beri asam alkohol kembali sampai tidak tampak warna merah lagi

• Bilas dengan air mengalir


• Genangi seluruh permukaan kaca sediaan dengan larutan Methylen Blue 0.3%.

• Diamkan 10 – 20 detik.

• Bilas dengan air mengalir pelan.


• Keringkan sediaan diatas rak pengering diudara terbuka.

• Hasil pewarnaan yang baik

• Di bawah mikroskop

SOP Pembacaan Sediaan BTA

• Perhatikan:

1. Kualitas dahak

2. Ukuran sediaan ( 2 X 3 cm )

3. Kerataan sediaan apus

4. Ketebalan

5. Pewarnaan sediaan apus

6. Kebersihan sediaan apus

SOP Pembacaan Sediaan BTA

Letakkan sediaan di atas meja spesimen mikroskop

Cari lapang pandang dengan objektif 10XTetes minyak imersi diatas hapusan

dahak tidak boleh menyentuh kaca sediaan

Periksa dengan menggunakan lensa okuler 10X dan objek 100X

• Cari Basil Tahan Asam (BTA) yang berbentuk batang warna merah

• Periksa paling sedikit 100 lapang pandang dalam waktu ± 10 menit, dengan cara menggeserkan sediaan menurut arah seperti gambar dibawah ini ;

Pembacaan Sesuai Kemenkes/IUATLDYang di Lihat Yang di Laporkan

Tidak ditemukan BTA dalam 100 lapangan pandang

BTA negatif

1-9 BTA dalam 100 lapang pandang Tulis jumlah BTA yang ditemukan /100 lapang

pandang10-99 BTA dalam 100 lapang pandang

1+

1-10 BTA dalam 1 lapang pandang, periksa min 50 lapang pandang

2+

Lebih dari 10 BTA dalam 1 lapang pandang, periksa min 20 lapang pandang

3+

Mikroskopik BTA

• Catat hasil pemeriksaan BTA pada formulir T2 • Kaca sediaan yang telah diperiksa kemudian

diletakkan secara terbalik diatas kertas tissue beberapa lapis yang telah disusun di sebuah baki, diamkan selama 1 malam.

• Bersihkan lensa mikroskop dengan kapas yang telah dibasahi dengan eter alkohol.

• Simpan sediaan kedalam box sediaan selesai dibaca

• Jangan lupa melakukan dekontaminasi untuk limbah dahak

Pewarnaan sediaan apus darah tebal

• Pembuatan larutan Giemsa 5%

0,5 ml Giemsa stock + 9,5ml air mineral

1 tetes Giemsa stock + 19 tetes air mineral• Letakkan sediaan yang akan diwarnai di rak sediaan

(permukaan rata)• Teteskan larutan Giemsa 5% ke seluruh permukaan

sediaan apus darah tebal• Pasang timer 45 menit – 1 jam• Bersihkan sediaan dari Giemsa dengan air mengalir

tanpa membuang larutan Giemsa terlebih dahulu• Keringkan dengan posisi berdiri

Pemusnahan RDT bekas pakai

Petugas laboratorium PRM mencocokkan jumlah dan nomor stiker di formulir M1•Bila tidak cocok klarifikasi dengan ketua tim enumerator•Mengisi berita acara pemusnahan RDT bekas pakai•Pemusnahan dilakukan sesuai kebiasaan PRM

Cara I (Susunan sediaan)

• Pisahkan sediaan positif dan negatif, susun berdasarkan nomor urut , dimulai dengan kode P dan diikuti S pada setiap nomornya.

• Hitung jumlah 10% sediaan negatif

• Tentukan interval sediaan negatif

Misal total sediaan negatif 100 10% = 10

• Tentukan sediaan negatif pertama tanpa melihat

• Misal : sediaan ke 2 dengan no 11-00001 S

• Maka sediaan berikutnya yang terpilih adalah 2+10 = sediaan ke-12

• Misal : sediaan ke 12 no 11-00007P

SAMPLING sediaan NEGATIF

• Cara II (dengan Log Book)• Pisahkan log book sediaan BTA positif dan negatif• Hitung jumlah 10% sediaan negatif• Tentukan interval sediaan negatif

Misal total sediaan negatif 100 10% = 10

• Tentukan sediaan negatif pertama tanpa melihat• Misal : sediaan ke 2 dengan no 11-00001 S• Maka sediaan berikutnya yang terpilih adalah 2+10

= sediaan ke-12• Misal : sediaan ke 12 no 11-00007P

Contoh Log bookNo No Stiker Hasil

1 5300001P Neg

2 5300001S Neg

3 5300002P Neg

4 5300002S Neg

5 5300003P Neg

6 5300003S Neg

7 5300004P Neg

8 5300004S Neg

9 5300005P Neg

10 5300005S Neg

11 5300006P Neg

12 5300006S Neg

13 5300007P Neg

14 5300007S Neg

SOP Pengepakan Sediaan Apus Malaria dan TB serta Formulir-formulir

• Semua apusan BTA positif ditata rapi dalam sediaan box

• 10 % apusan negatif (dari sistematik random sampling) ditata rapi dalam sediaan box terpisah dari apusan BTA positif Simpan dalam sediaan box, berdasarkan nomor urut stiker dan P,S.

• Semua sediaan apus darah tebal ditata rapi dalam sediaan box terpisah dengan apusan BTA

• Agar tidak terjadi guncangan tambahkan kertas tissue ke dalam sediaan box untuk memadatkannya

• Tulis nama provinsi, kabupaten, kecamatan, NKS di tutup sediaan box

• Tutup sediaan box, lakban

• Masukkan dalam dus bersama sediaan box TB dan formulir-formulir

Penyusunan sediaan apus BTA

• Tutup sediaan box dan cantumkan identitas atau pengenalan tempat pada sediaan box (nama provinsi, kabupaten, kecamatan, NKS) dan keterangan isi sediaan box

• Bungkus masing-masing sediaan box dengan menggunakan koran dan dilakban

• Susun sediaan box beserta semua formulir (MT1, M1, M2, M3, T1, T2, MT2) ke dalam kardus.

• Kemudian kardus di lakban.• Beri label alamat yang dituju pada sisi luar

kanan dan kiri

Contoh Label AlamatPEMERIKSAAN LABORATORIUM

FRAGILE/

Mudah Pecah

Kepada:Bagian Penerimaan Spesimen Malaria-TBRiskesdas 2010

Puslitbang Biomedis dan Farmasi Badan Litbang KesehatanJalan Percetakan Negara 29Jakarta Pusat 10560Telp: 021-4261088 pswt 309 & 510Pengirim:Nama PJT Kab......................Alamat....................................Kab.…………………………. Prov……................................Telp:……….………………....

Pusat (Puslitbang BMF)• Penerimaan spesimen• Penyortiran• Pemeriksaan mikroskopik malaria dan

pengisian hasil pemeriksaan di formulir M4• Validasi sediaan apus BTA dan pengisian hasil

pemeriksaan di formulir T3• Pengentrian formulir M4 dan T3

TERIMA KASIHTERIMA KASIH

SIMULASI PENGUMPULAN SPESIMEN MALARIA DAN TB

Documents